荧光定量RCR检测比格犬雌激素β受体mRNA在间情期与发情期表达量的差异

目的对比格犬发情期与间情期ERβ基因在性腺组织器官的变化状况进行荧光定量,明确ERβ基因在发情期与间情期下丘脑-垂体-性腺轴上的表达量差异情况,为深入研究比格犬发情机制提供基础。方法作为调控生殖的关键基因,ERβ基因位于比格犬下丘脑-垂体-性腺轴上,因此分别取处于发情期和间情期的比格犬,提取下丘脑、垂体、卵巢和子宫的RNA,反转录后对ERβ基因mRNA的表达量进行荧光定量PCR检测。结果间情期比格犬卵巢、子宫、垂体、下丘脑内ERβ基因mRNA的表达量分别是发情期比格犬卵巢、子宫、垂体、下丘脑内ERβ基因mRNA表达量的0.35倍、0.17倍、0.44倍、0.43倍。结论 ERβ基因在处于发情期的比格犬下丘脑-垂体-性腺轴内表达量均上调。     

比格犬卵巢子宫内雌激素受体ERα、ERβ的免疫组织化学定位研究

目的 研究雌激素受体α, β在比格犬卵巢及子宫内的定位。 方法 采用免疫组化SP法DAB显色结合BCIP/NBT及AEC显色检测ERα、ERβ在比格犬子宫及卵巢内的表达。 结果 比格犬ERα主要表达于卵泡颗粒细胞、卵巢间质腺腺上皮细胞及子宫内膜腺体腺上皮细胞胞核内,胞质内仅有少量表达，而在卵泡膜内膜的间质细胞，腺体周围的基质细胞及小动脉血管内皮细胞和平滑肌细胞、小静脉内皮细胞的胞核内有少量表达。而ERβ则以相同的组织特异性主要表达于上述组织细胞的胞质内,在胞核内有微弱表达。ERα 表达于膜黄体细胞的胞核内，而在黄体颗粒细胞胞核与胞质内均有表达。而ERβ则仍特异表达于不同生理阶段黄体细胞的胞质内。BCIP/NBT与AEC双染未见ERα、ERβ在子宫内有明显的共表达现象。结论 比格犬ERα、ERβ 在子宫与卵巢组织内定位不同，ERα主要定位于胞核，在胞质内有微弱表达，而ERβ主要定位于胞质，在胞核内有零星表达。     

常见实验动物雌性生殖系统比较组织学及自发病变研究

目的对实验动物雌性生殖系统进行比较组织学研究,找出其异同,为实验动物的基础研究提供正常组织学对照。并对其自发病变进行观察。方法选取实验动物质量国家检测标准检测合格的已经性成熟的5种雌性实验动物,包括昆明小鼠、sD大鼠、日本大耳白兔、比格犬、树嗣。处死行病理解剖,常规病理制片,HE染色,免疫组化染色,研究卵巢、输卵管、子宫及宫颈的组织学异同及有无自发病变。结果（1）卵巢组织学比较,日本大耳白兔各级卵泡数量最多,其次为昆明小鼠次级及成熟卵泡数量较多,sD大鼠黄体及白体数量最多,sD大鼠、比格犬卵巢门部明显。（2）输卵管组织学比较,比格犬输卵管上皮高度发达,呈乳头状交织成网。（3）子宫组织学比较,比格犬内膜层及肌层厚度最厚,而昆明小鼠内膜层及肌层最薄。从子宫内膜层腺体密度比较,树驹子宫内膜层腺体密度最大。（4）宫颈组织学比较,昆明小鼠、SD大鼠、比格犬宫颈粘膜均为鳞状上皮,并且无宫颈固有粘液腺体,日本大耳白兔及树鼢粘膜均为粘液柱状上皮,成乳头状排列,并且具有宫颈固有粘液腺体,但数量较少。（5）极少数实验动物存在炎症、溃疡、钙化、含铁血黄素沉积等自发病变。结论实验动物雌性生殖系统存在比较组织学的差异性,在进行动物实验和实验动物病理检测时应予考虑。     

动情后期应用米非司酮对大鼠下丘脑弓状核和垂体β-内啡肽的影响

目的:探讨动情后期应用米非司酮对大鼠下丘脑弓状核和垂体β-内啡肽(β-EP)的影响. 方法:选择动情周期为4 d的大鼠40只,随机分为正常对照组(NC)和动情后期给药组(AM)各20只,采用免疫组化方法观察用药后的预期间情期和动情前期大鼠下丘脑弓状核和垂体β-EP的变化,以及卵巢和子宫内膜的形态学改变. 结果:①弓状核β-EP细胞计数显示:用药后在随后的预期间情期β-EP细胞数量高于对照组间情期数量(P<0.01),在随后的预期动情前期β-EP细胞数量亦高于对照组动情前期数量(P<0.01). ②垂体前叶β-EP细胞计数:用药后在随后的预期间情期β-EP细胞数量高于对照组间情期数量(P<0.05),在随后的预期动情前期β-EP细胞数量亦高于对照组动情前期数量(P<0.01). ③卵巢形态学变化:对照组间情期卵巢可见多个发育中的卵泡,直径较小,动情前期有数目较多的发育成熟的卵泡;动情后期给药组,在随后的预期间情期(24 h),发育中的卵泡少于对照组,直径较小,在预期的动情前期(48 h),发育卵泡仍然很少,直径较前变化不大,黄体较其他组大. ④对子宫内膜每横断面腺体数、腺腔直径、腺细胞高度和内膜厚度4参数的统计结果:动情后期给药组在随后的预期间情期(24 h),所有参数均高于对照组间情期(P<0.01);在随后的预期动情前期(48 h),所有数值均下降,子宫内膜厚度和腺细胞高度比对照组动情前期低(P<0.05);腺腔直径和腺体数与之无差异(P>0.05). 结论:动情后期单独应用米非司酮可影响大鼠下丘脑弓状核和垂体前叶β-EP神经元的数量,抑制相继的卵泡发育和延迟子宫内膜成熟. 动情后期应用米非司酮在一定剂量上影响性腺轴中枢部位,并可能进而影响卵巢和子宫内膜.     

补肾助孕方对肾虚薄型子宫内膜大鼠组织形态ERa、PR表达影响及容受性的调控作用

目的观察补肾助孕方对肾虚薄型大鼠子宫内膜、卵巢组织形态影响及ERa、PR表达变化,探讨中药对子宫内膜容受性的调控作用。方法雌性SD大鼠30只随机分为正常组、模型组、中药组,每组10只。后两组经羟基脲灌胃建立肾虚薄型子宫内膜大鼠模型。模型成功后,中药组给予补肾助孕方0.3 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水,持续15 d。干预结束后,HE染色观察大鼠子宫内膜及卵巢组织形态;Elisa检测血液中孕酮及雌二醇水平;免疫组化及Western blot法检测大鼠子宫内膜ERa、PR表达。结果与正常组比较,模型组大鼠子宫内膜腺体稀少,分泌功能降低,内膜间质致密,卵巢组织内卵泡数目减少,卵泡内细胞层数减少,颗粒细胞排列无序;孕酮及雌二醇水平减低,ERa、PR表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,中药组子宫内膜腺体数目增多,分泌增加,间质蜕膜化,卵巢内卵泡数目增加,细胞层数增加,颗粒细胞排列较规则;孕酮及雌二醇水平升高,ERa、PR表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾助孕方素能改善肾虚薄型大鼠子宫内膜及卵巢组织形态,并上调雌、孕激素的表达,调控种植窗促进胚胎植入。     

慢性焦虑刺激对成年雌性大鼠性激素水平的影响

目的 探讨慢性焦虑刺激对成年雌性大鼠性激素水平的影响.方法 将雌性成年大鼠随机分成空白组、模型组,采用不确定性空瓶刺激法建立焦虑应激大鼠模型.以高架十字迷宫实验评价其行为学;采用化学发光法检测大鼠性激素六项:促黄体生成素(LH),促卵泡激素(FSH),泌乳素(PRL),睾酮(T),孕酮(P),雌二醇(E2)水平;光镜观察大鼠子宫、卵巢的形态学变化.结果 与空白组相比,模型组大鼠血清T浓度显著升高(P＜0.01),LH浓度显著减少(P＜0.01),FSH、PRL、P、E2水平差异无统计学意义;模型组卵巢组织闭锁卵泡多,黄体和成熟卵泡少,子宫内膜较薄,间质纤维增生.结论 在焦虑状态下,成年雌性大鼠的血清T浓度升高,LH浓度降低,子宫、卵巢出现病理改变,提示焦虑是影响雌性大鼠生殖机能的重要因素.     

不同超剂量组RU486对大鼠卵巢中细胞亚显微结构的作用

目的：电镜下观察不同时间,不同超剂量组ＲＵ４８６对大鼠卵巢中细胞亚显微结构的影响,从形态学角度研究ＲＵ４８６避孕机制。方法：给实验大鼠灌服不同超剂量ＲＵ４８６,于不同时间取卵巢组织,制作电镜标本并观察。结果：实验各组生长卵泡发育不良或闭锁,未见成熟卵泡和黄体,闭锁卵泡,间质腺增多,卵泡细胞,间质腺细胞内含大量脂滴,空泡,滑面内质网（ＳＥＲ）及次级溶酶体,巨噬细胞腺增多,变异颗粒细胞内出现残余体和聚     

兔卵巢组织移植后组织学研究

目的:构建母兔自体及异体卵巢组织移植模型,揭示卵巢组织移植后组织学特征。方法:以母兔为实验动物,A组阳性对照,不做任何处理;B组阴性对照,切除双侧卵巢;C组自体移植组,分离卵巢组织,切成1mm3左右大小的米粒块,种植于颈部皮下;D组异体移植组,卵巢组织处理方法与C组相同,移植时将卵巢组织异体进行种植。术后60d处死母兔,子宫称重,对移植物及子宫内膜进行组织学检查。结果:1C组与D组中分别有5与3只母兔阴道呈红色或者粉红色、湿润、肿胀,进入发情期;2自体、异体皮下移植后存活的卵巢组织形态与移植前相似,表面血管较为丰富,皮质内可见正常形态的原始卵泡、初级卵泡,部分移植物可见成熟的窦状卵泡;3A组、C组、D组母兔子宫内膜表层细胞呈锯齿状,宫腔间隙较宽,被复粘膜层子宫腺发育,固有膜宽大,肌壁厚,而B组母兔宫腔呈裂隙状,粘膜层平坦,缺乏子宫腺,固有膜变窄,肌壁变薄。结论:母兔卵巢组织移植后,移植物可存活,并进一步释放内源性激素,对靶器官产生作用。     

功血时子宫全切标本的形态学观察

观察了功血时全子宫切除标本23例,形态学的变化主要表现在子宫内膜,其特点是:(1)子宫内膜较厚;(2)腺体生长旺盛;(3)间质基质浓密,网状纤维增多及部分胶元化;(4)有时可见到间质灶性出血。可以认为这些改变与雌激素的作用有关。而功血时子宫内膜间质出血的形态学基础,则是在间质纤维出现上述形态改变的同时,间质动脉及静脉壁上出现了相同的变化所致。     

滋肾益脑方对抑郁模型大鼠子宫及卵巢组织形态学的影响

目的观察中药复方滋肾益脑方对抑郁大鼠子宫、卵巢形态学的影响。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组、滋肾益脑方中剂量组和高剂量组,采用甲状腺素灌胃和慢性不可预见性应激方法制备肾阴虚抑郁动物模型,采用苏木精-伊红染色法光镜下观察各组大鼠子宫、卵巢的形态学变化。结果与正常对照组比较,模型组显示闭锁卵泡多,黄体和成熟卵泡少见,子宫内膜明显较薄,间质纤维增生;与模型组比较,氟西汀组大鼠子宫、卵巢的形态学变化无明显改善,而滋肾益脑方组子宫、卵巢的病理形态学变化均有不同程度的减轻,其中滋肾益脑方高剂量组较滋肾益脑方中剂量组改善更为明显。结论滋肾益脑方能明显减轻肾阴虚抑郁大鼠的子宫、卵巢病理形态学改变。     

去甲二氢愈创木酸对大鼠卵巢功能的影响

目的探讨血管生成抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid, NDGA)对有规律动情周期大鼠卵巢功能的影响.方法将有规律动情周期的雌性大鼠按不同的动情阶段随机分为NDGA组(N)和PBS组(P),隔日皮下注射16 d,观察给药前后血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、FSH和LH水平和给药后的交配情况及子宫和卵巢的形态学变化.结果 NDGA各组大鼠在给药后皆不能成功交配.免疫组化染色显示NDGA能显著抑制子宫内膜基质细胞增殖,减少内膜腺体数目,抑制腺上皮细胞增殖,抑制内膜血管增殖和减少微血管密度(MVD)(P<0.01).卵巢有成熟的黄体,但数目和面积比对照组显著减少,闭锁卵泡明显增多(P<0.01).血清E2显著降低,P在动情期和动情后期呈反向变化(P<0.01),FSH在动情期和动情后期明显升高(P<0.05),LH值与给药前比较没有统计学差异(P>0.05).结论长时间使用NDGA可以引起大鼠的卵巢功能紊乱.     

大鼠海马齿状回、杏仁核突触外GABAA受体表达与生殖周期雌孕激素变化相关性研究

目的明确生殖周期中卵巢甾体激素波动是否引发特定脑区神经元突触外GABAA受体表达变化及相关性。方法阴道涂片法筛选出具有完整生殖周期的大鼠,并将其分为两组,动情期组与动情间期组;Elisa检测每组大鼠血清雌孕激素含量;免疫组化法观察每组大鼠海马齿状回、杏仁核突触外GABAA受体δ亚基的表达;分析各组大鼠血清孕激素含量与突触外GABAA受体δ亚基表达的相关性。结果动情期组血清雌激素含量高于动情间期组,而孕酮含量则低于动情间期组,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。海马齿状回、杏仁核GABAA受体δ亚基的免疫组化结果显示,阳性表达动情间期组高于动情期组,差异具有统计学意义(P<0.05);海马齿状回、杏仁核突触外δ亚基阳性结果 IOD值随着动情间期与动情期孕酮浓度值的增加而增加,两变量呈线性相关。结论动情间期高水平的孕激素可致大脑海马齿状回、杏仁核突触外GABAA受体高表达。     

花生四烯酸对小鼠卵泡衰老的影响

目的:研究花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对小鼠卵泡发育的影响,探讨AA与卵巢早衰的关系?方法:10% AA饲料喂食4周龄ICR雌鼠,4个月后观察小鼠子宫卵巢重量?卵巢组织脂肪酸分析?卵巢组织学改变?结果:10%AA组与对照组相比子宫卵巢体重下降;脂肪酸分析结果显示10%AA组卵巢n-6/n-3不饱和脂肪酸比值增大;光镜下,10%AA组可见卵巢退行性黄体增多?间质纤维化?卵巢闭锁卵泡所占比例增加?结论:喂食10%AA饲料可引起小鼠卵巢衰老?     

Immunolocalization of uterine luminal fluid protein (ULF-250) in rat uterus

Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＡｎｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｌｏｃａｌｉｚｅＵＬＦ 2 50ｉｎｒａｔｕｔｅｒｉｄｕｒｉｎｇｅａｃｈｐｈａｓｅｏｆｔｈｅｅｓｔｒｏｕｓｃｙｃｌｅ ,ａｎｄｉｎｕｔｅｒｉｏｆｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｉｚｅｄｒａｔｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｅｓｔｒａｄｉｏｌａｎｄｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＰｏｓｉｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇｏｆＵＬＦ 2 50ｏｃｃｕｒｒｅｄｉｎｔｈｅｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｏｆｔｈｅｕｔｅｒｕｓａｔａｌｌｐｈ…     

动情周期中大鼠子宫β肾上腺素能受体测定的初步研究

用放射配体结合技术测定了大鼠子宫肌细胞膜上β肾上腺素能受体的数目与亲和力。动情前期与动情期子宫肌β肾上腺素能受体的数目(由最大结合容量R_T表示)为126.84±54.69fmol/mg蛋白质,明显高于动情后期与动情间期子宫中的数目77.98±30.66fmol/mg蛋白质(P<0.05),由此表明子宫的激素状态可影响受体从而再影响子宫收缩。动情周期中各期间的受体亲和力(用解离常数K_D反映)未见显著差别     

不同方法确定动情周期及动情期生殖器官结构

目的 为确定最佳合笼时间,对两种常见鉴定小鼠动情周期方法进行比较,并确定处于动情期的子宫内膜和输卯管的形态结构,为动物生殖发育及胚胎研究提供基础技术指导.方法 对43只昆明小鼠分别应用阴道脱落细胞检查法、宫颈黏液结晶法,确认小鼠动情周期,与子宫、输卵管和卵巢做成石蜡切片,HE染色后镜下观察的结果进行统计分析比较,同时对处于动情期的小鼠子宫内膜和输卵管进行HE染色.结果 阴道脱落细胞检查法所确定小鼠动情周期与子宫镜检所见确定的动情周期中,在动情期的判定上吻合率较高;小鼠的阴道脱落细胞在动情周期各个时期有不同的形态特点,处于动情期的小鼠的子宫内膜和输卵管的形态与处于非动情期的小鼠有明显变化.结论 阴道脱落细胞染色检查确定动情期比宫颈黏液结晶法更为可靠;小鼠激素水平的变化使阴道上皮细胞发生周期性变化,动情期小鼠输卵管和子宫内膜发生相应改变分别为受精和着床做准备.     

肾虚脾弱型黄体功能不健性不孕症临床研究

目的 探讨肾虚脾弱型黄体功能不健性不孕症患者子宫内膜的雌、孕激素受体（ER、PR）及宫腔异常的概况，为研究此类不孕症提供实践依据。方法 在子宫内膜增生中晚期进行宫腔镜检查和通过免疫组化法对宫内膜的雌、孕激素受体进行半定量分析，并与非黄体功能异常的不孕组进行了比较。结果 15例观察组不孕患者的增生中晚期宫内膜间质细胞、腺上皮细胞的PR明显低于对照组（P＜0．05、P＜0．01），间质细胞的ER也明显低于对照组（P＜0．05），腺上皮细胞的ER2组虽无显著差异，但观察组有降低趋势。宫腔镜检发现，此类型不孕症患者的宫腔异常改变以宫内膜苍白、肥厚，局部呈息肉样增生最多见。结论 增生中晚期子宫内膜的ER、PR含量明显降低，宫腔存在明显异常改变，是肾虚脾弱型黄体功能不健性不孕症患者存在的病理改变实质。     

激素替代疗法对妇女绝经期症状与子宫及其循环的影响

目的：观察激素替代疗法对妇女绝经期症状、子宫及其循环的影响。方法：３０例病人分２组，使用贴皮及口服雌孕激素前后，观察子宫体积、内膜厚度，Ｋｕｐｐｅｒｍａｎ评分，血清Ｅ２、ＦＳＨ、彩超测子宫动脉搏动指数及阻力指数；用ｔ检验统计。结果：用雌孕激素后，Ｋｕｐｐｅｒｍａｎ评分，子宫动脉搏动指数及阻力指数明显下降，子宫体积无变化，子宫内膜增厚，已上升，ＦＳＨ下降；口服组改善血脂构成。结论：激素替代疗法可改善绝经期症状，降低子宫循环阻力，增加子宫血供；口服者可改善血脂构成。     

特殊部位异位妊娠超声检查的特点分析

目的分析特殊部位异位妊娠超声检查的特点。方法回顾性分析本院2018年1月至2019年12月经临床手术证实的80例特殊部位异位妊娠患者的临床资料,所有患者均给予超声(经腹联合经阴道)诊断,以手术结果为标准,分析超声诊断对特殊部位异位妊娠诊断与手术结果的一致性及特殊部位异位妊娠的超声影像特征。结果经Kappa检测,超声诊断不同类型特殊部位异位妊娠与手术诊断结果的一致性较好(Kappa=0.810,P=0.000),超声诊断的特殊部位异位妊娠的误诊率为13.75%;瘢痕妊娠孕囊型的超声特点:孕囊完全或部分着床于子宫瘢痕位置,血流信号可见环状或条索状滋养血流,局部肌层存在缺损或肌层较薄;混合型包块的超声特点:瘢痕位置可见不均匀回声,浆膜层局部外凸或不完整,包块周边可见低速低阻血流信号。输卵管间质部的超声特点:宫腔内未见孕囊,子宫旁一侧可见孕囊或不均匀包块,孕囊周边肌层厚度<5 mm,孕囊周边可见环状高回声,呈间质线样征,周边肌层较薄弱或有缺损。宫角妊娠的超声特点:孕囊位于一侧宫角且宫角增大膨出,孕囊或包块与宫腔内膜互通,且周边存在完整肌层包绕。卵巢妊娠的超声特点:宫腔内未见孕囊,孕囊型一侧卵巢内可见孕囊、卵黄囊、胚芽及胎心管搏动,囊壁较厚且绒毛膜光环明显,包块型可见混合型回声,周边卵巢实质内可见卵泡或黄体,包块内可见条状、点状血流信号。腹腔妊娠:原发性腹腔妊娠超声特点,子宫大小、形态、回声正常,宫旁一侧可见孕囊样回声,周边呈增强厚壁回声,可探及胚芽且可见心管搏动,甚至可探及不均匀的胎盘回声,内散在斑点状强回声,腹腔可探及腹腔积液,内见条索状分隔,且胎盘周边可见丰富蓝红色血流包绕;继发性腹腔妊娠超声特点,子宫增大、子宫内膜增厚且呈不均匀回声,可见腹腔积液,大网膜上可探及羊膜囊、内见胎儿、胎心搏动、胎盘组织,羊膜囊与膀胱间未见子宫肌壁层。结论不同类型特殊部位异位妊娠的超声特点存在较大差异,但仍存在误诊情况,故临床上应充分了解患者病史,扩大扫查范围,以提高临床诊断的准确性。