葛根素对去卵巢小鼠学习记忆和突触结构的影响

 目的研究葛根素对雌激素剥夺小鼠学习记忆和突触结构的影响。方法卵巢摘除(Ovx)或假手术(Sham)后一周,雌性小鼠给予4周的葛根素(Pur,40,120mg·kg^-1,ip)或苯甲酸雌二醇(EB,4μg·d^-1,sc)治疗。分别用Morri′s水迷宫和穿梭箱检测小鼠的空间记忆和主动回避行为;通过制备超薄切片电镜观测学习记忆相关脑区海马CA1和前皮层的突触超微结构变化。结果Ovx小鼠经120mg·kg^-1 Pur治疗后,在水迷宫中搜寻平台的平均路径显著缩短(P<0.05),主动逃避电击的次数明显增多(P<0.01)。同时,葛根素增加Ovx小鼠海马和前皮层的突触后密度(PSD)厚度,并减小突触间隙宽度,但对突触界面曲度、突触活性带长度没有明显作用。结论长期Pur治疗可通过影响海马和前皮层突触结构改善雌激素剥夺小鼠的记忆损伤。     

葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠纹状体氨基酸水平的影响

 目的研究葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠纹状体氨基酸水平的影响。方法大脑中动脉栓塞(MCAO)60min建立大鼠局部脑缺血模型。给药组在缺血前30min和再灌注开始时分别腹腔注射Pur(50,100mg·kg^-1,ip)。用脑微透析仪收集缺血前后和再灌注过程纹状体的细胞外液,高效液相色谱分析其兴奋性和抑制性氨基酸水平;缺血再灌注24h取脑用TTC染色法测算脑梗死体积和水肿率。用流式细胞仪结合Annexin-V荧光标记法检测Pur(40,100μmol·L^-1)对体外培养海马神经细胞谷氨酸(0.5mmol·L^-1)诱导细胞凋亡的保护作用。结果缺血开始后,纹状体的天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)和牛磺酸(Tau)水平快速升高,最高时分别达缺血前的8.92,14.15,9.07和4.84倍。再灌注开始后,氨基酸水平迅速下降,120min后接近正常。100mg·kg^-1Pur在减小脑梗死体积和脑水肿的同时,显著降低脑缺血过程纹状体氨基酸水平,其最高值分别比缺血组降低35.7%(Asp)、43.2%(Glu)、28.5%(GABA)和31.8%(Tau)(P<0.01);Glu/GABA比值明显低于缺血大鼠。流式细胞检测结果显示,100μmol·L^-1Pur明显抑制谷氨酸兴奋毒作用,分别使海马神经细胞的凋亡率和坏死率降低33.1%和35%(P<0.01)。结论Pur可有效抑制脑缺血诱导的细胞外氨基酸水平升高和谷氨酸兴奋毒作用,该机制可能与Pur的抗脑缺血作用有关。     

蕃荔枝酰胺新衍生物cFLZ对小鼠学习记忆功能障碍的改善作用

 目的研究蕃荔枝酰胺新衍生物cFLZ对小鼠实验性学习记忆功能障碍的影响。方法选用体积分数40%乙醇、戊巴比妥钠(20 mg·kg^-1)、环己酰亚胺(120 mg·kg^-1)造成小鼠学习记忆障碍模型,分别通过避暗法、跳台法、水迷津法观察提前口服不同剂量的cFLZ对小鼠学习记忆能力障碍的作用。结果①小鼠口服体积分数为40%乙醇后出现明显记忆障碍,避暗法实验中表现在第一次进入暗室的潜伏期明显缩短(P<0.01),3 min内进入暗室的次数显著增加(P<0.01)。与模型组相比,cFLZ(75,150 mg·kg^-1)组小鼠第一次进入暗室的潜伏期延长(P<0.05),3 min内进入暗室的次数减少(P<0.05);②水迷津法实验中随着路径的延长和盲端的增多,腹腔注射戊巴比妥钠(20 mg·kg^-1)模型组小鼠游到目的地的时间比正常对照组明显延长,进入盲端的错误次数也明显增加。与模型组相比,cFLZ(75,150 mg·kg^-1)组小鼠能够缩短游到目的地的时间(P<0.05),减少进入盲端的错误次数(P<0.05)。③跳台法实验中小鼠腹腔注射环己酰亚胺(120 mg·kg^-1)后引起显著的记忆巩固障碍,第一次跳下安全岛的时间明显缩短(P<0.01),5 min内跳下的次数显著增加(P<0.01)。cFLZ(37.5,75,150 mg·kg^-1)可显著改善环己酰亚胺诱导的记忆障碍,延长第一次跳下安全岛的潜伏期(P<0.05),减少跳下的次数(P<0.01)。结论蕃荔枝酰胺新衍生物cFLZ对体积分数40%乙醇、戊巴比妥钠及环己酰亚胺诱导的小鼠学习记忆功能障碍有明显改善作用。     

葛根素对脑缺血诱导神经细胞凋亡的保护作用

 目的探讨葛根素(puerarin,Pur)对脑缺血诱导神经细胞凋亡和凋亡蛋白抑制剂XIAP表达的影响。方法SD大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)的同时ip50,100mg·kg^-1Pur,MCAO50min后再灌注24h,用TTC染色法、Annexin-V和PI双荧光标记结合流式细胞检测法、半定量RT-PCR等技术分别检测大鼠脑水肿、梗死体积、细胞凋亡和坏死率、caspase-3活性、XIAP mRNA表达。结果Pur(100mg·kg^-1)明显缓解缺血引起的脑水肿和神经行为障碍(P<0.05);减少脑梗死体积,以皮层尤其显著(P<0.01)。Pur(100mg·kg^-1)还显著降低背外侧皮层的细胞凋亡和坏死率,抑制caspase-3活性,逆转缺血诱导的XIAP mRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论Pur通过调节神经细胞XIAP mRNA表达,抑制细胞凋亡而保护缺血性脑损伤。     

石菖蒲挥发油和水煎液的抗焦虑作用

目的：观察石菖蒲抗焦虑作用并探讨其作用机制。方法：将昆明种雄性小鼠随机分为8组（n=12）,分别为模型对照组、阳性对照组、石菖蒲挥发油高、中、低剂量组（10,5,2.5 g·kg^-1·d^-1）,石菖蒲水煎液高、中、低剂量组（20,15,10 g·kg^-1·d^-1）,模型组ig生理盐水,阳性组ig地西泮（2.5 mg·kg^-1·d^-1）,连续ig给药5 d,末次给药0.5 h后进行高架十字迷宫实验和明暗箱实验,观察石菖蒲对小鼠焦虑行为的干预作用。用酶联免疫法测定小鼠脑内γ-氨基丁酸（GABA）,谷氨酸（Glu）,五羟色胺（5-HT）的含量。结果：①石菖蒲挥发油高、低剂量组和水煎液中、低剂量组能明显增加小鼠在高架十字迷宫装置上的开臂滞留时间（OT%,P<0.05）,能明显增加小鼠的开臂进入次数（OE%,P<0.05）。②石菖蒲挥发油剂量组和水煎液高剂量组能显著增加小鼠脑内GABA的含量（P<0.05）;石菖蒲挥发油中、低剂量组和水煎液3个剂量组能显著降低小鼠脑内Glu的含量（P<0.05）;石菖蒲挥发油3个剂量组和水煎液3个剂量组能显著降低小鼠脑内5-HT的含量（P<0.05）。结论：石菖蒲挥发油和水煎液在小鼠高架十字迷宫模型和明暗箱模型上均表现出抗焦虑作用,其作用效果与地西泮类似。作用机制可能与提高中枢GABA含量,降低Glu和5-HT含量有关。     

白芥子提取物抑制前列腺增生的实验研究[Ⅱ]

目的:研究白芥子提取物抑制前列腺增生的活性成分和作用机理。方法:采用丙酸睾酮诱导的去势小鼠前列腺增生;组胺诱导的小鼠皮肤毛细血管通透性增加;滤纸片埋藏诱发的大鼠皮下肉芽肿为动物模型。从白芥子提取物中分离得到的白芥子苷和白芥子β-谷甾醇为药效研究对象。结果:白芥子苷(16.0,8.0mg·kg^-1·d^-1)和β-谷甾醇(16.0,8.0 mg·kg^-1·d^-1)均能明显降低由丙酸睾酮诱发的去势小鼠前列腺增生,降低小鼠血清酸性磷酸酶活力(P<0.01或P<0.05);白芥子苷(16.0 mg·kg^-1·d^-1)能明显降低滤纸片埋藏引起的大鼠肉芽肿增殖(P<0.05);β-谷甾醇(8.0,16.0 mg·kg^-1·d^-1)能明显降低组胺诱发的小鼠毛细血管通透性增加(P<0.05)。结论:白芥子苷、β-谷甾醇具有抗雄激素和抗炎活性。     

炒紫苏子提取物的抗氧化作用研究

 目的　研究炒紫苏子提取物的抗氧化作用。方法　15月龄昆明种小鼠,随机分组,每日1次灌胃炒紫苏子醇提药物和水提药物,给药21次后,杀鼠取脑和血。采用MDA试剂盒、SOD试剂盒,测定血浆中MDA,SOD值,采用紫外分光光度法测小鼠脑匀浆中MAO。结果 炒紫苏子醇提物269,134 mg·kg^-1剂量组均能显著降低MDA水平(P<0.001),提高SOD酶活性(P<0.05),而134 mg·kg^-1剂量组能显著降低MAO水平(P<0.05);炒紫苏子水提物213 mg·kg^-1剂量组均能显著降低MDA,MAO水平(P<0.001,P<0.01),提高SOD酶活性(P<0.05),而106 mg·kg^-1剂量组能显著降低MDA水平(P<0.001),MAO水平(P(0.05)。结论 炒紫苏子醇提取物和水提取物具有较强的抗氧化作用。     

盐酸小檗碱及其与环孢素A合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A2表达影响

 目的　阐明盐酸小檗碱(berberinehydrochloride,Ber)及其与环孢素A(cyclosporinA,CsA)合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A2的影响。方法　实验分溶媒对照组、200mg·kg^-1Ber组、10mg·kg^-1CsA组、200mg·kg^-1Ber+10mg·kg^-1CsA组,Ber灌胃给药6d,CsA仅在实验第6天灌胃给药。采用RT-PCR和Westernblot等方法测定大鼠肝脏和小肠CYP3A2的表达水平。结果　RT-PCR结果表明,与对照组比较,各实验组对大鼠肝脏CYP3A2/β-acting的比值无明显影响;200mg·kg^-1Ber+10mg·kg^-1CsA组则可显著降低大鼠小肠CYP3A2/β-acting的比值(P <0.05);两药合用组与200mg·kg^-1Ber组相比可显著抑制CYP3A2的表达(P<0.05),与10mg·kg^-1CsA组相比则无显著差异(P>0.05)。Westernblot结果表明,与对照组比较,各实验组对大鼠肝脏CYP3A2蛋白水平的表达无明显抑制作用,但是200mg·kg^-1Ber+10mg·kg^-1CsA组则对小肠CYP3A2蛋白水平的表达有明显抑制作用(P<0.05);两药合用组与200mg·kg^-1Ber组相比可显著抑制CYP3A2的表达(P <0.05),与10mg·kg^-1CsA组相比则无显著差异(P>0.05)。结论　Ber对CsA下调小肠CYP3A2的效应至少有相加作用,是否有协同效应还需进一步研究,但是,CsA对Ber下调小肠CYP3A2有协同作用可以确立。     

淫羊藿苷改善快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能及与血清雌激素水平相关性研究

目的:研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能的影响及与血清雌激素水平相关性。方法:按体重随机挑选10只6月龄抗快速老化小鼠SAMR1和40只同龄快速老化小鼠SAMP8,并将SAMP8随机分为4组(模型组、己烯雌酚组和ICA75mg·kg^-1、150mg·kg^-1组),灌胃给药,3个月后,用Morris水迷宫法检测SAMR1和SAMP8的学习记忆能力;放射免疫法检测血清雌二醇(Estradiol,E₂)水平;处死称量子宫湿重,计算子宫系数。结果:ICA可以改善SAMP8定位航行和空间搜索学习记忆障碍,提高血清E₂水平,但对子宫系数影响不明显;Pearson相关系数分析发现ICA对SAMP8Morris水迷宫潜伏期的影响与血清E₂水平呈负相关的关系(R=-0.64,P=0.003)。结论:ICA可以改善SAMP8的学习记忆能力,其作用机理可能与升高血清雌激素水平有关。     

参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能和海马突触功能的影响

 目的研究糖尿病性脑病病变机制以及参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能干预作用。方法采用在大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(60mg·kg^-1)引起糖尿病的基础上,再行双侧颈动脉缺血再灌手术建立糖尿病脑病变动物模型。经参乌胶囊小剂量(0.45g·kg^-1·d^-1)、中剂量(0.9g·kg^-1·d^-1)和大剂量(1.8g·kg^-1·d^-1)灌胃治疗30d后,用Morris水迷宫实验对动物行为学进行评价以及用玻璃微电极记录诱发的锥体细胞群峰电位测定大鼠海马脑片长时程增强效应(longtermpotentiation,LTP)。结果糖尿病复合脑缺血模型大鼠到达站台游动时间比正常对照组增长115.3%(P<0.01);而参乌胶囊小、中、大剂量组较模型组动物分别缩短59.0%(P<0.01),75.2%(P<0.01)和38.9%(P<0.05);复合模型大鼠在高频刺激后,不论波幅还是斜率的增强都不如正常对照组明显,表明了突触增强能力减退(P<0.05)。参乌胶囊治疗组在高频刺激后PS波幅、斜率较糖尿病复合脑缺血模型组有明显增强(P<0.05)。结论糖尿病复合脑缺血模型大鼠存在认知功能障碍和海马突触可塑性功能减弱;参乌胶囊有改善糖尿病复合脑缺血模型大鼠的学习记忆功能和突触可塑性功能。单纯糖尿病模型和单纯脑缺血模型在造摸4周后不足以引起大鼠认知功能和突触可塑性功能的改变。     

2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1,4-二氢-3,5-吡啶二羧酸-3-甲酯-5-正戊酯(MN9202)抗实验性血栓形成作用

 目的：探讨新的二氢吡啶钙通道阻滞剂MN9202对实验性血栓形成的影响及其作用机制。方法：采用iv胶原-肾上腺素或sc角叉菜胶，分别复制小鼠肺血栓和尾血栓模型。观察MN9202对实验性肺血栓小鼠死亡率，血栓黑尾形成率及微循环的影响。用凝血酶-ADP-肾上腺素复合诱导剂，复制大鼠脑血栓模型，观察MN9202对大鼠脑血栓损伤的预防作用。结果：MN9202 4mg·kg^-1ip，能明显降低胶原 肾上腺素引起的小鼠死亡率(30vs84P<0.01)；6mg·kg^-1ig，对凝血酶诱导的大鼠脑血栓损伤具有保护作用(0.069±0.068 vs 0.110±0.013,P<0.01);0.04,0.4mg·kg^-1能降低角叉菜胶诱导的血栓黑尾发生率(30,10 vs 90,P<0.05;P<0.01)，明显减轻微血管内皮的渗出，抑制血小板聚集和RBC聚集，改善微血管血流速度。结论：MN9202具有对抗血小板聚集诱导剂及角叉菜胶引起的血栓形成作用。其机制可能与其抑制RBC、血小板聚集，保护血管内皮，舒张痉挛血管有关。     

黄芪总苷防治地塞米松诱导小鼠记忆障碍和对APP及β-分泌酶mRNA表达的研究

目的:探讨黄芪总苷(AST)对地塞米松(DEX)诱导小鼠记忆障碍的保护作用及对脑内淀粉样前体蛋白(APP)及其mRNA,α-分泌酶和β-分泌酶mRNA表达的影响.方法:将小鼠随机分成6组:正常对照组、模型组、AST(10,20,40 mg·kg~(-1))组和阳性药(人参皂苷Rg_1,6.5 mg·kg~(-1))组.用DEX(5 mg·kg~(-1),ig,21 d)建立小鼠学习记忆损伤模型,各用药组于造模同时ig给予相应药物,模型组和对照组ig等容积蒸馏水.用Morris水迷宫方法测定小鼠学习记忆功能;用RT-PCR方法检测脑组织中APP、α-分泌酶和β-分泌酶mRNA表达;用免疫组织化学方法观察大脑皮质,海马CA1,CA3区APP表达.结果:与模型组比较,AST(20,40 mg·kg~(-1))能明显改善小鼠记忆功能(P＜0.05,P＜0.01);降低脑组织内APP,β-分泌酶mRNA的表达(P＜0.05),升高脑组织内α-分泌酶mRNA的表达(P＜0.05);减少APP在大脑皮质及海马CA1区的表达(P＜0.05).结论:AST能改善DEX诱导的小鼠记忆障碍,其机制可能与抑制脑内APP及其mRNA、β-分泌酶mRNA表达,促进α-分泌酶mRNA表达有关.     

全胃肠外营养时奈替米星的药代动力学

 目的:观察在全胃肠外营养(TPN)时患者体内奈替米星(乙基西梭霉素,NTM)的药代动力学?方法:用高效液相-间接光度检测法(HPLC-IPD)测定7例行TPN患者和7例对照患者静滴NTM5mg·kg^-1后血清和尿中药物浓度,并计算药代动力学参数?结果:NTM在体内处置符合二室开放模型,静滴后TPN组NTM血清峰浓度低于对照组但无显著性差异,至5h后TPN组浓度开始高于对照组,至12h时已明显高于对照组;尿中原型药物排出率TPN组较对照组下降,但无显著性差异;TPN组与对照组血清NTM的t_1/2β分别为(5.8±1.6)h和(3.5±1.4)h?结论:患者给TPN时,NTM体内分布和消除变慢。     

补阴益智汤配方颗粒对东莨菪碱所致小鼠学习记忆损伤的保护作用

目的:考察给予东莨菪碱造模后,补阴益智汤配方颗粒对小鼠学习记忆损伤的保护作用,并通过神经递质和突触可塑性相关蛋白考察其可能的机制。方法:雄性昆明种小鼠50只,通过腹腔注射东莨菪碱(3.0 mg·kg~(-1))建立小鼠学习记忆损伤模型。随机分为正常组、模型组和补阴益智汤高、中、低(18,6,2 g·kg~(-1)),造模后,连续给药2周,通过小鼠跳台实验,Morris水迷宫实验和新物体辨别实验,考察小鼠学习记忆的能力。采用高效液相色谱法测定小鼠前额叶皮层和海马内氨基酸类神经递质的水平,通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马区内突触核蛋白(Syn),突触后密度蛋白-95(PSD-95)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠跳台实验、水迷宫实验潜伏期显著缩短(P0.01),触电次数显著增加(P0.01),对新物体的探索时间显著缩短(P0.01),海马及前额叶皮层内γ-氨基丁酸(GABA)含量增多,而谷氨酸(Glu)含量均显著降低(P0.01),海马内Syn,PSD-95和BDNF蛋白表达量均明显增多(P0.05,P0.01);与模型组比较,中、高剂量给药组潜伏期明显延长(P0.05,P0.01),其中高剂量组触电次数明显减少(P0.05);对新物体的探索时间显著延长(P0.01),GABA含量明显降低(P0.05,P0.01),Glu含量以及Syn,PSD-95和BDNF蛋白表达量明显升高(P0.05,P0.01)。结论:补阴益智汤配方颗粒可以改善东莨菪碱所致的小鼠学习记忆损伤,其机制可能与改变海马及前额叶皮层内Glu/GABA以及调节小鼠海马脑区内Syn和PSD-95蛋白的表达有关。     

半夏总生物碱对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的:研究半夏总生物碱(TAPT)对D-半乳糖诱导的衰老小鼠学习记忆的影响并初步探讨其作用机制。方法:昆明种小鼠100只,随机分为5组,即正常对照组,模型组,TAPT低、中、高剂量组(7.5,15,30 mg.kg-1),每组20只。模型组和TAPT组给予120 mg.kg-1的D-半乳糖注射液(sc,每天1次,连续8周),建立学习记忆障碍的衰老小鼠模型,对照组给予等量生理盐水;同时,TAPT各组给予对应浓度的TAPT药液(ig,每天1次,连续8周),对照组及模型组给予等量蒸馏水。采用跳台法和Y迷宫评价法测试TAPT对模型小鼠学习记忆障碍的改善作用,采用比色法测定小鼠脑组织中丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果:TAPT低、中、高剂量组小鼠Y迷宫训练时达标所需总次数减少,分别为(21.9±2.9),(20.8±3.2),(19.7±2.8)次;Y迷宫记忆测试时错误次数也明显减少,分别为(3.8±1.4),(3.2±1.7),(1.7±1.1)次;模型组小鼠脑组织SOD活性明显降低(28.98±13.08)U.mg-1,MDA及AChE含量明显增加(2.78±0.21)nmol.mg-1,(1.05±0.16)U.mg-1;经TAPT干预后,各剂量组小鼠脑组织中SOD活性增高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01);中、高剂量组AChE含量显著减少(P<0.01,P<0.05)。结论:应用TAPT干预D-半乳糖诱导的衰老小鼠,可明显改善其学习和记忆功能,这可能与其具有抗氧化作用及抑制AChE的活性有关。     

藏药旺拉提取物对胆碱能损伤大鼠的神经保护作用

目的:研究藏药旺拉提取物(CE)对胆碱能损伤大鼠的神经保护作用。方法:采用基底前脑注射鹅蒿蕈氨酸的方法建立胆碱能损伤大鼠模型。实验动物分为假手术组,模型组,阳性药吡拉西坦(400 mg.kg-1),CE(0.31,1.25,5 mg.kg-1)组,连续灌胃给药28 d。跳台法检测大鼠学习记忆能力,尼氏染色法观察大鼠基底前脑尼氏小体的变化,免疫组化法观察海马CA1区神经生长因子的表达水平。结果:与假手术组大鼠相比,模型组大鼠跳下平台的潜伏期明显缩短,基底前脑尼氏小体数量减少,海马CA1区神经生长因子表达水平明显下降。与模型组大鼠相比,CE 5 mg.kg-1可改善记忆损伤大鼠在跳台试验中的表现(P<0.05),使基底前脑病理改变部分恢复正常,上调海马CA1区神经生长因子表达水平(P<0.05)。结论:CE具有神经保护作用,可改善胆碱能损伤大鼠学习记忆能力。