ω-3多不饱和脂肪酸对慢性移植物抗宿主病狼疮小鼠的免疫调控作用

目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 poly unsaturated fatty acids,ω-3 PUFAs)对慢性移植物抗宿主病(chronic graft versus host disease,cGVH)狼疮模型小鼠的免疫调节功能影响。方法单次腹腔注射bm12小鼠淋巴细胞建立cGVH小鼠模型,造模当天分别给予90%ω-3 PUFAs和97%EPA灌胃治疗,持续14 d。通过流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞中各免疫指标,ELISA检测小鼠血清中总IgG水平。结果与正常对照组相比,cGVH组明显下调Treg亚群,明显上调T_FH细胞、生发中心B细胞和浆细胞亚群;与模型对照组相比,90%ω-3和97%EPA均明显上调Treg亚群,并明显下调T_FH细胞、生发中心B细胞和浆细胞亚群;且97%EPA组小鼠血清中总IgG水平明显下降。结论在cGVH狼疮小鼠模型中,ω-3 PUFAs通过增加Treg细胞,减少T_FH细胞、生发中心B细胞和浆细胞,抑制IgG的分泌,从而发挥免疫抑制作用,且其免疫抑制作用可能与ω-3 PUFAs含量相关。     

重组沙门氏菌VNP20009-M对骨肉瘤的治疗作用

目的 研究携带甲硫氨酸酶基因的减毒沙门氏菌VNP20009-M对骨肉瘤的治疗作用及其机制。方法 将重组沙门氏菌VNP20009-M与骨肉瘤细胞MNNG-HOS共培养；骨肉瘤细胞MNNGHOS、U2OS及SaoS-2均高表达甲硫氨酸酶基因后探索细胞增殖、迁移及凋亡能力的变化；构建MNNG-HOS裸鼠皮下荷瘤模型，评价不同剂量的VNP20009-M在动物模型中的治疗效果。结果 通过质粒PCR验证甲硫氨酸酶基因只存在于目的菌株VNP20009-M中，且具有较高的甲硫氨酸酶活性，重组沙门氏菌构建成功。VNP20009-M显著诱导骨肉瘤细胞MNNG-HOS的凋亡。相比对照组，甲硫氨酸酶基因过表达的骨肉瘤细胞增殖、迁移能力被显著抑制。VNP20009-M治疗后小鼠皮下肿瘤生长被显著抑制。结论 VNP20009-M可诱导骨肉瘤细胞凋亡并抑制癌细胞增殖和迁移，可以作为一种新型高效的药物为临床提供新的治疗方式。     

河南省1995-2005年学生运动素质水平分析

近年来,河南的经济建设取得了巨大的成就,带动了科技、文化、教育、体育等各项事业的发展,人民的生活水平也得到极大的提高。本文以1995,2000,2005年3次体质调研原始数据为依据,针对7～12岁(小学)、13～18岁(中学)、19～22岁(大     

脂联素对子宫内膜癌细胞生长抑制和细胞凋亡的影响

观察脂联素对子宫内膜癌细胞株HEC-1-A和RL95-2细胞计数、细胞凋亡和细胞周期的影响,检测脂联素对细胞p-AMPK/AMPKα表达的影响.结果提示脂联素对子宫内膜癌细胞具有抑制生长和诱导细胞凋亡发生的作用,其作用机制可能与AMPK激活有关.     

自噬基因Atg5的缺失对精子成熟的影响

目的探讨自噬蛋白Atg5在维持附睾生理功能及精子的成熟过程中发挥的作用。方法通过基因敲除技术构建附睾头4-5段主细胞Atg5特异性敲除小鼠模型,根据基因型分为三组:对照组(野生型)、杂合敲除组以及纯合敲除组。8周龄时,做合笼实验并记录致孕率和产仔数,14周龄时通过精子动力分析仪检测小鼠精子活力和数量的变化,并通过病理组织染色观察小鼠附睾组织的形态学变化,以及通过Western blot和免疫荧光技术检测三组模型鼠中ATG5蛋白表达和自噬通路变化情况。结果与对照组、杂合敲除组相比,纯合敲除组小鼠的附睾头4-5段主细胞Atg5特异性敲除后,自噬标记蛋白LC3-Ⅰ以及p62得到积累,自噬过程成功阻断;但纯合敲除组小鼠的附睾组织形态、精子活力、精子数目、产仔率和致孕率均无变化。结论在正常条件下(无外界刺激),Atg5特异性敲除导致附睾头4-5段的自噬过程阻断后,对小鼠附睾的生理功能和精子成熟过程没有影响。     

低免疫原性脱细胞神经基质的制备及其理化性能

目的：制备低免疫原性异种脱细胞神经基质并评估其理化性能。方法：以α-1，3-半乳糖苷转移酶基因敲除（GTKO）猪坐骨神经为实验原料对基因敲除猪坐骨神经进行脱细胞处理制备低免疫原性异种脱细胞神经基质，通过HE、DAPI染色及DNA残留量检测评价神经组织的脱细胞效果；I型胶原、层黏连蛋白、纤连蛋白免疫组织化学及天狼猩红染色评价脱细胞神经细胞外基质组分保留情况；α-1，3-半乳糖基（a-gal）免疫荧光检测异种抗原a-gal的残留；扫描电镜（SEM）分析脱细胞神经三维组织结构及孔隙率。结果：组织染色显示脱细胞神经基质内膜、外膜、束膜中的细胞均去除干净，DNA定量结果显示DNA含量下降了95%。天狼猩红染色及免疫组织化学结果显示脱细胞神经组织较好地保留了胶原纤维与细胞外基质主要蛋白。SEM结果显示脱细胞神经较好地保留了其三维组织结构，细胞毒性检测表明脱细胞神经基质无细胞毒性。结论：本研究自主设计的四联脱细胞方案能彻底去除神经组织中的细胞成分与异种抗原，并且较完整地保留了神经组织结构，与天然神经具有高度相似性。     

新型磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对骨肉瘤U2OS细胞增殖的抑制作用

目的研究高选择性的新型磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91对骨肉瘤的抗癌作用。方法CCK-8法检测不同浓度(0、20、40、80、160、240、320、400、480μmol·L^-1)和不同干预时间(0、24、48、72、96 h)的ZL-n-91对U2OS细胞的增殖抑制作用;平板克隆形成实验检测ZL-n-91对U2OS细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术检测细胞周期以及凋亡的影响;Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2、周期蛋白CDK2、结果ZL-n-91明显抑制U2OS细胞的增殖,呈时间及剂量依赖性(P<0.05),其半数抑制浓度IC₅₀为174.1μmol·L^-1;ZL-n-91明显抑制U2OS细胞的克隆形成能力(P<0.01);ZL-n-91影响U2OS细胞的周期进程,将U2OS细胞阻滞在G₀/G₁期,并明显促进细胞凋亡(P<0.01);Western blot结果显示ZL-n-91明显下调U2OS细胞中Bcl-2、CDK2、CDK4、CyclinD1、CyclinE1蛋白的表达(P<0.05)。结论新型选择性磷酸二酯酶4抑制剂ZL-n-91显著抑制骨肉瘤细胞U2OS的增殖,促进细胞的周期阻滞和凋亡,可能是治疗骨肉瘤的潜在药物。     

新医改环境下基层医疗机构药剂科发展的几点建议

药剂科是负责医院药剂工作的重要职能部门,集药品采购、供应、调剂、制剂、经济管理、临床药学、科研工作及贯彻执行药政法规为一体,是提高医疗质量、保证患者用药安全有效的重要环节。药剂科属医疗技术部门,具有专业技术性、业务监督性、信息指导性、管理效益性及工作服务性的特点。     

基于D-最优设计的SD大鼠皮肤化学脱毛参数优化

目的对SD大鼠皮肤进行脱毛参数研究,为建立皮肤光老化动物模型提供基本实验条件。方法以毛发残存量和皮损面积为评价指标,分别考察Na_2S作用浓度及时间对脱毛效果的影响,在此基础上进一步通过D-最优设计优化Na_2S脱毛参数。结果 Na_2S浓度是影响脱毛能力的关键因素,5%以下几乎无脱毛效果,7%以上则开始出现皮损并逐步加重,6%为脱毛基础浓度;在6%Na_2S浓度下作用5 min开始脱毛,10 min时皮肤表面较光滑,15 min时非常光滑,15 min之后皮损显现,20 min时皮损加重,25 min时肉眼可见皮肤灼烧样外观,D-最优设计表明7%Na_2S作用10 min效果最好,未见皮损且无残余毛发。结论基于D-最优设计的SD大鼠皮肤化学脱毛可实现高效脱毛。