鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基对人肝癌细胞凋亡及端粒酶影响

目的：观察鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基(GP1)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡及端粒酶活性的影响。方法：将GP1与体外培养的人肝癌细胞共同孵育4天后光镜及电镜观察细胞形态改变，细胞计数测定细胞生长及增殖情况，DNA凝胶电泳分析DNA改变，流式细胞仪分析细胞周期分布，应用TRAP—ELISA法测定端粒酶活性。结果：GP1能明显抑制SMMC-7721细胞生长与增殖，2．5ug／ml GP1诱导细胞出现凋亡特征性形态改变，DNA电泳呈现“梯形带”，细胞周期被阻滞在G2／M期，并使端粒酶活性下降。结论：GP1可抑制人肝癌细胞的生长，其抗癌机制与诱导细胞凋亡和降低端粒酶活性有关。     

健脾化瘀方对人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响

[目的]探讨健脾化瘀方对人肝癌细胞系SMMC-7721的抑制率及药物浓度和作用时间对细胞抑制率的影响,以及IC_(50)药物浓度下对SMMC-7721凋亡的影响。[方法]采用MTT法,观察不同浓度的健脾化瘀方对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖的影响及与药物作用时间之间的关系。用AnnexinV/PI双染色法,用流式细胞仪检测健脾化瘀方对肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响。[结果]健脾化瘀方浓度在5mg/mL时,对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用,呈剂量依赖和时间依赖效应关系。健脾化瘀方对人肝癌细胞SMMC-7721作用24h后,肝癌细胞凋亡率升高,并有一定的浓度依赖性。[结论]健脾化瘀方有抑制SMMC-7721细胞的增殖,能诱导人肝癌细胞株SMMC-7721的凋亡。     

健脾化瘀方抑制肝癌SMMC-7721细胞ERK和c-fos表达的研究

目的：从基因和蛋白水平探讨健脾化瘀方抑制肝癌SMMC-7721细胞ERK和c—fos表达的影响。方法：分别采用RT—PCR和Westemblot方法检测不同浓度健脾化瘀方处理SMMC-7721细胞前后ERK、C—fosmRNA和蛋白水平的改变。结果：健脾化瘀方能抑制肝癌SMMC-7721细胞ERK、c—fosmRNA和蛋白表达。结论：健脾化瘀方的作用机制之一可能是抑制肝癌SMMC-7721细胞ERK和c—fos的基因表达。     

白头翁皂苷D抗肝癌作用的药效学研究

目的研究白头翁皂苷D(毛茛科植物白头翁Pulsatilla chinensis(Bge.)Regel的干燥根)体内抗小鼠H22肝癌细和体外的抗人肝癌SMMC-7721作用。方法在体外实验中,采用MTT法考察白头翁皂苷D对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;在体内实验中,采用小鼠H22实体瘤进行体内抑瘤实验,测定肿瘤生长抑制率,利用光镜(HE染色)、电镜等方法进行形态学观察。结果白头翁皂苷D处理人肝癌SMMC-7721细胞24、48、72h后,给药组均出现了不同程度的细胞增殖抑制。白头翁皂苷D(4.5、6.0 mg/kg)对小鼠H22肝癌细胞实体瘤的生长有明显的抑制作用,抑瘤率分别为38.67%和41.59%(P<0.01,与模型组比较)。组织学观察显示,肿瘤细胞大量变性坏死,电镜下可见凋亡细胞和凋亡小体。结论白头翁皂苷D具有一定的体内、外抗肿瘤作用。     

珍珠菜提取物对肝癌抑制作用的研究

目的 观察珍珠菜提取物(ZE4)对肝癌体内外的抑制作用.方法 体外采用MTT法、3H-TdR掺人法、集落形成实验观察ZE4对肝癌SMMC-7721细胞的杀伤作用;采用划痕实验法与内皮细胞黏附实验观察ZE4对SMMC-7721细胞迁移的抑制作用,体内以抑瘤率和脏器指数为指标观察ZE4对小鼠肝癌H22的作用.结果 ZE4可抑制SMMC-7721细胞的增殖和转移;体内实验显示ZE4可显著抑制小鼠肝癌H22的增殖,抑瘤率均在30%以上,其中中剂量(200 mg/kg)组的效果最好,可达到57.8%.结论 ZE4对肝癌有很好的抑制作用.     

健脾柔肝方含药血清诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及对VEGF表达的影响

目的:探讨健脾柔肝方含药血清诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:以健脾柔肝方低、中、高剂量含药血清培养液作用体外培养SMMC-7721细胞,并设立空白血清及5-FU组。MTT法检测细胞增殖程度,TUNEL法检测细胞凋亡指数,荧光定量PCR检测VEGF-mRNA在细胞中的表达。结果:健脾柔肝方含药血清各组均有一定的抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用,均能不同程度的诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,抑制VEGF-mRNA的表达;而以化疗药5-FU组作用最强,健脾柔肝汤中、高剂量含药血清组次之,且作用相当。结论:健脾柔肝方含药血清可有效诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,其作用机制可能是通过抑制VEGF-mRNA的表达而实现的。     

健脾化瘀中药逆转人肝癌细胞恶性表型作用研究

目的:研究健脾化瘀中药960复方(960)对人肝癌细胞恶性表型的逆转作用及机理.方法:用960大鼠灌胃后采集的含药血清体外处理人肝癌SMMC7721细胞,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测AFP和白蛋白(Alb),放免法检测环核苷酸水平,PCR-ELISA法检测端粒酶活性.结果:中药血清处理组,细胞活力显著减弱,Alb生成明显增多,以作用6天组作用最为明显,AFP显著降低,端粒酶活性显著低于对照组,与DDP组相近.细胞内cAMP明显高于对照组,DDP组无明显变化.结论:中药960复方具有逆转人肝癌SMMC7721细胞恶性表型作用,作用机理与升高细胞内环核苷酸水平和降低端粒酶活性有关.     

健脾化瘀方抑制肝癌SMMC一7721细胞ERK和c-fos表达的研究

目的:从基因和蛋白水平探讨健脾化瘀方抑制肝癌SMMC-7721细胞ERK和c-fos表达的影响.方法:分别采用RT-PCR和Western blot方法检测不同浓度健脾化瘀方处理SMMC-7721细胞前后ERK、c-fos mRNA和蛋白水平的改变.结果:健脾化瘀方能抑制肝癌SMMC-7721细胞ERK、c-fos mRNA和蛋白表达.结论:健脾化瘀方的作用机制之一可能是抑制肝癌SMMC-7721细胞ERK和c-fos的基因表达.     

牛黄−麝香联合应用通过PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制肝癌细胞增殖并诱导其凋亡

目的 探讨牛黄?麝香联合使用对人肝癌细胞SMMC-7721及裸鼠肝癌皮下移植瘤的影响,探讨其抗肝癌机制.方法 将牛黄?麝香联合应用于体内、体外两种肝癌模型.体外培养人肝癌SMMC-7721细胞系,实验分为牛黄?麝香处理组和对照组,采用不同浓度(生药量0.625、1.25、2.5、5 mg/mL)牛黄?麝香萃取液进行干预...     

荭草花提取物体外抗肿瘤活性研究

目的：筛选荭草花中的抗肿瘤活性部位.方法：采用MTT法观察荭草花的各提取部位对人宫颈癌HeLa细胞、人肝癌SMMC-7721细胞株生长的影响.结果：荭草花的乙酸乙酯部位及正丁醇部位对人宫颈癌HeLa细胞的抑制率约分别为60%及40%;对人肝癌SMMC-7721细胞均约为60%,并具有明显的量效关系.结论：荭草花对人宫颈癌HeLa细胞及人肝癌SMMC-7721细胞的增值具有一定的抑制作用,是一类具有开发前景的抗肿瘤中药.     

党参抗肿瘤药理作用研究

目的:探讨党参多糖对肝癌细胞的活性。方法:MTT法探索党参多糖对肝癌细胞的抑制作用,利用荧光显微镜检测党参多糖对肝癌细胞的凋亡作用、瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态学、病理切片及急性毒性确定党参多糖毒性。结果:党参多糖对肝癌细胞SMMC-7721细胞具有抑制作用,细胞核固缩,有凋亡小体的出现,但是党参多糖对昆明种小鼠的脏器没有明显的毒性。结论:党参多糖具有抑制肝癌细胞SMMC-7721的作用。     

埃克特注射液体内外抗肝癌作用研究

目的:观察埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞及小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用。方法:用MTT法、细胞生长曲线实验研究不同浓度的埃克特注射液作用48h对SMMC-7721细胞的生长抑制作用,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,以了解该药物对肝癌细胞的体外增殖作用;同时建立小鼠H22肝癌移植性实体瘤模型研究埃克特注射液对肝癌的体内抑制作用。结果:埃克特注射液对SMMC-7721具有抑制作用,呈明显的量效关系,IC50为2.325mg/L;生长曲线提示埃克特注射液对SMMC-7721细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;Hoechst 33258染色后,给药组出现明显的细胞凋亡形态学变化;腹腔注射0.5、1、2mg/kg埃克特注射液对小鼠移植性肿瘤H22的抑制率分别为34.37%、42.36%、57.99%,呈剂量依赖性。结论:埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞具有明显体外抗增殖作用,对小鼠移植性肿瘤H22有一定的抑制作用。     

柔肝解毒方法含药血清体外抗肝癌的实验研究

目的：通过体外抑制肿瘤细胞增殖试验,观察柔肝解毒方体外防治肝癌的药效作用。方法：制备柔肝解毒方含药血清,用MTT法观察含药血清对人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721细胞增殖的影响。结果：柔肝解毒方含药血清能显著抑制人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721的增殖,对HepG2的最高抑制率为69.73%,对SMMC-7721的最高抑制率为62.64%,与空白对照组及PBS组相比差异显著（P〈0.01）;最高剂量组与含5-氟尿嘧啶血清抑制肝癌细胞的效果相比,无显著性差别（P〉0.05）。中药组的抑制率呈一定的量效关系,随着给药剂量的增加其抑制率升高。结论：柔肝解毒方具有良好的体外抗肝癌的药效作用。     

红缘拟层孔菌子实体中抗肿瘤活性成分研究

目的对红缘拟层孔菌Fomitopsis pinicola子实体的石油醚提取物、氯仿提取物、水层提取物和氯仿提取物中获得的化合物A(3-乙酰氧基-8,24-羊毛甾二烯-21-酸)进行了体内外抗肿瘤活性和细胞凋亡实验研究。方法通过测定脾脏指数、胸腺指数以及血清中白介素-2(IL-2)的含量,检测了各提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果氯仿提取物和化合物A对H22荷瘤小鼠具有较高的抑瘤率,当氯仿提取物剂量为200 mg.kg-1.d-1时,抑瘤率为52.97%,胸腺指数明显高于对照组和环磷酰胺(CTX)组(P<0.05),而接近于正常组(P>0.05);脾脏指数接近于对照组和CTX组而明显高于正常组(P<0.01);IL-2的含量明显升高;化合物A具有较好的抗肿瘤作用,各剂量组之间存在良好的剂量关系;且同对照组相比存在显著性差异(P<0.01);在剂量为10mg.kg-1.d-1时,抑瘤率最高可达到52.31%。体外实验研究结果表明化合物A对人肝癌细胞SMMC-7721和人乳腺癌细胞MCF-7均具有良好的抑制作用,其抑制率最大分别为77.63%和90.29%,IC50分别为213.80μg/ml和123.03μg/ml。化合物A作用后的细胞凋亡率仅为23.2%,接近阴性对照组的20.9%,促进细胞凋亡效果不明显。结论结合体内外实验可推断化合物A(3-乙酰氧基-8,24-羊毛甾二烯-21-酸)为红缘拟层孔菌抗肿瘤活性成分之一,提高机体免疫活性可能是其抗肿瘤作用的机理之一。     

泽漆根体外抗肿瘤实验研究

本文研究了泽漆根水提取液(EWE)的体外抗肿瘤作用。通过活细胞计数法、MTT法、集落形成试验观察其对肿瘤细胞的生长抑制作用。活细胞计数结果表明EWE对7721、Hela、MKN-45细胞株72小时IC_(50)分别为1.26、1.98、1.72mg/ml;EWE对三种细胞降解MTTIC_(50)值分别为 1.43、1.67、0.97mg/ml;EWE4mg/ml对三种细胞集落抑制率分别为59.8％、66.4％、70.5％。说明EWE有直接细胞毒作用,并与时间、剂量呈正相关。     

槲芪散及其君药槲寄生提取物对人肝癌细胞生长和端粒酶活性的影响

目的:研究槲芪散及其君药槲寄生对人肝癌细胞生长和端粒酶活性的影响。方法:用不同浓度的槲芪散及其君药槲寄生提取物作用于人肝癌细胞(SMMC-7721)后,用四甲基偶氮唑比色法(MTT)检测SMMC-7721细胞增殖。用实时荧光定量PCR法检测SMMC-7721的端粒酶活性。结果:(1)MTT结果显示槲芪散、槲寄生多糖和总碱能抑制SMMC-7721细胞,随药物作用时间的延长作用增强。(2)槲芪散、槲寄生多糖和槲寄生总碱能明显降低SMMC-7721端粒酶的活性。结论:槲芪散及槲寄生多糖和总碱均能抑制SMMC-7721增殖,降低SMMC-7721端粒酶的活性。     

半乳糖基壳聚糖/5-氟尿嘧啶纳米粒抑制小鼠肝癌的实验研究

目的制备半乳糖基壳聚糖(GC)/5-氟尿嘧啶(5-Fu)纳米粒,观察其缓释特性及对小鼠肝癌的抑制作用。方法通过GC和5-Fu合成纳米粒,通过体外释放实验观察其缓释作用和体外实验观察GC/5-Fu纳米粒对肿瘤细胞抑制率和半数抑制率浓度值(IC50)。结果 GC/5-Fu纳米粒成功合成,呈规则的球形,表面光滑,大小均匀,纳米粒间无粘连。0～12 h出现突然快速释放,其累计释放率为32.4%;1～8 d出现平稳的缓慢释放,其累计释放率为93.50%;8～10 d呈平台期缓慢释放,10 d时累计释放率达95.70%。5-Fu和GC/5-Fu纳米粒对人结肠癌细胞株(SW480)和人肝癌细胞株(SMMC-7721)杀伤具有药物浓度越大,杀伤作用也就越强的量效依赖关系。在24 h、48 h和72 h,肿瘤抑制率从GC/5-Fu-SMMC-7721,5-Fu-SW480,5-Fu-SMMC-7721和GC/5-Fu-SW480依次降低。5-Fu的时间依赖性杀伤效应主要在1～6 d,在此期间的各个时相点,其IC50从GC/5-Fu-SMMC-7721,5-Fu-SW480,5-Fu-SMMC-7721和GC/5-Fu-SW480依次升高,但7 d后,5-Fu-SW480和5-Fu-SMMC-7721的时间依赖性杀伤效应进入一个平台期;而GC/5-Fu-SMMC-7721和GC/5-Fu-SW480的时间依赖性杀伤效应则从1～10 d呈持续增加趋势,并且6 d后,GC/5-Fu-SW480的IC50值小于5-Fu-SW480和5-Fu-SMMC-7721。结论 GC/5-Fu纳米粒具有缓释作用,体外对肿瘤细胞的杀伤作用具有量效依赖性和时间依赖性,对小鼠原位肝癌具有明显抑制作用,较5-Fu明显增强。     

青蒿琥酯抗肝癌作用的实验研究

目的 :研究青蒿琥酯的抗肝癌作用。方法 :运用小鼠肝癌H₂₂ 癌模型、MTT法和集落形成法 ,观察青蒿琥酯对荷瘤鼠和人肝癌SMMC-772 1细胞株的作用。结果 :口服青蒿琥酯 30 0mg·kg^-1·d^-1,肿瘤受到明显抑制 ,抑瘤率在 3次实验中分别为 49.1% ,48.7% ,46.6% ;小鼠生存时间明显延长。青蒿琥酯与 5-氟尿嘧啶有协同抗肿瘤作用。青蒿琥酯体外对人肝癌细胞有明显细胞毒作用 ,其IC₅₀为 2.07μg·ml^-1,同时抑制人肝癌SMMC-7721克隆原细胞形成集落 ,其IC₅₀为2.48μg·ml^-1。结论 :口服青蒿琥酯有抗肝肿瘤作用。     

正交设计优选丹参-人参组分抗肝癌配伍研究

目的:优选丹参-人参活性组分抗肝癌优化配伍并对其作用机制作初步研究。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721为研究对象,人正常肝细胞L-O2为对照,采用CCK-8法以对肝癌细胞增殖抑制和正常肝细胞保护作用为筛选指标,正交设计优选丹参-人参活性组分抗肝癌有效组合,确定优化配伍;应用实时细胞分析技术(RTCA DP)检测丹参-人参组分优化配伍对肝癌细胞SMMC-7721和正常肝细胞L-O2增殖的影响,并进行时效关系考察;采用Annexin V/PI双染法经高内涵细胞成像系统(HCS)检测丹参-人参组分优化配伍对肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响。结果:丹参-人参组分配伍抗肝癌SMMC-7721细胞的优化组合为丹参总酚酸、人参总皂苷和人参多糖,其配伍剂量分别为10,10,5 mg·L-1;优选的丹参-人参组分配伍能显著抑制肝癌细胞的增殖,呈现时间依赖性,而对正常肝细胞的增殖抑制作用不明显;丹参-人参组分优化配伍能诱导肝癌细胞凋亡,对正常肝细胞的凋亡无显著影响。结论:丹参-人参组分优化配伍具有潜在的特异选择性抗肝癌作用,其机制与抑制肝癌细胞增殖和诱导细胞凋亡相关。     

吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞端粒酶活性的影响

目的:探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞凋亡及端粒酶催化亚基(hTERT)表达的影响,为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法:体外培养人结肠癌HT29细胞,加入不同浓度的吴茱萸碱及盐酸小檗碱进行培养,采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,TRAP法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测hTERT的表达。结果:吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后,增殖明显受到抑制,呈剂量和时间依赖性;能够降低HT29端粒酶活性,但二者无协同作用;并且端粒酶hTERT表达降低,具有剂量依赖关系。结论:吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用,该抑制作用可能通过下调端粒酶hTERT基因表达,降低端粒酶的活性,为临床治疗大肠癌提供实验依据。