慢性温和不可预知应激抑郁模型大鼠脑组织1H-NMR代谢组学研究

目的 采用高分辨核磁共振¹H谱（¹H-NMR）代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激（CUMS）抑郁大鼠脑组织中代谢物及代谢通路的变化，探讨抑郁症的发病机制。方法 12只雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组，采用CUMS对模型组大鼠进行为期4周的造模，进行称体质量、旷场实验和糖水偏爱实验验证模型是否成功，造模结束后收集大鼠脑组织。采用两相提取法（甲醇/氯仿/水）对脑组织进行提取，得到水溶性和脂溶性代谢物。应用¹H-NMR技术结合多元统计和代谢通路分析筛选出与抑郁相关的脑内差异代谢物，并构建其代谢通路。结果 行为学数据显示，与对照组比较，模型组大鼠的体质量、糖水偏爱率、旷场的穿格数和直立次数均显著降低（P<0.05），显示了抑郁状态。在大鼠脑组织的¹H-NMR图谱中共指认出35种内源性代谢产物。脑组织中水溶性和脂溶性代谢物主成分分析（PCA）均显示模型组与对照组分开，与行为学结果一致，表明造模成功；OPLS-DA分析找到9个水溶性差异代谢物和6个脂溶性差异代谢物。就水溶性代谢物而言，与对照组比较，模型组中肌酐、谷氨酰胺、牛磺酸和γ-氨基丁酸含量显著增加（P<0.05、0.01、0.001），丙二醇、谷氨酸、亮氨酸、缬氨酸和赖氨酸含量显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。就脂溶性代谢物而言，与对照组比较，模型组-（CH₂） n和-N （Me₃）₃含量显著升高（P<0.05、0.001），胆固醇的C18/19甲基、R-CH₃、CH₂OPO₂-、-CH=CH-含量显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。与对照组比较，CUMS造模后5条代谢通路发生显著变化：缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成，牛磺酸和亚硫磺酸代谢，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，糖降解和糖异生通路和丙酮酸代谢。结论 运用¹H-NMR代谢组学技术结合多元统计分析和代谢通路分析，阐明抑郁症的发病机制与能量代谢、氨基酸代谢和神经递质合成等相关。     

红北柴胡药效作用初探

目的:比较研究北柴胡和红柴胡在解热、抗炎、镇痛及保肝等方面药效作用间的差异。方法:wistar大鼠和昆明种小鼠随即分为5组正常组、模型组、北柴胡组、红柴胡组和阳性对照组,分别采用大鼠2,4-二硝基苯酚致热实验、小鼠光热法致尾痛实验、小鼠腹腔毛细血管通透性实验及四氯化碳所致小鼠急性肝损伤实验进行药效评价与验证。结果:结果表明,北柴胡的抗炎、镇痛作用比红柴胡好,而红柴胡的解热作用优于北柴胡。结论:中药的品种对其疗效会产生很重要的影响,建议在临床用药时北柴胡和红柴胡不可混用,应注明其品种,以确保中药疗效的稳定性。     

基于HPLC指纹图谱多软件分析的山西远志药材质量均一性评价

目的建立山西远志药材高效液相色谱指纹图谱的分析方法,为有效控制远志药材的质量奠定基础。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱,检测波长为318 nm,流速为1.0 ml/min,分析时间为80 min,分析10批山西远志药材的HPLC指纹图谱,并采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"、SPSS软件和SIMCA软件进行相似度分析、聚类分析和主成分分析。结果方法学考察实验表明所建立的指纹图谱方法稳定性、精密度和重现性均良好。山西不同来源的远志药材相似度大于0.8,聚类分析和主成分分析结果一致。结论山西远志药材的化学组成一致性较好,质量稳定。所建立的远志药材指纹图谱方法灵敏、稳定,可操作性强。     

基于功能药队分析策略和粗糙集理论的逍遥散改善大鼠抑郁样行为的配伍规律研究

目的 研究逍遥散及其功能药队（疏肝药队、健脾药队）改善抑郁大鼠行为学药效作用，并运用粗糙集理论和决策规则模型分析功能药队间的相互作用及其对逍遥散抗抑郁药效的影响，为科学阐释逍遥散抗抑郁配伍规律提供研究方法和理论依据。方法 采用慢性温和不可预知应激（CUMS）建立大鼠抑郁模型，考察逍遥散及其功能药队对CUMS大鼠在旷场实验、糖水偏爱和强迫游泳中的影响。运用Rosetta软件建立粗糙集的决策规则模型，通过决策规则分析疏肝药、健脾药和逍遥散与其抗抑郁药效之间的相互作用。结果 逍遥散及其功能药队可显著改善CUMS大鼠的抑郁行为。与模型组大鼠相比，逍遥散及其功能药队能显著增加旷场实验中大鼠的穿越格数和直立次数（P<0.05、0.01）；显著升高糖水偏爱率（P<0.05、0.01）；显著降低强迫游泳的不动时间（P<0.05、0.01）；改善糖水偏爱率作用：逍遥散 > 健脾组 > 疏肝组；旷场实验直立次数和穿越格数：疏肝组 > 健脾组 > 逍遥散；强迫游泳指标：逍遥散＝疏肝组>健脾组。决策规则分析结果显示，疏肝药和健脾药单独使用时的药效均没有逍遥散全方药效强；疏肝药和健脾药具有协同抗抑郁的作用，且具有剂量相关性，剂量越高，协同抗抑郁药效越强。为进一步验证疏肝药和健脾药之间的相互关系及其对抗抑郁药效的影响，根据逍遥散单味药决策表对逍遥散中8味药进行属性约简，分别得到疏肝和健脾功能药队的代表性药物柴胡和白芍。决策规则分析结果与上述药队分析结果一致。结论 逍遥散及其功能药队可显著改善CUMS抑郁大鼠旷场、糖水等核心症状，表现出抗抑郁作用。逍遥散整方作用优于其功能药队，表明其配伍精当、组方合理。基于粗糙集理论的决策规则分析方法是科学阐释中药复方配伍规律的有效策略之一。     

逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的网络药理学机制研究

目的 运用网络药理学技术探讨逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的作用机制。方法 通过TCMSP、PubChem、OMIM、GeneCards以及UniProt等数据库获得逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的作用靶点；利用STRING网站得到蛋白互作网络；并通过Metascape网站对潜在作用靶点进行富集分析；使用Cytoscape软件绘制“靶点-成分-通路”可视化网络图。结果 逍遥散主要通过芍药苷、刺槐素、儿茶素、槲皮素等化学成分和文拉法辛联合作用发挥抗抑郁作用。逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的相关靶点共208个，主要为酪氨酸蛋白激酶（SRC）、信号转导和转录激活器3（STAT3）、转录因子AP-1（JUN）、丝裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）等。这些主要靶点作用于糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路（AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications）、癌症通路（pathways in cancer）等43条通路，调节对受损的应答（response to wounding）、对无机物的应答（response to inorganic substance）以及细胞成分运动的正向调节（positive regulation of cellular component movement）、血液循环（blood circulation）和有机羟基化合物代谢过程（organic hydroxy compound metabolic process）等生物学过程发挥抗抑郁作用。结论 逍遥散与文拉法辛联用通过多靶点、多通路发挥抗抑郁作用，利用网络药理学预测中西药联合治疗疾病的作用机制值得深入探讨。     

脑-肠交互视域下抑郁症与胃肠疾病共病的中西药调节及其机制研究进展

抑郁症和胃肠疾病均可影响机体的生物学机能,且二者发病部位相互关联、临床症状双向发展、病理机制互为因果、治疗药物亦可互用。神经系统与免疫机制包括下丘脑-垂体-肾上腺轴传导异常、自主神经系统传输异常、神经递质水平紊乱、炎症因子串扰等。这些因素容易诱发或加重抑郁症,并通过“脑-肠轴”影响胃肠功能。胃肠机制包括肠道菌群紊乱、肠黏膜屏障损伤、肠神经系统异常等,既可促进胃肠疾病的发生、发展,又会影响神经系统功能,进而诱发或加重抑郁症。抗抑郁药物可能影响胃肠功能,亦可用于胃肠疾病的治疗。治疗胃肠疾病药物可能会影响大脑功能,与抗抑郁药物联用可显著提升抗抑郁疗效。“脑-肠交互视阈”理论的提出为有效、安全治疗2类疾病提供了新视角,为“脑肠同治”提供了理论支持,为临床合理用药提供了新方向。     

应激敏感与应激抵抗大鼠粪便代谢组学研究

应用核磁代谢组学技术表征应激敏感大鼠和应激抵抗大鼠的粪便代谢轮廓,明确应激敏感和应激抵抗的生物标志物及代谢通路的异同,阐释相同应激下机体不同反应的发生机制。首先,复制慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)大鼠抑郁模型;根据大鼠的粪便代谢组学轮廓将模型大鼠分为应激敏感大鼠和应激抵抗大鼠;其次,基于糖水偏爱率验证应激敏感大鼠和应激抵抗大鼠的抑郁状况;最后,应用多元统计分析明确应激敏感大鼠和应激抵抗大鼠粪便的生物标志物及相关代谢通路,阐明其机制。结果表明:与空白组相比,应激敏感大鼠的糖水偏爱率显著降低,而应激抵抗大鼠的糖水偏爱率未发生显著变化。代谢组学研究结果发现,应激敏感和应激抵抗具有相同和特异的差异代谢物和代谢途径。3条代谢途径与应激敏感显著相关,包括牛磺酸和亚牛磺酸代谢,丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢以及精氨酸和脯氨酸代谢。甘油酯代谢和色氨酸代谢是应激抵抗的特异性代谢通路。本研究从代谢组学角度探讨了相同刺激下,机体出现敏感和抵抗两种不同状态的机制,为抑郁症的研究提供了新视角,亦为临床个体化和精准治疗以及抗抑郁药物的研发提供...     

基于代谢组学技术应激抑郁动物模型的评价

目的：利用NMR的代谢组学方法比较慢性轻度不可预知应激抑郁模型（CUMS）与慢性束缚应激抑郁模型（CRS）,为抗抑郁中药新药的研究提供模型参考。方法：选用SD雄性大鼠制作CUMS模型与CRS模型,以大鼠旷场行为、体重以及糖水偏爱作为常规指标,并采用代谢组学技术对实验21 d大鼠尿液进行NMR数据采集,运用SPSS,MatLab7.5,SIMCA-P软件对数据进行分析。结果：行为学显示,与正常组相比,CUMS组除水平运动外,各种常规指标差异均有统计学意义（P＜0.05）,CRS组大鼠水平穿越格数、竖立次数和理毛次数等指标直观上都减少,中央格停留时间延长,粪便粒数增加,但是无统计意义（P＞0.05）;NMR代谢组学分析结果显示,散点图中CUMS组与正常组各样品散点比较集中,CRS组点较分散,介于正常与CUMS组之间。CUMS模型和CRS模型共有的标志物有缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、酪氨酸、肌酸,CUMS模型特有标志物为脯氨酸,CRS模型特有标志物为天冬酰胺及精氨酸。结论：行为学及代谢组学均显示CUMS组造模比较成功,CRS组在行为学指标上较差,但运用代谢组学技术显示造模成功,说明代谢组学方法比行为学更灵敏,由于代谢组学技术比常规方法具有灵敏、整体、直观性的优点,因此可用于抑郁模型的筛选。     

HPLC法评价引种栽培柴胡质量研究

目的评价北柴胡引种前后和不同品种柴胡的质量,为北柴胡优良种质的筛选和柴胡资源的合理利用提供基础。方法采用HPLC柱前酸化法测定北柴胡引种前后和不同品种药材中柴胡皂苷a、d的含量。结果柴胡皂苷a、d含量在北柴胡引种前后有差异,其中甘肃陇西种、山西陵川外引种引种后皂苷含量依然能保持较高水平,可作为优良种质资源;纬度对皂苷含量的积累影响较大：将药材从高纬度引到较低纬度,皂苷含量升高;山西太谷和陵川种植地药材中皂苷含量均较高,表明两者的环境因素有利于皂苷的积累,可作为适宜种植地;北柴胡中皂苷a、d含量高于红柴胡。结论北柴胡皂苷a、d的积累受药材遗传因素和生长环境的共同影响,引种时应首选优质资源,同时进行种植地适应性考察,以保证药材质量;红、北柴胡在临床应用时,应注明其品种,确保药效的稳定性。     

HPLC柱前酸化法测定柴胡中柴胡皂苷a和d的条件优化研究

目的 优选HPLC柱前酸化法测定柴胡中柴胡皂苷a、d的酸化条件,通过对相关分析方法的评价,筛选优化的测定方法。方法 采用单因素及正交试验优选柴胡皂苷a、d前处理的酸化条件和最佳提取条件,并对相关分析方法进行比较。结果 优选柴胡皂苷a、d的前处理酸化条件为：8%盐酸,30 ℃反应18 h,反应结束用8% KOH溶液调pH至中性;样品最佳提取条件为：取药材粉末0.5 g,加8%氨甲醇溶液25 mL,超声提取3次,每次45 min;与相关文献方法比较表明本方法灵敏度高、分离度好、色谱图杂质峰较小、目标峰面积较大。结论 本实验建立的定量测定方法优于相关文献报道的其他方法,可作为柴胡质量控制的方法。