8-硝基白杨素对HL-60细胞凋亡与PTEN-Akt途径的影响

目的 观察8-硝基白杨素(NOChR)抑制人急性髓性白血病细胞系(HL-60)细胞增殖和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制是否与PTEN-Akt信号传导途径相关.方法 体外培养HL-60细胞.MTT比色法检测增殖活性;流式细胞术(FCM)定量分析细胞凋亡程度;Western Blot分析HL-60细胞PTEN、P-Akt蛋白表达的影响.结果 NOChR显著抑制HL-60细胞增殖,呈浓度依赖性,其IC50值为1.34 μmol/L;NOChR具有诱导HL-60细胞凋亡作用,且呈浓度和时间依赖性.NOChR以浓度和时间依赖方式上调HL-60细胞PTEN蛋白表达和抑制P-Akt蛋白表达,其作用可被PPARγ特异性阻断剂GW9662(10 μmol/L)预孵育拮抗.结论 NOChR诱导HL-60细胞凋亡作用与其活化PPARγ,上调PTEN蛋白表达,抑制抑制Akt磷酸化相关.     

姜黄素对HL-60细胞体内、体外抗癌作用的实验研究

 目的　研究姜黄素对急性粒细胞白血病HL-60细胞体内、体外抗癌作用。方法　应用台盼蓝拒染法、MTT法及电镜观察超微结构和DNA片断化分析观察姜黄素对HL-60细胞的体外抗癌作用;通过HL-60细胞裸鼠移植瘤模型,采用TUNEL,免疫组化等方法检测姜黄素对HL-60细胞裸鼠移植瘤的体内抗癌效应。结果　①姜黄素对HL-60细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈时间和剂量依赖性;在体外可诱导HL-60细胞发生凋亡。②姜黄素抑制HL-60细胞裸鼠移植瘤生长,抑瘤率为54.35%;姜黄素在体内亦可诱导HL-60细胞凋亡,并使其Bcl-2蛋白的表达水平下降。结论　姜黄素在体内、外均可抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡;可能通过下调Bcl-2蛋白表达起作用。     

白花蛇舌草注射液对HL-60细胞凋亡相关基因和蛋白表达的影响

目的：通过观察白花蛇舌草注射液（HDI）在体外对人白血病细胞株HL-60凋亡相关基因和蛋白表达的影响,探讨HDI对HL-60细胞的分子作用机制。方法：以白血病HL-60细胞株为靶细胞,采用RT-PCR检测低浓度的HDI处理靶细胞前后Survivin、Bcl-2基因表达变化以及免疫印迹法观察HDI对Bcl-2和细胞色素C蛋白含量的影响。结果：HL-60经HDI（6.25ml/L）处理2周后,Survivin、Bcl-2基因无明显变化;处理3周后,Survivin、Bcl-2基因表达均明显低于未经处理过的细胞,分别低于未经处理细胞的2.5倍和1.8倍。蛋白免疫印迹反应结果同样显示,经低浓度HDI处理细胞1～2周后,Bcl-2和细胞色素C蛋白含量无明显变化;处理3周后,Bcl-2蛋白含量明显低于未经处理过的细胞,下降了1.5倍;而细胞色素C蛋白含量相应的有所增加。结论：白花蛇舌草注射液抑制白血病HL-60细胞增殖的作用机制可能与抑制抗凋亡相关基因和蛋白表达,触发线粒体凋亡途径有关。     

姜黄素诱导食管癌Eca-109细胞凋亡机制的研究

目的 观察姜黄素诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,并初步探讨其作用机制.方法 通过CCK-8法检测姜黄素不同浓度、不同时间点作用于Eca-109细胞的增殖抑制率.应用Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性.流式细胞技术检测细胞早期凋亡.免疫细胞化学法检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达情况.结果 随浓度增加时间延长各组细胞生长抑制率有明显增高,且呈剂量浓度依赖性,组间差异有显著性(P＜0.01).Caspase-3活性检测发现:姜黄素20μmol·L-1、40μmol·L-1作用24 h后OD值与对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术检测到姜黄素作用后,细胞凋亡率明显升高.免疫细胞化学染色显示,随着姜黄素浓度的增高和作用时间的增长,Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达增强.结论 姜黄素可能是通过诱导caspase-3表达活性增高,上调促凋亡基因Bax及下调抗凋亡基因Bcl-2的表达,诱导Eca-109发生凋亡.     

硒化壳聚糖逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的:研究硒化壳聚糖对人慢性粒细胞白血病耐阿霉素细胞株( K562/ADM) mdr-1基因/P-糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响,为逆转肿瘤多药耐药提供新的途径.方法:硒化壳聚糖100,200 mg·L-1作用K562/ADM细胞24 h,应用RTPCR法和免疫印迹法检测mdr-1/P-gp表达的改变;应用高效液相色谱法检测细胞内阿霉素积聚浓度;应用MTT法检测阿霉素对K562/ADM细胞增殖的影响.结果:硒化壳聚糖可增强K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性,增加细胞内阿霉素集聚浓度,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用效果显著强于100 mg·L-1硒化壳聚糖(P＜0.01);硒化壳聚糖能明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp的表达(P＜0.01),100 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(40.87 -3.19)％和(35.08±0.09)％,200 mg·L-1硒化壳聚糖可使mdr-1/P-gp表达分别下降(78.24±3.42)％和(79.61±0.23)％.结论:硒化壳聚糖可明显抑制K562/ADM细胞mdr-1/P-gp表达,增加细胞内阿霉素含量,恢复细胞对化疗药物敏感性,逆转mdr-1编码蛋白P-gp介导的多药耐药.     

续断皂苷抗白血病作用的机制探讨

目的探讨续断皂苷(akebia saponinD,ASD)抗白血病细胞及其作用机制。方法用不同剂量(10、30、50、100μg/mL)皂苷处理人急性白血病细胞株U937细胞和人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞,采用MTT比色法观察ASD对白血病细胞的作用。以Annexin-Ⅴ染色法检测细胞凋亡并以PCR法检测凋亡相关基因的表达。采用Westernblot法检测P53蛋白的变化。采用Griess分光光度法检测样品中一氧化氮(NO)的代谢产物亚硝酸盐的含量。结果与未处理组相比,50μg/mLASD能明显抑制U937细胞和HL-60细胞的生长并呈剂量依赖性,同时伴随bcl-2mRNA表达的明显下调。Western blot检测结果显示,P53蛋白的表达水平随ASD作用而升高。另外,ASD可以促使U937细胞和HL-60细胞中NO的含量显著提高(P<0.05)。结论 ASD对U937细胞和HL-60细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制与bcl-2基因的下调,p53蛋白上调,以及促进白血病细胞内NO含量提高相关。     

川芎嗪联合三氧化二砷对人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞增殖的影响

目的 探讨川芎嗪(TMP)联合三氧化二砷(As2O3)对人急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株HL-60增殖的影响及其治疗APL的作用机制.方法 采用HL-60和脐带内皮细胞系ECV-304两种细胞株,分为空白组、TMP组、As2O3组、TMP+ As2O3组,每组设4个复孔,经TMP单独或联合As2O3作用后,应用噻唑蓝(MTT)实验测定HL-60细胞增殖变化;检测HL-60细胞血管内皮生长因子(VEGF) mRNA和蛋白表达;台盼蓝染色计数绘制ECV-304细胞生长曲线;流式细胞仪检测ECV-304细胞早期凋亡率;倒置显微镜观察ECV-304细胞贴壁情况.结果 TMP能明显抑制HL-60、ECV-304细胞增殖,且能加强As2O3抑制增殖的作用;VEGF mRNA和蛋白表达在TMP与As2O3联合处理后明显减少;TMP与As2O3均能诱导ECV-304细胞早期凋亡,降低细胞贴壁能力,联合作用后效果均明显增强.结论 TMP联合As2O3抑制APL HL-60细胞增殖作用增强,抗血管新生是其治疗APL的可能机制.     

露蜂房蛋白对白血病HL-60细胞影响的实验研究

目的:研究露蜂房中蛋白成分抗白血病作用的机制,为露蜂房治疗白血病的临床应用和开发新的抗白血病药物提供实验和理论依据。方法:采用透射电子显微镜技术,观察露蜂房蛋白成分对白血病细胞(HL-60)的生长抑制作用和形态结构的影响,运用免疫组织化学方法和图像分析系统,研究露蜂房蛋白成分对HL-60细胞凋亡相关信号转导蛋白NF-κBp65、β-catenin及iNOS表达的影响。结果:透射电镜下发现露蜂房蛋白组白血病细胞呈典型的凋亡形态学改变。免疫组化显示,与生理盐水对照组比较,露蜂房蛋白组白血病细胞中NF-κBp65、β-catenin及iNOS表达减弱,NF-κBp65和β-catenin细胞核内转导减少。经图像分析检测和统计学处理后,均有显著性差异(P<0.05)。结论:露蜂房蛋白成分有明显抑制HL-60细胞的作用,其作用机制可能是通过调节凋亡相关信号传导因子NFκ-Bp65、β-catenin及iNOS的表达,从而诱导白血病细胞凋亡。     

姜黄素联合5-氟尿嘧啶对结肠癌SW620细胞体外抑制的影响

目的探索姜黄素与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对结肠癌细胞SW620的体外抑制作用。方法应用MTT法检测5-FU和姜黄素单用或联合用药对SW620细胞增殖的影响;Compu Syn软件分析姜黄素增敏效果;流式细胞仪检测药物作用对SW620细胞凋亡的影响;Western blot法检测联合用药对SW620细胞caspase家族蛋白表达的影响。结果 5-FU对SW620细胞抑制作用较弱,处理48 h,IC50为(367. 20±16. 80)μmol/L,姜黄素预处理与5-FU联用协同增强对SW620细胞株的杀伤作用。姜黄素预处理与5-FU联用诱导SW620细胞凋亡,促进SW620细胞内凋亡相关蛋白(cleaved-PARP、cleaved-caspase3、cleaved-caspase6、cleaved-caspase9)的表达(P<0. 05,P<0. 01)。结论姜黄素预处理与5-FU联合应用可协同抑制结肠癌细胞的增殖,诱导凋亡,并上调SW620细胞内caspase家族的表达。     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡及其机制的初探

目的研究熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制及诱导凋亡作用,探讨其中可能的分子机制。方法用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,免疫细胞化学技术研究熊果酸处理HL-60细胞后,Bcl-2,Survivin蛋白的表达情况。结果 MTT法证实熊果酸对细胞抑制作用强,呈明显的浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL-60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变:细胞染色质浓缩,聚集于核边缘;细胞体积缩小,核固缩深染,凋亡小体形成。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于Go/G1期。免疫细胞化学技术检测熊果酸作用24 h后Bcl-2蛋白表达降低,Survivin蛋白表达降低。结论熊果酸体外可抑制急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与凋亡基因Bcl-2,survivin表达下调有关。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变

目的:探讨《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变。结果:1963年版《中华人民共和国药典》中石斛来源为兰科石斛属Dendrobium植物的新鲜或干燥茎;1977—2000年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、环草石斛、马鞭石斛、黄草石斛或铁皮石斛;2005年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、铁皮石斛或马鞭石斛;2010年版《中华人民共和国药典》石斛的来源为金钗石斛、鼓槌石斛或流苏石斛,铁皮石斛也从石斛项下都单列出来。讨论:石斛药材基源的变化、铁皮石斛的单列体现出石斛用药的科学性。但铁皮石斛与石斛的性味、功效一致,值得商榷;DNA条形码、分子标记技术等新方法可以应用到石斛药材的鉴别中。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

姜黄根茎不同部位的理化指标分析

目的：研究姜黄根茎不同部位外在物理性状和内在化学成分的差异，为姜黄药材的等级划分提供数据基础。方法：在姜黄道地产区收集样品，每份样品按母姜、子姜一级、子姜二级进行分类，分别测定根茎的长度、宽度、厚度、质量、颜色值［明亮度（L*）、红绿度（a*）和黄蓝度（b*）］及双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、挥发油含量。结果：不同部位姜黄根茎的长度、宽度、厚度、质量、折干率差异较大，其中宽度、厚度、质量在鲜品和干品间差异均有统计学意义；子姜二级的折干率显著低于母姜与子姜一级。姜黄不同部位颜色值表现出相同的变化趋势，姜黄鲜品断面颜色值a*的变异系数最大，颜色值b*次之，颜色值L*最小，姜黄干品粉末颜色值b*的变异系数最大，颜色值L*、a*变异系数较小。姜黄不同部位的姜黄素类成分含量存在差异，子姜一级的双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含量均高于母姜和子姜二级。结论：综合以上指标，姜黄子姜一级的理化品质最佳。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。