养胃抗瘤冲剂及其拆方对人胃癌细胞系MGC-803及BGC-823侵袭重组基底膜的作用及作用途径

目的：观察人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜的侵袭作用，分析养胃抗瘤冲剂对其侵袭作用的影响及可能作用途径。方法：实验于2001-05／2001-10在中国中医研究院广安门医院肿瘤细胞生物学实验室完成。选取日本健康雌性大耳白兔21只，按随机数字表法分为7组，即养胃抗瘤冲剂组及拆方（益气方、活血方、解毒方、益气活血方、益气解毒方）组、空白血清组，制备含药血清。采用Transwell细胞培养小室建立人肿瘤细胞系体外侵袭模型，动态观察人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜的侵袭作用以及中药复方养胃抗瘤冲剂（由生黄芪、人参、白花蛇舌草、草河车、三七、苏木等组成，每克含生药3．22g，由中国中医研究院广安门医院制剂室提供）及拆方的含药血清、化疗药顺氯氨铂对胃癌细胞系侵袭作用的影响，侵袭抑制率（％）：（对照组侵袭细胞数-给药组侵袭细胞数）／对照组侵袭细胞数&;#215;100％，凡抑制率达30％以上，认为有抗侵袭作用。同时采用流式细胞仪通过单克隆抗体标记的方法检测侵袭转移相关黏附蛋白CD9，CD31，CD36，CD42a，CD44，CD49d，CD62p，CD41，凝血酶敏感蛋白及CD63的表达。结果：④各组人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜侵袭作用的抑制率比较：养胃抗瘤冲剂组、益气组、解毒组对人胃癌细胞MGC-803的抑制率均显著高于空白血清组（55．14％．32．43％，36．59％，0，P〈0．05）。益气解毒、益气活血组作用优于单纯解毒、益气、活血组，但两组比较差异无显著性意义（44．86％，41．23％，P〉0．05）。人胃癌细胞MGC-803与BGC-823比较，侵袭作用MGC-803强于BGC-823（空白血清组侵袭细胞数分别为60．75&;#177;4．57，56．35&;#177;3．25），养胃抗瘤冲剂及拆方对MGC-803的抑制作用强于BGC-823，但比较差异无显著性意义（P〉0．05）。（2）各组人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823侵袭转移相关黏附蛋白的表达水平比较：养胃抗瘤冲剂组肿瘤转移黏附蛋白CD63、凝血酶敏感蛋白的表达水平低于空白血清组（药物作用24h：3．30％，3．10％；24．97％，11．50％；48h：0．93％，3．56％；5．78％，10．41％），抑制肿瘤转移的黏附蛋白如CD9的表达水平高于空白血清组（药物作用24h：90．49％，86．23％；48h：94．81％，77．69％）。单纯的活血药在给药早期（24h）则可以促进CD63的表达（33．12％），随着给药时间的延长（48h）则降低CD9表达（30．22％）；益气活血组则可纠正活血药的这种作用（24hCD63：3．55％；48hCD9：82．92％）。结论：人胃癌细胞系MGC-803，BGC-823对重组基底膜均具有侵袭作用，MGC-803的侵袭作用强于BGC-823。养胃抗瘤冲剂及拆方对MGC-803的抗侵袭作用优于BGC-823。养胃抗瘤冲剂抗人胃癌细胞侵袭作用的可能作用途径在于可降低部分促进肿瘤转移的黏附蛋白如CD63、凝血酶敏感蛋白的表达，对抑制肿瘤转移的黏附蛋白如CD9表达有促进作用。     

益气活血软坚解毒含药血清诱导人肝癌细胞系Bel-7402细胞的凋亡

目的:研究益气活血软坚解毒(YHRJ)含药血清对人肝癌细胞系Bel-7402生长抑制及诱导凋亡作用.方法:将YHRJ含药血清作用于人肝癌细胞系Bel-7402细胞,应用MTT检测对肝癌细胞生长抑制作用,倒置显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜等影像学方法观察细胞形态学变化,以及PI染色单染、AnnexinV-PI双染后,流式细胞术检测对细胞周期影响及诱导细胞凋亡程度.结果:MTT法检测结果显示:YHRJ含药血清具有抑制Bel-7402肿瘤细胞生长作用(其中20%YHRJ等效剂量抑制率49.1%,与NS比,P<0.01);荧光显微镜及激光共聚焦显微镜可观察到典型的凋亡形态学变化.流式细胞术检测结果,细胞周期出现G0/G1期阻滞,并出现典型的凋亡峰,AnnexinV-PI双染法检测到早期及中晚期细胞凋亡.结论:YHRJ含药血清有抑制人肝癌细胞系Bel-7402细胞生长并有诱导细胞凋亡作用.     

复方苦参注射液诱导人肝癌SMMC-7221细胞凋亡的研究

目的 探究复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法 无菌培养人肝癌细胞SMMC-7721,采用MTT法检测复方苦参注射液对SMMC7721细胞的影响,复方苦参注射液的浓度分别为3.34、2.38、1.43和0.48 mg/ml;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法测肝癌细胞凋亡率,复方苦参注射液的浓度分别为0.86、1.72和3.43 mg/ml.结果 复方苦参注射液浓度3.34、2.38、1.43、0.48 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞抑制率分别为51.03％、53.67％、49.83％、0.03％;作用48 h后,上述浓度的细胞抑制率分别为67.14％、65.35％、62.25％、0.05％,作用72 h后,分别为74.16％、68.77％、66.04％、26.02％.结果 复方苦参注射液浓度0.86、1.72和3.43 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞凋亡率分别为(2.86±0.35)％、(15.16±1.15)％、(13.17±0.40)％;作用48 h后,上述浓度的细胞凋亡率分别为(8.57±0.44)％、(28.07±0.76)％、(29.81±8.10)％,均高于空白对照组(1.05±0.09)％(P＜0.05).结论 复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关.     

益气活血软坚解毒方对荷瘤小鼠抑瘤作用及对生存期影响研究

[目的]研究益气活血软坚解毒(YHRJ)方对荷瘤小鼠生存期的影响。[方法]抑瘤作用观察:荷S180腹水瘤昆明鼠、荷H22昆明鼠与615小鼠,造模后随机分成对照组、CTX(环磷酰胺)组、YHRJ等效剂量组、YHRJ高剂量组、YHRJ等效剂量组+CTX或顺铂(DDP)组、YHRJ高剂量组+CTX(或DDP)组,第2天开始用药,于第13天拉颈处死动物,取出瘤组织,称质量。生存期观察:荷H22昆明鼠,截尾期为对照组出现第1只动物死亡为止,记录小鼠存活时间。[结果]1)对荷S180昆明鼠:各用药组肿瘤明显缩小,YHRJ高剂量抑制率为64.22%,与生理盐水及YHRJ等效剂量组相比,差异显著;YHRJ高剂量+CTX组抑制率为80.10%,高于YHRJ等效剂量组及CTX组。2)对荷H22昆明鼠:除YHRJ等效剂量组外,其余各组抑瘤率均超过30%,抑瘤作用明显(P0.05),YHRJ高剂量组抑瘤率为51.36%。优于其他各组。3)对荷H22615小鼠肿瘤:YHRJ等效剂量抑瘤率为47.15%,YHRJ高剂量+DDP组抑瘤率为80.60%,说明中药对DDP有增效作用。4)对荷H22昆明鼠生存率影响:YHRJ高剂量组及各加DDP组荷瘤小鼠生存期及中位生存天数明显延长,生存率明显提高有统计学意义。[结论]益气活血软坚解毒方对小鼠S180腹水瘤、H22肝细胞癌肿瘤生长有抑制作用,并明显延长荷H22昆明鼠生存期。     

中药金安与顺铂诱导小鼠Lewis肺癌凋亡的研究

[目的]探讨中药金安是否能促进顺铂诱导C57BL/6J小鼠Lewis肺癌凋亡。[方法]荷Lewis肺癌的C57BL/6J小鼠分为生理盐水组(NS)、金安组(JA)、顺铂组(DDP)和金安合用顺铂组(DJ),通过检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率,应用流式细胞仪和TUNEL法以及提取组织DNA并电泳等方法观察金安合用顺铂对Lewis肺癌的治疗作用。[结果]JA组体重明显增加,DDP组体重先升后降,而DJ组体重则先升后降再回升呈“～”型。各治疗组的抑瘤率分别为40.90%、52.04%和47.83%。流式细胞仪检测各组的凋亡率依次为14.95%、11.68%和14.25%。TUNEL法测定各组的凋亡指数依次是(0.79±1.60)%、(4.00±7.15)%、(5.93±5.96)%、(7.07±10.15)%;DNA提取并电泳在DJ组有DNALadder出现。[结论]金安能增强DDP诱导Lewis肺癌的凋亡作用,并能减轻其毒副作用。     

人肺癌细胞PG、PAa对重组基底膜侵袭及榄香烯、PDGF-AB、TGF-β1对其的影响

1．1．1PG、PAa细胞株人高转移性巨细胞肺癌细胞PG、人低转移性肺腺癌细胞PAa由北京大学医学部病理教研室提供。     

Influence of Feiliuping No.2 (肺瘤平二号) on Platelet Surface Glycoprote in Expression in Mid-Late Stage Lung Cancer Patients

Influence of Feiliuping No.2 (肺瘤平二号) on Platelet Surface Glycoprote in Expression in Mid-Late Stage Lung Cancer Patients@张培彤@朴炳奎@孙桂芝@林红生@裴迎霞     

人参皂甙Rg3对荷瘤及环磷酰胺化疗小鼠黏膜免疫力影响

[目的]观察人参皂甙Rg3对肿瘤化疗肠道黏膜损伤的治疗作用及其黏膜免疫机制。[方法]运用给小鼠原位接种C-26结肠癌并重复灌胃环磷酰胺建立肿瘤化疗肠道黏膜损伤的模型，观察人参皂甙Rg3对瘤重、抑瘤率及PP结面积影响，分离肠上皮内淋巴细胞，固有层淋巴细胞及PP结内的淋巴细胞，用免疫荧光染色及流式细胞仪分析黏膜免疫各部位T淋巴细胞亚群的变化。[结果]环磷酰胺组瘤重显著降低，抑瘤率约为37.6%,而环磷酰胺加Rg3组瘤重与环磷酰胺组比较差异无显著性。荷瘤及环磷酰胺都可显著降低PP结而积，而人参皂甙Rg3可明显减轻环磷酰胺对PP结面积的影响（P＜0.01）。人参皂甙Rg3可使荷瘤和环磷酰胺作用下显著减少的固有层淋巴细胞中的CD4^＋细胞百分比显著增加（P＜0.05），但对CD8^＋细胞百分比无明显影响。[结论]荷瘤及环磷酰胺可明显抑制肠道黏膜免疫功能，而人参皂甙Rg3能明显改善这种黏膜免疫抑制状态。人参皂甙Rg3对黏膜免疫的调节作用是扶正中药发挥作用的重要途径之一。     

胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白的检测

目的　探讨胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白变化在肿瘤转移中的意义。方法　采用KL型肿瘤免疫图像分析系统和流式细胞仪测定正常人和胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA的转录活性和凋亡相关蛋白 (Fas/FasL)的表达。结果　胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性明显降低 ,凋亡相关蛋白Fas表达升高 ,与健康人相比 ,差异显著 (P <0 .0 1) ,随着病情的进展 ,这种趋势更为明显。结论　外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白变化可以从淋巴细胞增殖和凋亡活性两方面评价肿瘤患者的免疫状态 ,在胃癌转移的临床监测中具有重要意义。     

六神丸抗肿瘤作用的研究进展

通过对近30年六神丸抗肿瘤作用相关的临床和实验研究进行总结,认为六神丸可以逆转白血病细胞多药耐药作用,抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能与抗肿瘤炎性微环境、抗肿瘤血管生成作用相关。为中医古药新用、防治肿瘤提供研究思路。