川芎嗪对鼠骨关节炎关节软骨MMP-1、TIMP-1表达的影响

目的:观察关节内注射川芎嗪对鼠骨关节炎(Osteoarthritis,OA)模型关节软骨退变及软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,探讨川芎嗪对OA的修复作用。方法:50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组、丹参组和川芎嗪组5组:除空白对照组外,其余四组作左侧跟腱切除建立右膝OA模型。造模后第5周开始,川芎嗪组于右膝关节内注射盐酸川芎嗪注射液作为治疗,于第12周末处死动物,取股骨外髁软骨标本,进行HE染色,光镜下观察其病理改变,以免疫组织化学法检测关节软骨中的MMP-1、TIMP-1水平。结果:川芎嗪组关节软骨退变减缓,Mankin’s评分及软骨中MMP-1的水平非常显著低于模型组(P<0.01),TIMP-1水平较模型组显著上升(P<0.01)。结论:川芎嗪能明显降低OA软骨退变的程度,明显降低OA软骨中MMP-1的水平,增加TIMP-1的水平,具有保护和修复早期OA关节软骨的作用,可延缓OA的病理过程,有可能成为防治OA的良好药物。     

威灵仙注射液关节腔离子导入对骨关节炎NO、SOD和PGE2的影响

目的:研究威灵仙注射液关节腔离子导入对骨关节炎NO、SOD和PGE2的影响。方法:新西兰兔40只,除保留10只作为正常组外,余均采用木瓜蛋白酶关节腔注射复制OA模型。造模4周后,根据模型动物关节肿胀度随机分为模型组、威灵仙组(Wlx组)、醋酸曲安奈德组(Qand组)。实验结束时,抽取各组动物关节滑液进行NO、SOD和PGE2的检测。结果:与模型组相比较,Wlx组和Qand组动物关节滑液中的NO和PGE2的含量显著降低(P0.05),SOD的含量升高(P0.05);但与Qand组相比,Wlx组动物关节滑液中NO和PGE2的抑制作用显著弱于Qand(P0.01),对升高SOD有微弱的优势。结论:威灵仙关节腔离子导入可能具有抑制炎症相关因子NO、PGE2的释放和增强SOD的活性来减缓OA的病变过程。     

青藤碱关节腔注射对膝骨关节炎兔软骨和滑膜组织形态学及基质金属蛋白酶-13和软骨寡聚基质蛋白的影响

目的观察青藤碱关节腔注射对膝骨关节炎模型兔关节软骨和滑膜组织形态学及血清和关节液中基质金属蛋白酶(MMP)-13和软骨寡聚基质蛋白(COMP)含量的影响,探讨青藤碱治疗膝骨关节炎的部分作用机制。方法 38只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组和青藤碱组。空白组不予任何处理,模型组、透明质酸钠组和青藤碱组通过木瓜蛋白酶关节腔注射法诱导膝骨关节炎模型后,分别用生理盐水、透明质酸钠和青藤碱干预。5周后取关节软骨及滑膜HE染色并进行组织学评分,ELISA检测血清及关节液中MMP-13和COMP的含量。结果模型组软骨Mankin's评分和滑膜组织病理学评分显著高于空白组,青藤碱组软骨Mankin's评分和滑膜组织病理学评分显著低于模型组(P0.01);模型组血清及关节液中MMP-13和COMP含量较空白组显著升高(P0.01);青藤碱组血清、关节液中MMP-13含量较模型组显著降低,关节液中COMP含量较模型组降低(P0.05,P0.01)。结论青藤碱具有改善滑膜炎症、延缓关节软骨退变进程的作用。     

川芎嗪对鼠骨关节炎软骨组织病理学和IL-1β表达的影响

目的：观察关节内注射川芎嗪对鼠骨关节炎（Osteoarthritis,OA）模型关节软骨组织病理学及白细胞介素-1β（IL-1β）表达的影响,探讨川芎嗪对OA的修复作用。方法：50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组、丹参组、川芎嗪组5组,每组10只,除空白组外,其余各组作左侧跟腱切除建立右膝OA模型。造模后4周,每组随机处死动物2只,以检测动物模型是否成功;剩余40只于造模后第5周开始,空白组、模型组右膝关节内注射生理盐水,透明质酸钠组、丹参组、川芎嗪组右膝关节内分别注射相应药物。于第12周末全部处死动物,取股骨外髁软骨标本,进行苏木精-伊红、Masson染色,光镜下观察其病理改变,以免疫组织化学法检测关节软骨中的IL-1β水平。结果：与模型组比较,川芎嗪组关节软骨破坏减轻,Ⅱ型胶原脱失轻微,Mankin’s评分明显改善（P〈0.01）,IL-1β的表达水平显著降低（P〈0.01）。结论：川芎嗪能明显降低OA软骨退变的程度,阻止软骨中正常Ⅱ型胶原向Ⅰ型胶原的转变,明显降低OA软骨中IL-1β的水平,具有保护和修复早期OA关节软骨的作用。     

丹参加玻璃酸钠预防性关节内注射对兔膝关节软骨退行性变的影响

目的通过观察丹参加玻璃酸钠预防性关节内注射对兔膝关节软骨退行性变的影响,探讨其治疗作用机理。方法将80只日本大耳白兔随机分为A组、B组、C组、D组,每组20只。通过切断膝关节前交叉韧带和内侧副韧带造成膝OA模型,每组每只动物分别注入0.3 ml的生理盐水(A组)、玻璃酸钠注射液(B组)、丹参注射液(C组)、丹参加玻璃酸钠混合液(D组),手术当天给药,每周1次。于给药4、8周后分批处死实验兔,每批每组各10只。行关节腔大体观察、光镜下组织学观察、凋亡软骨细胞检测。结果各组术后4、8周组间比较,软骨退变计分、软骨凋亡细胞计数,有无显著性意义;D组与B、C组之间差异无显著性,但D组的均值小于B、C组(P>0.05);各组术后4、8周组内比较,B、C、D组软骨退变计分、软骨凋亡细胞计数相比较,差异无显著性(P>0.05);A组软骨退变计分、软骨凋亡细胞计数相比较,有显著性差异(P<0.05)。结论在OA早期,预防性关节腔注射丹参和HA,能明显延缓关节软骨的蜕变,为早期防治OA提供实验基础。     

复方健骨关节汤治疗骨关节炎的实验研究

目的:观察复方健骨关节汤对骨关节炎(OA)的治疗效果并探讨其作用机制。方法:将24只中国白兔随机分为正常对照组(A组)、空白对照组(B组)、中药治疗组(C组),每组各8只,A组不造模,B、C组均采用Hulth法建立兔OA模型;4w后,取胫骨平台关节软骨和滑膜进行光镜观察,采用免疫组化和末端原位标记细胞凋亡检测法分别检测关节软骨和滑膜中的白细胞介素-1β(IL-β),基质金属蛋白酶-1、3(MMP-1、3),软骨细胞凋亡指数(AI)的水平。结果:B组IL-1β,AI,MMP-1、3的水平均非常显著高于A组(P<0.01);B组IL-1β,MMP-3水平显著高于C组(0.01相似文献   

健骨胶囊对兔骨性关节炎软骨及滑膜影响的实验研究

目的：探讨健骨胶囊对实验性骨性关节炎（OA）家兔软骨及滑膜病变的影响。方法：通过兔膝关节腔内注射木瓜蛋白酶建立OA模型，8周后光镜及扫描电镜下观察软骨、滑膜组织学改变，Mankin法评分；采用免疫组化方法检测金属蛋白酶-1、3（MMP-1、3）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）的分布和阳性程度。结果：与模型组比较，健骨胶囊组病理学改变明显减轻（P〈0．01），MMP-1、MMP-3、IL-1β表达显著减少（P〈0．01），TIMP-1表达增加（P〈0．05）；健骨胶囊较维固力能明显降低IL-1β的表达（P〈0．05）。结论：健骨胶囊能够减轻OA软骨退行性变和滑膜炎症，机理可能与下调IL-1β调节MMP-1、MMP-3、TIMP-1表达有关。     

乌头注射液对膝骨关节炎模型兔关节软骨细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13的影响

目的:观察关节腔注射乌头注射液对兔膝骨关节炎模型关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13的影响,初步探讨乌头注射液治疗骨性关节炎的可能作用机理。方法:50只兔随机分为正常组、模型组、玻璃酸钠组、正清风痛宁组和乌头注射液组,除正常组外其余各组兔经关节腔注射木瓜蛋白酶溶液诱导骨关节炎模型,2周后各组分别于第1、4、7、10 d共4次关节腔注射给药,1周后处死兔取膝关节软骨组织,肉眼观察关节软骨改变,采用免疫组织化学法检测关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13表达。结果:乌头注射液组关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13表达较模型组和各药物对照组均明显降低,组间比较均有统计学意义(P0.05)。结论:乌头注射液关节腔注射能够显著降低膝关节骨性关节炎模型兔关节软骨MMP-1、MMP-3、MMP-13表达,对骨性关节炎软骨组织改变具有一定保护作用。     

健骨胶囊对免骨性关节炎软骨及滑膜影响的实验研究

目的:探讨健骨胶囊对实验性骨性关节炎(OA)家兔软骨及滑膜病变的影响.方法:通过兔膝关节腔内注射木瓜蛋白酶建立OA模型,8周后光镜及扫描电镜下观察软骨、滑膜组织学改变,Mankin法评分;采用免疫组化方法检测金属蛋白酶-1、3(MMP-1、3)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)的分布和阳性程度.结果:与模型组比较,健骨胶囊组病理学改变明显减轻(P＜0.01),加MMP-1、加MMp-3、IL-1β表达显著减少(P＜0.01),TIMP-1表达增加(P＜0.05);健骨胶囊较维固力能明显降低IL-1β的表达(P＜0.05).结论:健骨胶囊能够减轻OA软骨退行性变和滑膜炎症,机理可能与下调IL-1β、调节MMP-1、MMP-3、TIMP-1表达有关.     

牛膝总皂苷对实验兔膝骨关节炎滑膜组织的影响

目的:观察牛膝总皂苷(TSA)对兔膝骨关节炎(OA)模型滑膜组织的影响。方法:将40只实验兔分为正常组8只、OA模型组32只,OA造模成功后将OA模型组分为OA模型阳性对照组、OA模型空白组、OA模型TSA低剂量组、OA模型TSA中剂量组、OA模型TSA高剂量组,各6只,分别予硫酸氨基葡萄糖、蒸馏水、TSA低剂量、TSA中剂量、TSA高剂量灌胃2个月后进行关节粘连改善度测定、滑膜组织病理HE染色、滑膜炎KRENN评分、β-catenin蛋白免疫组化检测,及关节液TNF-1,IL-1β,MMP-3含量检测。结果:实验兔OA模型造模成功后灌胃2个月,与OA模型空白组关节粘改善度比较,OA模型阳性对照组和OA模型TSA低、中、高剂量组差异有统计学意义(P0.05),OA模型阳性对照组与OA模型TSA高剂量组比较差异有统计学意义(P0.01);滑膜HE染色和滑膜炎评分比较,OA模型空白组见大量滑膜组织炎细胞浸润、纤维组织增生以及滑膜细胞增生、排列紊乱,滑膜组织周边可见较多毛细血管增生,呈重度滑膜炎表现,OA模型阳性对照组见中度滑膜组织炎细胞浸润、纤维组织增生以及滑膜细胞增生、排列不规则,滑膜组织周边可见少量毛细血管增生,呈中度滑膜炎表现,OA模型TSA高剂量组见轻度滑膜组织炎细胞浸润、纤维组织增生以及滑膜细胞增生、排列尚规则,滑膜组织周边可见微量毛细血管增生,呈轻度滑膜炎表现;β-catenin蛋白免疫组化比较,OA模型阳性对照组和OA模型TSA高剂量组与OA模型空白组比较,差异有统计学意义(P0.01),OA模型阳性对照组与OA模型TSA高剂量组比较差异有统计学意义(P0.05);各组与正常组比较TNF-1,IL-1β,MMP-3指标差异有统计学意义(P0.05),OA模型TSA高剂量组与OA模型阳性对照组比较差异无统计学意义(P0.05),两者与OA模型空白组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:牛膝总皂苷能有效抑制OA滑膜炎症,改善关节粘连度,降低滑膜组织β-catenin蛋白表达以及减少关节液TNF-1,IL-1β,MMP-3因子含量,其作用机理有待进一步探索。     

实验性骨关节炎MMP-3与软骨细胞凋亡

目的:为观察实验性骨关节炎中MMP-3和软骨细胞凋亡情况,并对二者表达作相关分析。方法:采用改良Hulth’s法制造兔骨关节炎模型,分别在8周、16周抽取关节液测定MMP-3的含量,切取关节软骨。采用TUNEL法标记凋亡软骨细胞计数,并对软骨进行HE染色和透视电镜观察。结果:HE染色中,正常组软骨细胞排列规则,关节炎组中软骨细胞排列紊乱。透视电镜观察各组均可见凋亡细胞,但在关节炎组中可见胶原纤维失去正常的结构,排列紊乱,可见钙盐沉积。在MMP-3测定中,早期骨关节炎(20.91±2.48)ng.mL-1和晚期骨关节炎(41.68±5.71)ng.mL-1均高于正常对照组(4.34±2.13)ng·mL-1,差异有统计学意义P0.01;晚期骨关节炎和早期关节炎组比较(P0.01);早期骨关节炎(10.18±1.90)和晚期骨关节炎(35.47±3.46)软骨细胞凋亡指数都高于正常对照组(3.93±1.91),P0.01;晚期骨关节炎早期关节炎组比较,(P0.01)。MMP-3变化和软骨细胞的凋亡在各个时期均存在相关性(r=0.82,P=0.03;r=0.64,P=0.049;r=0.69,P0.029)。结论:实验性骨关节炎中,关节滑液中MMP-3含量在模型组中明显升高,晚期含量升高更明显;软骨细胞的凋亡指数和MMP-3的变化密切相关,MMP-3的升高可能是导致软骨基质破坏,软骨细胞凋亡的重要因素。     

增液润节汤对家兔膝骨关节炎软骨组织学和血清中SOD及关节液中IL-1的影响

目的观察增液润节汤对家兔膝骨关节炎软骨组织学和血清中超氧化物歧化酶(SOD)、关节液中白介素-1(IL-1)含量的影响。方法健康的新西兰大白兔38只,随机分为4组,即正常组(A组)8只、模型组(B组)10只、仙灵骨葆胶囊组(C组)10只、增液润节汤组(D组)10只。除正常组外,其余3组按照关节腔内注射木瓜蛋白酶的方法造模。在治疗前、后分别检测血清SOD和关节液IL-1的含量。并于治疗后行关节腔大体观察及关节软骨组织学的病理检查。结果 1)增液润节汤组SOD水平(92.82±20.35)U/L与模型组(74.24±15.26)U/L比较明显升高(P<0.05),增液润节汤组IL-1水平(125.73±4.27)μg/mL与模型组(180.26±4.59)μg/mL比较明显降低(P<0.05);2)增液润节汤可减轻模型动物关节软骨病理积分。结论增液润节汤可提高血清SOD水平,降低关节液IL-1水平,从而保护关节软骨,减轻炎症对关节软骨的破坏及所产生的疼痛。     

膝地荣筋疗骨饮对兔骨关节炎软骨干预实验研究

目的：探讨膝地荣筋疗骨饮对实验性兔膝骨关节炎的影响。方法：采用Hulth法造成实验性兔右侧膝骨关节炎模型。结果：在光镜和电镜下，膝地荣筋疗骨饮能显著抑制软骨、滑膜的炎症，减轻软骨病理改变；降低软骨细胞的凋亡指数（AI）。结论：膝地荣筋疗骨饮能显著改善动物实验性关节炎关节软骨的病理积分，抑制膝骨关节炎软骨细胞的凋亡，改善软骨病变。     

消定膏对兔骨性关节炎关节液中TNF-α的影响

目的:探讨消定膏对兔骨性关节炎关节液中TNF-α的影响。方法:新西兰大白兔40只,雌雄不限,体重(2.50±0.10)kg,随机分成4组,空白组、模型组、对照组、治疗组4组,每组10只。适应性喂养7d后,模型组、对照组、治疗组按照日本鬼头康彦等的兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成OA及滑膜炎病变模型方法造模。获得稳定的骨关节炎性滑膜炎模型。术中注意不刺激关节软骨及滑膜。造模成功后空白组不做处理。对照组外涂扶他林软膏,治疗组外敷消定膏,模型组外敷凡士林,空白组亦于右膝关节表面外敷凡士林。结果:模型组、对照组、治疗组与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05),对照组、治疗组与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05),对照组和治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05);结果说明消定膏与西药扶他林乳胶剂均可降低兔炎关节液中TNF-α的含量。结论:1.消定膏外敷与扶他林乳胶剂外擦对兔膝骨性关节炎均有治疗作用。2.中药消定膏外敷,可对兔膝骨关节炎软骨退变起明显缓解作用;能显著降低家兔关节液中TNF-α的含量,从而发挥对膝骨性关节炎的防治作用。     

基于纤溶酶途径介导的软骨细胞外基质损伤机制研究温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理

目的通过观察温针灸干预后膝骨性关节炎(KOA)兔关节软骨尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)因子表达的变化,探索温针灸治疗KOA的作用机制。方法将40只新西兰兔随机分为空白组、模型组、温针灸组、u PA抑制剂组,每组10只,采用右后肢石膏管型固定法制备KOA模型,空白组不予处理,模型组每天于兔架上固定15 min,温针灸组予以温针灸治疗,u PA抑制组每两日于关节腔注射u PA抑制剂稀释液1 m L/kg,干预结束后取兔关节软骨行TUNEL、RT-PCR、Western blot检测。结果 TUNEL细胞凋亡检测发现:较空白组,模型组软骨细胞凋亡率明显增高,差异有统计学意义(P <0. 05);较模型组,温针灸组及u PA抑制剂组软骨细胞凋亡率明显下降,差异有统计学意义(P <0. 05)。RT-PCR检测结果发现:较空白组,模型组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13 mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(P <0. 05);较模型组,温针灸组u PA、MMP-1、MMP-13 mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05);u PA抑制剂组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13 mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05);Western blot检测发现:较空白组,模型组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P <0. 05);较模型组,温针灸组u PA、MMP-1、MMP-13蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05) u PA抑制剂组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05);相关性分析显示u PA与MMP-1、MMP-13均由相关关系。结论 (1)温针灸可抑制软骨细胞的过度凋亡;(2)温针灸可有效抑制软骨细胞中u PA、MMP-1、MMP-13的表达,且可通过抑制u PA的生成进而阻断MMP-1、MMP-13的活化,发挥保护关节软骨最终达到治疗KOA的作用。     

灌胃凤凰衣水解物对膝骨关节炎模型大鼠影响的实验研究

目的：观察灌胃凤凰衣水解物对膝骨关节炎大鼠膝关节的影响,进而考察凤凰衣用于防治OA的合理性及可行性。方法：灌胃凤凰衣水解物及奥泰灵胶囊干预膝骨关节炎大鼠,观察软骨形态及软骨中Collagen-Ⅱ、MMP-β及蛋白多糖的指标变化,以及血清和关节液中IL-6,IL—1β,TNF-α的指标变化。结果：1．各用药组对降低膝骨关节炎大鼠血清IL10、IL-6、TNF-a表达,关节液中TNF-a的表达以及软骨中MMP-3表达,升高Collagen-Ⅱ的表达看,两用药组未见明显差异（P〉0．05）,但均优于模型组（P〈0．01）;2．在提高蛋白多糖含量及降低关节液中IL-6的表达方面,灌胃凤凰衣组优于灌胃奥泰灵组（Pd0．01）;3．在降低关节液中IL-1β的表达方面,灌胃奥泰灵组优于灌胃凤凰衣组（P（0．01）。结论：1．灌胃凤凰衣水解物能降低膝骨关节炎大鼠的炎症因子表达,提高关节软骨中蛋白多糖和Collagen-Ⅱ含量;2．凤凰衣中含有丰富的可以合成软骨基质中蛋白多糖的前体物质,是其改善0A指标的机制之一。     

蚁龙通痹汤改善兔膝骨关节炎软骨组织骨生物力学的炎症机制

目的:观察蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎病理形态的影响,探讨其治疗骨关节炎可能的作用机制.方法:将40只日本雄性大耳白兔按体重分为4组,即正常组,模型组、蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组,每组10只.除正常组外,其余各组均行右侧膝关节前交叉韧带切断建立骨关节炎病变模型.造模后第2天开始给药(葡立胶囊0.1 g·kg-1,蚁龙通痹汤生药0.6g·kg -,ig每日1次),连续4周.观察各组兔膝关节软骨及滑膜组织病理形态学改变,测定关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β含量以及软骨下骨生物力学检测,并分析软骨.中基质金属蛋自酶(MMP)-1、组织金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)的表达情况.结果:与模型组比较,蚁龙通痹汤组动物关节液IL-1β和.TNF-α含量、软骨MMP-1和TIMP-1表达率、关节外在表现和软骨病理组织学变化,以及软骨最大载荷和弹性模量均出现明显差异改善.结论:蚁龙通痹汤能够减少兔膝骨关节炎关节液IL-1β和TNF-α的分泌,改善MMP-1和TIMP-1在软骨组织细胞中表达的平衡而达到对软骨组织保护的作用.