熟地泽泻药对配比改变对庆大霉素耳毒性离体细胞模型的作用比较

目的：观察熟地（radix rehmanniae preparata）与泽泻（Rhizoma Alismatis）组成的药对在不同剂量配比下对庆大霉素（GM）损伤毛细胞的不同保护作用,寻找其最佳剂量配比。方法：复制内耳螺旋器体外培养GM损伤模型,参照基线等比增减设计,对熟地、泽泻设8个剂量配比组,通过耳蜗毛细胞计数观察不同剂量配比下熟地、泽泻对GM损伤耳蜗内、外毛细胞损失率的影响。结果：全耳蜗计数结果显示,熟地泽泻在8∶3、8∶8、0∶3、0∶8配比下,外毛细胞损失率在全耳蜗范围内较GM模型组有明显下降（P〈0.01）。其他配比组与模型组无统计学差异。结论：熟地泽泻在不同配比下对毛细胞损失率的影响呈现出一种非线性的量效关系,原方配比（8∶3）及其他配比（8∶8、0∶3、0∶8）属最佳配比。     

耳聋左慈丸对老年性耳聋小鼠耳蜗组织cAMP含量及PKA表达的影响

目的:通过研究耳聋左慈丸对老年性耳聋小鼠耳蜗组织cAMP含量及PKA表达的影响,探讨老年性耳聋的治疗机制。方法:选取75只耳廓反应灵敏的雄性清洁级昆明小鼠,随机抽取15只作为空白对照组,腹腔注射生理盐水。剩余60只进行老年性耳聋小鼠造模,腹腔注射D-半乳糖(150 mg/kg),每日1次,共60 d。造模成功后将老年性耳聋模型小鼠随机分为模型组、耳聋左慈丸低、中、高剂量组。空白对照组和模型组给予生理盐水灌服,耳聋左慈丸低、中、高剂量组给予耳聋左慈丸(0.3、0.6、1.2 g/kg)灌服,每日1次,共14 d。运用耳蜗基底膜铺片技术观察小鼠耳蜗毛细胞形态学变化;采用ELISA法检测耳蜗组织中cAMP含量;用免疫组织化学技术检测PKA的蛋白表达水平;用RT-PCR技术检测PKA mRNA表达水平。结果:与空白对照组相比,模型组小鼠耳蜗基底膜毛细胞明显缺失或散乱,cAMP含量及PKA蛋白和mRNA表达明显下降;与模型组相比,经过耳聋左慈丸治疗的小鼠耳蜗毛细胞排列较整齐,cAMP含量及PKA蛋白和mRNA表达升高,其中高剂量组变化最为明显。结论:耳聋左慈丸可以通过调节耳蜗组织中cAMP含量及PKA的表达水平发挥其对老年性耳聋的治疗作用。     

耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠耳蜗组织水通道蛋白4表达的影响

目的观察耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠耳蜗组织水通道蛋白4(AQP4)表达的影响,探讨其作用机制。方法除正常组对照组外,其他小鼠采用腹腔注射氢化可的松方法复制肾虚小鼠模型,造模成功后,随机分为模型组、中药组,每组16只。中药组予耳聋左慈丸水煎液灌胃,模型组和正常对照组予生理盐水灌胃,共22 d。运用耳蜗铺片技术观察小鼠耳蜗内、外毛细胞与支持细胞的形态学变化;采用免疫组化法、Western blot检测耳蜗组织AQP4蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠耳蜗内、外毛细胞和支持细胞缺失或散乱;与模型组比较,中药组耳蜗内、外毛细胞和支持细胞排列较整齐,边界尚清楚;小鼠耳蜗组织AQP4蛋白表达结果显示,与模型组比较,中药组AQP4蛋白表达增强(P0.01),中药组与正常对照组AQP4蛋白表达无显著差异。结论耳聋左慈丸可能通过上调耳蜗组织AQP4蛋白表达,达到治疗肾虚小鼠耳聋的作用。     

耳聋左慈丸及有效拆方拮抗庆大霉素诱导毛细胞凋亡的实验研究

目的:探讨耳聋左慈丸及其有效拆方(熟地黄泽泻药对、泽泻单味药)对庆大霉素诱导内耳听毛细胞凋亡相关蛋白及酶活性变化的影响。方法:复制内耳螺旋器体外培养庆大霉素损伤模型,采用原位荧光标记及免疫荧光标记观察庆大霉素损伤毛细胞区域凋亡酶Caspases活性、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达量的改变及中药的影响。结果:与正常对照组比较,0.3mmol.L-1庆大霉素能够引起内耳毛细胞Caspase-3,Caspase-9酶活性明显增强,凋亡调节因子Bcl-2/Bax蛋白表达明显下降。与模型组比较,耳聋左慈丸对Caspase-9酶活性有显著抑制作用,对Caspase-3酶活性有抑制趋势,对Bcl-2/Bax蛋白表达有明显上调作用;熟地黄泽泻药对、泽泻单味均能明显抑制Caspase-3,Caspase-9酶活性,显著上调Bcl-2/Bax蛋白表达。结论:耳聋左慈丸、熟地黄泽泻药对及泽泻单味可能通过纠正线粒体凋亡信号转导途径的异常变化,拮抗庆大霉素对毛细胞的损伤。     

耳聋左慈丸对大鼠年龄相关性听力减退的干预作用及对耳蜗组织SOD、MDA水平的影响

目的：探讨耳聋左慈丸对年龄相关性听力减退模型大鼠听力阈值及耳蜗组织中SOD、MDA表达水平的影响。方法：将2～3月龄Wistar大鼠90只，随机分为正常对照组，模型组，耳聋左慈丸低、中及高剂量组。比较观察五组大鼠的听力阈值水平、病理改变及血清中的SOD、MDA含量。结果：各组大鼠的听力阈值水平、病理改变及血清中的SOD、MDA的组间差异均存在统计学意义（P<0.01）。结论：耳聋左慈丸能够减轻老年性聋模型大鼠耳蜗组织病理损害，改善氧化应激水平。     

金匮肾气丸对药物性聋豚鼠耳蜗凋亡蛋白caspase-3的影响

目的:观察补肾方金匮肾气丸对庆大霉素(GM)中毒性聋豚鼠耳蜗凋亡蛋白caspase-3的影响。方法:将30只健康级白色红目豚鼠,雌雄各半,随机分为3组。正常对照组(n=10):普通饲料喂养;模型组(n=10):每日肌肉注射庆大霉素120mg/kg,连续10天造成耳聋模型;中药干预组(n=10):在模型组的基础上,以药量为20.3g/kg·天的金匮肾气丸制剂灌胃,连续10天。免疫组化法检测各组耳蜗毛细胞平均光密度值并比较。结果:模型组和中药干预组豚鼠耳蜗毛细胞平均光密度较正常组有明显差异(P0.01),中药干预组和模型组比较也有明显差异(P0.01)。结论:金匮肾气丸可通过抑制caspase-3的表达,而减轻GM的耳毒性反应,起到保护听功能的作用。     

健脾补肾活血利水法治疗原发性肾小球肾炎临床观察

目的观察健脾补肾活血利水法治疗原发性肾小球肾炎的临床疗效。方法将74例患者随机分为治疗组和对照组，治疗组服用以补肾健脾、活血利水法为治疗原则组成的基本方，对照组予肾炎舒颗粒，3个月为1个疗程。结果治疗组总有效率为89．5％；对照组总有效率为60％，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论健脾补肾活血利水法可有效用于治疗原发性肾小球肾炎。     

豁痰祛瘀法联合针灸治疗耳鸣疗效验证性研究

目的：对已知临床有效方法“针药结合治疗耳鸣治疗方案”的实效性进行验证性研究。方法：90例耳鸣患者随机分为中药加针刺组和对照组,2组分别采用豁痰祛瘀法联合针灸和耳聋左慈丸治疗。结果：中药加针刺组总体疗效优于对照组,具有极显著差异（P〈0．01）。结论：豁痰祛瘀法联合针灸治疗耳鸣疗效确切。     

金匮肾气丸对耳聋豚鼠血清SOD、MDA的影响

目的：探讨补肾方金匮肾气丸对耳聋豚鼠血清SOD、MDA的影响。方法：30只豚鼠随机分为正常组、模型组、治疗组3组,庆大霉素制作耳聋模型,治疗组给予金匮肾气丸水煎剂灌服,用药10天后,采血分离血清。检测指标：SOD、MDA含量。结果：豚鼠血清中MDA含量,模型组、治疗组均较正常组有显著增加（P〈0．01）;与模型组比较,治疗组MDA含量明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。血清中SOD活性,模型组、治疗组均比正常组明显下降（P〈0．01）;治疗组SOD活性较模型组有显著增加,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：金匮肾气丸可以降低试验豚鼠血清MDA表达,并能提高SOD活力,有效清除氧自由基,从而对抗庆大霉素对耳的毒性损伤。     

补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞FSH/cAMP-PKA通路的影响

目的通过补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞卵泡刺激素／环磷酸腺苷-蛋白激酶A（follicle stimulating hormone／cyclic adenosine monophosphate-protein kinaseA,FSH／cAMP-PKA）通路的影响,探讨补肾调经方改善卵巢内分泌功能可能的分子机制。方法收集行体外受精一胚胎移植（In vitro fertilization-embryo transfer,IVF．ET）患者卵泡液,提取颗粒细胞进行原代细胞培养24h,以低、中、高剂量补肾调经方人、大鼠含药血清以及正常人、大鼠血清分别与体外培养的人卵巢颗粒细胞共同孵育48h,分为补肾调经方低、中、高剂量组以及对照组。采用放射免疫方法测定培养液中雌二醇（estrogen,E2）、孕酮（progesterone,P）、环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）的水平,采用蛋白印迹法和Real-timePCR分别检测卵泡刺激素受体（follicle stimulating hormone receptor,FSHR）蛋白和FSHR、P450芳香化酶（P450 aromatase,P450arom）mRNA在颗粒细胞的表达。结果人含药血清组：与对照组比较,补肾调经方中、高剂量组培养液中E2、cAMP水平均明显升高（P〈0．05）,补肾强经方中剂量纽P明显降低（P〈0．01）;补肾调经方中、高剂量组卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA表达均明显增高（P〈0．01）,P450芳香化酶mRNA表达显著升高（P〈0．05,P〈0．01）。大鼠含药血清组：与对照组比较,补肾调经方中、高剂量组E2均升高（P〈0．01）,cAMP明显升高（P〈0．05,P〈0．01）,补肾调经方中剂量组P明显降低（P〈0．01）;补肾调经方中、高剂量组人卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA表达均增高（P〈0．01）,P450芳香化酶mRNA表达明显升高（P〈0．05,P〈0．01）。结论补肾调经方可能通过调节卵巢颗粒细胞FSH／cAMP-PKA通路的主要效应分子FSHR、cAMP、P450arom、E2,促进卵巢颗粒细胞的内分泌功能。     

康欣胶囊及其拆方对肾虚血瘀型大鼠神经细胞的保护作用

目的探讨康欣胶囊全方及其补肾、健脾、养血活血3组拆方对肾虚血瘀型血管性痴呆（VD）大鼠神经细胞的影响。方法采用双侧椎动脉永久性封闭和摘除单侧性器官建立肾虚血瘀型VD模型大鼠,分别给予康欣胶囊全方（全方组）、康欣胶囊补肾方（补肾组）、康欣胶囊健脾方（健脾组）、康欣胶囊养血活血方（养血活血组）、阳性对照药喜得镇（西药组）和蒸馏水（模型组）。结果全方组大鼠空间探索能力显著优于其他组（P〈0.01）;全方组海马神经细胞器及细胞核固缩情况轻于其他各组;全方组能增加海马乙酰胆碱含量（P〈0.01）,提高VD大鼠海马酪氨酸激酶A、核转录因子、原癌基因C-fos、神经生长因子受体的表达（P〈0.01）,降低胶质纤维酸性蛋白的表达（P〈0.05）。结论康欣胶囊全方对肾虚血瘀型血管性痴呆大鼠神经细胞具有保护作用。     

西雅图量表评价血府逐瘀汤及其拆方治疗冠心病稳定性心绞痛的疗效观察

目的 观察西雅图心绞痛量表（西雅图量表）评价血府逐瘀汤及其拆方治疗冠心病稳定性心绞痛的疗效。方法 123例冠心病稳定性心绞痛患者随机分为血府逐瘀组、精制血府逐瘀组、药对组、安慰剂组4组进行干预治疗,采用西雅图量表进行治疗前后疗效评价。结果 血府逐瘀组治疗前后心绞痛稳定状态、心绞痛发作情况、治疗满意程度均较治疗前改善（P〈0．05或P〈0．01）。精制血府逐瘀组治疗后心绞痛稳定状态、心绞痛发作情况、治疗满意程度、疾病认知程度较治疗前改善（P〈0．05或P〈0．01）。药对组治疗后心绞痛稳定状态、心绞痛发作情况较治疗前改善（P〈0．05或P〈0．01）。安慰剂组治疗后心绞痛稳定状态较治疗前改善（P〈0．05）。血府逐瘀汤及其拆方各组心绞痛发作情况改善优于安慰剂组（P〈0．05）。结论 西雅图量表评价血府逐瘀拆方治疗冠心病稳定心绞痛疗效,各拆方改善心绞痛发作情况优于安慰剂。     

化瘀健脾补肾汤治疗慢性肾功能不全疗效观察

目的：观察化瘀健脾补肾汤治疗慢性肾功能不全的临床疗效。方法：86例慢性肾功能不全患者随机分为两组，治疗组采用化瘀健脾补肾汤治疗，对照组采用包醛氧淀粉治疗。结果：治疗组总有效率为91．3％，对照组为55．0％，两组总有效率比较有显著差异（P〈0．05）。治疗组治疗后Scr、BUN均明显下降，与对照组治疗后比较也有明显差异（P〈0．05）。结论：化瘀健脾补肾法治疗慢性肾功能不全疗效显著。     

健脾补肾方对胃癌细胞系MGC-803线粒体膜电位和细胞内活性氧的影响

目的：研究健脾补肾方对MGC．803细胞凋亡的诱导作用及对线粒体膜电位和细胞内活性氧水平的影响。方法：应用流式细胞仪检测健脾补肾方含药血清诱导的MGC．803细胞凋亡及其线粒体膜电位和细胞内活性氧水平（分别用Annexin V、rhodamine 123和dihydrorhodamine 123）。结果：药物作用36h后，各用药组的细胞凋亡率显著高于空白血清组，药物作用有明显的时。效关系（P〈0．05）；药物作用36h后，中药组的细胞内活性氧水平基本稳定，而中西药组低于空白血清组和中药组（P〈0，05）；各用药组的线粒体膜电位水平随药物作用时间延长逐渐降低。结论：健脾补肾方可时间依赖地诱导MGC-803细胞凋亡，并可降低其线粒体膜电位，稳定细胞内活性氧水平；而且健脾补肾方与DDP具有协同作用。     

肾气丸对庆大霉素中毒性耳聋豚鼠ABR和DPOAE的影响

目的：观察金匮肾气丸对庆大霉素（G-M）中毒性耳聋豚鼠脑干听觉诱发电位（ABR）和畸变产物耳声发射（DPOAE）幅值的影响作用。方法：将45只健康级白色红目豚鼠随机分为正常对照组,模型组和中药干预组,模型组豚鼠每日肌肉注射庆大霉素120mg／kg连续10天,中药干预组豚鼠每日肌注庆大霉素的同时以药量为13．5g／kg／d的金匮肾气丸制剂灌胃给药连续]0天。分别检测各组ABR闽值和DPOAE幅值并比较。结果：豚鼠双耳ABR阈值和DPOAE幅值,模型组和中药干预组与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．01,P〈O．05）;与模型组比较,中药干预组ABR阈值明显降低和DPOAE幅值明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：金匮肾气丸可减轻GM的耳毒性反应,对GM所致的豚鼠耳中毒有一定的防治作用。     

平喘方及其拆方对支气管哮喘小鼠肺组织转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的：观察平喘方及其拆方对支气管哮喘模型小鼠转录因子T—bet、GATA－3表达的影响,研究平喘方及其拆方防治支气管哮喘的作用机理。方法：通过对BALB／C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘动物模型。将120只清洁级雄性BALB／C小鼠,随机分为6组：对照组、模型组、平喘方组、拆方1组、拆方2组、拆方3组。各组分别于雾化激发哮喘后7d、21d分两批处死、取样、检测,动态观察。采用RT—PCR（Real Time PCR）法检测小鼠肺组织T—bet、GATA-3 mRNA的表达。结果：哮喘激发7d,拆方1、2、3组T—bet升高（P〈0．05）;平喘方组和拆方2、3组GATA-3降低（P〈0．05）;拆方3组T—bet／GATA-3比值升高（P〈0．05）。哮喘激发21d,平喘方及拆方1、2、3组T—bet升高（P〈0．01）,GATA-3降低（P〈0．01）,T—bet／GATA-3比值升高（P〈0．01）;其中平喘方组、拆方3组T—bet表达高于拆方1、2组（P〈0．05）,GATA-3低于拆方1、2组（P〈0．01）,T—bet／GATA-3的比值高于拆方1、2组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：平喘方及拆方各组均能不同程度地调节支气管哮喘小鼠Th1／Th2上游因子T—bet／GATA-3 mRNA的表达,对Th1／Th2细胞的失衡有纠正作用,拆方3组疗效接近平喘方组。     

金匮肾气丸及其拆方对肾阳虚雌鼠卵巢功能的影响

目的探讨金匮肾气丸及其拆方（补。净阳、补肾阴、阴阳双补）对雌性肾阳虚大鼠卵巢功能的影响。方法将55只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、补阳组、补阴组、双补组,每组各11只。除正常组外,在大腿内侧肌肉丰厚处消毒后注射氢化可的松25mg,（kg·d）,连续12天。成模后第13天起各干预组按1mL／100g灌胃给药,每天1次,补阳组（补阳方,2．75g／kg）、补阴组（补阴方,6．25g／kg）、阴阳双补组（金匮肾气丸,6．75g／kg）,正常组、模型组给予等体积生理盐水,连续干预20天。干预结束后第2天眼眶取血,ELISA法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P）含量。计算子宫、卵巢脏器指数（visceraindex,VI）,观察病理改变。结果双补组肾阳虚雌性大鼠一般状况改善,正常、模型、补阳、补阴、双补组体重增加分别为（35．0±12．5）、（16．7±7．4）、（20．2±6．9）、（18．3±3．6）、（29．4±12．2）g;子宫V1分别为（183．4±11．6）、（144．0±6．5）、（158．7±6．3）、（152．1±6．9）、（172．8±8．1）mg／100g;卵巢V1分另1为（32．9±2．4）、（22．6±1．1）、（25．0±1．4）、（23．0±0．4）、（31．4±3．3）mg／100g。与模型组比较,补阳组及双补组大鼠体重、卵巢VI增加（P〈0．05,P〈0．01）,各给药组子宫V1增加（P〈0．05,P〈0．01）。与两个拆方组比较,双补组各指标增加（P〈0．05,P〈0．01）。补阳组及双补组大鼠E。P水平提高（P〈0．05,P〈0．01）。正常、模型、补阳、补阴、双补组E,水平分别为（22．1±9．4）、（9．8±3．0）、（11．3±2．2）、（10．5±0．8）、（16．0±5．5）pg／mL;P水平分别为（14．6±7．5）、（4．3±1．8）、（8．3±2．8）、（5．9±2．9）、（9．5±3．4）ng／mL。与两个拆方组比较,双补组E：水平提高（P〈0．05,P〈0．01）。与补阴组比较,双补组P水平提高（P〈0．05）。与模型组比较,双补组各级卵泡数增多,病理性囊性卵泡数减少（P〈0．01）。补阳组及补阴组可见初级卵泡、次级卵泡,成熟卵泡较少。双补组各级卵泡总数明显多于补阳组及补阴组（P〈0．05）,病理性囊性卵泡明显少于补阴组（P〈0．05）。结论对于肾阳虚证,金匮肾气丸及其拆方所代表的不同补肾法均能不同程度改善受损的卵巢功能,但单一的补阳法或补阴法效果不佳,阴阳双补可提高疗效。     

复聪片及其拆方拮抗庆大霉素耳毒性反应的实验研究

目的：观察中药复方复聪片及拆方内补肾、益气养血、活血祛瘀、通窍聪耳等主要药物对豚鼠庆大霉素（ＧＭ）耳毒性反应的拮抗作用。方法：豚鼠每日肌肉注射ＧＭ８０ｍｇ／ｋｇ，同时每日喂服复聪片或等效剂量各拆方组药物，连续２０日，测定用药前后听离干诱发电位阈值，耳蜗基底膜铺片外毛细胞计数，螺旋韧带铺片观察血管纹血流状况及拆方之补肾、益气养血、活血祛瘀药物可减轻ＧＭ所致耳蜗外毛细胞损伤率，保护耳蜗结构及功能，拮抗     

一次性胸腔穿刺导管闭式引流联合健脾利水方治疗胸腔积液100例

目的：观察一次性胸腔穿刺导管闭式引流联合健脾利水方治疗胸腔积液的临床疗效。方法：将符合病例选择标准的200例胸腔积液患者随机分为观察组、对照组各100例。2组均给予一次性胸腔穿刺导管闭式引流治疗,观察组于入院之初即服用健脾利水方,连续服用15天。观察2组患者引流时间、住院时间、临床症状消失时间、临床疗效。结果：治愈率观察组为78．00％,对照组为56．00％,2组相比差异显著（P〈0．05）。总有效率观察组为96．000％,对照组为73．00％,2组相比差异显著（P〈0．05）。观察组引流时间、症状消失时间、住院时间均短于对照组（P〈0．05）。结论：一次性胸腔穿刺导管闭式引流联合健脾利水方治疗胸腔积液临床疗效显著,且操作简便、安全、实用。     

肾气丸对庆大霉素致聋豚鼠线粒体凋亡通路Cyt-C的影响

目的观察金匮肾气丸对庆大霉素(GM)中毒性耳聋豚鼠线粒体凋亡通路中细胞色素C表达的影响。方法将40只健康级白色红目豚鼠随机分为正常对照组,模型(GM)组、金匮肾气丸干预高剂量、中剂量和低剂量组,GM组豚鼠每日肌肉注射庆大霉素120mg/kg连续10 d,金匮肾气丸干预高、中、低剂量组豚鼠分别每日肌注庆大霉素120mg/kg的同时以药量为20.3g/(kg·d)、13.5g/(kg·d)、6.08g/(kg·d)的金匮肾气丸制剂灌胃给药连续10 d。HE染色观察病理改变,免疫组化法检测各组耳蜗毛细胞平均光密度值并比较。结果豚鼠毛细胞Cyt-C光密度值比较,模型组较正常组有明显差异(P0.01),高剂量组和模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论金匮肾气丸可减轻GM的耳毒性反应,对GM所致的豚鼠耳中毒有一定的防治作用。