地黄饮子对APP/PS1双转基因小鼠肠道菌群的影响

目的 采用16S rRNA测序技术，检测地黄饮子对5月龄APP/PS1双转基因小鼠肠道菌群多样性、相对丰度等差异。方法 将转基因APP/PS1(-)小鼠设为正常组，其余转基因阳性APP/PS1(+)分为模型组、中药组和西药组。中药组灌胃给予地黄饮子24g·kg^-1,西药组灌胃给予安理申0.8mg·kg^-1,正常组ig给予同等体积的生理盐水，1次/d,连续28 d。提取试剂盒抽提各组粪便样本中DNA,对V3-V4区进行PCR扩增，再使用Illumina Miseq PE300高通量测序平台进行Paired-end测序。最后对数据进行生物信息学分析，结果 本研究共得到1003个OTUs。物种累积曲线表明本研究所收集的样本量充足。Alpha多样性分析，中药组与其余组相比显著提高了菌群的多样性，Beta多样性分析，各组数据组间差异明显，物种韦恩图显示，中药组和西药组均能降低APP模型小鼠的微生物菌群OTU丰度，但较正常组增加了OTU丰度。菌种分类水平提示地黄饮子更倾向提升菌群的多样性，尤其是在厚壁菌门的菌种，优势菌种的比例更接近正常组；LEfSe分析...     

基于16S rDNA测序技术的自发性高血压大鼠肠道菌群结构变化及中药干预作用

目的分析自发性高血压大鼠(SHR)肠道菌群结构特征,初步探讨中药黄连解毒汤(HLJDD)干预作用影响。方法 12周龄雄性SHR随机分模型组(M组)、HLJDD组(H组),同周龄雄性Wistar大鼠为正常对照组(W组),每组各4只。空白对照组及模型组常规饲养,HLJDD组按0.027 g/(kg·d)灌胃给药,每天给药1次,连续给药6周。干预结束后,取出盲肠内容物(新鲜粪便),采用16S rDNA高通量测序并进行生物信息学分析。结果 3组大鼠肠道微生物测序覆盖度在0.997以上,从属水平分析3组大鼠物种丰度聚类分布于4个优势的细菌门:27个属于厚壁菌门类(Firmicutes)、4个属于拟杆菌门类(Bacteroidetes)、3个属于变形菌门类(Proteobacteria)和1个属于疣微菌门类(Verrucomicrobia)门类细菌;Simpson指数表明,模型组大鼠肠道菌群多样性降低,HLJDD组大鼠肠道菌群多样性高于模型组;3组大鼠肠道菌群微生物群落结构在门水平上主要由厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和变形菌门(Proteobacteria)组成,其中模型组厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度增加,HLJDD组大鼠肠道菌群厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度低于模型组;3组大鼠肠道菌群微生物群落结构在属水平上主要由乳酸杆菌属(Lactobacillus)、肠球菌属(Enterococcus)、大肠志贺氏杆菌属(Escherichia Shigella)组成,其中益生菌乳酸杆菌属(Lactobacillus)相对丰度在模型组明显降低,HLJDD组大鼠肠道菌群乳酸杆菌属相对丰度高于模型组。结论 SHR肠道菌群结构失于平衡状态,菌群多样性有一定程度下降,HLJDD可能通过增加SHR菌群多样性、降低SHR致病菌厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度、升高SHR益生菌乳酸杆菌属相对丰度达到对抗高血压的作用,尚需扩大样本量进一步进行验证。     

通督启神”针法对APP/PS1小鼠肠道菌群的影响

目的:观察小鼠的行为学和肠道菌群多样性、组成及功能的变化,探讨“通督启神”针法改善APP/PS1小鼠认知功能障碍的潜在作用机制。方法:将APP/PS1小鼠随机分为模型组、针刺组和益生菌组;C57BL/6小鼠为正常组。针刺组选取百会穴、印堂穴与双侧足三里穴进行针刺;益生菌组予以益生菌灌胃。上述干预1次/d,共56 d。采用Morris水迷宫评估小鼠的空间学习和记忆能力;采用16S rRNA高通量测序技术检测小鼠肠道菌群的多样性、组成和功能。结果:与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期显著增加(P<0.01),穿台次数、目标象限游泳时间比及路程比均显著降低(P<0.01);肠道菌群多样性显著降低,肠道菌群的组成和功能显著改变(P<0.01)。针刺和益生菌治疗能够逆转上述变化(P<0.01或P<0.05)。结论:“通督启神”针法能够良性调节APP/PS1小鼠的肠道菌群紊乱,进而提升其学习记忆能力。     

基于调节肠道菌群失衡的四君子汤干预心力衰竭大鼠机制研究

目的从调节肠道菌群角度探讨四君子汤对心力衰竭大鼠的作用机制。方法 40只雄性Wistar大鼠分为假手术组、模型组、四君子汤组及益生菌组,每组10只。采用冠状动脉左前降支结扎法制备心力衰竭大鼠模型,心电图及TTC、HE染色确定心肌梗死情况,HE染色检测肠黏膜结构变化,治疗前后超声评估心功能,并于治疗后行高通量测序检测肠道菌群的变化。结果心肌HE染色显示,模型组心肌细胞较假手术组数量减少,细胞形态萎缩,肌纤维疏松;结肠HE染色显示,模型组大鼠肠黏膜结构破坏,细胞排列紊乱,绒毛萎缩、粘连,隐窝减少、排列不规则,腺体正常结构消失、呈空泡状。超声结果显示,治疗前与假手术组比较,模型组大鼠心肌明显变薄,心腔增大,左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVESd)显著增加,左心室射血分数(LVEF)显著减少(P0.001);治疗后与模型组比较,四君子汤组大鼠LVEDd、LVESd显著减少(P0.001),LVEF显著增加(P0.001)。测序结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠出现肠道菌群失衡:在门分类水平,表现为厚壁菌门丰度显著减少(P0.001),拟杆菌门及疣微菌门丰度显著增加(P0.001,P0.05);在属分类水平,表现为乳杆菌属、厌氧芽孢杆菌属丰度显著减少(P0.001,P0.05),Muribaculaceae_norank菌属、艾克曼菌属丰度显著增加(P0.001,P0.05)。与模型组比较,四君子汤组大鼠肠道菌群失衡显著改善:在门分类水平,厚壁菌门丰度显著增加,拟杆菌门丰度显著减少(P0.05);在属分类水平,乳杆菌属、厌氧芽孢杆菌属丰度显著增加,Muribaculaceae_norank菌属丰度显著减少(P0.05)。结论四君子汤通过调节肠道菌群失衡,对大鼠心肌梗死后心力衰竭有一定的治疗作用。     

固本健脑液对APP/PS1小鼠肠道菌群与肠道ZO-1、occludin及海马Aβ与形态学的影响

目的 基于“肠-脑轴”途径探讨固本健脑液调控Aβ沉积防治AD的作用机制。方法 6月龄APP/PS1小鼠70只，其中40只APP/PS1小鼠与C57BL/6J小鼠10只随机分为5组，每组10只，分别给予各药物干预组相应的固本健脑液灌胃，Control组和Model组给予等容积的纯水灌胃，持续12周，同时制备每组粪菌混悬液；另取30只APP/PS1小鼠先进行肠道脱菌处理(GF组),C57BL/6J为空白对照组(Control组),10只，后进行粪菌移植，给予GF组实验第一部分的粪菌混悬液灌胃，Control组给予等容积的纯水灌胃，持续8周。行Morris水迷宫评价各组小鼠学习记忆能力；16SrRNA技术检测各组小鼠肠道菌群差异；HE染色观察各组小鼠海马组织形态；Western Blot检测Zo-1、occludin、Aβ_1-42的表达。结果 与空白对照组相比，模型组小鼠逃避潜伏期与游泳总路程以及首次抵达平台时间显著增加，穿越原平台次数和在目标象限停留时间都明显减少；与模型组比较，各治疗组小鼠逃避潜伏期与游泳总路程以及首次抵达平台时间显著减少，穿越原平台次数和在目标象限...     

黄连-肉桂对db/db小鼠肠道菌群及内毒素影响的研究

目的研究黄连-肉桂对db/db小鼠血糖、肠道菌群及脂多糖(LPS)的影响。方法取6只db/m小鼠为正常组,将30只db/db小鼠随机分成模型组、二甲双胍组、黄连组、肉桂组、黄连-肉桂组各6只。正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余组给予相应药物灌胃8周。灌胃前(0周)及灌胃后每周测量各组小鼠的体重,在灌胃前及灌胃4周、8周后分别测量各组小鼠的血糖;灌胃8周后采集各组小鼠粪便,16S-rDNA高通量测序对肠道菌群进行基因测序;眼球采血,酶联免疫法检测血清中LPS含量。结果各药物组小鼠体重增长趋势均减缓,黄连-肉桂组体重增长减缓最明显。各药物组小鼠血糖呈明显下降趋势,黄连-肉桂组血糖下降趋势最明显;灌胃8周后黄连组和黄连-肉桂组小鼠血糖均明显低于二甲双胍组和肉桂组(P均<0.05),黄连组和黄连-肉桂组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组及二甲双胍组比较,黄连组、肉桂组、黄连-肉桂组小鼠粪便中后壁杆菌门(Firmicutes)丰度明显下降,其中黄连-肉桂组下降最明显;黄连-肉桂组拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形杆菌门(Proteobacteria)及疣微菌门(Verrucomicrobia)丰度明显增加。灌胃8周后各药物组血清LPS含量均较模型组明显降低(P均<0.05),各药物组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05),但黄连-肉桂组最低。结论黄连-肉桂可以有效降低db/db小鼠血糖,其降糖机制可能与有效调节小鼠肠道菌群及减少LPS释放入血有关。     

基于肠道菌群与相关炎症因子的交互作用探讨肝复乐干预肝癌作用机制北大核心CSCD

目的:通过建立肠道菌群和相关炎症因子的交互作用分析,从全新角度探索肝复乐干预肝细胞癌的药效机制。方法:将15只SPF级昆明小鼠随机分为3组,造模获得H22肝癌荷瘤小鼠模型。肝复乐5.4 g/kg组灌胃相应剂量的药物,1次/d;模型对照组、正常对照组予以等体积生理盐水。干预14 d后处死小鼠,取血清、瘤体组织和肠道内容物,HE染色法观察小鼠瘤体坏死情况;ELISA法检测小鼠血清中4个相关炎症因子,高通量测序技术对小鼠的肠道菌群作16S rDNA V3~V4区分析。采用皮尔逊指数相关性(Pearson correlation coefficient)分析法,考察小鼠血清中相关炎症因子与体内肠道菌群交互作用。结果:与正常对照组比较,模型对照组血清中相关炎症因子白介素-10(IL-10)、转化生长因子(TGF-β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量明显升高(P<0.05或P<0.01),IL-4的含量明显降低(P<0.05),H22肝癌荷瘤小鼠肠道菌群物种多样性和丰度降低,变形菌门和疣微菌门等有益菌数量明显减少(P<0.05);与模型对照组比较,肝复乐5.4 g/kg组对肝癌小鼠肿瘤抑制率为64.6%,肿瘤细胞坏死程度严重;血清IL-10、TGF-β、TNF-α的含量明显降低(P<0.05或P<0.01),IL-4的含量明显升高(P<0.05),16S rDNA基因测序显示,肝复乐5.4 g/kg组可提高H22肝癌荷瘤小鼠肠道菌群物种多样性和丰度,并增加变形菌门和疣微菌门等有益菌数量(P<0.05),减少厚壁菌门等致病菌数量(P<0.05)。建立机体炎症因子与肠道菌群互作分析发现:TGF-β与阿克曼氏菌属呈负相关(P<0.01),TNF-α与葡萄球菌属呈正相关(P<0.01),副拟杆菌属与IL-10呈正相关(P<0.01),IL-4与乳酸杆菌属呈正相关(P<0.01)。结论:肝复乐可调节肠道菌群结构,改善相关炎症因子的异常表达,差异肠道菌种与4个炎症因子呈高度相关性,提示其可通过调控炎症相关的肠肝轴遏制肝癌。     

电针对APP/PS1转基因小鼠海马P-糖蛋白和间质液β淀粉样蛋白水平的影响

目的:通过观察电针对于APP/PS1双转基因小鼠海马P-糖蛋白表达和脑间质液Aβ水平的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法:12只4月龄雄性APP/PS1转基因鼠,随机分为电针组和模型组;6只4月龄雄性C57BL鼠为正常对照组。电针"百会""涌泉"2周后,采用脑微透析检测技术取小鼠脑间质液,Elisa法检测小鼠间质液Aβ水平;免疫组化法观察小鼠海马P-糖蛋白表达情况。结果:免疫组化结果显示,与正常对照组比较,模型组P-糖蛋白表达明显减少;与模型组比较,电针组的表达相对增加。ELISA检测显示,与正常对照组比较,模型组的间质液Aβ明显减少;与模型组比较,针刺组Aβ水平明显下降。结论:电针可以降低脑间质液Aβ水平,并可以升高海马内P-糖蛋白的表达。     

葛根素减轻APP/PS1双转基因小鼠的认知障碍和tau蛋白过磷酸化

该实验利用APP/PS1双转基因模型小鼠,观察葛根素对小鼠学习记忆能力及tau蛋白磷酸化的影响。选用APP/PS1双转基因模型小鼠,3个月龄后开始灌胃给药。给药3个月后,通过Morris水迷宫实验测试小鼠学习记忆能力的变化;行为学测试结束后,处死动物,留取脑组织标本,ELISA法检测皮层Aβ水平;Western blot法检测皮层tau蛋白、磷酸化tau蛋白、GSK3β及磷酸化GSK3β(Ser9)蛋白表达情况。Morris水迷宫实验显示,APP/PS1双转基因模型小鼠逃避潜伏期较正常对照组明显延长,原象限停留时间明显缩短。葛根素组小鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短,原象限停留时间明显延长。与正常对照组比较APP/PS1双转基因模型小鼠皮层Aβ水平增多,磷酸化tau蛋白表达显著增加,磷酸化GSK3β(Ser9)蛋白表达降低;给予葛根素后,APP/PS1转基因小鼠寻台潜伏期明显缩短,Aβ水平减少,磷酸化tau蛋白表达显著减少,磷酸化GSK3β(Ser9)蛋白表达增加。葛根素通过减少Aβ的生成,激活GSK3β信号通路,抑制tau蛋白磷酸化,改善APP/PS1双转基因模型小鼠的学习记忆损害。     

观察电针“百会”、“涌泉”两穴对不同月龄APP/PS1双转基因小鼠海马Aβ淀粉样沉淀及超微结构的影响

目的观察电针"百会"、"涌泉"两穴对5月龄和10月龄淀粉样前体蛋白/早老蛋白1(amyloid precursor protein/presenilin-1,APP/PS1)双转基因鼠海马β淀粉样蛋白(AmyloidβProtein,Aβ)沉积及超微结构的影响。方法分别将4月龄和9月龄的APP/PS1双转基因小鼠按随机分配法分为模型组、电针组和药物组,以相同月龄同窝阴性小鼠作为对照组,4月龄每组12只,9月龄每组11只。电针组取"百会"、"涌泉"两穴,每次留针时间为15分钟,隔日1次,治疗5周;药物组予多奈哌嗪片0.92 m L/g灌胃,取脑透射电镜片并观察。结果 5月龄透射电镜结果显示:在微血管、神经元突触及神经元超微结构上对照组优于模型组。10月龄透射电镜结果显示:模型组海马出现Aβ淀粉样沉淀——老年斑。结论 5月龄小鼠行为学出现阿尔茨海默病样改变;10月龄APP/PS1双转基因小鼠海马出现老年斑;电针治疗APP/PS1双转基因小鼠可能对海马超微结构有保护作用。     

调更汤对更年期女性记忆能力影响的临床研究

[目的] 观察调更汤对更年期女性记忆能力的影响。[方法] 80例记忆能力明显减退的更年期综合征患者随机分为治疗组及对照组,每组各40例,治疗组给予中药调更汤治疗,对照组给与补佳乐结合黄体酮胶囊人工周期治疗,疗程为12周。[结果] 治疗组完成观察38例,对照组完成观察37例,两组治疗后与治疗前比较对更年期综合征患者改良KI评分均有明显改善（P<0.01）,治疗后两组疗效无统计学差异（P>0.05）。两组治疗后患者记忆商均有提高,治疗组优于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。两组血清雌二醇（E2）,黄体生成素（LH）水平比较,对照组治疗后与治疗前比较差异有统计学意义（P<0.01）。[结论] 调更汤可提高更年期记忆能力下降患者的记忆商,改善记忆能力。根据中医治未病思想,更年期记忆能力的改善有望降低认知功能下降的发生,从而有可能降低女性阿尔茨海默症的发病。     

三焦针法对阿尔茨海默病免疫功能影响的研究

[目的]观察三焦针法对阿尔茨海默病(AD)的临床疗效及对患者免疫功能的影响。[方法]收集AD患者32例和健康老年人30例。AD组给予三焦针法,取穴膻中、中脘、气海、血海、足三里和外关,健康组不给予任何干预。利用简易精神状态检查表(MMSE)、临床痴呆量表(CDR)、老年性痴呆评估量表-认知分量表(ADAS-cog)和日常生活活动量表(ADL)评价AD患者针刺前后的认知功能、非认知功能和日常生活能力。应用流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA法)检测外周血CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+T细胞数量、CD4~+/CD8~+比例、免疫球蛋白(IgG)、白介素(IL)-1β、IL-2、IL-6、干扰素-γ(IFN-γ)的水平。[结果]针刺后AD组MMSE评分升高,CDR、ADAS-cog、ADL评分降低(P0.05)。与健康组比较,AD组CD3~+、CD8~+T细胞数量减少,CD4~+T细胞数量增加(P0.05),针刺后CD3~+T细胞数量增加(P0.05)。与健康组比较,AD组IL-1β、IL-2、IL-6、IFN-γ水平增加(P0.05),IgG未见明显改变(P0.05),针刺后以上细胞因子水平降低(P0.05)。[结论]三焦针法可能通过调节AD患者的免疫功能而改善其痴呆状态。     

止颤汤治疗帕金森病运动并发症的临床研究＊

目的 观察止颤汤治疗帕金森病运动并发症的临床疗效。方法 采用双盲、安慰剂平行对照临床试验设计，将100例帕金森病运动并发症患者，随机分为治疗组（50例）与对照组（50例），两组在原有治疗方案上，治疗组加服止颤汤颗粒剂，对照组加服止颤汤颗粒安慰剂，疗程12周，每4周随访1次，比较两组帕金森病综合评分量表IV（UPDRS IV）、不自主运动评定量表（AIMS）、中医证候量表评分，评价患者帕金森病运动并发症改善情况。结果 治疗后治疗组各项评分随时间改善，UPDRSIV、UPDRSIV-A、中医证候评分从第8周起与对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01），AIMS肢体部分评分在12周时与对照组比较，差异有显著统计学意义（P < 0.01）；与对照组相比，治疗组中医证候疗效有明显改善（P < 0.01）。结论 止颤汤治疗帕金森病运动并发症有效。     

针刺四关穴对帕金森病的疗效及相关机制研究

目的:探讨针刺四关穴对帕金森病(PD)临床疗效。方法:选取2017年12月至2019年1月宝安区中医院收治的PD患者60例进行回顾性分析,按照治疗方法不同分为对照组和观察组,每组30例。对照组予药物治疗联合脑深部电刺激治疗,观察组在对照组基础上加用针刺四关穴治疗,治疗8周。比较2组患者治疗前后氧化应激、帕金森综合量表评分(UPDRS评分)、生命质量测定简式量表(WHO-QOL-2)、肌电图震颤的差异及临床疗效。结果:1)治疗后2组患者精神、行为、情绪积分,日常活动积分、运动功能积分、运动并发症积分、UPDRS总评分、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、固定姿势震颤的频率、强度和坐位静止震颤强度较治疗降低,生理、环境、独立性、社会关系、心理、WHO-QOL-2总评分、超氧化物歧化酶(SOD)、多巴胺(DA)较治疗前均升高(P<0.05),观察组优于对照组(P<0.05)。2)观察组显效率、总有效率为46.67%、86.67%,优于对照组的30%、73.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺四关穴可改善PD病情,作用机制可能是抑制炎性反应和氧化应激反应有关。     

加味四妙勇安汤对CIA大鼠关节炎性病理损伤的作用研究

[目的]探讨加味四妙勇安汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节炎指数(AI)、关节病理损伤的改善情况,对大鼠体内白介素(IL)-6,IL-17,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。[方法]建立CIA模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、阳性药(来氟米特)组、中药高、中、低剂量组,设正常对照组,每组6只,干预治疗12周。每周评价每只鼠的AI值。12周后麻醉处死,取各组大鼠右踝关节,光镜下观察病理学变化。采用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)法检测大鼠膝关节滑膜IL-6、IL-17、TNF-α的m RNA转录水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清IL-6、IL-17、TNF-α的蛋白表达水平。[结果]中药3种剂量组在6~12周时AI分值较模型组明显下降(P0.05或P0.01);而且在8~10周还分别表现出较阳性组显著的改善(P0.05或P0.01)。光镜检测结果显示:中药中剂量组明显改善了CIA模型大鼠关节滑膜增生、炎性细胞浸润情况。细胞因子检测结果显示各治疗组IL-6、IL-17、TNF-α的m RNA及蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01)。[结论]加味四妙勇安汤对CIA模型大鼠关节炎改善作用的分子机制,可能与下调炎性细胞因子IL-6、IL-17、TNF-α的表达相关。     

基于网络药理学和分子对接研究红花治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的:运用网络药理学和分子对接的方法研究红花治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:通过查阅文献和数据库获取红花的有效药物成分,利用数据库预测红花的成分靶点与AD的靶点,并对红花靶标基因进行标准化。运用Cytoscape 3.7.2软件构建“红花-成分-靶点”网络,利用红花的靶标基因与AD的靶标基因的交集基因构建蛋白相互作用(PPI)网络。通过DAVID数据库进行GO分析和KEGG富集分析,最后利用Ledock软件对关键成分与核心靶点进行分子对接。结果:获得21种红花有效成分和391个作用靶点,AD的疾病靶点535个,其中红花与AD的共同作用靶点有94个。共得到535个GO分析,43个KEGG通路,主要涉及阿尔茨海默病信号通路、ErbB信号通路、5-羟色胺能突触、癌症中的蛋白多糖等;分子对接结果显示,核心成分与关键靶点具有良好的结合能力。结论:红花治疗由微循环障碍引起的AD的潜在作用机制,且具有多成分、多靶点、多通路的特点。     

知母宁在神经退行性疾病中作用机制的研究进展

知母宁是一种具有C-糖苷和氧杂蒽酮成分的天然化合物,具有抗氧化、抗炎性损伤、提高线粒体生物能量和改善认知缺陷等多种生物活性,可以通过血脑屏障在中枢神经系统中发挥神经保护作用。对知母宁在神经退行性疾病中的作用及机制研究进展进行综述,以此探究其发挥神经保护作用的潜在分子机制,为其进一步的研究和应用提供参考。     

基于中医方证代谢组学的开心散干预老年痴呆症大鼠的效应物质动态分析

目的：本研究在开心散干预氯化铝联合D-半乳糖诱导老年痴呆症大鼠模型有效性的基础上,揭示开心散对老年痴呆症（AD）不同阶段干预作用的代谢物靶点,构建开心散体内成分与内源性生物标记物的网络关系,分析开心散对AD发展过程干预作用的效应物质的动态变化。方法：利用行为学指标评价模型复制进程以及开心散的干预作用;运用代谢组学技术和方法分析开心散对AD大鼠模型不同阶段干预作用的靶点;应用UPLC-MS技术和MSE质谱数据采集模式,分别对开心散体外化学成分和口服给药后的血中移行成分进行表征及鉴定;利用PCMS手段,构建复方药效物质基础与内源性生物标记物的数理模型,发掘开心散防治老年痴呆症不同阶段的效应物质。结果：给予AD大鼠开心散溶液治疗后,模型大鼠的认知功能得到改善,其病理学进程得以延缓。代谢组学研究表明,开心散对AD模型不同阶段标记物的异常表达起到恢复作用,体现了开心散干预老年痴呆症多靶点、多途径的特点。结论：基于中医方证代谢组学方法为开心散减缓AD进程研究提供了新的思路。     

基于脑肾相济理论异病同治论治常见脑髓病

脑髓病是一种常见的神经系统疾病,其对患者的生命质量、生命安全造成不可忽视的恶劣影响。本文通过对脑肾相济理论进行阐述,认为脑为髓海,肾主骨生髓,二者间关系密切,相互影响。故“肾精亏虚,脑髓失充”是脑髓病的重要病机,“填肾精,益脑髓”是治疗脑髓病的基本方法。阿尔茨海默病、血管性痴呆、帕金森病是临床常见的神经系统疾病,三者同属于脑髓病范畴,脑肾相济理论是临床论治脑髓病的常用理论基础,从脑与肾的生理功能与联系出发,认为脑肾相济是精神充沛、情感智能、行为活动的基础。从病理角度出发,认为补肾祛瘀是治疗脑髓病的基本治法。本文基于脑肾相济理论从脑与肾的生理功能,二者间紧密的联系出发,探析脑髓病的病理基础,通过阿尔茨海默病、血管性痴呆、帕金森病具有相同的病机角度,异病同治不同脑髓病,为临床治疗脑髓病提供具有基础、统一、一致的方法,并将典型医案进行分享。     

屈膝点按叩揉法调控L型电压依赖性钙通道影响软骨细胞代谢的机制研究

[目的]通过分析屈膝点按叩揉法调控L型电压依赖性钙通道影响软骨细胞合成代谢,探讨该手法防治膝骨性关节炎(KOA)的分子机制。[方法]50只新西兰大耳白兔随机分成5组,运用Hulth造模法构建KOA兔模型,治疗组采用屈膝点按叩揉法治疗,阳性对照组采用关节腔注射玻璃酸钠注射液治疗,正常组、假手术组及模型组同条件饲养。通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测L型电压依赖性钙通道α1亚基及合成代谢相关蛋白的表达。[结果]治疗组、阳性对照组Cav1.2、Cav1.3、Cav1.4、PTHr P、ColⅡ蛋白的表达均高于模型组,差异具有统计学意义(P0.05),治疗组Cav1.2、Cav1.3、Cav1.4、PTHr P、ColⅡ蛋白的表达与阳性对照组相比无统计学差异(P0.05)。[结论]屈膝点按叩揉法通过影响L型电压依赖性钙通道蛋白,增加细胞内钙离子浓度,上调甲状旁腺激素相关蛋白(PTHr P)的表达,进而发挥促软骨细胞合成代谢的作用。