调脾护心方对急性心肌缺血模型大鼠心肌AngⅡ、ACE、AGTR1蛋白及AGT、AGTR1、ET-1 mRNA表达的影响

目的观察调脾护心方对急性心肌缺血模型大鼠心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ受体1(AGTR1)蛋白和血管紧张素原(AGT)、AGTR1、内皮缩血管肽1(ET-1)mRNA表达的影响。方法采用腹腔注射异丙肾上腺素[5 mg/(kg·d)]连续5天,制备大鼠急性心肌缺血模型。将64只急性心肌缺血模型大鼠随机分为调脾护心方低剂量组[低剂量组,生药5.85 mg/(kg·d)]、调脾护心方高剂量组[高剂量组,生药23.40 mg/(kg·d)]、曲美他嗪组[10 mg/(kg·d)]、模型组,每组16只,并设正常大鼠16只作为对照组。各用药组灌胃相应药物,对照组与模型组灌胃等体积生理盐水。连续灌胃28天后,分别采用HE染色法观察心肌组织病理变化;Western Blot检测各组大鼠心肌组织中AngⅡ、ACE、AGTR1蛋白表达;RT-PCR检测各组大鼠心肌组织中AGT、AGTR1、ET-1 mRNA表达。结果病理结果显示,调脾护心方和曲美他嗪可改善心肌缺血后细胞损伤。与对照组比较,模型组AngⅡ、ACE、AGTR1蛋白和AGT、AGTR1、 ET-1 mRNA表达增高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,各用药组AngⅡ、ACE、AGTR1蛋白和AGT、AGTR1、 ET-1 mRNA表达均降低(P0.05,P0.01)。与曲美他嗪组比较,低剂量组AngⅡ、ACE、AGTR1蛋白和AGT、AGTR1 mRNA表达增高,高剂量组ACE蛋白和AGT mRNA表达增高(P0.05,P0.01)。与低剂量组比较,高剂量组AngⅡ、ACE、AGTR1蛋白和AGT mRNA表达降低(P0.01),ET-1 mRNA表达增高(P0.01)。结论调脾护心方可通过抑制肾素—血管紧张素系统(RAS)的过度激活发挥心肌保护作用。     

芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠心脏炎性损伤的协同保护作用

目的:观察芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rats,SHR)心肌炎性损伤的协同保护作用,为高血压病心肌炎性损伤的临床防治提供实验依据。方法:以8只正常血压大鼠(normal blood pressure rat,WKY)为空白组A,72只10周龄SHR大鼠随机分为模型组B,苯那普利(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))组C,芒果苷单用(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组D,葛根素单用组E(20 mg·kg~(-1)·d~(-1)),芒果苷(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))组F,芒果苷(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组G,芒果苷(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))组H,芒果苷(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组I,芒果苷(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组J。每天10 m L·kg-1连续灌胃,灌胃给药2个月后停药,取材前禁食12 h。用显微镜观察大鼠心肌组织病理形态结构,免疫组化法检测大鼠心肌组织白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达,酶联免疫法检测SHR心肌组织IL-6,IL-10,TNF-α水平。结果:各组大鼠心脏组织均未见明显病理形态学改变;免疫组化和酶联免疫结果显示,与模型组比较,各组给药大鼠心肌组织IL-6,IL-10,TNF-α含量均有不同程度下降(P0.05,P0.01)。结论:芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠心脏组织病理形态学无显著影响;但可下调大鼠心脏组织异常升高的炎症因子IL-6,IL-10,TNF-α水平,具有一定的协同增效作用。     

牛磺酸对舒张性心力衰竭大鼠心肌细胞 钙超载的拮抗作用

目的:观察牛磺酸(Tau)对舒张性心力衰竭(DHF)大鼠心肌细胞内钙离子浓度[Ca~(2+)]_i和心肌细胞膜上ATP酶活性的影响.方法:采用腹主动脉缩窄法建立DHF模型,术后4周随机分为模型组,Tau高、中、低剂量组(400,200,100mg·kg~(-1)·d~(-1))4组(n=10),另有假手术组10只.连续给药4周,酶解法分离DHF大鼠心肌细胞,以Fluo-3AM荧光指示剂负载,应用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术检测心肌细胞内[Ca~(2+)]_i变化,[Ca~(2+)]_i用荧光强度(FI)表示;通过ATP酶试剂盒,采用酶促反应定磷比色法测定心肌细胞膜上ATP酶活性.结果:与假手术组相比,模型组大鼠心肌细胞内Ca~(2+)浓度明显上升,心肌细胞膜上ATP酶活性明显下降.与模型组比较,Tau高剂量组显著降低心肌细胞内荧光值,明显升高ATP酶活性;Tau中剂量组明显降低心肌细胞内荧光值和ATP酶活性;Tau低剂量组明显升高心肌细胞内荧光值,显著降低ATP酶活性.结论:大剂量的Tau可以明显提高DHF大鼠心肌细胞膜ATP酶活性,改善DHF大鼠心肌细胞内[Ca~(2+)]_i拮抗钙超载.     

益心舒胶囊对心力衰竭大鼠心肌细胞钙调控蛋白的影响

在确定益心舒胶囊(Yixinshu Capsules,YXS)治疗心力衰竭(heart failure,HF)的基础上,从心肌细胞钙调控蛋白的角度探究YXS促进心衰大鼠心脏功能恢复的分子机制。将SD大鼠的左冠状动脉前降支结扎4周制备心肌缺血所致的心力衰竭动物模型,将大鼠随机分为假手术组(Sham,生理盐水)、模型组(HF,生理盐水)、益心舒胶囊高剂量组(HF+YXS-H,1 600 mg·kg~(-1)·d~(-1))、益心舒胶囊低剂量组(HF+YXS-L,800 mg·kg~(-1)·d~(-1))和阳性药缬沙坦组(HF+VST,8 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续灌胃6周后,处死大鼠,取心肌组织,采用实时定量PCR(RT-PCR)及蛋白质印迹(Western blot)法测定与心肌细胞钙调控相关基因及蛋白的表达。结果显示,与模型组相比,YXS治疗后增强心肌钙调控相关基因Atp2a2,Ryr2,CACNA1C和PRKACA转录水平,并提高p-Ryr2,CACNA1C及SERCA2a蛋白水平,而降低NCX1水平。另一方面,YXS治疗明显降低RIP3及其底物CaMKⅡ蛋白磷酸化水平,并增强了PLB磷酸化表达。综上所述,YXS治疗调节心肌钙调控相关基因及蛋白的表达,同时通过抑制RIP3及其底物CaMKⅡ蛋白磷酸化的水平,并促进PLB上的Ser16残基磷酸化,增加了SERCA2a蛋白表达,表明YXS可能通过CaMKⅡ/PLB/SERCA2a通路调节心肌钙稳态,提高肌浆网钙泵摄钙能力,使细胞内游离Ca~(2+)趋于稳定,从而促进心衰大鼠心脏功能的恢复。该研究揭示了YXS在心力衰竭治疗中可能的作用机制,特别是从干预钙调控蛋白的角度,促进了YXS的临床应用。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨益气活血方对脑缺血损伤大鼠氧化应激反应的影响

目的:以氧化应激损伤为切入点探讨益气活血方对脑缺血损伤大鼠的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为模型组,假手术组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),益气活血方高、中、低剂量组(2. 916,1. 458,0. 729 g·kg~(-1)),连续灌胃14 d后,采用结扎双侧颈总动脉法建立急性脑缺血损伤模型,透射电镜观察突触超微结构,生化法检测脑匀浆中总超氧化物歧化酶(T-SOD),丙二醛(MDA),乳酸脱氢酶(LDH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)酶的水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠缺血区脑皮层血红素氧化酶-1(HO-1),核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白和m RNA表达。结果:透射电镜观察结果显示益气活血方对脑缺血损伤程度有明显改善作用。与假手术组比较,模型组大鼠脑匀浆MDA水平显著上升,T-SOD,GSH-Px水平显著降低(P 0. 01),LDH,Na+-K~+-ATP酶,Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶及ATP酶的活性均明显降低(P 0. 05,P 0. 01),脑组织中HO-1,Nrf2蛋白含量以及HO-1,Nrf2 m RNA表达显著降低(P 0. 01)。与模型组比较,益气活血方中、高剂量组可明显降低脑组织中MDA含量,升高T-SOD,GSH-Px的水平(P 0. 05,P 0. 01);益气活血方高剂量组可显著增加LDH,Na+-K+-ATP酶,Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和总ATP酶活性(P 0. 05,P 0. 01),益气活血方中、高剂量组大鼠脑组织中HO-1,Nrf2蛋白含量明显升高(P 0. 05,P 0. 01),益气活血方高剂量组HO-1,Nrf2 m RNA表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01)。结论:益气活血方可能通过Nrf2/HO-1信号通路抑制氧化应激水平实现对脑缺血损伤的保护作用。     

银杏内酯B对心肌缺血再灌注心律失常大鼠的作用及机制研究

目的观察银杏内酯B对心肌缺血再灌注所致心律失常大鼠的保护作用并探讨其机制。方法取120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、维拉帕米组2.5 mg/(kg·d)(阳性药物)及银杏内酯B低、中、高剂量组[15、30、60 mg/(kg·d)]组,每组各20只。术前7d连续腹腔注射给药,每日1次,最后1次给药2h后,采用结扎冠状动脉前降支的方法建立心肌缺血再灌注性心律失常大鼠模型,行Ⅱ导联心电图监测并记录,计算心律失常发生率、行心律失常评分;测定心肌组织Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性,测定心肌组织Ca~(2+)浓度;测定心肌组织抗氧化酶活性和MDA含量。结果与模型组比较,银杏内酯B 30、60 mg/(kg·d)组和维拉帕米2.5 mg/(kg·d)组心电图PR间期、QRS间期显著延长且ST段抬高程度显著降低(P0.05或P0.01);室性心动过速(VT)、室颤(VF)发生率显著降低(P0.05或P0.01),心律失常评分显著降低(P0.05或P0.01),心肌组织Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性显著升高(P0.05或P0.01),Ca~(2+)浓度显著降低;抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]活性显著升高且MDA含量显著降低(P0.05或P0.01)。结论银杏内酯B对心肌缺血再灌注性心律失常大鼠具有一定的保护作用,机制可能与银杏内酯B提高ATPase活性、降低心肌组织Ca~(2+)浓度、降低氧化应激损伤有关。     

基于β_2-AR/PKA信号探讨附子瓜蒌配伍对压力超负荷大鼠炎症反应和心肌纤维化的增毒作用

考察附子与瓜蒌配伍对压力超负荷大鼠心功能、心电图及炎症反应和心肌纤维化的影响,并基于β_2-AR/PKA信号探讨作用机制。采用腹主动脉缩窄术复制压力超负荷大鼠模型,术后12周随机分为模型组(PO)、附子低剂量组(FL,5. 4 g·kg~(-1)·d~(-1))、瓜蒌组(GL,5. 4 g·kg~(-1)·d~(-1))、附子瓜蒌配伍组(FG,5. 4 g·kg~(-1)·d~(-1)+5. 4 g·kg~(-1)·d~(-1))和附子高剂量组(FH,10. 8 g·kg~(-1)·d~(-1)),同时设立假手术组(sham)。药物干预6周后,检测大鼠颈动脉血压、心功能、心电图、心脏质量指数; HE染色观察心肾炎症反应; Masson染色观察心肌纤维化程度; Western blot法检测心肌β_2-AR和PKA蛋白表达。与sham组相比,PO组大鼠血压和心脏指数明显升高,各给药组对此均无明显影响。与PO组相比,FH组显著升高射血分数(EF),GL组显著增加心输出量(CO),其余各给药组对此无明显影响。附子瓜蒌配伍组虽可协同改善PO组大鼠QT和QTc间期延长,但同时加重心肾炎症反应并促进心肌纤维化,其毒性作用与附子高剂量组相当。同时,FG和FH组促进心肌β_2-AR和PKA蛋白表达,提示FG的增毒作用可能与激活β_2-AR/PKA信号有关。附子瓜蒌配伍在特定病理状态下加重附子毒性,临床合用应谨慎。     

参芎滴丸对心肌缺血大鼠血管内皮细胞及能量代谢的影响

目的:探讨参芎滴丸对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血的保护作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为正常组,模型组,复方丹参滴丸组,美托洛尔组和参芎滴丸高、中、低剂量组(11.2,5.6,2.8 g·kg-1)。采用注射异丙肾上腺素(ISO)建立大鼠急性心肌缺血模型,观察参芎滴丸预给药5 d后对大鼠不同时间点心电图(ECG)的影响;继续给药2 d检测各组大鼠血清中一氧化氮合酶(NOS),一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1),血栓素B2(TXB2)和6-酮前列腺素(6-Keto-PGFlα)的水平;同时测定大鼠心肌组织中钙-镁-ATP(Ca2+-Mg2+-ATP)酶,钠-钾-ATP(Na+-K+-ATP)酶活性及ATP含量。结果:参芎滴丸能明显改善ISO引起的大鼠心电图J点下移变化;降低大鼠血清中ET-1,TXB2的水平;不同程度地升高血清中NOS,NO和6-KetoPGFlα的水平;但对心肌组织中ATP含量,ATP酶活性无明显影响。结论:参芎滴丸对大剂量异丙肾上腺素引起的大鼠急性缺血性心肌损伤有明显的保护作用,其机制可能与保护血管内皮细胞,抑制血小板聚集有关。     

四君子汤对慢性心衰大鼠心肌组织蛋白质组学影响的研究

目的:探讨四君子汤对慢性心衰大鼠心肌组织蛋白质表达变化的影响。方法:SD雄性大鼠42只,随机取6只作为正常组,其余36只复制慢性心力衰竭大鼠模型,造模成功后,分为四君子汤高、低剂量组(11.88,2.97 g·kg~(-1)·d~(-1)),卡托普利组(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),正常组和模型组分别给予相同体积生理盐水,连续灌胃给药1月。分别留取各组左心室组织,双向凝胶电泳分离心肌蛋白,分析差异显示的蛋白,并对有显著差异的蛋白点进行胶内酶切和质谱鉴定。结果:与模型组比较,四君子汤组有31种蛋白质表达上调,28种蛋白质表达下调,各选取8个差异显著(Volume值相差≥1.5倍)的蛋白进行质谱鉴定,通过整合去重,鉴定出4个蛋白:与能量代谢相关的Suclg2蛋白、丙酮酸脱氢酶复合体;与心肌细胞收缩功能相关的肌球蛋白轻链2;与心肌细胞重构相关的丝氨酸蛋白酶抑制剂A3N。结论:四君子汤可调节慢性心衰大鼠心肌组织多种蛋白表达,可能通过调节能量代谢、减少心肌重构、提高收缩功能而改善心功能。     

消斑愈肾颗粒剂对实验性IgA肾病大鼠治疗作用的实验研究

目的:研究消斑愈肾颗粒剂治疗大鼠实验性 IgA 肾病的作用机理。方法:采用口服牛血清白蛋白(BSA)和尾静脉注射葡萄球菌肠毒素 B(SEB)免疫复合法建立大鼠 IgA 肾病模型。随机分组,分别灌胃给予消斑愈肾颗粒剂、肾炎舒及强的松,另设正常组。观察消斑愈肾颗粒剂高剂量组40g(生药)·kg~(-1)·d~(-1)、低剂量组20g(生药)·kg~(-1)·d~(-1)及肾炎舒组6.3g·kg~(-1)·d~(-1)、强的松组5.4mg·kg~(-1)·d~(-1)对其病变的影响。结果:消斑愈肾颗粒剂可以改善实验性 IgA 肾病大鼠血尿和蛋白尿,减轻肾脏的病理改变,减轻免疫复合物在肾组织中的沉积。结论:消斑愈肾颗粒剂对实验性 IgA 肾病有治疗作用。     

南天竹不同药用部位对三氧化二砷肝毒与肾毒的保护作用

目的:比较南天竹的不同药用部位对抗肿瘤药三氧化二砷的减毒作用,为南天竹的深度开发应用提供科学依据。方法:采用大鼠慢性三氧化二砷中毒模型,将56只SD大鼠随机分为空白组;模型组(信石40 mg·kg~(-1));2,3-二巯基丙磺酸钠组(2,3-二巯基丙磺酸钠25 mg·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹根组(南天竹根20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹茎组(南天竹茎20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹叶组(南天竹叶20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1));南天竹果实组(南天竹果实20 g·kg~(-1)+信石40 mg·kg~(-1))。连续灌胃给药10 d。末次给药后,收集24 h内尿液,手术后收集血清、肾组织及肝组织样本,测定血肌酐(serum creatinine,SCr)及尿肌酐(urine creatinine,UCr)水平,计算内生肌酐清除率(creatinine clearance,CCr),同时检测各组大鼠肝脏、肾脏中丙二醛(malondialdehyde,MDA),总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase,CAT)水平,肾脏及肝脏苏木精-伊红染色后显微镜下观察组织病理形态学变化。结果:与模型组比较,南天竹根、茎、果实联合给药组大鼠体质量显著增加(P 0. 01),肾脏系数显著降低(P 0. 01),大鼠UCr和CCr水平显著升高(P 0. 01),肾组织中MDA含量显著下降(P 0. 01),肝组织中MDA水平明显降低(P 0. 05),肝、肾组织中SOD和CAT活性显著升高(P 0. 01),大鼠肝、肾损害病理损伤减轻;南天竹叶联合给药组除肝脏中SOD活性与模型组无明显差异外,其余指标与以上3组变化一致。结论:南天竹根、茎、果实对三氧化二砷氧化应激所致肝、肾毒性有显著的保护作用,南天竹叶效果稍差。     

金丝桃苷预处理对心肌缺血再灌注性心律失常大鼠心肌ATP酶活性和Cx43、Kir2.1表达的影响

目的金丝桃苷具有抗脑缺血、降低心肌梗死面积等作用,通过构建大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型,进行金丝桃苷预处理对I/R大鼠室性心律的影响以及相应作用机制的研究。方法选择雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、金丝桃苷(50 mg/kg)组(n=15),结扎冠状动脉左前降支缺血30 min恢复灌注构建I/R模型,金丝桃苷组于缺血前10 min腹腔注射金丝桃苷50 mg/kg,记录缺血前10 min、后30 min,再灌注30、60、120 min(T0、T_1、T_2、T_3、T_4)大鼠心率(HR)、平均动脉压(MAP)、心率收缩压乘积(RPP),观察心律失常情况,ELISA法测定血清肌酸激酶-同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白(cTnI)水平,分光光度法测定Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶水平,HE染色观察心肌组织变化,免疫组化法测定心肌缝隙连接蛋白(Cx43)表达,Western blot测定Kir2.1蛋白表达。结果在T_1、T_2、T_3、T_4,模型组HR、MAP、RPP显著低于假手术组,金丝桃苷组HR、MAP、RPP高于模型组(P0.05);模型组、金丝桃苷组心律失常评分、CK-MB、cTnI高于假手术组,Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性、Cx43和Kir2.1蛋白表达低于假手术组(P0.05),金丝桃苷组心律失常评分、CK-MB和cTnI水平低于模型组,Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶水平、Cx43和Kir2.1蛋白表达高于模型组(P0.05)。结论金丝桃苷有减轻I/R大鼠室性心律失常的作用,其作用可能与增加Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性,上调Cx43和Kir2.1蛋白表达有关。     

川芎嗪对DHF大鼠心肌损伤的保护作用及其机制研究

目的:观察川芎嗪(TMP)对舒张性心力衰竭(DHF)大鼠心肌损伤及心肌细胞内钙超载的影响.方法:腹主动脉缩窄法建立DHF模型,术后4周随机分为模型组、TMP高、中、低剂量组(40,20,10 mg·kg~(-1)·d~(-1))4组(n=10),另有假手术组10只.连续给药4周后应用十六导生理记录仪测定血流动力学指标;采用透射电镜观察大鼠心肌病理改变及细胞超微结构.应用激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)技术检测心肌细胞内[Ca~(2+|)]变化;采用比色法测定心肌线粒体ATP酶活性.结果:与假手术组相比,模型组大鼠左心室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dt_(max))无显著变化,左心室舒张末期内压(LVEDP)显著升高,左室内压最大下降速率(-dp/dt_(max))显著降低,左室松弛时间常数(T)数值显著延长;心肌损伤明显,肌细胞内Ca~(2+)浓度明显上升,线粒体钙ATP酶活性明显下降.给药4周后,与模型组比较,TMP中、低剂量组显著降低LVEDP,显著升高-dP/dt_(max),显著缩短T;明显减轻心肌超微结构的损害;显著降低心肌细胞内荧光值;心肌细胞线粒体中Ca~(2+)-ATPase活力明显增加.结论:中、低剂量的TMP可以明显减轻DHF所致的心肌损伤,改善DHF大鼠心功能及心肌细胞内[Ca~(2+)],提高心肌线粒体ATP酶活性,拮抗钙超载.     

水蛭提取物结肠迟释微丸与普通微丸的抗血栓作用比较

目的比较水蛭提取物结肠迟释微丸(colon delayed-release pellets,CDP)和水蛭提取物普通微丸(regular pellets,RP)的抗凝血和抗血栓形成作用。方法采用毛细管法检测新西兰兔凝血时间,考察CDP和RP对大鼠动-静脉旁路血栓、狭窄法诱导的下腔静脉血栓和三氯化铁(FeCl_3)诱导颈动脉血栓形成的作用。凝血时间测定实验为单次给药,设3个组:正常组,CDP组(64 mg·kg~(-1)·d~(-1))和RP组(43.7 mg·kg~(-1)·d~(-1));动-静脉旁路血栓实验为单次给药,设6个组:模型组,CDP低、高剂量组(87,174 mg·kg~(-1)·d~(-1)),RP低、高剂量组(59.4,118.8mg·kg~(-1)·d~(-1)),阿司匹林组(7.8 mg·kg~(-1)·d~(-1));狭窄法诱导大鼠下腔静脉血栓实验设8组:假手术组,模型组,CDP低、高剂量组,RP低、高剂量组,阳性药华法林组(2.0 mg·kg~(-1)·d~(-1))和活血通脉胶囊组(312.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每天给药1次,连续给药7 d;FeCl_3诱导颈动脉血栓实验为单次给药,设8组:假手术组,模型组,CDP低、高剂量组,RP低、高剂量组,阳性药氯吡格雷组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1))和活血通脉胶囊组。称量动-静脉旁路血栓湿重和干重以及静脉血栓质量和长度,计算血栓形成抑制率;对动脉血栓进行半定量病理学分析,计算血栓形成百分比和血栓形成抑制率。结果与正常组比较,CDP组和RP组分别在给药后4 h和0.5 h显著延长新西兰兔凝血时间(P0.05),抗凝作用分别维持4 h和1 h。CDP组和RP组能剂量依赖性抑制大鼠动-静脉旁路血栓和下腔静脉血栓形成,抑制动脉血栓形成,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01)。此外,在抑制大鼠动-静脉旁路血栓和下腔静脉血栓作用上,CDP强于RP。结论 CDP抗血栓形成作用显著优于RP,且CDP抗静脉血栓的作用比抗动脉血栓明显。     

拳参正丁醇提取物对大鼠心肌肥厚时钠钾及钙ATP酶活性的影响

目的 观察拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素(Iso)所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对Na~+-K~+-ATPase,Ca~(2+)-ATPase,CK,LDH活性的影响.方法 采用Iso 1mg·kg~(-1)·d~(-1),背部皮下注射,连续10 d,建立大鼠心肌肥厚模型.造模第2天开始给予不同浓度的拳参正丁醇提取物或NS,连续14 d,末次给药后禁食12 h,称重,麻醉后断头取血,测定血清LDH的活性、心肌组织Na~+-K~+-ATPase,Ca~(2+)- ATPase,CK及LDH的活性.结果 模型血清LDH的活性升高,心肌组织Na~+-K~+-ATPase,Ca~(2+)- ATPase,CK及LDH的活性降低;与模型组相比,拳参正丁醇提取物治疗组血清LDH的活性降低,心肌组织Na~+-K~+-ATPase,Ca~(2+)ATPase,CK及LDH的活性升高.结论 拳参正丁醇提取物可通过提高Na~+-K~+-ATPase,Ca~(2+)- ATPase的活性起抗心肌肥厚作用.     

西洋参赤芍配伍对大鼠心肌梗死后早期心室重构心肌纤维化的影响

目的观察益气活血配伍(西洋参茎叶总皂苷+赤芍总苷)对大鼠心肌梗死后早期心室重构炎性因子和心肌纤维化的影响,并从胶原代谢方面探讨可能的作用机制。方法结扎Wistar大鼠冠状动脉前降支制备AMI模型,将90只造模成功的大鼠随机分为6组,每组15只,分别为假手术组(冠状动脉前降支仅穿线不结扎)、模型组、阳性对照组(灌胃缬沙坦7.2 mg·kg~(-1)·d~(-1))、益气组(灌胃西洋参茎叶总皂苷162 mg·kg~(-1)·d~(-1))、活血组(灌胃赤芍总苷54 mg·kg~(-1)·d~(-1))和益气活血组(灌胃西洋参茎叶总皂苷162 mg·kg~(-1)·d~(-1)+赤芍总苷54mg·kg~(-1)·d~(-1))。第2天开始灌胃给药,连续4周,假手术组和模型组灌胃等量蒸馏水。4周后取材,超声心动图检测心脏结构及心功能变化,HE染色观察心肌组织病理变化,免疫组织化学染色法检测缺血心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。放射性免疫法检测血清心肌损伤标记物B型脑钠尿肽(BNP)、肌钙蛋白T(cTnT),炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β),纤维化指标层连蛋白(LA)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)的含量。结果与模型组比较:(1)益气活血组大鼠心肌细胞炎性浸润减少,心肌纤维间隙水肿和心肌纤维细胞坏死变性明显减轻;(2)阳性对照组、活血组和益气活血组大鼠左室舒张末期内径(LVDd)均显著降低,左室射血分数(LVEF)均显著升高(P0.05,P0.05),益气活血组左室收缩末期内径(LVDs)显著降低(P0.05);(3)阳性对照组和益气活血组心肌损伤标记物血清BNP水平明显降低(P0.05);(4)阳性对照组和益气活血组炎性因子血清TNF-α、IL-1β含量显著降低(P0.05,P0.01);(5)益气活血组纤维化指标血清LA、HA、PⅢNP含量明显降低(P0.05);(6)阳性对照组和益气活血组损伤心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论益气活血配伍可以减轻心梗后心肌纤维化过程中的炎性反应,减少损伤心肌纤维化因子的释放及胶原的堆积从而达到减轻心室重构改善心功能的作用。     

山精胶囊对心肌缺血大鼠NF-κB信号通路调控机制探讨

目的:探讨山精胶囊对心肌缺血大鼠能量代谢、氧自由基及细胞凋亡相关基因的作用及其机制。方法:选取Wista大鼠采用冠状动脉结扎法,建立慢性心肌缺血模型。将筛选出来的大鼠随机分为山精胶囊低、中、高剂量组(283.5,850.5,1 701.0 mg·kg~(-1))和阳性药组(心安胶囊324.0 mg·kg~(-1)),假手术组和模型组灌胃给予同等剂量的0.9%的氯化钠注射液,给药10 d。紫外可见分光光度计检测血清及组织中乳酸(LD),游离脂肪酸(NEFA),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),一氧化氮(NO)及三磷酸腺苷酶(ATP)水平;蛋白质免疫印迹(Western blot)法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织中核转录因子-κB(NF-κB),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠LD,NEFA,MDA明显升高(P0.05),NO,Na~+-K~+-ATP,Ca~(2+)-ATP酶,SOD,GSH-Px明显降低(P0.05),心肌NF-κB,Caspase-3,Bax mRNA及蛋白表达明显上调(P0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显下调(P0.05);与模型组比较,山精胶囊能显著降低LD,NEFA,MDA(P0.05),NO,Na~+-K~+-ATP,Ca~(2+)-ATP酶,SOD,GSH-Px显著升高(P0.05),明显下调NF-κB,Caspase-3,Bax mRNA及蛋白表达(P0.05),明显上调Bcl-2的mRNA及蛋白表达(P0.05)。结论:山精胶囊可能通过调控NF-κB信号通路,提高心肌缺血大鼠清除氧自由基能力,改善心肌细胞能量代谢,调节凋亡相关蛋白和基因的表达,从而抑制了心肌细胞凋亡,减少缺血缺氧对心肌细胞的病理损害,起到保护心肌的作用。     

银杏叶提取物对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用

目的:研究银杏叶提取物对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用.方法:异丙肾上腺素(4 mg·kg~(-1)·d~(-1),10 d,sc)制备大鼠心肌损伤模型并以银杏叶提取物(100 mg·kg~(-1)·d~(-1),13 d,ig)或倍他乐克(10 mg·kg~(-1)·d~(-1),13 d,ig)进行治疗,记录大鼠体重和左心室重,计算心室重指数,测定血流动力学及心肌酶谱AST,LDH,CK,HBDH,CKMB等指标.结果:模型组体重增长速度显著放缓(P＜0.01),心室重指数显著升高(P＜0.05),血流动力学指标显示大鼠心功能显著下降(P＜0.01,P＜0.05),心肌酶谱含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比,银杏叶提取物组体重增长速度变大,心室重指数明显下降(P＜0.05),血清中心肌酶谱含量明显下降(P＜0.05),血流动力学指标明显恢复(P＜0.05),与倍他乐克组无显著差异.结论:银杏叶提取物对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌损伤有保护作用.     

人参皂苷Rg1 通过PI3K/Akt/eNOS信号通路调控异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心肌的抗氧化作用

目的:观察人参皂苷Rg_1预处理对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心肌磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)通路的影响。方法:采用异丙肾上腺素建立SD大鼠急性心肌缺血模型,将50只大鼠随机分为正常组,模型组,葛根素组,人参皂苷Rg_1高、低剂量组(20,10 mg·kg~(-1));Moor激光血流成像系统观测各组大鼠心脏表面血流值;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定各组大鼠血清中肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH),一氧化氮(NO)的水平以及心肌中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;实时荧光定量-聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测各组大鼠心肌内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测各组大鼠心肌PI3K,Akt,p-Akt蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠心脏表面平均血流量明显下降,血清NO降低,CK,LDH升高;心肌MDA含量升高,GSH-Px含量下降,eNOS mRNA含量显著降低,PI3K/Akt通路蛋白的表达有所降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,人参皂苷Rg_1高、低剂量组,心肌表面平均血流有显著提升,血清NO升高,CK,LDH降低,心肌MDA含量降低,GSH-Px含量升高,eNOS mRNA表达含量升高,PI3K/Akt通路蛋白的表达有所升高(P0.05,P0.01)。结论:人参皂苷Rg_1可以通过调控PI3K-Akt-eNOS信号通路改善急性心肌缺血大鼠心脏变化防治心血管病变。     

鹿芪颗粒对急性心肌梗死大鼠心功能及血清内毒素水平影响的实验研究

目的观察鹿芪颗粒对急性心肌梗死大鼠心功能及血清内毒素(LPS)水平的影响。方法 60只雄性成年健康Wistar系大鼠随机分为假手术组、模型组、万古霉素组(0.075 g·300 ml~(-1)·d~(-1))、中药低剂量组(0.25 ml·kg~(-1)·d~(-1))、中药中剂量组(0.5 ml·kg~(-1)·d~(-1))、中药高剂量组(0.75 ml·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只。除假手术组外,其余5组大鼠通过结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,假手术组大鼠除不结扎冠状动脉外,余手术方法相同。造模成功后各药物组分别给予相应药物,假手术组、模型组给予等量0.9%NaCl溶液,连续干预6周。观察各组大鼠心功能[左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(FS)]、血清LPS水平及心肌组织病理学情况。结果①与假手术组比较,模型组LVEF、FAS值降低(P0.05),血清LPS水平升高(P0.05)。②与模型组比较,中药中、高剂量组大鼠LVEF、FAS值升高(P0.05),③与万古霉素组比较,中药中、高剂量组大鼠LVEF及FS值升高(P0.05),④与中药低剂量组比较,中药中、高剂量组大鼠LVEF及FS值升高(P0.05),血清LPS水平降低(P0.05)。⑤中药中、高剂量组组间比较,大鼠心功能、血清LPS水平差异无统计学意义(P0.05)。结论鹿芪颗粒可改善急性心肌梗死大鼠的心功能,减少心肌组织炎性面积,其机制可能与降低血清LPS水平、维持心脏稳态有关。