鹿茸玛咖配伍抑制乙酰胆碱酯酶活性部位的HPLC-DAD-ESI-MS/MS分析研究

目的对鹿茸玛咖提取物各萃取部位的体外乙酰胆碱酯酶抑制作用进行研究,并对其活性部位进行化学成分分析。方法以鹿茸玛咖提取物的各极性溶剂萃取部位为研究对象,以体外抑制乙酰胆碱酯酶活性为指标,研究鹿茸玛咖提取物各萃取部位对乙酰胆碱酯酶的体外抑制作用;采用高效液相色谱-质谱联用技术对鹿茸玛咖抑制乙酰胆碱酯酶的活性部位化学成分进行分析。结果鹿茸玛咖乙酸乙酯萃取部位能够抑制乙酰胆碱酯酶活性,具有抗老年痴呆的潜在作用,经液质联用分析推测出乙酸乙酯萃取部位中的6个玛咖酰胺和2个鹿茸寡肽类的结构。结论鹿茸玛咖乙酸乙酯萃取部位为鹿茸玛咖抑制乙酰胆碱酯酶活性部位,其中含有的玛咖酰胺类成分和鹿茸寡肽类成分是鹿茸玛咖提取物体外抑制乙酰胆碱酯酶的主要物质基础。     

海南龙血树抗肿瘤新用途研究

目的:筛选海南龙血树的抗肿瘤活性部位.方法:分别用溶剂萃取法和大孔吸附树脂柱层析法对海南龙血树的95%乙醇提取物进行分段处理,利用MTT法测定各提取部位体外抗肿瘤活性.结果:氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对体外肿瘤细胞表现出较强的抑制活性,甲醇洗脱物显示了弱活性,水提取、水洗脱物和50%甲醇-水洗脱物则没有活性.在各提取物中氯仿提取物活性最强.结论:氯仿提取部位是海南龙血树主要的体外抗肿瘤活性部位.     

蜡梅花石油醚萃取物的GC-MS分析及AChE抑制率测定

目的分析蜡梅花乙醇提取物的石油醚萃取物的化学成分,并测定其对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。方法用75%乙醇对风干的蜡梅花进行超声辅助常温浸泡提取,提取物分散于水中后,用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇依次萃取,将石油醚萃取物进行GC-MS分析,并用改良的Ellman比色法测定其对乙酰胆碱酯酶的抑制率。结果经GC-MS分析鉴定共得出54种化合物,并用面积归一化法确定各成分质量分数。石油醚萃取物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性呈现一定的量效关系。结论蜡梅花石油醚萃取物具有一定抗乙酰胆碱酯酶活性。     

诃子体外抗解脲脲原体的有效部位研究

目的探讨中药诃子体外对解脲脲原体的抑制作用。方法制备诃子总提取物,并将其粗分成几个部位(10%,20%,40%,60%甲醇洗脱部位);选用8株解脲脲原体临床分离株混合液,以倍比稀释法测定最低抑制浓度,筛选最佳部位;最佳部位以洁尔阴洗液为对照,进一步测定其对血清14型及6株解脲脲原体临床分离株的半数最低抑制浓度(MIC50)。结果除60%甲醇洗脱部位外,总提取物及其它部位在10～100 mg.ml-1时均有抑制解脲脲原体生长活性,以10%甲醇洗脱部位最明显,MIC50小于洁尔阴洗液。结论诃子提取物具有显著的体外抗解脲脲原体活性,以10%甲醇洗脱部分部位最高。     

香加皮不同提取部位体外抗肿瘤活性实验研究

[目的]筛选香加皮的抗肿瘤活性部位.[方法]用大孔吸附树脂柱层析法对香加皮的和60%乙醇回流提取物进行分段处理,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各提取部位体外抗肿瘤活性.[结果]70%乙醇洗脱部位对体外肿瘤细胞表现出抑制活性,并在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性.95%乙醇洗脱部位的抑制作用较弱.而水洗脱物和20%乙醇洗脱物则未呈现出抗肿瘤活性.在各提取部位中70%乙醇提取物活性最强.[结论]70%乙醇提取部位是香加皮主要的体外抗肿瘤活性部位.     

头花蓼提取物中具抗淋球菌作用的有效部位研究

目的分析头花蓼提取物中具有抗淋球菌活性有效部位的成分。方法采用药敏纸片法检测头花蓼提取物的不同部位对淋球菌的抑菌活性。并采用UPLC-TOF-MS对头花蓼提取物中具有抗淋球菌作用的有效部位进行鉴别。结果头花蓼醇提取物经特定的大孔树脂洗脱所获得的洗脱物中,35%甲醇洗脱物(部位F3)中含有可水解鞣质(三没食子酰葡萄糖),该部位具有良好的抗淋球菌作用。F2、F4～6有微弱的抑菌作用,而其他部位无抑菌作用。结论头花蓼提取物的35%甲醇洗脱物具有良好的抗淋球菌作用,其主要成分为三没食子酰葡萄糖,可能为头花蓼抗淋球菌物质基础。     

不同发酵时间对西瓜霜抗菌活性的影响及其有效部位筛选

目的考察不同发酵时间对西瓜霜抗菌活性的影响,并对最佳发酵时间制得的西瓜霜进行有效部位筛选。方法选择常见致病菌(多为口腔、上呼吸道致病菌),采用体外试管法抑菌实验和平板法杀菌实验,对发酵7、15、22、30、50 d的西瓜霜进行抗菌活性比较;以甲醇提取发酵15 d的西瓜霜制得西瓜霜甲醇提取物,进一步以AB-8大孔吸附树脂对西瓜霜甲醇提取物进行分离,得到甲醇提取物的水洗脱部位和95%乙醇洗脱部位,比较西瓜霜甲醇提取物与其水洗脱部位和95%乙醇洗脱部位的抗菌活性,筛选有效部位。结果发酵15 d制备的西瓜霜抗菌活性最强;西瓜霜甲醇提取物的大孔吸附树脂95%乙醇洗脱部位对福氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、白葡萄球菌、柠檬葡萄球菌、绿脓杆菌、乙型溶血性链球菌、乙型副伤寒杆菌和大肠杆菌具有明显抗菌作用。结论发酵时间对西瓜霜的抗菌活性具有显著影响,西瓜霜抗菌作用的有效部位为其甲醇提取物的大孔吸附树脂95%乙醇洗脱部位。     

黄奇楠生物活性和化学成分的研究

目的研究黄奇楠的生物活性,并分析其化学成分。方法对黄奇楠乙醚提取物进行抗菌、抗肿瘤、乙酰胆碱酯酶抑制和降血糖活性测试,然后应用HP6890/5975C GC/MS联用仪分析其化学成分。结果乙醚提取物对金黄色葡萄球菌、慢性髓原白血病细胞K562、人胃癌细胞SGC-7901、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶均表现出较好的抑制活性。同时,GC-MS检测到30个成分(相对含有量为91.46%),并鉴定了其中26个化合物,包括16个倍半萜类成分(相对含有量为52.94%)和3个2-(2-苯乙基)色酮类成分(相对含有量为16.09%)。其中,有7个倍半萜具有香味(相对含有量为36.29%)。结论黄奇楠乙醚提取物具有抗菌、抗肿瘤、乙酰胆碱酯酶抑制和降血糖活性,并含有多种化学成分,主要为倍半萜类型。     

独一味镇痛止血有效部位的研究

目的 筛选独一味镇痛止血有效部位.方法 采用醋酸扭体法和小鼠断尾法,对独一味茎叶70%乙醇渗漉提取物,经聚酰胺和AB-8大孔吸附树脂分离得到各个部分进行了镇痛、止血活性筛选.结果 经聚酰胺分离的水洗脱部分有明显的镇痛、止血作用,再经大孔吸附树脂分离,30%醇洗脱部分镇痛、止血作用明显.结论 70%乙醇渗漉提取物经聚酰胺后的水洗脱部分,再经大孔吸附树脂富集,30%乙醇洗脱部分是独一味镇痛、止血的主要活性部位.     

瑞香狼毒系统溶剂法分离提取部位的体外抗肿瘤活性

目的:分离筛选瑞香狼毒中抗肿瘤活性部位.方法:用系统溶剂法对瑞香狼毒95%乙醇提取物进行分离,MTT比色法对分离得到的部位进行体外抗肿瘤活性的测定.结果:石油醚提取物和氯仿提取物对体外培养肿瘤细胞表现出较强的抑制作用,在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性抑制作用,而正丁醇和甲醇提取部位在测定浓度范围内则显示出很弱的抑制作用;在各提取部位中石油醚提取物的体外抗肿瘤作用最强.结论:石油醚提取部位是瑞香狼毒中的体外抗肿瘤活性部位.     

猪牙皂体外抗白血病活性部位筛选

目的研究猪牙皂总皂苷不同浓度乙醇提取物对白血病细胞的体外抑制作用,筛选猪牙皂抗白血病作用的活性部位。方法利用大孔树脂吸附技术,对猪牙皂总皂苷通过不同浓度的乙醇进行梯度洗脱;以人白血病细胞K562、HL-60和NB4为供试细胞,采用MTT法,观察猪牙皂总皂苷各分离组分对其抑制作用。结果 60%乙醇部分对白血病细胞增殖有显著抑制作用,随作用时间的延长,抑制作用增强。40%、85%洗脱物对白血病细胞抑制率较低。20%乙醇和水洗脱物对白血病细胞无抑制作用。结论猪牙皂总皂苷60%大孔树脂乙醇洗脱部分体外抗白血病细胞作用显著,是猪牙皂体外抗白血病的主要活性部位。     

辽东楤木叶总皂苷的HPLC及抗肿瘤作用谱效关系分析

目的:对辽东楤木叶总皂苷进行HPLC分析并确定不同的极性部位,利用C18反相硅胶(ODS)柱分离获得不同极性部位,比较不同部位的体外抗肿瘤作用效果。方法:辽东楤木叶经70%乙醇提取后通过AB-8型大孔树脂柱,获得总皂苷,用不同体积分数甲醇经ODS柱洗脱分离获得经HPLC确定的不同部位。利用噻唑蓝(MTT)比色法测试不同部位对人肺腺癌细胞株(A549),人宫颈癌细胞株(He La)和人结肠癌细胞株(HT-29)的体外生长抑制作用。结果:由总皂苷HPLC的保留时间确定了5个极性部位,分别为A(保留时间20 min以前的部位,ODS柱上0~25%甲醇洗脱组分),B(保留时间20~45 min,ODS柱上30%~45%甲醇洗脱组分),C(保留时间50~75 min,ODS柱上50%~65%甲醇洗脱组分),D(保留时间80~110 min,ODS柱上70%~75%甲醇洗脱组分)和E(保留时间110 min,ODS柱上80%~100%甲醇洗脱组分)。5个部位给药48 h后对3种细胞的抑制作用明显不同,A部位对3种癌细胞均无抑制作用;B部位对3种癌细胞抑制作用微弱;C,D,E部位对3种癌细胞表现出较强的抑制作用,且明显强于总皂苷,最佳的D部位对A549,Hella和HT-29抑制作用的半抑制浓度分别为4.06,4.29,3.60 mg·L~(-1)。结论:辽东楤木叶总皂苷经HPLC分析后,利用ODS柱进行分离,可获得其抗肿瘤作用的有效部位及最佳部位。     

山核桃外果皮提取物抗肿瘤活性研究

目的研究山核桃外果皮抗肿瘤活性部位。方法利用系统溶剂分离法,对山核桃外果皮进行部位分离,采用MTT法分别检测水提取物、甲醇提取物、石油醚提取物、醋酸乙酯提取物对小鼠肺癌细胞3LL、人乳腺癌细胞MCF-7、人肝癌细胞QGY-7701、人胃癌细胞BGC-823等4种肿瘤细胞株的生长抑制情况。结果水提取物对上述肿瘤细胞抑制作用均不明显,甲醇和石油醚提取物对4种肿瘤细胞有抑制作用,醋酸乙酯提取物对4种肿瘤细胞有明显的抑制效果,且呈一定的浓度-效应关系。结论山核桃外果皮的甲醇提取物、石油醚提取物及醋酸乙酯提取物具有一定的体外抗肿瘤作用。     

从丹参中分得具乙酰胆碱酯酶抑制活性的二萜类化合物

作者从丹参Salvia miltiorrhiza Bung丙酮提取物中分离到4个具乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性的二萜类化合物,并以改良的Ellman方法为导向,研究了它们对AChE的抑制活性。丹参干燥根于55℃用丙酮提取4h,减压回收溶剂至干。提取物经VLC硅胶柱层析,依次用甲苯、甲苯-二氯甲烷(1:1)、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮和甲醇洗脱,通过TLC检测得到6个部位F1～F6。将显示AChE抑制活性的F1和F2合并,以CC硅胶柱层析得4个部位     

京大戟对斑马鱼胚胎血管生成的影响

目的:采用活性导向方法寻找京大戟提取物中具有抗血管生成作用的有效部位。方法:以血管荧光标记的斑马鱼作为实验模型动物,分别使用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇为提取溶剂,按序依次回流提取,得到京大戟的不同极性提取部位,处理受精后6 h的斑马鱼胚胎,药物作用至72 h时观察斑马鱼胚胎背部节间血管数(intersegment vessels,ISV)的生成情况。并选取活性较好的极性提取部位,使用硅胶柱层析进一步分离纯化并观察其不同纯化部位的活性。结果:京大戟二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇各提取部位均可引起不同程度的斑马鱼节间血管残缺或缺失,且其效果呈浓度依赖性。综合毒性和活性考虑,选取甲醇部位进行进一步纯化,其中20%甲醇、80%甲醇洗脱部位对斑马鱼节间血管的生成有抑制作用,且抑制效果呈浓度依赖性。结论:京大戟甲醇提取部位经柱层析纯化后,20%、80%甲醇洗脱部位对斑马鱼血管新生有明显抑制作用,且其抑制作用较甲醇提取部位更强。后续可进一步追踪分析其有效成分。     

山腊梅叶提取物抗补体及镇咳活性物质基础的初步研究

目的研究山腊梅Chimonanthus nitens叶提取物的抗补体及镇咳活性,并初步分析其活性成分。方法以经典抗补体途径和浓氨致咳模型对不同极性部位的山腊梅叶进行活性比较,确定具有抗补体和镇咳活性的部位;采用高效液相色谱-质谱联用技术对有效活性部位进行化学成分的初步分析。对山腊梅叶中主要的化学成分进行镇咳和抗补体的活性评价。结果山腊梅叶的醋酸乙酯提取物部位同时具有抗补体和镇咳作用,通过质谱分析,初步鉴定了28个化合物。山柰酚-3-O-芸香糖苷和山柰酚同时具有镇咳和抗补体的活性。结论山腊梅叶醋酸乙酯提取物具有良好的抗补体和镇咳活性,其主要活性成分为山柰酚-3-O-芸香糖苷和山柰酚,且两者可作为控制质量的化学标记物。     

漏芦抗肺癌活性部位的筛选

目的筛选漏芦Rhaponticum uniflorum(L.)DC.体内外抗肺腺癌的活性部位,并对其化学成分进行解析。方法漏芦经有机溶媒提取,其残渣再经水提,共5个活性部位与人肺腺癌细胞A549和H1299共孵育,从中筛选抗肺癌活性最强的部位;并观察它们对Lewis接种C57BL/6J荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数的影响,验证其体内抗肺癌作用。采用UPLC-Q-TOF-MS-MS对该活性部位进行解析。结果漏芦抑制A549细胞增殖作用的提取物依次为正丁醇(半数抑制浓度IC_(50)为205.43μg/m L)乙酸乙酯(IC_(50)为244.22μg/m L)二氯甲烷(IC_(50)为350.40μg/m L);漏芦抑制H1299细胞增殖作用的提取物依次为正丁醇(IC_(50)为315.87μg/m L)乙酸乙酯(IC_(50)为356.13μg/m L)二氯甲烷(IC_(50)为416.13μg/m L)。漏芦提取物抑制Lewis荷瘤小鼠肿瘤增长的作用排序为正丁醇高剂量组(37.43%)正丁醇低剂量组(32.91%)乙酸乙酯高剂量组(25.87%)乙酸乙酯低剂量组(21.15%)。漏芦抗肺癌活性部位的主要成分为三萜类、甾醇类和植物激素类等。结论漏芦体内外抗肺癌作用最强的部位为正丁醇部位,该部位主要的成分为以齐墩果酸和熊果酸为代表的三萜类,以β-谷甾醇和豆甾醇为代表的甾醇类,以β-蜕皮甾酮、漏芦素甲为代表的植物激素类。     

四川宝兴虎耳草活性部位筛选

目的 筛选虎耳草抑菌、抗炎、镇咳作用的活性部位。方法 从虎耳草提取物中萃取出不同极性段的有效部位，观察石油醚、醋酸乙酯、正丁醇、水提取部位临床常见致病菌的体外抑制效果、对小鼠的急性、慢性炎症抑制效果和对小鼠氨水引咳的抑制效果。结果 虎耳草提取物中不同极性段萃取物对所选细菌的体外抑制作用，对小鼠急性耳肿胀、慢性肉芽肿及氨水引咳的抑制作用差异明显；其中醋酸乙酯部分效果最好。结论 虎耳草提取物中醋酸乙酯萃取部分为其主要的活性部位。     

UPLC-Q-TOF-MS法分析平卧菊三七抗补体活性及活性部位

目的运用UPLC-Q-TOF-MS技术分析平卧菊三七的抗补体活性及其活性部位。方法采用经典的体外抗补体活性测定方法对平卧菊三七70%醇提物的乙酸乙酯萃取部位和水部位进行抗补体活性测定。平卧菊三七甲醇提取物的分析采用Welch Ultimate UHPLC XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min。质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据。结果平卧菊三七乙酸乙酯萃取部位具有较强的抗补体活性,其CH_(50)为(0.003 5±0.000 3)mg/mL。鉴定了22个化合物,其中包括有机酸类10个、黄酮类7个、其他类5个。结论该方法简单,快速,可为进一步确定平卧菊三七抗补体活性的作用机制及作用靶点提供参考。     

中药提取物乙酰胆碱酯酶抑制活性的研究

目的研究中药水提物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。方法选取24味中药做研究对象。应用传统的水提的方法制备中药提取物。使用改进了的Elman比色法检测24种中药的水提物对兔大脑乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果黄柏的水提物有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性,在50μg/ml浓度下抑制率达75.58%,IC50值为20.03μg/ml。厚朴的水提取物在50μg/ml浓度下抑制率为43.95%,其IC50值为127.17μg/ml。益智仁的水提物有较弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论黄柏等中药提取物对乙酰胆碱酯酶具有很好的抑制活性。