不育相关泛素特异性蛋白酶USP26的分子克隆及活性分析

目的 对克隆泛素特异性蛋白酶26(ubiquitin-specific protease 26,usp26)基因进行表达和活性测定.方法 采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),从小鼠全血中扩增获得usp26基因并测定序列.将基因片段与pGEX-6p-1拼接,应用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)使蛋白表达并利用Ub-Met-β-gal鉴定活性.用多重比对方法分析人类、小鼠及褐家鼠usp26基因编码氨基酸序列的差异.结果 本实验克隆出usp26基因.构建出pGEX-usp26质粒,该质粒表达出GST-USP26结合蛋白并测得其活性.三个种属含有相同的赖氨酸结构域(Cys box)与组氨酸结构域(His box)特征部位氨基酸.结论 usp26基因克隆并表达成功,完成活性测定,为进一步探索usp26在男性不育机制方面的作用提供了一种活性研究方法.     

石家庄市灌溉用污水对大鼠肝功能的影响

目的研究石家庄市灌溉用污水对大鼠肝功能的影响,以期为污水灌溉的安全性评价提供参考。方法采用气相色谱-质谱联用仪和电感耦合等离子体质谱仪测定石家庄市农田污灌水样中的重金属含量和有机污染物成分。将80只SD大鼠随机分成4组,每组20只,雌雄各半,其中3个染毒组分别为25%,50%及100%污水,采用自由饮水方式进行染毒,连续28 d;并以蒸馏水为阴性对照组。分别于染毒前及染毒第7、28天采集大鼠血样,通过全自动生化分析仪测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力。结果水样中铬和铅含量分别超过国标0.78、0.43倍,共检出30种有机化学物,主要为多环芳烃类化合物、邻苯二甲酸酯类、杂环类化合物及苯胺类化合物等。与对照组相比,饮用灌溉用污水28 d时,50%和100%剂量组雄、雌性大鼠血清ALT活力升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论石家庄灌溉用污水可引起大鼠肝损伤。     

猪囊尾蚴一种蛋白抗原的cDNA分子克隆

目的从猪囊尾蚴cDNA文库中克隆某种编码蛋白抗原的基因.方法用脑囊尾蚴病人血清筛选猪囊尾蚴cDNA文库,获得阳性克隆后,经PCR技术扩增噬菌体载体中插入的cDNA片段,并将其亚克隆入pUC18质粒载体中,用双脱氧核苷酸末端终止法测定插入片段的核苷酸序列.测序后与GenBank中的核苷酸序列进行同源性分析.结果经3次筛选,从cDNA文库中克隆出一个阳性克隆,测序后其长度为546 bp,含有一个开放读码框,编码158个氨基酸.同源序列分析结果表明此基因片段与编码猪囊尾蚴的一种免疫原性蛋白基因(NC-9)同源性高达99%.结论本研究克隆出一种编码猪囊尾蚴蛋白抗原的基因.     

高血压病基因治疗临床前研究近况

高血压病是一种世界性的常见疾病，不仅发病率高，还是脑卒中，冠心病的重要危险因素，临床上尽管有多种治疗高血压病的药物，但是由于药物作用时间短（≤24小时），特异性不高等，许多病人往往仍不能很好地控制住高血压，近年高血压病的基因治疗研究提供了具有精确特异性，效果长而又无副作用的突破性治疗方向，本文回顾了有关临床前研究中的两种基因治疗方法的近况，即：采用转移基因增加舒血管蛋白与反义技术减少缩血管蛋白的产生。     

肺癌的化学预防

本文介绍了通过化学预防方法,即给人体输入某些特殊的微量营养成分,如维生素、化学物质和微量元素或其它一些癌的抑制剂,以降低某些癌的发病率。已证明含维生素 A 或β-胡萝卜素的饮食与癌症危险度间呈负相关。通过动物实验和流行病学方法,研究视黄醇、β-胡萝卜素、维生索 E、硒、叶酸和维生素 B_(12)等物质对降低肺癌发病率的作用.     

重症监护病房住院患儿医院感染的多因素分析

目的通过对重症监护病房住院患儿医院感染发生情况进行研究,探讨其危险因素,为预防和控制医院感染提供依据。方法以2009年6-11月河北省儿童医院重症监护病房住院的872例患儿为研究对象,确定医院感染病例,并设立对照组;将资料进行多因素logistic回归分析。结果 872例患儿中,发生医院感染者101例,感染率为11.58%;医院感染多因素分析发现,基础疾病>3个、抗菌药物应用种类>2种、早产儿、机械通气等是明显的医院感染危险因素。结论合理使用抗菌药物、减少侵入性操作,将有利于预防和控制儿科医院感染;充分了解医院感染的高危因素,对易感者实施重点保护,有助于减少医院感染的发生。     

2型糖尿病的非糖尿病一级亲属的血管内皮功能受损

2型糖尿病患者及非糖尿病的2型糖尿病一级亲属血浆一氧化氮和内皮素1水平下降,且与肥胖、胰岛素抵抗呈正相关。     

一次口服剂量的强的松对人体淋巴细胞分布的影响

人应用皮质类固醇(CRS)后,发现淋巴细胞极度减少,这与CRS溶解淋巴细胞无关,而是CRS改变淋巴细胞运行的结果。最近证明T细胞群从血管内游出比其它免疫活性细胞明显。带有IgG Fc受体的T细胞对GRS不敏感;而带有IgM Fc受体的T细胞对CRS敏感。本文用单克隆抗体分析了一次口服剂量的强的松对T淋巴细胞亚群的影响。6名健康人(20—43岁)在服药前和一次口服12mg强的松后4、6、8、24、72小时取血,应用连续血浆凝胶沉淀法和聚蔗     

恩替卡韦联合软肝化坚颗粒治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的近期临床疗效研究

目的 观察恩替卡韦联合软肝化坚颗粒治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效。方法 将65例慢性乙型肝炎肝纤维化患者分为观察组和对照组,观察组患者采用恩替卡韦与软肝化坚颗粒联合治疗,对照组患者单纯给予恩替卡韦治疗,疗程均为6个月。观察两组患者治疗前后肝功能、血清肝纤维化标志物及肝脾影像学变化。结果 治疗后,两组患者肝功能和血清肝纤维化指标均较治疗前下降,其中观察组血清碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶和层粘连蛋白水平低于对照组,且差异均具有统计学意义（均有P<0.05）;两组肝纤维化改善的显效率分别为30.77%和7.69%,观察组优于对照组,且差异具有统计学意义（Z=-2.327,P<0.05）;但肝脾影像学参数包括门静脉直径,脾脏长度和脾脏厚度,在两组间差异均无统计学意义（均有P>0.05）。结论 恩替卡韦与软肝化坚颗粒联合治疗慢性乙型肝炎肝纤维化具有良好效果。