医疗机构制剂活血益气方抗瘤丸基于裸鼠荷瘤模型的工艺筛选

目的:筛选医疗机构制剂活血益气方抗瘤丸(简称KLW)的制备工艺。方法:将足够量的大鼠神经胶质瘤C6细胞注射至裸鼠右侧腋窝,建立裸鼠荷瘤模型,按瘤块体积随机分组,分别灌胃给予等量的不同工艺KLW1～4,以替莫唑胺为阳性对照,以溶媒(去离子水)为模型对照,测量裸鼠体重、瘤体积,并观察给药前后小鼠症状;连续给药15 d后,处死,称量裸鼠瘤重量。结果:KLW-1中、高剂量组裸鼠瘤块重量,KLW-1高剂量组瘤体积,均低于模型对照组,差异有统计学意义(P 0. 05),阳性对照组瘤块重量及瘤体积均低于模型对照组,差异有统计学意义(P 0. 01)。其他处方组裸鼠瘤块重量、体积与模型对照组比较,差异无统计学意义(P 0. 05)。各待测组(KLW-1～4高、中、低剂量组)裸鼠体重与模型对照组比较,差异均无统计学意义(均P 0. 05),阳性对照组给药后裸鼠体重明显低于模型对照组,差异有统计学意义(P 0. 01)。各组有少量裸鼠死亡。结论:抗瘤丸在荷瘤裸鼠模型中具有一定抑瘤效果,与待测工艺比较,原制剂工艺抑瘤效果较好,成本低廉,适用于大规模现代化生产。     

优化治疗神经胶质瘤复方抗瘤丸的实验研究

目的:通过实验研究,优化治疗神经胶质瘤中药复方抗瘤丸(KLW)的组成,得出最佳处方配伍。方法:采用大鼠神经胶质瘤C6细胞BALB/c裸鼠移植瘤模型,将模型裸鼠按瘤块体积随机分为10组(模型组,阳性药对照组(替莫唑胺TMZ组),KLW-1、KLW-2、KLW-3、KLW-4高、低剂量组,每组7只裸鼠。)连续给药15 d,检测各组裸鼠体重、瘤块体积、瘤块重量、微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、凋亡细胞、Bcl-2,Bax蛋白表达水平。结果:与模型组比较,KLW-1高、低剂量组,KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组瘤体积显著减小(P<0.05);KLW-4高剂量组,TMZ组移植瘤的MVD值明显降低(P<0.05);KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组移植瘤VEGF灰度值明显增高(P<0.05);KLW-1、KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组细胞凋亡率显著增高(P<0.05);各给药组Bcl-2/Bax的比例增加。结论:处方KLW-1高、低剂量组,KLW-2、KLW-4高剂量组对C6移植瘤的生长具有较好的抑制作用。     

中药复方抗瘤丸治疗神经胶质瘤作用机制的实验研究

目的探讨中药复方抗瘤丸(KLW)治疗神经胶质瘤的作用机制。方法制备人神经胶质瘤U87细胞BALB/c裸鼠移植瘤模型,按瘤块体积和体重分层随机法分为:模型组,替莫唑胺(TMZ)组,KLW高、中、低剂量组,每组12只,连续给药20天。检测各组裸鼠体重、瘤块体积、瘤块重量、微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)。结果与模型组比较,KLW高、中剂量组及TMZ组瘤重量显著减少(P0.05);KLW中、低剂量组及TMZ组移植瘤的MVD明显降低(P0.05);KLW高、中、低剂量组及TMZ组移植瘤VEGF表达水平明显降低(P0.05)。结论 KLW治疗胶质瘤的作用机制可能与降低MVD、抑制VEGF表达相关。     

蝇蛆壳聚糖急性毒性实验

目的观察蝇蛆壳聚糖的急性毒性反应。方法蝇蛆壳聚糖以最大浓度及最大给药体积的药液灌胃连续给药3次。连续观察14d，记录小鼠毒副反应情况。蝇蛆壳聚糖腹腔注射给药1次，连续观察14d，记录小鼠毒副反应情况。结果观察14d，灌胃给药全部动物健存，小鼠体重与空白对照组差异无显著性，未见任何毒性反应。计算蝇蛆壳聚糖最大给药量为2700mg／kg体重，相当于成人日用量的67．5倍。腹腔注射给药亦未见任何毒性反应。结论蝇蛆壳聚糖毒性较小。     

芒果叶提取物芒果苷安全性评价Ⅱ:小鼠及犬急性毒性试验

目的:观察动物24 h多次灌胃给予芒果苷的急性毒性。方法:将40只KM种小鼠随机分为给药组和对照组,6只Beagle犬随机分为给药组和对照组,均以最大耐受量(MTD)法灌胃给药进行毒性试验,给药后均观察14 d。结果:小鼠给药后,其外观、行为活动、饮食等均未见明显异常,体重增长正常,试验结束时全部存活,大体解剖未见肉眼可见病理变化;犬给药后,均出现一过性灰白色粪便,给药组在给药后次日出现TBIL明显升高,发生率为1/4,但观察结束后又恢复至给药水平,其余外观、血液生化指标等均无明显异常,大体解剖未见肉眼可明显异常。结论:小鼠灌胃给予芒果苷54 g/kg未产生明显毒性反应;犬灌胃给予芒果苷MTD9.0 g/kg体重;有1/4例动物在给药次日TBIL明显升高,提示芒果苷有可能影响TBIL代谢,但能自行恢复。     

养心颗粒急性毒性试验研究

目的:观察养心颗粒灌胃给药的小鼠急性毒性反应,为该药的安全性评价和药效试验剂量的设定提供参考。方法:采用最大给药量法,按照《中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则》附录II中要求的指征进行观察,并每7d记录体重。结果:养心颗粒205.95g生药/kg对小鼠灌胃给药,与空白对照组比较,7d、14d体重未见明显减轻,未见组织器官有体积、颜色、质地的改变。结论:以最大给药量给予小鼠灌胃2次(即总给药量为205.95g生药/kg),相当于临床人用剂量的约74倍,该剂量下小鼠未见死亡,各个系统和靶器官未表现相应的毒性反应。     

扶正抑瘤汤对胶质瘤裸鼠肿瘤生长抑制的影响

目的探讨扶正抑瘤汤联合INF-γ基因修饰的BMSCs在体内抗肿瘤作用。方法构建INF-γ基因慢病毒表达载体并在体外转染BMSCs,BALB/C裸鼠腋下接种胶质瘤细胞造模,裸鼠随机分为正常组、模型组、BMSCs组、INF-γ+BMSCs组、扶正抑瘤汤组、扶正抑瘤汤+INF-γ+BMSCs组,连续灌胃给药14 d。qRT-PCR验证BMSCs转染INF-γmRNA表达,激光共聚焦观察INF-γ转染的BMSCs在裸鼠瘤体中荧光分布,测量荷瘤裸鼠肿瘤长径和短径,ELISA检测血清中INF-γ水平;免疫组化检测裸鼠瘤体组织凋亡蛋白Bax/Bcl-2表达。结果激光共聚焦显微镜发现BMSCs在裸鼠瘤体组织中呈明显集聚分布。给药14 d后,与模型组比较,扶正抑瘤汤组和扶正抑瘤汤+INF-γ+BMSCs组肿瘤体积增值较少(P<0.05),血清INF-γ水平增加(P<0.05),Bax蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论扶正抑瘤汤能够协同INF-γ基因转染的BMSCs发挥抗肿瘤作用,其作用可能与血清INF-γ、Bax/Bcl-2途径诱导细胞凋亡有关。     

复方银杏叶片的急性毒性实验研究

目的观察复方银杏叶片的急性毒性反应。方法复方银杏叶片以最大浓度及最大给药体积的药液灌胃给药,3次/d。连续观察7 d,记录小鼠毒副反应情况。结果观察7 d后,全部动物健存,小鼠体重平均增长24.82%,未见任何毒性反应。计算得葛根素最大给药量为3339.6 mg/kg体重,相当于成人日用量的2360.1倍。结论提示复方银杏叶片毒性较小。     

重楼皂苷Ⅶ对裸鼠胰腺癌的治疗作用及机制研究

【目的】 观察重楼皂苷Ⅶ对裸鼠胰腺癌的治疗作用及其机制。【方法】 以人胰腺癌细胞AsPC-1皮下注射裸鼠构建胰腺癌移植瘤模型。将胰腺癌移植瘤裸鼠随机分为5组,即对照组,重楼皂苷Ⅶ低、中、高剂量组和5-氟尿嘧啶组,对应给药治疗。给药结束后,测量移植瘤体积、质量;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记（TUNEL）法测定移植瘤组织细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测移植瘤组织Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。【结果】 与对照组比较,重楼皂苷Ⅶ低、中、高剂量组和 5-氟尿嘧啶组移植瘤体积、质量显著降低,TUNEL 阳性表达细胞比例显著升高,移植瘤组织Caspase-3、Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低（均P＜0.01）。【结论】 重楼皂苷Ⅶ可有效抑制胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制肿瘤细胞凋亡有关。     

复方黄酮胶囊的急性毒性作用研究

目的观察复方黄酮胶囊的急性毒性反应。方法复方黄酮胶囊以最大浓度及最大给药体积的药液灌胃给药,3次/d。连续观察7 d,记录小鼠毒副反应情况。结果观察7 d后,全部动物健存,小鼠体重平均增长为25.08%,未见任何毒性反应。计算其最大给药量为783.38 mg槲皮素/kg体重,相当于成人日用量的39.33倍。结论提示复方黄酮胶囊毒性较小。     

复方银杏叶对脾虚模型小鼠治疗作用研究

目的研究复方银杏叶(compound ginkgo biloba,CGB)对脾虚模型小鼠的治疗作用。方法采用利血平加猪油灌胃的方法,造成小鼠脾虚模型,检测小鼠脾脏胸腺指数、小鼠外周血象、血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇。结果CGB组动物脾脏胸腺指数增加、血细胞数和血红蛋白含量明显增加,血清甘油三酯降低、高密度脂蛋白胆固醇升高。结论复方银杏叶具有改善脾虚症状、调节脂质代谢作用。     

葛根素合用二甲双胍对糖尿病小鼠血糖的影响

目的：探讨葛根素合用二甲双胍（P—M合剂,2：1）对糖尿病小鼠的降糖作用。方法：四氧嘧啶腹腔注射造成小鼠糖尿病模型,分为P—M合剂高、中、低剂量组（400、200、100mg／kg）、模型组、正常组。分别灌胃给药7d和14d,各组称体重,采血测定空腹血糖值,另进行糖耐量实验。结果：P—M合剂各剂量组能够改善糖尿病小鼠的多饮多食症状,中、低剂量组的体重比模型组显著增加（P〈0．05）。给药7d和14d后各剂量组均能明显降低空腹血糖值（P〈0．01）,中、低剂量组可明显改善糖尿病小鼠的糖耐量异常,改善血糖调节功能（P〈0．01）。结论：葛根素合用二甲双胍有良好的降糖作用。     

石菖蒲对小鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响

目的研究石菖蒲对小鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响,分析作用机制.方法 石菖蒲不同部位提取物灌胃,用高效液相色谱法测定小鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量.结果石菖蒲挥发油、水提液、去油水煎液可使大鼠谷氨酸( Glu)水平显著降低,挥发油、水提液使天门冬氨酸( Asp)含量降低,挥发油组的牛磺酸( Tau)含量也有较明显降低.结论 石菖蒲可降低小鼠脑组织兴奋性氨基酸的含量,对脑细胞有保护作用.     

薄荷油致小鼠肝毒性时-量关系及其机理研究

目的研究薄荷油致小鼠肝毒性的量效、时效关系及自由基损伤机制。方法小鼠口服不同剂量薄荷油,测定其LD50。另取小鼠按不同剂量或不同时间点分组,检查血清ALT等肝功能指标和肝组织形态变化,测定肝组织SOD,MDA。结果小鼠口服薄荷油的LD50为3.0 ml/kg。ALT等肝功能指标在给药后24~48 h达到高峰,72 h可恢复近正常值。与正常组相比,薄荷油中、高剂量组对肝组织损伤显著,随着剂量增大,ALT等肝功能指标升高显著(P<0.05或P<0.01)。薄荷油组与正常组比较,小鼠肝组织中SOD降低而MDA升高(P<0.05),与四氯化碳相似。结论小鼠一次性口服大剂量薄荷油可造成急性肝损伤甚至死亡,并显示有毒性时-效、量-效关系;自由基损伤可能是其肝毒性机制之一。     

三七总皂苷对小鼠巨噬细胞炎性反应的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对小鼠巨噬细胞炎性反应的治疗作用,同时探讨其可能机制。方法:通过蛋白质免疫印迹实验、实时PCR法、酶联免疫吸附试验,对照研究PNS对小鼠巨噬细胞系RAW 246.7细胞中炎性反应调控因子过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)以及其下游调控的炎性反应递质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)和重组人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),白细胞介素6(IL-6),炎性反应相关氧化因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶-2(COX-2)表达的影响。结果:小鼠巨噬细胞炎性反应模型制备后TNF-α、CRP、M-CSF、IL-6、iNOS及COX-2水平明显上调,三七总皂苷给药后,细胞炎性反应递质与造模组比较有显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三七总皂苷可明显抑制小鼠巨噬细胞炎性反应效应,其作用机制可能通过激活调控因子PPAR-α实现。     

蝇蛆蛋白粉对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨蝇蛆蛋白粉对正常小鼠及免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法:利用正常及环磷酰胺(Cy)所致免疫低下模型小鼠,通过血清溶血素含量检测及碳粒廓清指数测定考察蝇蛆蛋白粉对巨噬细胞巨噬功能及体液免疫功能的影响。结果:蝇蛆蛋白粉可显著提高正常小鼠半数溶血值(HC50),对吞噬指数(α)无影响;对免疫功能低下小鼠HC50无影响,但可显著提高其α值。结论:蝇蛆蛋白粉可有效地增强正常小鼠体液免疫功能;对Cy造成的免疫功能低下有一定的预防和治疗作用。     

枸杞多糖对衰老小鼠皮肤组织总抗氧化能力及脂褐质的影响

目的:观察枸杞多糖对D-半乳糖致小鼠衰老的影响。方法:将50只1月龄昆明种雌性小鼠随机分为空白对照组、模型组、枸杞多糖低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外其余各组均每日注射D-半乳糖造成亚急性衰老模型,给药组同时给予不同剂量的枸杞多糖。6周后检测小鼠皮肤组织中总抗氧化能力(T-AOC)活性和脂褐质(LF)含量。结果:枸杞多糖可增强衰老模型小鼠皮肤组织T-AOC活性(P<0.05),降低LF含量(P<0.05)。结论:枸杞多糖可通过提高衰老皮肤抗氧化物酶活性,降低氧化产物含量,从而达到延缓衰老的作用。     

松花粉总黄酮对小鼠化学性肝损伤保护效应探析

目的：观察松花粉总黄酮对急性化学性肝损伤模型小鼠的作用机制。方法：60只ICR小鼠随机分为空白组、模型组及实验组，每组20只。其中模型组及实验组制备小鼠急性肝损伤模型，模型制备成功后实验组每日灌胃松花粉总黄酮，空白组及模型组灌胃同等剂量的生理盐水，连续干预10 d。比较3组肝脏病理变化，外周血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性以及PI3K-AKT信号通路标志性蛋白水平变化。结果：1）空白组小鼠肝脏形态正常，模型组小鼠肝脏出现明显病理改变，实验组小鼠肝脏细胞空泡及炎性反应侵润现象较模型组减轻，肝脏细胞轻微坏死。2）与空白组比较，模型组外周血ALT、AST及Bax浓度均明显上调(P<0.05)，Bcl-2表达下降(P<0.05)；实验组上述指标明显改善。3）模型组肝脏组织的PI3K、p-AKT水平明显下降，干预后小鼠上述指标表达明显上调，与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：松花粉总黄酮对化学性肝损伤有保护效应，其作用机制可能与介导PI3K-AKT信号通路有关。     

草酸钙型肾结石小鼠模型的研究

目的:摸索简单易行的方法诱导草酸钙型肾结石小鼠模型,为后续药效学研究提供可靠的动物模型。方法:将健康小鼠分为正常组(A组)、模型组(B组)、模型组(C组),B组灌胃给予诱石剂(含0.75%乙二醇和0.75%氯化铵的水溶液),C组灌胃给予诱石剂(含1%乙二醇和1%氯化铵的水溶液),1 m L/次,3次/d,连续28 d进行造模,A组平行灌胃给予等量生理盐水。实验期间观察小鼠的进食进水情况,生命体征,行为活动及体毛变化,于造模后7、14、21、28 d收集24 h尿液进行草酸和钙含量的测定,于末次造模后处死小鼠,剖取肾脏进行病理学观察。结果:于造模第3天开始,B、C组小鼠均出现后肢无力爬行,食欲减退,体毛呈进行性晦暗无光泽,C组小鼠的表现比B组小鼠严重;造模7 d后,模型组开始出现不同数量的动物死亡,且C组死亡率高于B组;B组和C组小鼠尿液中草酸、钙浓度均明显高于A组(P0.01),B组尿草酸浓度明显高于C组(P0.05~0.01),而尿钙浓度明显低于C组(P0.01);病理学结果表明,A组小鼠肾小管未见扩张和草酸钙晶体沉积,B组、C组小鼠肾组织均出现肿胀,肾小管管腔明显扩张、变性、坏死,肾间质有明显慢性炎性细胞浸润,表面点状分布白色结晶或钙化,在近曲小管和远曲小管有大片结晶存在,且B组的成石率比模型C组高。结论:采用0.75%乙二醇及0.75%的氯化铵混合溶液作为诱石液,可成功诱导死亡率低、成石率高的草酸钙型肾结石小鼠模型。     

补阴益智汤配方颗粒对睡眠剥夺小鼠记忆力及睡眠质量的影响

目的：分析补阴益智汤配方颗粒（BYT）对睡眠剥夺（SD）小鼠记忆力及睡眠质量的影响,并探讨其机制。方法：选取ICR小鼠60只,用随机数字表法分为正常对照组、模型组、BYT低剂量组（6 g/kg）、BYT中剂量组（12 g/kg）、BYT高剂量组（18 g/kg）、阳性对照组（0.9 mg/kg）组,每组10只,建立长期SD模型。检测学习记忆能力、神经递质水平、睡眠质量、海马神经元细胞凋亡率;蛋白质印迹法测学习记忆通路-蛋白激酶A-催化亚基β（PKA-Cβ）/cAMP反应元件结合蛋白（CREB）/原肌球蛋白相关激酶B（TrkB）、神经再生通路-配体蛋白（Wnt）/β-连环素/β-半乳糖苷酶（β-gal）蛋白表达。结果：与正常对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力及睡眠质量降低、神经递质释放异常、海马神经元凋亡率升高、记忆通路PKA-Cβ/CREB/TrkB及神经再生通路Wnt/β-连环素/β-gal蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组比较,BYT低剂量组、BYT中剂量组、BYT高剂量组及阳性对照组小鼠学习记忆能力及睡眠质量升高、神经递质释放趋于正常,神经元细胞凋亡率降低,学习记忆及神经再生通路蛋白表达升高（P<0.05）。结论：BYT可调节神经递质释放,促进记忆及神经再生通路激活,改善SD小鼠睡眠质量及学习记忆能力。