GC-MS代谢组学分析逍遥散干预抑郁模型大鼠盲肠代谢物组的变化规律

目的采用GC-MS代谢组学方法分析逍遥散干预抑郁模型大鼠盲肠组织代谢物组的变化规律。方法采用慢性温和不可预知应激(CUMS)程序对大鼠进行造模,以逍遥散及盐酸氟西汀(氟西汀)为干预药物,采用GC-MS方法分析大鼠盲肠组织代谢物组及其变化规律。化合物的结构通过NIST 05数据库检索及对照品指认确定,将数据预处理后导入SIMCA-P 13.0软件进行多元统计分析。结果 CUMS抑郁大鼠模型复制成功,代谢组学研究结果表明氟西汀及逍遥散干预后大鼠盲肠组织中丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸等减少,氟西汀组棕榈酸、硬脂酸升高,且与模型组比较具有显著性差异(P0.05、0.01)。结论逍遥散干预后CUMS大鼠盲肠组织的代谢物组发生明显变化,该研究可为逍遥散抗抑郁作用机制研究提供依据。     

自拟解郁方抗抑郁作用的实验研究

目的:探讨自拟解郁方对慢性不可预知温和应激(CUMS)致抑郁症大鼠行为学及脑组织单胺类神经递质的影响。方法:将SD大鼠随机分为四组,分别为对照组、模型组、氟西汀组和解郁方组,每组10只。采用CUMS构建抑郁症大鼠模型,同时每天分别用生理盐水、氟西汀、自拟解郁方灌胃,连续治疗21天。用敞箱实验及糖水偏好实验评价大鼠抑郁状况,并检测脑组织单胺类神经递质的含量。结果:氟西汀和解郁方明显改善了大鼠的抑郁症状,增高了脑组织单胺类神经递质(NE、DA、5-HT)的含量(P0.01)。结论:自拟解郁方可通过增高脑组织单胺类神经递质的含量产生抗抑郁作用。     

基于粪便代谢组学技术的逍遥散抗抑郁作用机制研究

目的应用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠粪便中内源性代谢物及代谢通路的变化,并评价逍遥散的改善作用,探讨其抗抑郁作用机制。方法使用CUMS造模程序建立抑郁模型,采用1H-NMR技术结合多变量统计分析方法,研究CUMS抑郁大鼠粪便代谢物谱的变化、鉴定相关代谢标志物并构建代谢通路。结果在抑郁大鼠粪便样本中共筛选10种与抑郁相关的潜在生物标志物。与对照组比较,模型组天冬酰胺、天冬氨酸、乳酸和丙酸水平显著升高(P0.05、0.01),而苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和脯氨酸水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组相比,逍遥散能显著升高苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸的水平,能显著降低天冬酰胺、乳酸和丙酸的水平。与对照组比较,CUMS抑郁大鼠粪便中6条代谢通路发生了显著变化:包括(1)氨基酰t RNA生物合成,(2)丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,(3)精氨酸和脯氨酸代谢,(4)谷氨酸和谷氨酰胺代谢,(5)苯丙氨酸代谢以及(6)丙酮酸代谢。而逍遥散可显著回调(2)、(3)、(4)、(5)和(6)条代谢通路。结论逍遥散可能通过调控氨基酸代谢、糖代谢和肠道微生物的代谢等途径发挥抗抑郁作用。     

柴胡-白芍药对干预大鼠抑郁症模型的血清代谢组学研究

目的:基于UPLC/Q-TOF-MS技术对大鼠抑郁模型血清代谢组学进行研究,寻找与柴胡-白芍药对干预抑郁症关联的生物标志物,探索该药对抗抑郁作用机制。方法:SD大鼠,采用CUMS方法造模,通过糖水偏爱率和摄食量实验评价。建立模型成功后,随机分成柴胡-白芍药对组、氟西汀阳性药组、模型组、空白组。末次给药后,眼眶取血收集血清样品。样品通过UPLC-MS分析,采集数据用Masslynxv4.1进行PCA分析。结果:模型组与空白组对比,色氨酸、尿酸、胆酸、溶血磷脂酞胆碱发生明显变化,给予氟西汀或者药对后,代谢物组发生变化并具有回调作用,推测潜在的标志物可能是上述内源性代谢物。结论:柴胡-白芍药对可能通过调控氧化应激、脂类代谢、氨基酸代谢来实现抗抑郁作用。     

舒郁散对慢性应激抑郁大鼠行为及海马神经肽表达的影响

目的观察舒郁散对慢性应激抑郁大鼠的行为变化、脑组织肿瘤坏死因子(TNF-α)含量及海马神经肽表达的影响,为临床治疗提供实验依据。方法 50只大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸氟西汀组及舒郁散小、大剂量组,各治疗组给予相应药物,正常组与模型组给予等容积蒸馏水。应激刺激造模,采用糖水消耗实验、悬尾实验观察大鼠行为改变,采用ELISA检测脑组织TNF-α含量,免疫组化法观察大鼠海马神经肽表达。结果盐酸氟西汀、舒郁散大剂量组大鼠悬尾不动时间明显减少,糖水消耗量明显增加,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。盐酸氟西汀、舒郁散大剂量组大鼠脑组织TNF-α含量显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。盐酸氟西汀组、舒郁散大剂量组海马神经肽免疫反应阳性神经元数目减少,平均光密度降低,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论舒郁散具有抗抑郁作用,其作用与剂量呈正相关。     

文拉法辛和氟西汀抗抑郁作用机制和药效特点的代谢组学研究

目的 采用代谢组学技术比较并评价文拉法辛和氟西汀两种药物的抗抑郁药效及作用机制。方法 采用两种药物对慢性不可预知应激（CUMS）动物模型进行干预,观察大鼠的行为学变化;同时采集尿液,进行GC-MS代谢组学分析,并寻找生物标志物。结果 行为学数据显示,与模型组相比,文拉法辛和氟西汀组在行为学指标上均有显著性差异（P<0.05）,显示出抗抑郁作用。代谢组学分析结果显示,散点图中文拉法辛距离正常对照组较近,其抗抑郁效果较优,通过正常对照与模型组的载荷图寻找出了CUMS抑郁模型的15个潜在生物标志物,文拉法辛所能回调的标志物较氟西汀多。结论 两种药物都有明显的抗抑郁效果,且文拉法辛效果较优;运用代谢组学技术分析了两种药物对抑郁症有关标志物的回归调节作用并对其机制进行了初步比较研究,为药物药效的评价提供了新思路和新方法。     

β-细辛醚对慢性不可预见性轻度刺激小鼠模型的行为学和单胺类神经递质的影响

目的探讨β-细辛醚对慢性不可预见性轻度刺激小鼠模型的抗抑郁作用及其机制。方法小鼠随机分为正常组,模型组,β-细辛醚低、中、高剂量组(7.5、15、30mg/kg),氟西汀组(8 mg/kg),边造模边给药3周,通过糖水偏爱实验、强迫游泳实验、旷场实验进行行为学观察,用高效液相荧光检测法检测小鼠中脑和纹状体单胺类神经递质及其代谢产物(5-HT、5-HIAA、DA、DOPAC、HVA、NE)的含量。结果与模型组比较,β-细辛醚中、高剂量组和氟西汀组的糖水偏爱百分比明显增加(P0.05或P0.01)、游泳不动时间明显减少(P0.05),且β-细辛醚中、高剂量组和氟西汀组显著增加中脑、纹状体中5-HT、5-HIAA、DA的含量(P0.05或P0.01)。结论通过3周的慢性不可预见性轻度刺激成功建立了小鼠抑郁模型,β-细辛醚具有一定的抗抑郁作用,其机制可能与β-细辛醚能增加中脑和纹状体中5-HT、5-HIAA、DA的含量有关。     

静顺汤对抑郁模型大鼠行为学及海马单胺神经递质水平的影响

目的:探究静顺汤对慢性不可预知温和刺激(CUMS)联合孤养致抑郁模型大鼠的行为学及海马单胺神经递质水平的影响。方法:将30只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、柴芩温胆汤组、静顺汤组。除空白组外,其余各组大鼠进行孤养,并接受CUMS刺激方式造模。造模同时给药,42 d后,采用糖水偏好实验观察大鼠的行为学变化;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠海马去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)及代谢产物的含量。结果:与模型组比较,氟西汀组、柴芩温胆汤组、静顺汤组大鼠的糖水偏好指数均明显升高(P<0.01);与模型组比较,静顺汤组大鼠海马NE、5-HT含量明显升高(P<0.01)。结论:静顺汤能改善抑郁模型大鼠抑郁样行为,其发挥抗抑郁作用可能与升高海马NE、5-HT有关。     

百事乐胶囊对慢性应激抑郁小鼠神经因子表达的影响

目的:探讨百事乐胶囊对慢性应激抑郁小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响.方法:将40只小鼠随机分为正常组、模型组、百事乐组和氟西汀组.除正常组外,均给予21d慢性不可预知的应激造模.造模前分别给予蒸馏水、百事乐和氟西汀治疗.使用免疫组织化学法观察其脑组织BDNF、NGF的阳性表达情况.结果:模型组小鼠脑组织中BDNF、NGF阳性表达低于正常组(P＜0.05或P＜0.01);百事乐组脑内BDNF、NGF的阳性表达均明显高于模型组(P＜0.01),但与正常组及氟西汀组比较差异不显著(P＞0.05).结论:百事乐胶囊对慢性应激抑郁小鼠的作用可能与上调脑内BDNF、NGF的阳性表达有关.     

冠心Ⅱ号对抑郁联合高脂大鼠行为及海马BDNF的影响

目的:探讨冠心Ⅱ号(GXⅡ)对抑郁联合高脂大鼠模型的抗抑郁作用及可能的机制。方法:慢性不可预见性温和应激(CUMS)联合孤养造模方法诱导抑郁模型,CUMS联合孤养和高脂饮食诱导抑郁高脂模型。将Wistar大鼠按随机数字表法分为抑郁氟西汀组、抑郁GXⅡ组、抑郁模型组、抑郁高脂氟西汀组、抑郁高脂GXⅡ组、抑郁高脂模型组和空白对照7组,各组分别给予相应药物灌胃连续15 d。HE染色观察胸主动脉及大脑中动脉的病理变化,旷场实验、强迫游泳实验评估行为学变化,Western blot测定海马脑源性神经营养因子(BDNF)含量。结果:抑郁高脂GXⅡ组能改善胸主动脉及大脑中动脉粥样硬化,抑郁氟西汀组、抑郁GXⅡ组、抑郁高脂氟西汀组、抑郁高脂GXⅡ组旷场实验活动总距离增加,强迫游泳不动时间缩短,海马BDNF含量提高。结论:GXⅡ对心脑动脉具有抗动脉粥样硬化的保护作用,同时具有抗抑郁样作用,其机制可能与上调海马BDNF表达相关。本研究体现了中医学"脑心同治",可能为治疗抑郁症合并冠心病患者提供临床用药参考。     

青阳参总苷对慢性不可预知轻度应激大鼠的抗抑郁作用

目的:本研究评价了青阳参总苷(QYS)在慢性不可预知轻度应激(CUMS)大鼠模型上的抗抑郁活性,并通过研究其对大鼠脑内单胺神经递质浓度的影响探讨QYS的作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、氟西汀组和QYS低、中、高剂量组(0.625,2.5,10 mg·kg-1),每组9只。随机给予21 d不可预知刺激建立抑郁症模型,建模同时ig给予相应药物。造模结束后,采用旷场实验观察QYS对大鼠自主活动的影响,采用悬尾实验、强迫游泳实验观察QYS的抗抑郁作用,采用高效液相-电化学检测法测定大鼠脑内单胺递质去甲肾上腺素(NE),5-羟色胺(5-HT)及多巴胺(DA)的浓度。结果:与正常组比较,模型组大鼠悬尾时间及大鼠强迫游泳的不动时间明显延长,自主活动时间明显减少;大鼠脑内额叶皮层中NE,5-HT及DA的浓度明显降低,均具有明显的统计学差异(P0.05,P0.01);与模型组比较,QYS(0.625,2.5,10mg·kg-1)能够显著缩短模型大鼠悬尾实验中的不动时间,QYS高剂量组显著缩短模型组大鼠强迫游泳实验中的不动时间,QYS在旷场实验中对模型组大鼠的自主活动无明显影响,QYS高剂量组显著升高模型组大鼠脑内额叶皮层中NE,5-HT及DA的浓度。结论:QYS高剂量对模型抑郁大鼠具有良好的抗抑郁活性,其抗抑郁作用机制可能是QYS提高了模型大鼠脑内额叶皮层NE及5-HT水平。     

橙皮苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及HPA轴的影响

目的:观察橙皮苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响.方法:采用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)制备大鼠抑郁模型,60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、橙皮苷(40,80,160 mg· kg-1)组及阳性药氟西汀(10mg.kg-1)组.连续灌胃给药3周,糖水偏爱实验和强迫游泳实验测定动物行为学,检测血清皮质酮(CORT)、肾上腺指数、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRF) mRNA以及下丘脑室旁核糖皮质激素受体(GR)蛋白,探讨橙皮苷的抗抑郁作用及机制.结果:与模型组相比,橙皮苷(40,80,160 mg·kg-1)治疗组大鼠的糖水消耗量均明显增加、强迫游泳不动时间有不同程度的减少.同时,橙皮苷能逆转CUMS大鼠过高的血清CORT水平和肾上腺指数,并能抑制CUMS大鼠下丘脑CRF mRNA表达、上调室旁核GR蛋白表达.结论:橙皮苷能有效改善CUMS大鼠行为学,表现出抗抑郁作用,其机制可能与调节HPA轴的功能有关.     

玉郎伞多糖对慢性应激抑郁小鼠行为学及海马结构的影响

目的:观察玉郎伞多糖(YLSPA)对慢性应激抑郁小鼠行为学及海马结构的影响。方法:50只昆明种小鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、氟西汀20 mg·kg-1组和YLSPA 1 200,600 mg·kg-1高、低剂量组,连续灌胃21 d,同期利用慢性不可预知温和应激加孤养模型建立小鼠抑郁症模型。采用蔗糖水消耗实验和小鼠自主活动记录仪进行行为学测定;采用脑组织切片HE染色观察海马结构的改变。结果:实验第22天,模型组小鼠的体重、活动站立次数、糖水偏爱度明显减少(与正常对照组比较,P<0.01或P<0.05),YLSPA高、低剂量组、氟西汀组均较模型组有所增加(P<0.01或P<0.05);观察HE染色切片可见慢性应激引起海马结构发生改变,细胞数量减少,玉郎伞多糖和氟西汀可对抗这种改变。结论:YLSPA具有抗抑郁作用,能改善慢性应激对小鼠海马神经元细胞的损伤。     

基于代谢组学方法的姜黄素抗抑郁作用生物标志物初步筛查

该文运用代谢组学的技术手段寻找与姜黄素干预抑郁模型大鼠相关的潜在标志物,从而探究姜黄素用于抗抑郁的作用机制。选取健康雄性SD大鼠随机分成4组,采用慢性不可预知温和应激(CUMS)刺激造模,造模2周后灌胃姜黄素(200mg·kg~(-1))、文拉法辛(40 mg·kg~(-1))、空白组和模型组同时灌等体积的1%CMCNa生理盐水,每天1次,连续2周。采集大鼠血清并采用LC/MS-IT-TOF方法对各组血清代谢差异进行表征,利用多元统计分析方法筛选出可能的潜在生物标志物并分析其可能的代谢通路。在分别给予姜黄素和文拉法辛后,CUMS模型组大鼠的抑郁各项指标均有显著性改善(P0.05),但姜黄素和文拉法辛组之间则无明显差异;通过PCA和PLS-DA分析,经姜黄素或文拉法辛干预后,CUMS模型组大鼠体内的小分子代谢物水平体现出恢复正常的趋势,而且姜黄素组尤为明显;通过代谢组学技术手段,从中筛选得到11个与姜黄素抗抑郁功效相关的生物标志物,同时涉及到7条代谢通路。研究表明姜黄素具有确切的抗抑郁作用,其在宏观和微观层面均有体现,可与阳性药物文拉法辛相比;姜黄素在体内可能是通过影响甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、戊糖和葡萄糖醛酸酯互变及醚脂类代谢等发挥抗抑郁功效,今后还需进一步探索。     

基于1H-NMR代谢组学探讨柴胡-白芍药对“疏肝解郁”的代谢调控途径

目的:利用核磁共振氢谱(~1H-NMR)代谢组学技术,分析慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型大鼠肝脏内源性代谢物的变化,观察柴胡-白芍药对对此的调节作用,分析柴胡-白芍药对疏肝解郁相关的代谢通路。方法:将SD大鼠随机分为对照组、CUMS模型组、阳性药文拉法辛组和柴胡-白芍药对高(CBH)、低(CBL)剂量组。通过抑郁症的传统药效学指标(大鼠体质量、旷场测试、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴胡-白芍药对的药效。采用~1H-NMR代谢组学技术结合多元统计分析方法,分析CBH、CBL组大鼠肝脏代谢物的变化,鉴定可靠的生物标志物并进行代谢通路分析。结果:与对照组比较,模型组大鼠药效学指标均有显著变化,即体质量,旷场穿越格数、直立次数,糖水偏爱率降低(P0.001)及强迫游泳不动时间增加(P0.001);柴胡-白芍药对能显著改善模型组大鼠的抑郁样行为。~1H-NMR代谢组学分析显示,CUMS会使大鼠体内24个代谢物和10条代谢通路紊乱,柴胡-白芍药对能显著回调其中的21个差异代谢物,对其中7条代谢通路产生影响。结论:柴胡-白芍药对能够改善CUMS抑郁模型大鼠的抑郁样症状,可能是通过调节大鼠体内氨基酸代谢和能量代谢等通路实现的。     

陈皮提取物改善慢性温和不可预知应激小鼠行为和海马BDNF的研究

目的:探讨陈皮提取物对慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁模型小鼠的行为和对脑源性神经营养因子(BDNF)表达水平的影响。方法:ICR小鼠根据糖水偏好百分比随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照盐酸氟西汀20 mg·kg-1组及陈皮提取物100,200,400 mg·kg-1组;除空白对照组外,各组均接受CUMS,造模28 d后开始灌胃给药;各组连续给药28 d后,糖水偏好实验测定糖水偏好百分比、新奇抑制摄食实验测定摄食潜伏期、强迫游泳实验测定不动时间;荧光实时定量PCR和ELISA法测定大脑海马BDNF含量。结果:慢性应激后,模型对照组小鼠糖水偏好百分比减少,摄食潜伏期延长,不动时间增多,海马BDNF含量显著降低;与模型对照组比较,陈皮提取物组能显著改善抑郁小鼠行为学指标,显著提高小鼠海马BDNF含量。结论:陈皮提取物对CUMS模型小鼠有抗抑郁作用,其机制可能与增加海马BDNF有关。     

基于1H-NMR代谢组学的豨莶草水洗脱部位致大鼠肺损伤作用机制分析

目的:应用代谢组学分析豨莶草水洗脱部位(SWES)致大鼠血清和肺脏中内源性代谢产物的动态变化,探讨其造成肺损伤的可能作用机制,寻找肺损伤的敏感标志物。方法:将SD大鼠随机分为3组,即正常组(生理盐水)和SWES高、低剂量组(给药剂量分别为0.500,0.125 g·kg-1·d-1),给药4周,停药2周,检测大鼠体质量,并对肺脏组织进行病理学检查。采用血清和肺脏样本进行核磁共振氢谱(1H-NMR)检测,运用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对大鼠体内代谢产物的变化进行分析。结果:SWES高剂量组大鼠出现肺脏炎症,停药2周后呈可逆性改变。SWES高剂量组与正常组代谢谱差异区分显著。血清和肺脏中共鉴定出11个差异性代谢产物,其中血清4个(乙酸、氧化三甲胺、甘氨酸、肌肉肌醇),肺脏9个(乳酸、乙酸、磷脂酰胆碱、丙酮酸、二甲胺、谷氨酸、甘油磷酸胆碱、甘氨酸、黄嘌呤)。肺损伤涉及丙酮酸代谢、谷氨酸代谢等通路的紊乱。停药后肺脏中大多数差异代谢产物水平显著回调,与病理检测相一致。结论:SWES造成的损伤器官之一为肺脏,肺损伤呈可逆性改变,肺损伤机制与能量代谢和氧化应激反应有关。     

天麻乙酸乙酯提取物对行为绝望小鼠的抗抑郁作用

目的:研究天麻乙酸乙酯提取物(EtoAc extracts of Gastrodia elata,EEG)的抗抑郁作用.方法:雄性小鼠随机分为空白对照组,氟西汀组(20 mg·kg-1),氯丙咪嗪组(20 mg·kg-1),EEG低、高剂量组(0.063,0.126 g·kg-1),每组连续ig给药7d后,观察小鼠在悬尾实验(tail suspension test,TST),强迫游泳实验(forced swimming test,FST)中不动时间的变化情况以及小鼠在开场实验中自主活动的变化情况.结果:EEG高剂量(0.126 g·kg-1)能明显缩短小鼠悬尾不动时间,EEG高、低剂量(0.126,0.063 g·kg-1)均能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间.EEG高、低剂量对小鼠在开场实验中的自主活动次数没有明显影响.结论:天麻乙酸乙酯提取物对“行为绝望”小鼠有抗抑郁作用.