抗纤Ⅰ号对实验性肝纤维化大鼠组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及转移生长因子β1 mRNA表达的影响

目的:从分子水平研究抗纤Ⅰ号方剂治疗肝纤维化作用机理.方法:利用CCl4制造大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组、肝纤维化模型组及中药治疗组,中药灌胃治疗42d,检测病理学指标、肝纤维化血清学指标、肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化,以及肝组织TGF β1mRNA表达量的变化.结果:肝组织病理学以及血清学指标同对照组统计学尚有显著差异,同时实验也表明治疗组能够明显减少肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原以及TGF β1mRNA的表达量.结论:抗纤Ⅰ号具有逆转肝纤维化的作用,其作用机理可能是通过下调TGF β1mRNA,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成而减轻肝纤维化.     

抗纤Ⅰ号方药对实验性肝纤维化大鼠组织Ⅰ、Ⅲ型胶原基质金属蛋白酶及其抑制因子mRNA表达的影响

目的:从分子水平研究抗纤Ⅰ号方剂治疗肝纤维化的作用机理。方法:利用CCl4、高脂饮食和乙醇等综合因素制造大鼠肝纤维化模型。模型成功后将大鼠随机分为肝纤维化模型组、中药和西药治疗组。分别治疗42 d后,检测各组大鼠肝组织病理学变化、血清肝功能和肝纤维化指标、免疫组化检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化、半定量PCR检测肝组织MMP1、TIMP-1 mRNA表达量的变化。结果:中药组肝组织病理学变化明显优于模型组和西药治疗组;血清肝功能指标中药治疗组ALT和AST(108±24,142±23)显著低于模型组(242±34,248±20)和西药对照组(123±39,216±25,P<0.05);肝纤维化指标中药治疗组HA和LN(270±79,62±10)显著低于模型组(769±67,109±26)和西药对照组(346±62,79±13,P<0.05);中药治疗后能够明显减少肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原以及TIMP-1 mRNA的表达量,但MMP1的表达量无显著差异。结论:抗纤Ⅰ号通过下调TIMP-1mRNA减弱对MMP1的抑制作用,使Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解增强而使肝纤维化逆转。     

抗纤Ⅰ号和硒对肝纤维化大鼠免疫功能的调节作用

目的:研究抗纤Ⅰ号、抗纤Ⅰ号加硒对大鼠肝纤维化的治疗作用和免疫调节作用,并从分子水平对其机制进行探讨.方法:利用CCl4、胆固醇等复合因素制造大鼠肝纤维化模型,设立空白对照组、肝纤维化模型组、西药组、抗纤Ⅰ号及抗纤Ⅰ号加硒组,治疗组灌胃治疗42d,检测病理学指标、血清酶学、肝纤维化指标、肝组织羟脯氨酸含量、脾指数、胸腺指数、T淋巴细胞亚群、T淋巴细胞增殖、血清循环免疫复合物、巨噬细胞吞噬功能、肝组织TGF-β1mRNA表达量的变化.结果:与秋水仙碱组相比,中药治疗组大鼠肝脏损伤明显减轻,血清ALT、AST、HA、LN和Hyp均显著降低,提示抗纤Ⅰ号和硒具有很好的抗肝纤维化作用.同时中药治疗组大鼠脾指数降低,胸腺指数升高,胸腺组织CD 4、CD 4/CD 4明显高于秋水仙碱组,T淋巴细胞增殖抑制得到大大改善.血清循环免疫复合物明显减少,巨噬细胞吞噬功能有所上升.RT-PCR实验表明,抗纤工号能够明显抑制TGF-β1mRNA的表达量.结论:抗纤Ⅰ号对大鼠肝纤维化具有明确的治疗作用,且有提高机体免疫力的作用,同时加硒效果更好.其作用机制可能是通过下调TGF-β1mRNA,从而抑制胶原合成实现的.     

化瘀解毒汤抗肾间质纤维化的实验研究

目的探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制.方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分(I、Ⅲ型胶原)、TGFβ1mRNA及MMP1mRNA表达,并做相关肾组织学检查.结果模型组和各治疗组大鼠肾组织I、Ⅲ型胶原面积比及TGFβ1mRNA的平均吸光度值显著增加(P＜0.05),MMP1mRNA平均吸光度值显著降低(P＜0.05);各治疗组大鼠I、Ⅲ型胶原面积比及TGFβ1mRNA平均吸光度值较模型组减少(P＜0.05),MM-P1mRNA平均吸光度值较模型组增加(P＜0.05);治疗组中以中药预防组鼠I、Ⅲ型胶原面积比及TG-Fβ1mRNA平均吸光度值最低、MMP1mRNA平均吸光度值最高(P＜0.05).经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善.结论化瘀解毒汤通过下调TG即1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达,以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维化.     

软肝冲剂抗免疫损伤性肝纤维化的实验研究(2)

目的:探讨软肝冲剂治疗肝纤维化的作用机理。方法:制备免疫损伤性肝纤维化模型,以软肝冲剂作治疗组,促肝细胞生长素及秋水仙碱作对照组,观测肝组织Ⅲ型胶原(Collagen)、转化生长因子β1(TGFβ1)的免疫组化以及肝细胞生长因子(HGF)mRNA的原位杂交表达等。结果:肝脏组织TGFβ1、CollagenⅢ的免疫组化显示软肝冲剂组阳性表达显著减少;原位杂交及RT-PCR电泳图谱示软肝冲剂能明显抑制HGFmRNA的表达。结论:软肝冲剂具有明显的抗肝纤维化作用。     

抗纤软肝冲剂药物血清对激活肝星状细胞表达Ⅰ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的影响

目的 :探讨抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的作用机理。方法 :分离正常大鼠肝星状细胞 ,并传代培养。用抗纤软肝冲剂给正常大鼠灌胃 ,制备药物血清 ,温育培养细胞 72h ,提取细胞总RNA ,RT PCR法分析Ⅰ型前胶原、TGF β1mRNA的表达。结果 :抗纤软肝冲剂药物血清能显著抑制肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF β1mRNA的表达。结论 :抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的机理之一是调控肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF β1mRNA的表达     

抗纤Ⅱ号抗大鼠免疫性肝纤维化的作用研究

目的:研究中药抗纤Ⅱ号对大鼠免疫性肝纤维化的治疗作用并分析其作用机制.方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱组、抗纤Ⅱ号组,猪血清腹腔注射制作免疫性肝纤维化模型.水煮醇提制备抗纤Ⅱ号并用于大鼠,通过RT-PCR、免疫组化以及病理组织学等观察药物的治疗效果.结果:抗纤Ⅱ号组的肝纤维化分级明显改善.免疫组化结果显示,Ⅰ、Ⅲ型胶原和TIMP-1的表达在抗纤Ⅱ号组明显低于模型对照组.TIMP-1 mRNA在抗纤Ⅱ号组肝组织中的表达也明显低于模型对照组,治疗效果与秋水仙碱无差异.结论:抗纤Ⅱ号对大鼠免疫性肝纤维化有治疗作用,并可能通过抑制TIMP-1活性表达、促进肝细胞外基质降解来发挥作用.     

三七总皂甙对肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF—β1的影响

目的：观察三七总皂甙对肝纤维化大鼠胶原合成及TGF－β1表达的影响。方法：用四氯化碳复合因素致大鼠肝纤维化模型,同时给与三七总皂甙治疗,免疫组化观察Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF－β1的合成表达,纤维化程度分级。结果：三七总皂甙能抑制肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF－β1的合成表达,减轻肝纤维化程度。结论：三七总皂甙具有抗肝纤维化作用,其机理尚待进一步研究。     

抗纤软肝冲剂药物血清对激活肝星状细胞表达Ⅰ型前胶原及TGF—β1mRNA的影响

目的：探讨抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的作用机理。方法：分离正常大鼠肝星状细胞,并传代培养。用抗纤软肝冲剂给正常大鼠灌胃,制备药物血清,温育培养细胞72h,提取细胞总RNA,RT-PCR法分析Ⅰ型前胶原、TGF-β1mRNA的表达。结果：抗纤软肝冲剂药物血清能显著抑制肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF-β1mRNA的表达。结论：抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的机理之一是调控肝星状细胞的Ⅰ型前胶原及TGF-βmRNA的表达。     

补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1表达的影响

目的研究补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织TGF—β1表达的影响，探讨其防治肝纤维化的作用机制。方法建立wistar大鼠CCL4损伤性肝纤维化模型，通过免疫组化及图像分析等方法，观察补肾化瘀方对肝脏病理组织学、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及TGF—β1表达的影响。结果经补肾化瘀方治疗后，用药组肝组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原及TGF—β1表达显著降低（p〈0.05），与模型组比较有显著性差异。结论补肾化瘀方可能通过抑制肝组织TGF—β1的表达，使HSC的增殖活化受到抑制，胶原合成减少，而起到抗纤维化的作用。     

抗纤I号抗肝纤维化的临床研究

为观察复方中药抗纤I号治疗肝硬化的临床疗效。选择120例乙肝后肝硬化活动期患者，随机分为3组，各40例，中西医结合组（A组）予中药抗纤I号联合甘利治疗；中药组（B组）单纯予中药抗纤I号治疗；对照组（C组）予甘利欣加口服安慰剂治疗。疗程均为3个月。观察治疗前后肝功能、血清肝纤维化指标、HBV－DNA以及B超测定门静脉、脾静脉内径和脾脏厚径。结果：3组患者治疗后在症状、体征和肝功能方面均有明显改善。A组和B组在降低血清肝纤维化指标，缩小门静脉、脾静脉内径和脾脏厚径方面，较C组差异有显著性意义（P＜0．05）。且A组疗效明显优于B组和C组。提示抗纤I号可能具有控制肝细胞炎症，降低门脉压力，以及抗肝纤维化的作用。     

抗纤保肝汤治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的：研究抗纤保肝汤的临床疗效及作用机理。方法：慢性乙型肝炎患者81例，随机分为治疗组（54例）和对照组（27例），分别给予抗纤保肝汤及一般保肝药物治疗6个月，观察两组患者治疗前后血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（C－Ⅳ）、层粘蛋白（LN）、转化生长因子β1（TGFβ1）、肿瘤坏死因子α（TNF－α）水平，肝功能变化及肝脏病理组织改变。结果：治疗组临床各症状缓解率明显优于对照组（P＜0．05），治疗后治疗组患者血清HA、PCⅢ、C－Ⅳ、LN、TGFβ1、TNF－α显著下降，肝功能明显改善，与对照组比较差异均有显著性（P＜0．01或P＜0．01），肝脏活组织病理检查证实肝纤维组织减少。结论：抗纤保肝汤具有显著抗肝纤维化作用。     

软肝冲剂抗免疫损伤性肝纤维化的实验研究（2）

目的：探讨软肝冲剂治疗肝纤维化的作用机理。方法：制备免疫损伤性肝纤维化模型。以软肝冲剂作治疗组，促肝细胞生长素及秋水仙碱作对照组，观测肝组织Ⅲ型胶原（Collagen）、转化生长因子β1（TCFβ1）的免疫组化以及肝细胞生长因子（HGF）mRNA的原位杂交表达等。结果：肝脏组织TCFβ1、CollagenⅢ的免疫组化显示软肝冲剂组阳性表达显著减少；原位杂交及RT-PCR电泳图谱示软肝冲剂能明显抑制HGFmRNA的表达。结论：软肝冲剂具有明显的抗肝纤维化作用。     

剔毒护肝方对肝星状细胞表达Ⅰ型胶原及TGFβ1mRNA的影响

目的：探讨剔毒护肝方抗肝纤维化的作用机理。方法：分离正常大鼠肝星状细胞，并传代培养，用剔毒护肝方给正常大鼠灌胃，制备药物血清，温育培养细胞72h，测定培养上清中Ⅰ型胶原含量及TGF-β1活性，提取细胞总RNA，RT-PCR法分析Ⅰ型胶原，TGF-β1mRNA的表达。结果：剔毒护肝方药物血清能显著降低肝星状细胞培养上清中的Ⅰ型胶原含量及TGFβ1活性，并能抑制Ⅰ型胶原及TGFβ1mRNA的表达。结论：剔毒护肝方抗肝纤维化的机理之一是抑制肝星状细胞自分泌TGFβ1，并通过TGFβ1生成的减少，下调细胞Ⅰ型胶原的基因转录。     

熏洗方对大鼠骨折后期僵硬关节滑膜Ⅲ型胶原mRNA及TGFβ1表达的影响

为探讨熏洗方治疗大鼠骨折后期关节僵硬的作用机理.以Wistar大鼠制作骨折后期关节僵硬模型,用dot blot杂交法和ELISA法分别测定踝关节滑膜Ⅲ型胶原mRNA表达水平及TGF-β1含量.结果显示模型组Ⅲ型胶原mRNA及TGFβ1水平明显升高,与正常对照组比较差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05);功能组和中药组Ⅲ型胶原mRNA、TGFβ1水平明显降低,与模型组比较差异有显著性(P＜0.01);中药组Ⅲ型胶原mRNA、TGFβ1水平显著低于功能组(P＜0.05).表明大鼠骨折后期关节僵硬滑膜Ⅲ型胶原mRNA及TGFβ1水平异常改变;降低Ⅲ型胶原mRNA及TGFβ1水平可能是熏洗方治疗骨折后期关节僵硬的重要机制之一.     

虫草多糖抗免疫损伤性大鼠肝纤维化的作用及其机现研究

采用牛血清白蛋白免疫损伤大鼠肝纤维化模型,以虫草菌丝和秋水仙碱为对照,通过肝组织病理学与Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGFβ1、TGFβR1、Dm阳性细胞免疫组化观察,肝Hyp含量与肝胶原酶活性检测,观察虫草多糖抗肝纤维化的作用与机制.结果显示,虫草多糖与虫草菌丝及秋水仙碱均能减轻肝纤维化程度,降低Hyp含量,减少胶原及TGFβ1生成与分泌,降低TGFβR1表达,减少Dm阳性细胞,其中虫草多糖对Ⅳ型胶原与TGFβR1表达的影响更为明显.提示虫草多糖具有良好的抗肝纤维化作用,可能是虫草菌丝抗肝纤维化的主要有效成分之一,其作用机制可能在于抑制肝星状细胞的活化及其TGFβ1的表达.     

保肝抗纤胶囊防治大鼠肝纤维化的实验研究

目的:研究保肝抗纤胶囊治疗肝纤维化的作用。方法:建立 CCl_4高脂低蛋白复合因素所致的大鼠肝纤维化模型,随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、肝脾康组、保肝抗纤高剂量组、保肝抗纤低剂量组,观察用药后血清学及病理变化。结果:保肝抗纤胶囊能提高肝纤维化大鼠生存率,降低血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及血清透明质酸(HA)值,并能改善肝组织病理学变化。结论:保肝抗纤胶囊有保护肝细胞、减轻肝细胞变性坏死、阻止纤维组织增生、促进纤维组织降解的作用。     

鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠TGF-β1 mRNA表达的影响

目的：观察中药复方鳖甲煎丸对免疫性纤维化模型大鼠肝组织细胞因子TGF—β1 mRNA表达的影响，分析鳖甲煎丸的治疗作用，探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机理；并与西药秋水仙碱作对照，为临床防治肝纤维化用药提供科学依据。方法：雄性Wistar大鼠90只随机分为6组：正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎丸预防组、鳖甲煎丸治疗组，选用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型。各组于10周后取10只大鼠断头处死，取肝组织，用原位杂交法检测肝组织内TGF—β1 mRNA。结果：鳖甲煎丸能够明显减少TGF—β1 mRNA的表达，作用接近或优于秋水仙碱，显示它具有明显的抗纤维化作用。鳖甲煎丸和秋水仙碱的预防效果同治疗效果相比差异均不显著。     

姜黄素抗肝纤维化作用及机理研究

目的:探讨姜黄素抗肝纤维化作用及可能的作用机制。方法:以二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化模型,然后给予姜黄素治疗,并以水飞蓟素做对照,检测肝纤维化血清学指标,肝组织羟脯氨酸(Hyp)水平,光镜观察肝组织的病理变化,免疫组化检测血小板衍生长因子-BB(PDGF-BB)、血小板衍生长因子受体β(PDGFRβ)及细胞外信号调节激酶(ERK1)在肝组织的表达,RT-PCR方法检测PDGFRβ及ERK1 mRNA的表达。结果:姜黄素可明显降低肝纤维化大鼠血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量,降低肝组织Hyp含量,可明显改善肝纤维化大鼠病理损害,能抑制肝组织PDGF-BB、PDGFRβ及ERK1的表达,并下调肝组织PDGFRβ及ERK1mRNA的表达。结论:姜黄素具有良好的抗肝纤维化作用,其机理与抑制PDGF-BB及受体β、ERK1表达有关。     

保肝宁抗酒精性肝纤维化大鼠的实验研究

目的研究中药复方保肝宁对酒精性肝纤维化大鼠的治疗作用,并探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法建立酒精致肝纤维化大鼠模型,观察保肝宁对模型动物转化生长因子β1(TGFβ1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、透明质酸梅(HA)、层粘连蛋白(LN)、三型前胶原(PCⅢ)、四型胶原(CIV)的影响。结果保肝宁能显著降低肝纤维化大鼠血清中的TGFβ1、TIMP-1、HA、LN、PCⅢ、CIV的表达水平,减轻肝纤维化大鼠的纤维增生程度。结论保肝宁有拮抗酒精致大鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制肝纤维化形成中两个重要因子TGFβ1和TIMP-1的异常表达有关。