三聚氰胺污染饲料致大鼠肾毒性的代谢组学研究

目的探讨三聚氰胺污染饲料致大鼠尿液和肾脏组织内源性代谢产物的变化,寻找三聚氰胺污染饲料致大鼠肾毒性的差异代谢物。方法大鼠喂食三聚氰胺污染饲料20 d后,通过光学显微镜观察大鼠肾脏组织病理变化,并采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析手段对正常对照组和三聚氰胺组大鼠尿液和肾脏组织的代谢物进行分析。利用代谢组学分析软件SIMCA-P+11对大鼠尿液和肾脏组织采集的GC-MS数据进行多元统计分析。结果与正常对照组相比,三聚氰胺组大鼠肾脏组织部分纤维化,有大量尿酸盐结晶,可见颗粒管形病变。正常对照组和三聚氰胺组大鼠尿液和肾脏组织样品在主成分分析(PCA)中得到了很好的分离,并通过偏最小二乘判别分析(PLS-DA)指认引起差异的特征代谢物。与正常对照组相比,三聚氰胺组大鼠肾脏组织中丙氨酸显著上升;缬氨酸和乙醇胺等明显下降;尿液中乳酸显著上升,而半胱氨酸和尿嘧啶等明显下降。结论三聚氰胺污染饲料引起大鼠明显的肾毒性,尿液中有17种物质,肾脏组织中有11种物质被判定为可能特征代谢物。     

基于气质联用的款冬花蕾动态发育代谢组学特征分析

目的:采用气相色谱-质谱法(GG-MS)结合代谢组学分析技术明确不同发育阶段款冬花蕾的代谢组学特征.方法:对款冬花5个不同发育阶段药材进行两相溶剂提取,得到极性和非极性部分,分别对其进行GC-MS测定.代谢产物的结构指认通过NIST数据库检索和对照品对照确定,将数据预处理后导入SIMCA-P软件进行多元统计分析.结果:共鉴定了54个代谢产物,包括35个极性化合物和19个非极性化合物;主成分分析(PCA)结果显示,5个阶段的款冬花蕾样品能较为明显的分开,且呈动态变化趋势;与传统采收期12月样品相比,10月和11月的花蕾样品与12月相距较近,说明这3个阶段的代谢物组成接近;而9月和3月的样品则距离较远,说明这2个时间点的样品化学差异较大.通过对部分特征代谢物相对含量进行比较,发现款冬花蕾发育过程中,脯氨酸、赖氨酸和亚油酸在发育初期含量较低,中期升至最高,在开花后又急剧下降;苹果酸和柠檬酸在中期含量较低;蔗糖的含量逐渐降低,开花后降至最低.结论:发育初期和开花后与传统采收期款冬花样品的化学差异较大,为其不能入药提供了科学依据,也为款冬花合理采收期的确定及其药效物质基础研究奠定了基础.     

基于植物代谢组学技术的远志不同炮制品质量控制研究

目的运用基于1H-NMR和UPLC的植物代谢组学技术对生远志、蜜远志及甘草制远志进行代谢组学分析。方法首先采用基于1H-NMR及UPLC代谢组学技术对生远志及两种炮制品进行分析,指认初级代谢产物21种,次级代谢产物8种,并采用UPLC技术测定三者中细叶远志皂苷的量。结果生远志与蜜远志、甘草制远志化学成分明显不同;与蜜远志相比,生远志与甘草制远志化学成分更加接近;三者中部分氨基酸、有机酸及糖类等的量变化较大;与生远志相比,蜜远志中总皂苷量几乎不变,甘草制远志则有所上升;糖酯类化合物3,6′-二芥子酰基糖酯在甘草制远志中其量降低,蜜远志中最低,同时部分次级代谢产物的量也有所不同。结论从代谢组学整体角度来看,生远志及其蜜制、甘草制品化学成分差异明显,说明炮制可改变药性,导致其功效可能各有不同。     

潞党参极性和非极性成分HPLC指纹图谱研究

目的研究并建立潞党参药材极性和非极性成分HPLC指纹图谱,为党参质量控制提供依据。方法采用HPLC-UV法分别建立潞党药材中极性和非极性成分指纹图谱,色谱条件为:Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);检测波长分别为266 nm和230 nm;流动相:乙腈-水,分别进行梯度洗脱,对山西不同产地潞党参药材进行分析。结果潞党参药材非极性部分指纹图谱有9个共有峰,极性部分指纹图谱有13个共有峰,山西不同产地潞党参极性和非极性指纹图谱相似度较高(>0.87)。结论本文所建立的潞党参药材的HPLC指纹图谱方法简便、准确、重现性好,可作为党参药材质量均一性评价的基础。     

基于植物代谢组学技术的远志不同炮制品质量控制研究

目的 运用基于¹H-NMR和UPLC的植物代谢组学技术对生远志、蜜远志及甘草制远志进行代谢组学分析。方法 首先采用基于¹H-NMR及UPLC代谢组学技术对生远志及两种炮制品进行分析,指认初级代谢产物21种,次级代谢产物8种,并采用UPLC技术测定三者中细叶远志皂苷的量。结果 生远志与蜜远志、甘草制远志化学成分明显不同;与蜜远志相比,生远志与甘草制远志化学成分更加接近;三者中部分氨基酸、有机酸及糖类等的量变化较大;与生远志相比,蜜远志中总皂苷量几乎不变,甘草制远志则有所上升;糖酯类化合物3, 6′-二芥子酰基糖酯在甘草制远志中其量降低,蜜远志中最低,同时部分次级代谢产物的量也有所不同。结论 从代谢组学整体角度来看,生远志及其蜜制、甘草制品化学成分差异明显,说明炮制可改变药性,导致其功效可能各有不同。     

文拉法辛和氟西汀抗抑郁作用机制和药效特点的代谢组学研究

目的 采用代谢组学技术比较并评价文拉法辛和氟西汀两种药物的抗抑郁药效及作用机制。方法 采用两种药物对慢性不可预知应激（CUMS）动物模型进行干预,观察大鼠的行为学变化;同时采集尿液,进行GC-MS代谢组学分析,并寻找生物标志物。结果 行为学数据显示,与模型组相比,文拉法辛和氟西汀组在行为学指标上均有显著性差异（P<0.05）,显示出抗抑郁作用。代谢组学分析结果显示,散点图中文拉法辛距离正常对照组较近,其抗抑郁效果较优,通过正常对照与模型组的载荷图寻找出了CUMS抑郁模型的15个潜在生物标志物,文拉法辛所能回调的标志物较氟西汀多。结论 两种药物都有明显的抗抑郁效果,且文拉法辛效果较优;运用代谢组学技术分析了两种药物对抑郁症有关标志物的回归调节作用并对其机制进行了初步比较研究,为药物药效的评价提供了新思路和新方法。