小柴胡汤和当归芍药散单方及合用对免疫性肝损伤的保护作用

目的考察小柴胡汤和当归芍药散单方及合用对免疫性肝损伤的保护作用。方法昆明小鼠72只随机分为6组,空白组、模型组、小柴胡汤组(6.63 g/kg)、当归芍药散组(11.31 g/kg)、小柴胡汤合当归芍药散(柴归汤)组(17.94 g/kg)和阳性药(联苯双脂合甘草酸二铵)组(0.2μg/g,0.3μg/g)。除空白组外,其余各组采用刀豆蛋白A(Con A)尾静脉注射制造免疫性肝损伤模型,各组采取相应干预7天。采用动物半自动生化分析仪检测ALT、AST、ALB和TP水平;HE染色观察肝组织病理切片;比色法检测肝组织SOD活性、MDA和GSH含量;ELISA法检测TNF-α、IL-1和IL-6;Western blotting法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;APAAP法检测T淋巴细胞亚群。结果与模型组比较,小柴胡汤组可降低ALT和AST水平,减少IL-1,降低MDA含量,显著降低Bcl-2蛋白表达;当归芍药散组可降低ALT水平,降低血清TNF-α、IL-1和IL-6炎症因子,并降低Bcl-2蛋白含量;小柴胡汤合当归芍药散对上述指标均有显著保护作用,对各指标改善优于单方,且能显著改善血清CD4~+/CD8~+比值。结论小柴胡汤和当归芍药散均能够保护刀豆蛋白A所致免疫性肝损伤,两方合用优于单方,其机制与提高抗氧化、抗凋亡能力及调节免疫失调多方面作用有关。     

酸枣仁皂苷A对小鼠前额叶皮层腺苷释放及核苷转运体的影响

目的研究酸枣仁皂苷A(JuA)(40、80 mg/kg)对小鼠前额叶皮层腺苷释放的影响。方法采用在体脑微透析观测JuA对前额皮质细胞外腺苷含量的影响,并同时观察小鼠的自主活动;Western blot考察JuA对平衡型核苷转运蛋白(ENT)和浓度型核苷转运蛋白(CNT)2种蛋白质表达。结果 JuA腹腔注射能在90 min内剂量依赖性地增加小鼠前额叶皮层细胞外腺苷含量,并降低其自主活动。对CNT1和ENT1蛋白表达无显著性影响。结论 JuA可以促进小鼠前额叶皮层腺苷的释放,但可能与核苷酸转运蛋白无关。     

人参皂苷CK抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的实验研究

目的探讨人参皂苷CK对乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的影响及潜在机制。方法体外培养MCF-7细胞,分别通过四甲基噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、Transwell侵袭实验及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同浓度的人参皂苷CK对MCF-7细胞活力、迁移能力、侵袭能力及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9表达的影响。结果人参皂苷CK可剂量依赖性的抑制MCF-7细胞的增殖;与对照组相比,人参皂苷CK 5,10μmol/L组的细胞迁移能力及2.5,5,10μmol/L组的细胞侵袭能力呈显著性降低(P0.05);与对照组相比,人参皂苷CK 2.5,5,10μmol/L剂量组的MMP-2及5,10μmol/L剂量组的MMP-9表达呈显著性降低(P0.05)。结论人参皂苷CK具有抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的作用,该作用与MMP-2及MMP-9的表达减少有关。     

人参多糖对乙醇依赖小鼠戒断行为及血浆ACTH和皮质醇的影响

目的探究人参多糖(Ginseng polysaccharides,GSP)对乙醇依赖小鼠戒断行为及血浆促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质醇水平的影响。方法将昆明种小鼠100只,随机分为5组,空白组腹腔注射生理盐水,模型组和GSP 3个剂量组(100、200、400 mg/kg)腹腔注射2.5 g/kg乙醇(20%,v/v),连续15 d,并于最后一次给予乙醇后24 h进行明暗箱实验、高架十字迷宫实验和乙醇戒断症状评分。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中ACTH和皮质醇含量。结果中、高剂量GSP显著提高乙醇依赖戒断小鼠在明暗室中穿梭次数和在明室内停留时间以及进入开臂次数比和在开臂停留时间比。此外,GSP中、高剂量组小鼠戒断症状评分低于模型组。ELISA结果显示,GSP能显著降低血浆皮质醇含量,增加ACTH含量。结论 GSP可能通过调节ACTH和皮质醇的含量改善乙醇戒断引起的焦虑相关行为。     

补阴益智汤配方颗粒对东莨菪碱所致小鼠学习记忆损伤的保护作用

目的:考察给予东莨菪碱造模后,补阴益智汤配方颗粒对小鼠学习记忆损伤的保护作用,并通过神经递质和突触可塑性相关蛋白考察其可能的机制。方法:雄性昆明种小鼠50只,通过腹腔注射东莨菪碱(3.0 mg·kg~(-1))建立小鼠学习记忆损伤模型。随机分为正常组、模型组和补阴益智汤高、中、低(18,6,2 g·kg~(-1)),造模后,连续给药2周,通过小鼠跳台实验,Morris水迷宫实验和新物体辨别实验,考察小鼠学习记忆的能力。采用高效液相色谱法测定小鼠前额叶皮层和海马内氨基酸类神经递质的水平,通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马区内突触核蛋白(Syn),突触后密度蛋白-95(PSD-95)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠跳台实验、水迷宫实验潜伏期显著缩短(P0.01),触电次数显著增加(P0.01),对新物体的探索时间显著缩短(P0.01),海马及前额叶皮层内γ-氨基丁酸(GABA)含量增多,而谷氨酸(Glu)含量均显著降低(P0.01),海马内Syn,PSD-95和BDNF蛋白表达量均明显增多(P0.05,P0.01);与模型组比较,中、高剂量给药组潜伏期明显延长(P0.05,P0.01),其中高剂量组触电次数明显减少(P0.05);对新物体的探索时间显著延长(P0.01),GABA含量明显降低(P0.05,P0.01),Glu含量以及Syn,PSD-95和BDNF蛋白表达量明显升高(P0.05,P0.01)。结论:补阴益智汤配方颗粒可以改善东莨菪碱所致的小鼠学习记忆损伤,其机制可能与改变海马及前额叶皮层内Glu/GABA以及调节小鼠海马脑区内Syn和PSD-95蛋白的表达有关。     

奔豚汤对慢性束缚应激小鼠焦虑的影响

目的:实验观察奔豚汤对慢性束缚应激诱导小鼠焦虑模型的影响,从中枢神经递质角度阐述奔豚汤抗焦虑的可能机制。方法:72只小鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,奔豚汤低、中、高剂量组(3.51,10.53,31.59 g·kg~(-1))和阳性药地西泮组(4 mg·kg~(-1)),各组均采用灌胃给药30 d。通过慢性束缚应激建立小鼠焦虑模型;自主活动检测、旷场实验、明暗箱实验和高架十字迷宫实验从行为学分析奔豚汤对焦虑小鼠行为学的保护作用;高效液相结合荧光检测器检测海马谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马内γ-氨基丁酸受体(GABAa-Rα5),GABA转运体-1(GAT-1)和GAT-3蛋白表达。结果:与模型组比较,奔豚汤高剂量可以明显提高旷场中央区域的时间(P0.05),增加在高架十字迷宫开臂停留时间和进入次数(P0.05),提高海马内GABA水平(P0.05),降低Glu水平(P0.05),且能够明显降低GAT-1和GAT-3蛋白表达(P0.05)。结论:奔豚汤能够改善慢性束缚应激诱导小鼠焦虑行为,可能是通过下调海马区GAT-1和GAT-3蛋白表达,进而调节中枢神经系统氨基酸类神经递质的含量。     

脑出血实验动物模型制备及在中医药研究中的应用

<正>脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)是一种发病率和致死率都很高的疾病。有统计显示,本病死亡率最高可达68%,其中约4/5的患者死亡发生在4 d之内,其余大多数也发生在2周之内,10年生存率只有24. 1%~([1])。目前西医和中医都在积极寻求降低患者死亡率和提高生存质量的方法。虽然西医学与中医学在理论基础和诊断标准等方面存在着一定的差别,     

合欢花-远志单味药及药对对慢性不可预知应激大鼠抑郁样行为及海马CREB，NOX2表达的影响

目的 观察合欢花-远志单味药及药对改善慢性不可预知应激大鼠抑郁样行为的作用,并通过海马组织超微结构及环腺苷酸反应元件结合蛋白（CREB）,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2（NOX2）表达水平初步研究其机制。方法 72只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、合欢花组、远志组、合欢花-远志药对组及氟西汀组。除正常组外,其余5组均采用慢性不可预知应激刺激与孤养相结合的方法制备抑郁模型。自造模第1天起,合欢花组、远志组和药对组分别给与总生药量1.05 g·kg^-1的水煎液,氟西汀组给予2.1 mg·kg^-1剂量盐酸氟西汀水溶液,正常组和模型组给予蒸馏水,连续灌胃28 d。分别于造模前1 d及造模后第7,14,21,28天进行敞箱实验和强迫游泳实验,第28天电镜观察海马组织形态学改变,紫外分光光度法检测海马组织超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测CREB和NOX2表达水平。结果 行为学实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠水平活动次数和糖水消耗量减少,游泳不动时间增加（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,合欢花组、远志组和药对组大鼠水平活动次数和糖水消耗量明显增加,游泳不动时间明显缩短（P<0.05,P<0.01）;与单味药比较,药对组各项行为学指标差异有统计学意义（P<0.05）。形态学结果发现,模型组海马组织线粒体肿胀明显,超微结构被破坏,而各给药组大鼠海马组织超微结构接近正常。与正常组比较,模型组海马组织SOD活性降低,MDA含量升高（P<0.01）;与模型组比较,合欢花组、远志组和药对组大鼠海马组织SOD活性升高,而MDA含量降低（P<0.05,P<0.01）;与单味药比较,药对组差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。Real-time PCR和Western blot结果表明,与正常组比较,模型组大鼠海马组织NOX2表达增加,CREB的表达减少（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,合欢花组、远志组和药对组大鼠海马组织NOX2表达减少,CREB表达增加（P<0.05,P<0.01）;与单味药比较,药对组大鼠海马组织NOX2和CREB蛋白表达差异有统计学意义（P<0.01）。结论 合欢花-远志单味药及药对能改善慢性不可预知应激大鼠的抑郁样行为,可能与减少氧化应激和上调CREB表达、下调NOX2表达有关。     

人参皂苷CK对MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨人参皂苷CK对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响。方法 MCF-7细胞经不同浓度的人参皂苷CK处理后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,real-time q PCR法检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,Western blot法检测p-PI3K、p-Akt蛋白表达。结果与对照组比较,10μmol/L人参皂苷CK处理72 h,20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理24、48、72 h后,对细胞增殖的抑制率显著增加(P0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,细胞凋亡率和E-钙黏蛋白mRNA表达显著增加(P0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,以及p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著降低(P0.05)。结论人参皂苷CK可抑制MCF-7细胞增殖、上皮间质转化,并诱导细胞凋亡,这可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关。     

回毒银花散中各药及药物不同配比对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用研究

目的 研究《外科正宗》中回毒银花散对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑菌能力以及毒力因子α-溶血素(α-hemolysin, Hla)活性和生物被膜形成的抑制作用,同时探究回毒银花散最佳配比为古方新用提供实验支撑。方法 通过最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)、纸片扩散法(K-B法)分析回毒银花散及组方中各味药对MRSA菌株USA300的抑制效果,溶血实验、Hla中和实验、Hla寡聚实验、免疫印记(Western blot)实验验证药物以何种形式抑制毒力因子Hla的活性,生物被膜形成实验评价回毒银花散对生物被膜的抑制效果,最后正交实验探究回毒银花散的最佳配比。结果 回毒银花散抑制MRSA菌株,MIC₉₀为64 mg/mL,MBC为256 mg/mL,抑菌圈直径为(7.50±0.50)mm。回毒银花散还通过抑制Hla的释放抑制...