超高效液相色谱-串联四极杆质谱法同时检测鹿角胶饮片中牛皮源、驴皮源及鹿角胶成分

目的建立鹿角胶饮片中牛皮源、驴皮源及鹿角胶成分同时检测方法。方法精密称定鹿角胶饮片粉末0.1 g,加1%碳酸氢铵溶液超声溶解、稀释、过滤,用胰蛋白酶酶解12小时,利用超高效液相色谱-串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)和多反应监测模式(MRM)分别检测黄明胶特征肽段离子对(m/z)641.3→726.2,783.3,阿胶特征肽段离子对(m/z)539.8→612.4,924.0,鹿角胶特征肽段离子对(m/z)765.4→554.0,733.0。色谱柱为BEH-C18,以乙腈—0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。分别考察上述三种特征肽段离子对的专属性,并用逐级稀释法确定方法检出限。用所建方法检测10批市售鹿角胶饮片。结果黄明胶、阿胶、鹿角胶三种对照药材在所建方法下保留时间分别为3.6分钟、6.2分钟和10.9分钟,无基质干扰,检测限分别为0.1,2.0,1.0 mg/L,对照药材混合溶液进样6次,鹿角胶峰面积RSD为2.1%,黄明胶峰面积RSD为3.7%,阿胶峰面积RSD为2.8%,方法重复性良好。将所建方法应用于10批市售鹿角胶饮片的检测分析,1批结果为不合格(检出牛皮源成分)。结论所建方法专属性强、灵敏度高,实现了鹿角胶饮片中主成分鉴别与非法添加成分检查的同时检测,进一步提高检验效率,可有效控制鹿角胶质量。     

QuPPe-高效液相色谱-串联质谱法测定3种根茎类药材中矮壮素和甲哌鎓残留量

目的 建立高效液相色谱-串联质谱同时检测3种根茎类药材中植物生长调节剂矮壮素和甲哌鎓残留的方法。方法 以1%甲酸甲醇-水(1∶1)为提取溶剂、以分散固相萃取粉末PXA为净化材料的改良QuPPe方法,对药材中矮壮素和甲哌鎓进行充分提取并对提取液进行净化;采用正离子的质谱扫描模式对待测物实现单次进样的同时监测,并引入同位素内标辅助定量。结果 新建方法按照欧盟标准SANTE 11312/2021进行方法学验证,2种化合物线性关系良好(r>0.99),定量限20μg/kg,检出限10μg/kg;加样回收率在76.7%～105.0%之间,日内精密度和日间精密度RSD均小于10%,满足欧盟方法学考察相关要求。结论 新建方法可用于3种根茎类药材中矮壮素和甲哌鎓残留的检测。     

藏药二十五味马宝丸中药材的鉴别与丁香酚的测定

目的：鉴别藏药二十五味马宝丸中药材，对丁香酚建立更科学、合理、有效的测定方法。方法：在参照相关文献的基础上采用薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC）测定。结果：在Y=5.721×10~5X+7.702×10~4(r=0.9998）的基础上连续进样6次时RSD（丁香酚峰面积积分值）=0.65%时系统精密度最佳；RSD=0.61%时，对照品和供试品溶液含量均最稳定；重复性试验结果最佳时，供试品溶液及对照品溶液的进样含量RSD=0.68%；平均加样回收率100.45%,RSD=0.83%时，丁香酚的加样回收率最佳；丁香酚的最佳含量分别为1.240 mg·g~(-1)、1.312 mg·g~(-1)和0.741 mg·g~(-1)。结论：在对藏药二十五味马宝丸中的药材进行鉴别与丁香酚测定时，TLC和HPLC均有较高的准确率，且操作方便。     

乳香中三萜类成分的薄层色谱鉴别和含量测定

目的：以乳香中主要三萜类成分为指标,建立和完善乳香的定性定量分析方法。方法：用TLC鉴别法,以三萜酸类成分11-羰基-β-乙酰-乳香酸（AKBA）为对照品,采用硅胶GF254薄层板,以环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（10：2：0．2）为展开剂,鉴别乳香药材中AKBA;用HPLC测定方法,Agilent TC-C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,乙腈-0．05％磷酸溶液（80：20）为流动相,流速：0．8mL·min^-1,检测波长：250nm,测定不同来源乳香药材中AKBA和11-羰基-β-乳香酸（KBA）含量。结果：乳香TLC图谱中,AKBA斑点清晰、分离效果好;HPLC含量测定法中,AKBA和KBA分别在0．02463～0．2463mg·mL^-1和0．01004～0．1004mg·mL^-1,线性关系良好。AKBA和KBA的回收率分别为96．1％（RSD=3．1％）和96．4％（RSD=3．5％）。结论：所建立的TLC和HPLC法操作简便、结果准确、重复性好,可作为乳香定性、定量的质量控制方法。     

高效液相色谱法同时检测石菖蒲中β-细辛醚、α-细辛醚的含量

目的:建立石菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的HPLC含量测定方法,并对石菖蒲药材进行质量评价。方法:采用岛津高效液相色谱仪,对样品的前处理方法、色谱柱、检测波长、流动相等分析条件进行了优化筛选,并对分析方法的线性范围、精密度、重复性、稳定性、准确度进行考察,建立同时检测β-细辛醚、α-细辛醚的石菖蒲药材质量控制方法。结果:采用Kromasil C18色谱柱,柱温35℃,流动相甲醇-水(含0.1%甲酸)(70∶30)等度洗脱,检测波长257 nm。回归方程β-细辛醚为Y=2×106X+205.93(r=0.999 9,0.026 96~0.539 2μg),α-细辛醚Y=6×106X-117.6(r=0.999 9,0.016 04~0.320 8μg);方法精密度β-细辛醚RSD 0.119%,α-细辛醚RSD 0.116%;重复性试验β-细辛醚RSD 0.877%,α-细辛醚RSD 0.815%;稳定性试验室温下20 h内样品中β-细辛醚RSD 0.42%,α-细辛醚RSD 0.25%;准确度β-细辛醚平均回收率为97.7%(RSD1.9%),α-细辛醚平均回收率为102.3%(RSD 1.5%)。所收集的石菖蒲样品中β-细辛醚含量1.12%~3.51%,α-细辛醚含量0.03%~1.01%。结论:该方法快速、准确、重复性好,可用于石菖蒲药材的质量评价。     

高效毛细管电泳内标法测定山银花中绿原酸含量

目的：建立高效毛细管电泳内标法测定山银花中绿原酸的含量,对产自贵州绥阳、安龙、兴义的山银花中绿原酸进行含量分析。方法：以腺苷为内标物,20mmol/L的硼砂（p H=9.12）为缓冲溶液的毛细管区带电泳法进行测定。结果：当腺苷内标溶液的浓度为0.10 mg/L时,绿原酸在3～28μg/m L范围内线性关系良好,山银花样品中绿原酸含量得到准确测定。结论：该定量方法准确,简便,重复性好。     

马鹿茸不同分子量肽段中水解及游离氨基酸的含量分析

目的:测定马鹿茸不同分子量肽段中水解氨基酸和游离氨基酸的含量及构成。方法:采用柱前衍生化,氨基酸自动分析仪对马鹿茸肽段中氨基酸类成分进行含量测定。色谱柱为氨基酸分析专用ODS柱,柱温:27℃;检测波长360 nm;流动相总流速1.2 mL·min~(-1)。结果:马鹿茸肽段中氨基酸类成分线性关系良好,r均大于0.999;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%;加样回收率在96.6%~104.7%之间,RSD值均小于2.4%。不同分子量肽段的氨基酸含量及构成有一定差异。50~100 k分子量段的氨基酸含量最高。结论:该方法简便可行、重复性好、准确度高,可用于马鹿茸药材多肽中水解氨基酸及游离氨基酸的含量测定。     

HILIC-MS/MS结合酶解-QuEChERS净化法测定含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留

目的建立亲水作用色谱-串联质谱(HILIC-MS/MS)结合酶解-QuEChERS净化法测定含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留。方法样品中加入¹³C₅利巴韦林内标,1%乙酸乙腈超声提取,在37℃下经酸性磷酸酶酶解,经QuEChERS净化萃取包净化后用Waters ACQUITY UPLC BHE HILIC (2.1 mm×100 mm, 1.7μm)色谱柱分离,以5 mmol/L乙酸铵(含0.2%甲酸)-乙腈为流动相梯度洗脱,在电喷雾正离子电离多反应监测模式下监测,内标法定量。结果乌鸡白凤丸、复方鸡内金片中利巴韦林含量在1.0~100μg/kg之间时,相关系数大于0.999,方法检出限为0.3μg/kg,定量限为1.0μg/kg,日内回收率为95.47%~100.75%,日内精密度RSD为0.53%~2.76%,日间回收率为94.47%~101.11%,日间精密度RSD为1.00%~2.33%。结论该方法快速简便,线性范围宽,重复性好,可用于含鸡源成分中成药中利巴韦林及其代谢物总残留的定性及定量检测。     

HPLC法测定南丹参中丹酚酸B的含量

目的:建立南丹参中丹酚酸B的含量测定方法。方法:色谱柱:Dikma Diamonsil C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇-乙腈-1.5%甲酸溶液(16∶16∶68),流速:1mL/min,检测波长286nm,柱温:室温。结果:线性范围为11.984～299.6 mg.mL-1(r=0.9998),平均回收率为99.57%,RSD=1.83%,精密度RSD=1.66%(n=6),重复性RSD=1.08%(n=6),稳定性RSD=1.60%。结论:方法稳定、可靠,可作为该药材的质量控制方法。     

RP-HPLC法测定怀牛膝中β-蜕皮甾酮和牛膝皂苷II的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定怀牛膝中牛膝皂苷II和β-蜕皮甾酮的含量方法。方法:Sun Fire ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇—0.5 m L/L磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L/min,最大吸收波长(牛膝皂苷II 240 nm,β-蜕皮甾酮250 nm)下检测。结果:牛膝皂苷II在1.42~14.20μg、β-蜕皮甾酮在0.220 8~2.208 0μg范围内,线性关系良好,相关系数分别为0.999 6,0.999 8,平均回收率牛膝皂苷II为98.31%(RSD=2.43%),β-蜕皮甾酮为100.00%(RSD=2.88%)。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于怀牛膝的定量控制。     

鱼腥草黄酮类成分HPLC指纹对照法研究

目的:建立HPLC法测定鱼腥草药材黄酮类成分的指纹图谱,从定性定量角度评价药材质量.方法:采用C18色谱柱,以(A)甲醇、(B)0.1%磷酸水溶液-甲醇(90∶ 10)混合溶液为流动相梯度洗脱,测定不同产地鱼腥草药材HPLC指纹图谱,确定共有模式及指纹对照品,以各产地药材与指纹对照品之间夹角余弦和相对欧氏距离为参考指标,分别从化学组成和相对含量对指纹图谱进行定性定量相似性评价.结果:建立的鱼腥草药材黄酮类成分的指纹图谱确立了14个共有峰;方法学考察中各特征指纹峰保留相对稳定,相对保留时间和相对峰面积的RSD分别小于0.2%和5.0%.槲皮苷在1.07～83.4 μg/mL范围内线性关系良好,加样回收率为100.3%(n=6),RSD为0.82%.结论:建立的鱼腥草黄酮类成分的指纹图谱重复性和稳定性好,指纹对照法结合定性和定量相似度评价,为有效控制鱼腥草药材质量提供了可靠依据.     

HPLC法测定民族药露水草中β-蜕皮激素的含量

目的露水草中β-蜕皮激素的含量测定。方法采用高效液相法对露水草中β-蜕皮激素含量进行测定。色谱柱为Agilent Extend-C18柱(4.6×150 mm,粒径5μm);流动相为甲醇-水(40:60);柱温35℃;检测波长248 nm;流速1.00 mL/min;进样量5μL。结果β-蜕皮甾酮溶液在0.025 mg/mL～0.5 mg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999)。平均回收率为102.02%(n=6),RSD值为1.0%。结论本方法重复性好,稳定性好,精密度高,适用于β-蜕皮甾酮的含量测定。     

北苍术苍术素、苍术酮、β-桉叶醇测定及特征图谱研究

目的研究北苍术药材中苍术素、苍术酮和β-桉叶醇的GC测定及特征图谱研究方法,为科学评价其质量提供依据。方法采用GC色谱法,以Agilent HP-5毛细管色谱柱,载气为氮气,FID检测器,程序升温,分流进样,进样口温度250℃,检测器温度250℃,柱温130℃;外标法,测定承德与其他市场采购的25批北苍术样品中苍术素、苍术酮和β-桉叶醇的量;建立特征图谱并利用中药色谱指纹图谱评价系统进行相似度分析。结果建立了北苍术药材苍术素、苍术酮和β-桉叶醇量测定和GC特征图谱研究方法,指认了9个特征峰;β-桉叶醇线性范围20.00~406.10μg/m L(r=0.999 9),平均加样回收率为100.75%,RSD为1.17%,最低检测限0.12 ng;苍术酮线性范围35.00~348.70μg/m L(r=0.999 5),平均加样回收率为99.84%,RSD为1.29%,最低检测限0.04 ng;苍术素线性范围在16.46~329.30μg/m L(r=0.999 6),平均加样回收率为100.12%,RSD为0.88%,最低检测限0.06 ng。结论建立的苍术素、苍术酮、β-桉叶醇定量测定和特征图谱方法简便、灵敏、稳定性和重复性良好,测定结果准确可靠。     

野生全蝎粉可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析研究

目的:探索野生全蝎粉水溶性蛋白质SDS-PAGE电泳的最佳分离条件,测定各蛋白质的大体分子量。方法:采用55%乙醇提取,75%以上乙醇沉淀的方法获得全蝎粉水溶性蛋白质,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量,SDS-PAGE法和Quantity one软件测定全蝎粉水溶性蛋白质的相对分子量。结果:全蝎粉水溶性蛋白质的含量为4.649 mg/mL;得到较好全蝎粉可溶性蛋白质的7条电泳谱带,相对分子质量分别为70.447,64.730,54.139,40.832,29.939,26.494,19.172 kDa。结论:这7条全蝎粉水溶性蛋白质的特征谱带可用于全蝎粉水溶性蛋白质的种类鉴别。     

RRLC-UV法同时测定丹参中酚酸类成分的含量

目的:建立RRLC-UV法同时测定丹参药材中9种酚酸的含量.方法:以3,4-二羟基苯乙酸为内标,采用Agilent Zorbax Eclipse Plus C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min~(-1),检测波长质量286 nm.结果:这9种成分在测定质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数不低于0.999 5.仪器精密度和方法精密度RSD均小于2.4%,9种成分平均回收率在96.7%～102.6%,RSD均小于3.1%(n=3).结论:该方法简便、快速,结果准确,重复性好,适用于丹参药材的质量控制.     

藏药结血蒿生药鉴定与质量标准研究

目的对结血蒿进行生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。方法运用药材性状、显微特征、薄层色谱、高效液相色谱对该药材进行鉴定。结果选择50%甲醇作为提取溶剂,超声时间30 min,溶剂用量为样品量的100倍,系统精密度良好,有良好的重复性,至少在12 h内稳定,加样回收较好,测得药材中绿原酸平均含量为1.372 7 mg/g（n=3）,RSD=1.99%。。结论结果可为结血蒿生药鉴定、相关质量标准的提高、资源开发利用提供依据。     

气相色谱-质谱联用法测定不同产地苦玄参中有机磷农药残留

目的 测定广西不同产地苦玄参中5种有机磷农药残留量.方法 以混合溶剂超声提取,提取物通过活性炭净化后进行气相色谱-质谱联用(GC-MS)测定.结果 5种农药回收率在72%～108%之间,RSD＜12%.农药的最低检测限在0.51～1.27μg /kg之间.5种产地药材中有机磷农药残留均未超过国家标准.结论 GC-MS内标法测定苦玄参药材中的农药残留,方法简便快速、可靠、灵敏度高,可作为有机磷农药残留的定性定量方法.     

HPLC-ESI-MSn法测定黄芪药材中黄芪甲苷

目的 建立黄芪醇提物中黄芪甲苷的高效液相色谱-电喷雾-离子阱质谱测定方法,测定黄芪药材中黄芪甲苷.方法 超声法制备黄芪药材的总提物,反相色谱分离,采用离子阱质谱多级反应模式,以m/z807.4→627.2为提取离子对,外标法测定黄芪甲苷.结果 方法 最低检测限为5 ng/mL,线性范围为0.10～1.04 mg/mL,精密度、重复性、稳定性RSD均小于5.0%,平均加样同收率为96.51%.供试黄良药材中含黄芪甲苷为0.54 mg/g.结论 该方法 具有简便,快速和灵敏度高的特点,可用于黄芪药材及其生物制品样品中黄芪甲苷测定.     

HPLC法测定党参中5-羟甲基糠醛的含量

目的：建立党参中己糖降解产物5-羟甲基糠醛（5-HMF）的含量测定方法,对党参药材中的5-羟甲基糠醛进行含量测定。方法：采用Agilent Extend-C18（250 mm＆#215;4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.3%醋酸溶液（3∶97）为流动相,检测波长284 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃。结果：5-羟甲基糠醛在浓度为2.538～63.45μg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系（r=0.9998）,精密度和重复性的RSD分别为0.8％和2.5%。结论：该方法操作简便,结果准确可靠,可用于党参中5-羟甲基糠醛的含量测定,为进一步评价党参的安全性提供参考。     

小金胶囊中麝香酮含量测定方法研究

目的:建立准确可靠的小金胶囊中麝香酮含量测定方法。方法:采用(5%-苯基)-甲基聚硅氧烷为固定相的色谱柱(30 m×0.32 mm×1.8μm),FID检测器温度为300℃,载气为氮气,流速为1.5 mL/min,未分流,柱温为程序升温,进样量为1μL。以正十八烷为内标物,采用内标法以峰面积比进行检验计算。结果:阴性对照品溶液在与内标溶液、对照品溶液和供试品溶液色谱图相同时间处未见相同色谱峰,麝香酮在进样量为0.1201~1.2006 ng的范围内线性关系良好(R2=0.9997),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<3%,平均回收率为99.93%,RSD为1.30%(n=6)。结论:该方法操作简便,与本品现行药典方法相比,检测结果更准确重复性更好,检测时间大大缩短,可用于小金胶囊中麝香酮的含量测定。