比格犬雌激素β受体RNA干扰实验细胞及PCR检测引物的筛选

目的筛选用于比格犬ERβ基因RNA干扰实验的细胞和检测所用引物。方法根据比格犬ERβ氨基末端区域和DNA结合区设计三对引物,用阳性质粒筛选最佳引物应用于RNA干扰效果检测,并利用293T、Hela和vero细胞的cDNA验证该引物的特异性。对这三种细胞内人ERβ基因的存在情况也进行了检测。结果经过三次重复性实验之后,结果显示引物C36684扩增效率高,且没有非特异条带,该引物对293T、Hela和vero细胞cDNA扩增时同样没有非特异性条带,但293T细胞中存在人的ERβ基因。结论引物C36684用于检测RNA干扰效率,而Hela细胞则作为RNA干扰实验的细胞工具。     

苜蓿异黄酮提取物对小鼠生长和免疫功能的影响

目的研究苜蓿异黄酮提取物对小鼠生长性能和免疫功能的影响。方法选用80只小鼠,随机分成四组,分别给予0(对照)、40(低)、120(中)和400mg/kgbw·d(高)的苜蓿异黄酮处理,苜蓿异黄酮给药方式为每日一次定时灌胃。结果低剂量苜蓿异黄酮处理可提高雄性小鼠平均日增重和胃重百分率。中剂量苜蓿异黄酮可提高脾脏系数、小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率,和小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数。高剂量苜蓿异黄酮可提高胸腺系数,和血清溶血素值。各剂量苜蓿异黄酮处理可提高小鼠迟发性变态反应右耳增厚值。结论苜蓿异黄酮对小鼠生长性能的影响与性别和剂量有关,40mg/kgbw·d处理可显著地提高雄性小鼠的生长性能;苜蓿异黄酮对小鼠的特异性和非特异性免疫功能都有一定的提高和改善,其应用的适宜剂量为120mg/kgbw·d。     

食品菌落总数检验中不确定度的评定

目的:为减小实验误差,提高检测结果精确度,评定菌落总数的不确定度。方法:分析样品中菌落总数不确定度的来源,采用合并样本标准差的方法来评定菌落总数的不确定度。结果:测量结果表明扩展不确定度为0.046%,适合于每一个样本的检测结果。结论:方法简便,适合于每一个样本的检验结果,随着检验结果的不断增加,可随时加入到合并样本中,重新计算合并样本标准差,更新其不确定度的取值范围。     

比格犬雌激素β受体RNA干扰实验细胞及PCR检测引物的筛选

目的 筛选用于比格犬ERβ基因RNA干扰实验的细胞和检测所用引物。方法 根据比格犬ERβ氨基末端区域和DNA结合区设计三对引物,用阳性质粒筛选最佳引物应用于RNA干扰效果检测,并利用293T、Hela和vero细胞的cDNA验证该引物的特异性。对这三种细胞内人ERβ基因的存在情况也进行了检测。结果 经过三次重复性实验之后,结果显示引物C36684扩增效率高,且没有非特异条带,该引物对293T、Hela和vero细胞cDNA扩增时同样没有非特异性条带,但293T细胞中存在人的ERβ基因。结论 引物C36684用于检测RNA干扰效率,而Hela细胞则作为RNA干扰实验的细胞工具。     

荧光定量RCR检测比格犬雌激素β受体mRNA在间情期与发情期表达量的差异

目的对比格犬发情期与间情期ERβ基因在性腺组织器官的变化状况进行荧光定量,明确ERβ基因在发情期与间情期下丘脑-垂体-性腺轴上的表达量差异情况,为深入研究比格犬发情机制提供基础。方法作为调控生殖的关键基因,ERβ基因位于比格犬下丘脑-垂体-性腺轴上,因此分别取处于发情期和间情期的比格犬,提取下丘脑、垂体、卵巢和子宫的RNA,反转录后对ERβ基因mRNA的表达量进行荧光定量PCR检测。结果间情期比格犬卵巢、子宫、垂体、下丘脑内ERβ基因mRNA的表达量分别是发情期比格犬卵巢、子宫、垂体、下丘脑内ERβ基因mRNA表达量的0.35倍、0.17倍、0.44倍、0.43倍。结论 ERβ基因在处于发情期的比格犬下丘脑-垂体-性腺轴内表达量均上调。