Expression and clinical significance of CD4+CD25+ Tregs in patients with gastrointestinal malignancy

目的 探讨胃肠道恶性肿瘤患者外周血及病理组织调节性T细胞(Tregs)的表达及临床意义.方法 采用流式细胞仪对60例胃肠道恶性肿瘤患者及20例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Tregs/CD4+T)的比率进行检测,采用免疫组化法检测相应患者病理组织中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达水平.结果 胃癌、结直肠癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs/CD4+T细胞的比率分别为(7.46±0.85)%和(7.79±1.19)%,与对照组(6.65±0.79)%比较,差异有统计学意义(P<0.01).胃癌、结直肠癌病理组织中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达平均阳性细胞绝对数为(53.52±16.31)和(58.15±14.86),与癌旁组织(6.53±2.68)比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 胃癌、结直肠癌患者外周血及病理组织中Tregs的高表达可能具有肿瘤免疫的抑制作用,并与肿瘤的发生、发展密切相关.     

慢性乙型肝炎中CD4+ CD25+ T调节细胞水平的判定

目的:了解慢性乙型肝炎(CHB)患者CD4 CD25 T调节细胞(Tregs)的真实水平. 方法: 采用细胞内外三色荧光标记、流式细胞仪测定、RT-PCR等方法检测CHB患者外周血中Tregs的主要标志CD4 CD25 ,CD4 CD25h,CD4 CD25 Foxp3 细胞和Foxp3 mRNA水平,并观察其与患者肝功能、乙肝病毒复制标志的相关性. 结果: CHB外周血中CD4 CD25 细胞水平与正常无明显差异,CD4 CD25h/PBMC(外周血单个核细胞)则较正常对照组升高[(0.5±0.3) vs (1.1±0.6), P＜0.05],而CD25 Foxp3 /CD4 T细胞比值及Foxp3 mRNA水平则较正常明显降低[(4.5±2.7) vs (7.1±2.3)]. RT-PCR结果: △CT:13.98 vs 12.86, △△CT: 1.12 vs 0, 2-△△CT: 0.46 vs 1, P＜0.05. 外周血中CD25h T细胞水平与谷丙转氨酶呈正相关(r=0.5,P＜0.05),T细胞中CD25(包括高表达)阳性比例与Foxp3阳性的符合率明显低于正常人[(30.5±16.7) vs (54.6±11.1);(57.9±15.9 ) vs (87.8±13.5), P＜0.01]. 结论: CHB患者存在着Tregs细胞水平的异常,CD25h的阳性率易受炎症时非调节性T细胞激活而过多表达CD25分子影响,Foxp3作为Tregs判定指标较为可靠.     

CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs在自身免疫性甲状腺疾病中的作用研究

目的:探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)中的作用。方法:收集2014年2月-2016年11月在本院进行检查的AITD患者80例为治疗组,其中Graves(GD)患者40例,为GD组;桥本甲状腺炎(HT)患者40例,为HT组;选取健康体检人员20例为对照组。采用流式细胞术检测外周血CD4~+T、CD4~+CD25~+Tregs细胞数量和比例,采用RT-PCR检测外周血Foxp3 mRNA表达水平,采用化学发光法对血清中甲状腺素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT_3)、总甲状腺素(TT_4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的水平进行测定。结果:三组TSH、TT_3、TT_4、TgAb、TPOAb比较,差异均有统计学意义(P0.05);三组外周血CD4~+T细胞数量比较,差异无统计学意义(P0.05);GD组外周血CD4~+CD25~+Tregs占CD4~+T细胞的比率与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);HT组外周血CD4~+CD25~+Tregs占CD4~+T细胞的比率明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);GD组和HT组外周血Foxp3 mRNA表达量均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);自身免疫性甲状腺疾病的CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs与TSH、TT_3、TT_4、TgAb和TPOAb有明显正相关性(P0.05)。结论:CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs可能在AITD的发生发展进程中起着一定的作用,深入研究CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs在AITD中的作用将有助于建立新的预防和治疗策略。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在足月分娩发动中的变化

目的 检测足月妊娠孕妇临产前后外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞、单个核细胞Foxp3 基因、蜕膜Foxp3基因及蛋白表达变化,探讨调节性T细胞与足月妊娠分娩发动的关系.方法 根据临产情况将足月妊娠孕妇48例分为足月未临产组(20例)及足月临产组(28例),并设正常未孕对照组(20例)用作外周血检测对照.收集各研究对象外周血及蜕膜组织.流式细胞术检测外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞含量,RT-PCR测定外周血单个核细胞及蜕膜Foxp3 基因表达,Western blot检测蜕膜Foxp3蛋白表达.结果 足月临产组与足月未临产组相比,外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞含量 [(3.58±0.78)% vs(7.26±1.07)%],外周血单个核细胞中Foxp3基因相对表达水平[(0.307±0.052)vs(0.602±0.088)],蜕膜Foxp3 基因及蛋白相对表达水平[(0.249±0.085)vs(0.556±0.09)]、[(0.280±0.078)vs(0.579±0.093)],差异均有统计学意义(P<0.01).结论 足月妊娠孕妇临产后CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞含量,Foxp3基因及蛋白表达下降,提示CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞可能与分娩发动有关.     

肾综合征出血热患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞检测及其意义

目的 研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在肾综合征出血热(HRFS)患者外周血中的比例改变并探讨其在疾病进程中的意义.方法 选取27例HRFS患者,外周血用细胞内染色的流式细胞术及荧光定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3+表达,并与肾活检结果及肾功能进行相关分析.同时取19名正常健康体检者作为正常对照组.结果 HRFS患者各期CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例明显均低于正常对照组(低血压休克期:5.0%±1.2%,少尿期:3.1%±0.8%,多尿期:4.2%±0.9%,恢复期:5.0%±1.1%,正常对照组:6.5%±2.1%,均P<0.01);各期间CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例差异亦有统计学意义,以少尿期为最少(P<0.01).CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例与肾组织损害指数显著相关(r=0.51,P<0.01),但与蛋白尿程度及肾功能损害无显著相关(r=0.11,0.18;均P>0.05).HRFS患者少尿期外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平(503±64)明显低于正常对照组(3102±409)和其他期(低血压休克期:1805±291;多尿期:1869±320;恢复期:2697±420,均P<0.01).结论 HRFS患者CD4+CD25+Foxp3+T细胞明显减少,这群调节性T细胞可能参与了HRFS的病理进程.     

慢性移植肾病初期外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞变化及意义

摘要：目的研究慢性移植肾病(CAN)发生初期外周血CD4+CD25+Foxp3+T(TREG)细胞变化及意义。方法对25例初发CAN的
受者外周血CD4+CD25+high/CD4+T 比率及Foxp3表达进行了检测,同时与使用同一抗排斥治疗方案、移植肾功能正常的30例受
者、以及未行肾移植的慢性肾功能不全尿毒症期的20例和正常人20例进行比较,研究了CAN发生初期TREG细胞的变化。结
果CAN发生初期的受者,CD4+CD25+Thigh/CD4+比率为0.71±0.33,Foxp3表达率为62.75±10.80;移植肾功正常者,两指标分别为
1.17±0.25及70.42±6.87,移植肾病组两指标均明显低于移植肾功能正常组（P<0.01）。无论移植肾功能正常与否,移植受者的
CD4+CD25+high/CD4+比率和Foxp3表达率均较未行移植尿毒症患者(1.53±0.35及77.86±7.09)及正常人(1.65±0.28及81.35±2.39)
明显降低（P<0.01）,而正常人及未移植尿毒症患者两指标无明显差别。结论与移植肾功能正常者相比,CAN发生初期患者外
周血中CD4+CD25+high/CD4+ 比率及Foxp3表达率均明显降低,且与肌酐增高无关,提示TREG在CAN的发生中具有一定意义。
     

耐多药结核患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的变化

目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+T细胞在耐多药结核(multidrug-resistant TB,MDR-TB)发病机制中的作用。方法:随机选择MDR-TB患者31例,药物敏感性结核(drug-susceptible TB,S-TB)33例,健康对照(healthy control,HC)30例,流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞。结果:S-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞约占CD4+T细胞的(2.43±0.69)%,显著高于健康人的(1.61±0.46)%,两组之间差异具有显著统计学意义;MDR-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞约占CD4+T细胞的(3.14±0.59)%,显著高于S-TB患者的细胞比例,两组之间差异具有显著统计学意义。结论:MDR-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞明显增加,揭示其在MDR-TB发病中发挥了重要作用。     

IL-15诱导CD4+CD25- T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞转化的机制探讨

目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第1天加入IL-15,而拮抗1组和拮抗2组分别于培养第1、3天加入STAT5a封闭性肽。流式细胞仪检测细胞表型变化,3H-TdR掺入法检测IL-15诱导产生的Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western blot法检测细胞内p-STAT5的变化。结果与对照组比较,IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达上调,IL-15诱导生成的Tregs具有较天然Tregs稍弱的免疫抑制功能。Western blot检测结果显示,IL-15组p-STAT5表达较对照组明显上调。加入STAT5a封闭性肽后,拮抗1组和拮抗2组中CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达下调,但拮抗2组[细胞表型分别为(47.9±6.0)%、(20.7±3.4)%]改变较拮抗1组[细胞表型分别为(30.7±8....     

川崎病急性期患儿外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞水平的改变及其临床意义

目的 探讨T调节细胞在川崎病临床过程中的作用以及免疫失调与川崎病发病机制的关系.方法 分别于急性期与亚急性期采集18例KD患者外周静脉血,流式细胞技术检测T细胞中CD4、CD25与Foxp3的表达情况.结果 亚急性期CD4+ CD25high Foxp3+ T细胞的百分比较急性期明显升高(1.11±1.21)％ vs (0.54±0.55)％,P＜0.05,尽管CD4+ CD25low Foxp3+ T细胞与CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞的水平变化轻微,但是CD4+ CD25+ Foxp3-T细胞在亚急性期的水平明显低于急性期(2.86±1.85)％vs(5.74±5.79)％,P＜0.05.因此CD25high Foxp3+ T细胞与CD25+ Foxp3-T细胞的比率在亚急性期的水平明显高于急性期(0.46±0.55)％vs (0.12±0.12)％,P＜0.05.结论 CD4+ CD25high Foxp3+ T细胞的减少和/或CD25high Foxp3+ T细胞与CD25+ Foxp3-T细胞的比率失衡在KD的发病过程中扮演重要角色,由于所有患者均接受了丙种球蛋白的治疗,CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞的恢复可能是IVIG治疗KD的作用靶点.     

胃癌和食管癌外周血CD4+CD25+调节性T细胞检测及其临床意义

目的 探讨胃癌和食管癌外周血表达CD25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25+Tr)比率变化的特点及其临床意义.方法 采用流式细胞术检测49例胃癌和28例食管癌患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平,并进行分层分析.结果 食管癌患者外周血CD4+CD25+Tr细胞占总CD4+T细胞的(24.37±4.82)%(n=28);胃癌患者外周血CD4+CD25+Tr细胞占总CD4+T细胞的(17.74±4.24)%(n=49).与健康对照组比较,外周血CD4+CD25+Tr细胞比率均明显升高,差异有显著统计学意义(P＜0.01).该CD4+CD25+Tr细胞低表达CD45RA及CD69.分层分析外周血CD4+CD25+Tr细胞比率与肿瘤临床分期的关系显示,胃癌患者Ⅰ～Ⅲ期,其外周血CD4+CD25+Tr细胞占CD4+T细胞的比率为(16.69±5.71)%(n=15);Ⅳ期为(18.08±4.99)%(n=16).与Ⅰ～Ⅲ期比较,Ⅳ期患者外周血CD4+CD25+Tr细胞比率升高,但是,差异无统计学意义(P＞0.05).胃癌复发患者18例,其外周血CD4+CD25+Tr细胞占CD4+T细胞的比率为(23.32±4.98)%(n=18).明显高于原发胃癌组(P＜0.01).食管癌患者Ⅰ-Ⅲ期外周血CD4+CD25+Tr细胞占CD4+T细胞的(25.17±5.87)%(n=18),Ⅳ期患者外周血CD4+CD25+Tr细胞占CD4+T细胞的(26.46±4.84)%(n=10),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 胃癌和食管癌患者外周血CD4+CD25+Tr细胞比率明显升高.提示祛除人的CD4+CD25+Tr细胞是一种有效的治疗肿瘤的新方法.     

食道癌患者CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞的变化及意义

[目的]初步探讨CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌患者外周血中的变化及临床意义。[方法]59例食道癌患者,分为鳞癌组47例,腺癌组12例,另外30例健康志愿者为对照组,用流式细胞术分别检测外周血中CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例。[结果]食道癌初诊患者组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例为（10．33±5．72）％,明显高于健康志愿者组（4．56±1．06）％（P〈0．01）,而食道鳞癌组和食道腺癌组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例没有明显差异。[结论]CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌初诊患者外周血中比例增加,可能是食道癌免疫抑制的一个重要原因。     

恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞的检测及临床意义

目的：研究CD4⁺CD25^high Foxp3⁺调节性T细胞(Tregs)在恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在肿瘤发病中的作用及临床意义。方法：采用流式细胞术检测61例不同分期恶性肿瘤患者PBMC中CD4⁺CD25⁺/CD4⁺CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞百分比,进一步分析CD4⁺CD25⁺及CD4⁺CD25^highT细胞中表达Foxp3⁺T细胞的百分比,并与正常对照组(n=32)进行比较。结果：与正常对照组比较,Ⅰ及Ⅱ期恶性肿瘤患者PBMC中CD4⁺CD25⁺/CD4⁺及CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞百分比均无明显变化(P>0.05),Ⅲ及Ⅳ期恶性肿瘤患者均明显增高(P<0.05),随肿瘤恶性程度增高,CD4⁺CD25⁺/CD4⁺及CD4⁺CD25^high/CD4⁺T细胞的百分比也逐渐增高;恶性肿瘤患者CD4⁺CD25⁺ 及CD4⁺CD25^high Foxp3⁺T细胞表达水平较正常对照组均增高,组间比较差异均有显著性(P< 0.01)。结论:恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞增高可能是恶性肿瘤发病及免疫机制异常的主要原因之一,定期检测外周血中上述指标的变化,有利于了解恶性肿瘤患者的病情变化及预后判断。     

胃癌手术前后外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的：检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在胃癌手术前后外周血中的变化,探讨Treg在肿瘤免疫中的作用。方法：收集初治胃癌患者38例作为研究对象,同时收集20例健康人外周血作为正常对照组。检测手术前3d和手术后14d外周血中CD4^＋CD25^＋Treg比例及T细胞亚群,将各检测结果结合临床、病理指标进行统计学分析。结果：胃癌患者术前外周血中Treg比例显著高于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。胃癌患者术前外周血CD8^＋T细胞比例明显低于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。术前外周血CD8^＋T细胞比例与Treg比例呈负相关（P〈0．05）。胃癌患者术前外周血中Treg比例在不同淋巴结转移情况和TNM分期之间差异具有统计学意义（P〈0．05）,其与淋巴结转移和TNM分期呈正相关（P〈0．01）。胃癌患者手术后Treg比例较术前下降,且下降程度与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、病理分型以及手术方式无相关性。结论：Treg可能通过抑制CD8^＋T细胞的增殖及功能,促进肿瘤细胞的生长和发展。Treg与肿瘤的侵袭、淋巴结转移有关,提示Treg在一定程度上可作为检测疾病进展的免疫学指标。     

外周血调节性T细胞在儿童与成人重症肌无力发病机制中的作用

目的 初步探讨外周血CD4+CD25+调节性T细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用.方法 用流式细胞术分别检测儿童和成人MG外周血CD4+CD25+调节性T细胞的数最及其表达Foxp3和CTLA-4的情况.结果 儿童MG外周血CD4+CD25+调节性T细胞的数量明显高于正常儿童对照组,但其表达Foxp3水平反而大大低于对照组,成人MG比较差异无统计学意义.所有MG患者外周血CD4+CIY25+调节性T细胞表达的表面分子CTLA-4与正常对照比较,差异无统计学意义.结论 儿童MG患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞存在着数量改变和功能缺失.提示儿童MG发病可能与外周血调节性T细胞免疫耐受功能受损有关.     

肺癌恶性胸水中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞检测及其临床意义

目的 检测晚期肺癌患者外周血及恶性胸水中CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+ Foxp3 +Treg,Foxp3 +Treg)及相关细胞因子的表达情况并探讨其临床意义.方法 通过密度梯度离心法获得26例晚期肺癌患者外周血、胸水中淋巴细胞及上清和10例健康志愿者(对照组)外周血淋巴细胞及上清...     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞CD25及CD127的表达

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血调节性T细胞(Tregs)比例的变化情况,了解Tregs变化在RA发病及炎症活动中的意义.方法 采用流式细胞仪三色荧光抗体标记法分别对25例RA患者和31名健康志愿者(HV)的外周血淋巴细胞进行CD4、CD25及CD127标记,分析比较RA患者组与HV组间淋巴细胞中CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127-及CD4+CD25highCD127-细胞比例的差异情况,并将RA组相应细胞比例与RA疾病活动性评分(DAS28-4)、压痛关节数、肿胀关节数、晨僵时间、医生和患者对疾病活动性的整体评价(VAS)、血红细胞沉降率、C-反应蛋白行相关分析.结果 RA组外周血淋巴细胞中,CD4+CD25+CD127-和CD4+CD25highCD127-细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率分别为(2.53±0.85)%和(0.91±0.32)%,而HV组则分别为(3.22±0.97)%和(1.25±0.41)%.CD4+CD25+CD127+和CD4+CD25highCD127-细胞比例在RA组均明显低于HV组,其组间差异均有统计学意义(均P<0.05);另外,RA患者CD4+CD25+CD127-和CD4+CD25highCD127-T细胞比例均与DAS28-4及压痛关节数存在负相关(P<0.05),CD4+CD25highCD127-T细胞还与肿胀关节数及患者VAS存在负相关(P<0.05).结论 RA患者外周血淋巴细胞存在Tregs比例的降低,Tregs数量的异常可能是RA发病及炎症活动的重要影响因素.     

人结直肠癌和肿瘤引流淋巴结组织中Fox p3+调节性T细胞和 髓样树突状细胞的表达及其意义

目的：探讨Foxp3⁺调节性T细胞（Tregs）和CD11c⁺髓样树突状细胞（mDCs）在结直肠癌（CRC）组织中的表达及在肿瘤引流淋巴结（TDLN）组织中的浸润,并探讨其临床意义。方法：收集CRC患者手术切除的标本52例,采用免疫组织化学方法检测CRC患者标本及TDLN组织样本中Foxp3⁺ Tregs及CD11c⁺mDCs的表达,并探讨其表达频数与CRC患者临床病理特征的关系。结果：CRC患者癌组织中Foxp3⁺Tregs的阳性表达频数高于癌旁正常组织（P<0.01）;淋巴结转移阳性者癌组织中Foxp3⁺Tregs阳性表达频数高于淋巴结转移阴性者（P<0.01）;TNM分期Ⅲ+Ⅳ期组患者癌组织中Foxp3⁺Tregs阳性表达频数高于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期组患者（P<0.01）;肿瘤引流阳性淋巴结（mTDLN）组织中Foxp3⁺ Tregs阳性表达频数明显高于肿瘤引流阴性淋巴结（mfTDLN）组织（P<0.01）。CRC患者癌组织中CD11c⁺ mDCs的阳性表达频数高于癌旁正常组织（P<0.01）;淋巴结转移阳性者癌组织中CD11c⁺ mDCs阳性表达频数低于淋巴结转移阴性者（P<0.01）;TNM分期Ⅲ+Ⅳ期组患者癌组织中CD11c⁺ mDCs阳性表达频数低于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期组患者（P<0.01）;不同浸润深度癌组织中CD11c⁺ mDCs阳性表达频数比较差异有统计学意义（P<0.05）;mTDLN组织中CD11c⁺ mDCs阳性表达频数明显低于mfTDLN组织（P<0.01）。CRC和TDLN组织中Foxp3⁺ Tregs表达与CD11c⁺mDCs的表达无相关性（P>0.05）。结论：CRC的发生发展与癌组织局部微环境中Foxp3⁺ Tregs及CD11c⁺ mDCs的表达频数有关。Foxp3⁺ Tregs和CD11c⁺mDCs在抑制肿瘤微环境的细胞免疫中发挥作用。