甘遂及不同炮制品石油醚部位HPLC特征图谱比较研究

目的：考察不同炮制方法对甘遂石油醚部位HPLC特征图谱的影响。方法：采用HPLC法测定甘遂及不同炮制品石油醚部位的特征图谱。结果：不同炮制方法对甘遂石油醚部位的特征峰的峰面积均有影响,加热和加醋均可使峰面积降低,两者共同作用可使峰面积下降幅度增大,且顺序不一峰面积下降幅度不一。结论：醋炙为甘遂最合理的炮制方法。     

大戟属根类有毒中药醋制前后的毒性比较研究

目的:研究京大戟、甘遂、狼毒炮制前后的毒性变化并比较三者的毒性强弱。方法:采用肠推进运动模型及巨噬细胞炎症模型,评价3种大戟属根类有毒中药炮制前后的毒性。结果:京大戟、甘遂、狼毒生品及醋品均可明显促进小鼠小肠推进运动及巨噬细胞释放NO的能力,强弱顺序为甘遂>京大戟>狼毒,醋制后三者均可明显缓和这一作用。结论:京大戟、甘遂、狼毒可诱导炎症反应的发生并促进肠推进运动,产生强烈的泻下作用,醋制后致炎及肠推进作用显著减弱,表明醋制可缓和京大戟、甘遂、狼毒的泻下作用。     

甘遂不同炮制品的研究

生甘遂泻下作用峻烈,毒性较大,一般需经加工炮制以减缓其毒性后方可用于临床。甘遂的炮制方法较多,目前各地常用的炮制方法有醋制、甘草制,豆腐制等。为了便于确立一种较为合理的炮制方法,我们对     

甘遂不同炮制品中二萜类成分的变化研究

目的比较甘遂炮制前后各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯B和甘遂萜酯A含有量的变化,以期揭示上述成分与甘遂醋炙减毒作用的关联性。方法采用HPLC法测定甘遂各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯A、甘遂萜酯B,以X TerreRP C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)为固定相;流动相为甲醇(A)-水(B)二元梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长235 nm,柱温38℃。结果假白榄烷型二萜类成分甘遂萜酯A和甘遂萜酯B经炮制后均有所降低,其质量分数高低顺序为生品>清炒品>醋润品>醋炙品。结论甘遂醋炙前后甘遂萜酯A与甘遂萜酯B的含有量变化与甘遂醋炙减毒有一定的关联性。     

甘遂的临床运用

从甘遂的药理、毒理及炮制入手,结合《伤寒论》等经方中甘遂的入药方式、配伍、现代临床运用,对甘遂的临床运用进行探讨。甘遂作为有毒中药,有泻水逐饮,消肿散结的作用,可有效治疗气逆咳喘、痰饮积聚、胸腹积水、二便不利等疾病。甘遂作为有毒中药,其药用价值不容忽视,当加强对其临床运用的研究。     

常见毒性中药的炮制方法浅谈

近年来由于毒性中药而引起的中毒和死亡事故时有发生,而其中大多数是与毒性中药未经炮制或炮制不当有关。因此,加强对毒性中药的炮制是十分必要的。下面根据自己的经验谈谈几种常用的炮制方法。1 醋制法 是将药物加入定量米醋拌炒的方法,如大戟、甘遂、商陆、芜花、狼毒的炮制。因醋呈酸性,是良好的有机溶媒,具有解毒作用。通过醋制法,可降低这些药物的毒性成份,减少其毒性,缓和峻下作用。     

甘遂的炮制概况

甘遂的炮制概况梁爱华(中国中医研究院中药研究所北京100700)甘遂为大戟科大戟属植物EuphorbiaKansuiLiou的干燥块根,首载于《神农本草经》,是一味传统的峻下逐水药,被古医家誉为下水之圣药。甘遂苦寒、有毒,历代均重视其炮制。本文仅就其炮制沿革及近代炮制研究作一概述。1历代甘遂的炮制概况甘遂始载于《神农本草经》,列为下品,但该书未记载有炮制方法。汉代张仲景大陷胸汤中首先采用制末的方法。到清代末止,先后至少有60余部....     

醋炙法对中药加工炮制的增效减毒作用原理探析

通过对如甘遂、芫花、商陆、延胡索、香附等常用醋炙药物炮制学研究,分析了醋炙法对中药加工炮制的减毒增效作用原理。     

正交试验优选甘遂醋制最佳工艺

目的:确定醋甘遂饮片的最佳炮制工艺。方法:以大戟二烯醇含量为指标,醋的用量、炒制温度和炒制时间为考察因素,采用正交试验优选醋甘遂饮片的最佳炮制工艺。结果:醋的用量为30%,炒制温度控制在260℃,炒制时间为7 min。结论:优选出的醋甘遂炮制工艺稳定可行,重现性好。     

中药炮制对其促癌活性的影响

目的:研究中药炮制对其促癌活性的影响。方法:对4种有毒中药分别进行醋制和霜制,观察醋甘遂、醋大戟、醋芫花和巴豆霜对Raji细胞中Epstein-Barr病毒早期抗原(EBV-EA)表达的诱导作用,同时将4种有毒中药的生品和炮制品对EBV-EA的诱导表达情况进行比较。结果:在加丁酸时,炮制品组的激活率比生药组的激活率均有所降低,巴豆的降低率是18.29%,其它3药的降低率均在44.87%-79.71%之间。结论:通过合理炮制,可降低和阻断中药的毒性及促癌物活性。     

甘遂-甘草配伍对大鼠肾脏毒性代谢组学的影响

目的:根据传统用药习惯,从代谢组学的角度来验证甘遂-甘草以1∶4比例配比时对大鼠肾脏的减毒作用,并在此基础上初步探讨其减毒作用机制。方法:实验采用SD雄性大鼠,随机分为空白对照组,甘遂组,甘草组和甘遂-甘草1∶4组。应用核磁共振技术(NMR)和正交-偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法分析给予大鼠甘遂、甘草和甘遂-甘草1∶4配比液后的大鼠肾脏代谢物变化,并结合血浆生化分析和肾脏组织病理切片HE染色检测,明确甘遂-甘草1∶4配伍的减毒作用机制。结果:甘草组极少引起血浆生化指标和病理学改变,同时对大鼠肾脏内源性代谢物的变化不大;甘遂组能引起血浆葡萄糖的升高和肌酸、肌酐的下降,造成肾小管上皮细胞水肿和空泡变性,肾小球个别出现瘀血的现象,同时引起肾脏内源性代谢物如胆碱,磷酸胆碱,苯丙氨酸,谷氨酰胺的减少和异亮氨酸,亮氨酸,缬氨酸,丙氨酸,乙酸,肌酸/肌酐的增加;而甘遂-甘草1∶4组并未出现明显的血浆生化指标改变,仅出现肾小球轻微瘀血及肾小管上皮细胞扩张的现象,同时仅引起胆碱,磷酸胆碱和苯丙氨酸的减少。结论:甘遂-甘草以1∶4配伍存在明显的减毒作用,主要是通过甘遂毒性生物标志物含量的变化和肾脏毒性传统指标的下调来体现其减毒效应。     

不同方法炮制甘遂对LO2细胞周期与凋亡的影响

目的:探讨不同方法炮制所得甘遂各样品对人正常肝细胞LO2细胞周期与凋亡的影响.方法:以人正常肝细胞LO2为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后各炮制品(生品、清炒品、酷润品、醋制品)对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态,采用流式细胞术研究甘遂醋制前后各炮制品对LO2细胞周期和凋亡的影响.结果:与阴性对照组比较,甘遂生品可明显降低LO2细胞的活性(P＜0.01)和形态,显著升高S期细胞百分率(P＜0.05),显著降低G2/M期细胞百分率(P＜0.01),显著增加人正常肝细胞LO2细胞的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P＜0.01);与甘遂生品组比较,甘遂各炮制品均能降低对人正常肝细胞L02的增殖抑制作用(P＜0.01)和形态变差的趋势,其降低增殖抑制作用的顺序为醋制品＞醋润品＞清炒品,且呈一定的量-效关系(r醋制=0.999,r醋润=0.913,r清炒=0.914,r生品=0.984);且均能显著增加G2/M期细胞百分率(P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01),显著减少人正常肝细胞LO2的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P＜0.01),其增加G2/M期细胞百分率的顺序和降低凋亡率的顺序均为醋制品＞醋润品＞清炒品.结论:甘遂炮制后可通过影响LO2细胞周期与凋亡降低其毒性,且甘遂醋制工艺中的炒与醋润2种操作在醋制降低甘遂的肝毒性中能够起到协同作用,从而为揭示上述2种操作在甘遂醋制减毒工艺中的合理性和醋制工艺优化提供了一定的依据.     

甘遂与甘草反药相互作用的网络药理学分析

目的:采用网络药理学方法,探讨甘遂和甘草反药配伍后药效/毒性成分的分子作用机制,分析其多成分-多靶点-多通路相互关系。方法:针对甘遂甘草的主要药效/毒性成分——甘遂萜酯A,甘遂萜酯B,甘遂萜酯C,甘草酸,甘草苷,异甘草苷和刺芒柄花素,依据Pharm Mapper数据库构建多成分-蛋白网络,获取的靶点信息利用博奥数据库MAS 3.0系统得到相应通路,通过Cytoscape软件建立成分-靶点-通路网络模型。结果:网络分析表明,甘遂、甘草配伍药效/毒性成分涉及神经-免疫-内分泌-泌尿等相关的61条通路。在调节水和电解质排泄方面药效相反,与肾素血管紧张素系统、类固醇生物合成等通路有关;在抗肿瘤、抗炎、调节免疫方面发挥协同作用,涉及33条通路;两者配伍存在基于肝药酶代谢的毒性增强现象。结论:甘遂与甘草配伍存在药效降低或药效协同和毒性改变等多种情况,体现了中药配伍多成分、多靶点、多途径作用模式,该研究为深入探讨甘遂甘草配伍的分子作用机制提供了参考。     

生甘遂与制甘遂中的二萜类成分甘遂大戟萜酯D的含量研究

目的：建立甘遂中甘遂大戟萜酯D的含量测定方法,并比较生甘遂和醋甘遂中甘遂大戟萜酯D的含量差异。方法：样品以甲醇为提取溶剂,超声处理后,以HPLC法分析。采用菲罗门lunarC18。色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）色谱柱分离,柱温40℃,以乙腈-水（70：30）为流动相,流速1．0mL·min^-1;检测波长235nm。结果：甘遂大戟萜酯D线性范围分别为0．216～8．64μg（r=0．9999）,平均加样回收率为103．5％（n=9）;44批次甘遂中,甘遂大戟萜酯D的含量为0．008％～0．036％。结论：该方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于甘遂大戟萜酯D的定量分析。     

基于斑马鱼幼鱼模型的甘遂毒性评价

[目的]以模式生物斑马鱼幼鱼为模型,评价甘遂不同溶剂连续提取物毒性差异及毒性特征。[方法]采用索氏提取法获得甘遂不同溶剂连续提取物。通过预实验,确定各提取物72 h最大不致死浓度和最小全致死浓度。在此区间设定6~8个药物浓度,建立致死曲线,计算半数致死浓度(LC50)。以毒性最大提取物的10%致死浓度(LC10)、最小致死浓度(LC1)、1/3 LC1和1/10 LC1为给药浓度,同时设立空白组和溶剂对照组,连续给药72 h,观察甘遂毒性特征。停药后将幼鱼置于养殖水中恢复48 h,观察毒性可逆性。[结果]甘遂不同提取部位毒性顺序为石油醚二氯甲烷乙酸乙酯乙醇提取物。甘遂的主要毒性为肝毒性和胃肠道刺激性。肝毒性既可造成肝肿大,又可导致肝变性,肝肿大不可逆,而肝变性具有可逆性。[结论]本实验首次利用单个模型以相同浓度单次给药,同时评价了甘遂对心脏、肝脏、肾脏、神经系统和胃肠道等脏器系统的毒性作用及可逆性。实验结果证实了甘遂的毒性集中于石油醚提取部位,并可对肝脏和胃肠道造成实质性损伤。本实验为斑马鱼模型在中药毒性评价中的应用提供了参考。     

醋制降低甘遂对人正常肝细胞LO2毒性研究

目的:比较甘遂醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性差异,初步探讨甘遂醋制减毒机制。方法:以人正常肝细胞LO2细胞为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态;并测定细胞培养上清液和裂解上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶,Ca2+-Mg2+-ATP酶等酶的活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与阴性对照组比较,生甘遂可明显降低LO2细胞的活性(P<0.01)与形态,并显著提高LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著降低SOD活力和GSH含量(P<0.01),显著增加MDA含量(P<0.01),显著降低LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01);醋制后,与生甘遂各剂量组比较,醋甘遂可显著降低生甘遂对LO2细胞的增殖抑制作用(P<0.01)和形态变差的趋势,可显著降低LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著增加SOD活力和GSH含量(P<0.01)、显著降低MDA含量(P<0.01)、显著提高LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01),且呈一定的剂量相关性。结论:醋制可降低甘遂肝毒性,其可能机制为通过降低甘遂对肝细胞膜通透性的影响及减轻氧化损伤而实现。     

甘遂醋炙对正常及癌性腹水模型大鼠毒性的影响

目的:考察甘遂醋炙前后对正常及癌性腹水模型大鼠毒性的差异。方法:以正常及癌性腹水模型大鼠为研究对象,分组后连续7 d灌胃生、醋甘遂粉末及其提取物,各给药组按0.34 mg·g-1灌胃,空白组与模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠。考察给药后对大鼠肝、胃、肠组织病理形态学、血清肝功能指标、氧化损伤指标的影响。结果:与空白组比较,各正常给药组大鼠肝、胃、肠组织均出现显著损伤,血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活力显著升高,谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量显著降低,丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量显著升高;其中生甘遂粉末作用最为显著,醋甘遂该作用显著降低。与模型组比较,各模型给药组大鼠组织损伤有所减轻,血清AST,ALT,ALP活力显著降低,GSH和SOD含量显著升高,MDA和LDH含量显著降低;其中模型生、醋粉组功效最为显著,且两组间无显著性差异。结论:甘遂醋炙后对正常动物的毒性较生甘遂低;在模型动物上,生、醋甘遂均可显著缓解模型的损伤。     

甘遂中期引产胎盘与胎儿脏器的光镜及电镜观察

本文报告了13例用甘遂引产的胎盘和3例胎儿脏器的光镜和电镜观察。结果蜕膜组织有充血、出血、变性、坏死和炎细胞浸润;绒毛有充血、出血、水肿和血小板聚集现象;胎儿各脏器亦有充血、出血,心脏还有微血栓形成。作者认为,甘遂可能对胎儿循环系统有损害作用。     

甘遂醇提物对家兔离体回肠平滑肌张力的影响

目的通过研究甘遂60%醇提取物对家兔离体回肠平滑肌张力的影响,以筛选出其中兴奋离体回肠平滑肌的有效成分。方法通过RM6240生理信号采集系统记录甘遂60%醇提取物对家兔离体回肠平滑肌张力的影响,观察其对离体回肠平滑肌的收缩效应。结果甘遂60%醇提物与正常组比较,能够显著提高家兔离体回肠平滑肌的平均舒张谷张力、平均收缩峰张力以及平均张力的变化率(P<0.05),并且对阿托品所致家兔离体回肠平滑肌张力的降低有一定的拮抗作用(P<0.05)。结论甘遂60%醇提物对家兔离体回肠平滑肌张力有一定的兴奋作用。