黄芩中四种主要黄酮成分与环氧酶-2的分子对接研究

目的:黄芩中四种主要黄酮与COX-2进行分子对接。方法:采用软件Molegro Virtual Docker(MVD),以选择性COX-2抑制剂SC-558和6COX共结晶复合物作为受体模板,建立COX-2的活性位点,并对黄芩苷等四种黄酮进行分子对接。结果:黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素与6COX发生分子对接的MVD分值分别为-121.64KJ/moL、-124.76KJ/moL、-96.11KJ/moL和-96.68KJ/moL。黄芩苷、汉黄芩苷以及SC-558均能作用于以Leu352,Phe518,Gly526,Val523,Ala527和Ser353等氨基酸残基组成的活性位点。结论:黄芩苷等四种黄酮与COX-2能够成功进行分子对接,其对接位点信息有助于该类化合物抑制COX-2的活性机制的阐释。     

柴胡黄芩配伍不同提取部位对大鼠急性酒精性肝损伤肝组织中环氧合酶-2表达的影响

目的:研究柴胡黄芩配伍不同提取部位对大鼠急性酒精性肝损伤肝组织中环氧合酶-2表达的影响。方法:采用白酒灌胃造成大鼠急性酒精性肝损伤模型,以当飞利肝宁胶囊作为对照药,检测肝组织中环氧合酶-2表达,探讨柴胡、黄芩配伍不同提取部位对急性酒精性肝损伤的影响。结果:正丁醇组对环氧合酶-2表达影响最显著。结论:抑制肝组织环氧合酶(COX-2)的过度表达,可能是柴胡黄芩配伍抗酒精性肝损伤的机制之一。     

柴胡黄芩配伍对大鼠急性酒精性肝损伤整体调节作用初探

目的:从整体观念出发研究柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍(2:1,1:1,1:2)对大鼠急性酒精性肝损伤的防治作用.方法:采用白酒灌胃造成大鼠急性酒精性肝损伤模型,以单味柴胡、黄芩、小柴胡冲剂作为对照药,通过对一般状况观察,脏器指数的比较,肾上腺内VitC含量的测定,探讨柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍对急性酒精性肝损伤的影响.结果:柴胡黄芩1:2组对各项检测指标影响最显著.结论:整体调节作用(包括改善机体一般情况,拮抗乙醇引起的中枢抑制作用,发挥一定的内分泌-免疫网络调节作用)是柴胡黄芩配伍抗急性酒精性肝损伤的机制之一.     

柴胡黄芩配伍抗小鼠急性酒精性肝损伤的实验研究

目的:研究柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍对小鼠急性酒精性肝损伤的防治作用,求证二者配用时最佳的配比关系,并作相关机制探讨.方法:采用白酒灌胃造成小鼠急性酒精性肝损伤模型,以单味柴胡、黄芩、小柴胡颗粒作为对照药,通过观察肝组织病理形态,检测相关肝功能指标及肝脏蛋白、MDA的含量,探讨柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍对急性酒精性肝损伤的影响.结果:柴胡-黄芩1:2组对各项检测指标影响最显著,能显著降低血清ALT、AST、GGT的含量,抑制肝内MDA的生成,改善肝脏的病理变化.结论:不同比例配伍的柴胡黄芩抗急性酒精性肝损伤中发挥作用的强弱趋势不同,以柴胡-黄芩1:2组疗效最佳.其防治急性酒精性肝损伤的作用机制可能是稳定肝细胞膜,改善肝功能,保护肝细胞;抗脂质过氧化损伤;改善肝脏的病理损伤.     

不同溶剂对黄芩-柴胡药对中的药效成分提出的影响

目的:考察水提、醇提对黄芩-柴胡药对中的药效成分黄芩苷、柴胡皂苷a、d提出率的影响.方法:采用RP-HPLC法,测定各提取液中黄芩苷及柴胡皂苷a、d的含量.结果:水提、醇提对黄芩苷提出率影响不大,但对柴胡皂苷的提出率影响较大,对柴胡皂苷a的提取,醇提优于水提2.4～4.7倍,且水提不能将柴胡皂苷d提出.结论:提取溶剂对黄芩苷的提出含量影响不大,但对柴胡皂苷的提出率影响较大,本实验结果为临床合理用药和提高药材利用率提供了依据.     

柴胡-黄芩药对保肝作用有效部位的研究

目的:探查柴胡-黄芩药对保肝作用的有效部位。方法:采用乙醇沉淀法,将柴胡-黄芩药对水提液分为A、B、C、D 4个部位,以血清ALT、AST为指标,观察柴胡-黄芩药对水提液及其分离部位合并液对CCL4急性肝损伤的保护作用;采用正交试验考察A、B、C、D各部位的保肝效应,最后对分析所得的最佳配伍进行效用再验证。结果:柴胡-黄芩药对水提液及其分离部位合并液均能明显降低急性CCL4肝损伤模型大鼠血清ALT与AST(P<0.05或P<0.01);正交试验表明,C和D对模型大鼠血清ALT与AST均有不同程度地降低作用(P<0.05或接近0.05),其最佳部位配伍为C+D;重复验证实验表明,C+D组能显著降低模型大鼠血清ALT与AST(P<0.05),其效应与柴胡-黄芩药对水提液相当。结论:部位C、D是柴胡-黄芩药对保肝作用的主要部位。     

基于分子对接柴胡桂枝干姜汤干预初期寒湿郁肺型新型冠状病毒肺炎的活性成分及功效作用机制探讨

目的预测柴胡桂枝干姜汤干预初期寒湿郁肺型新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的药效成分及关键靶标,明确其作用机制。方法查阅文献及临床报道,总结COVID-19中医分期、临床表现及柴胡桂枝干姜汤的功用进行方证关系分析。运用TCMSP数据库筛选柴胡桂枝干姜汤中潜在活性成分及相关靶点,PubMed等数据库筛选肺炎、咳嗽、发热相关靶点,借助Cytoscape软件构建"药物-疾病-靶点"的可视化网络图、蛋白互作网络,并通过STRING数据库进行关键靶点的GO和通路(pathway)富集分析,药效成分采用AutoDock与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶蛋白及血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)进行分子对接。结果方证关系分析柴胡桂枝干姜汤可奏温阳散寒化湿、兼清郁热、开达膜原之功干预初期寒湿郁肺型COVID-19,通过筛选,预测柴胡桂枝干姜汤中发挥治疗作用主要为156个化学成分作用于159个相关靶点,核心基因有EGFR、TP53、YWHAZ、HSP90AB1、PIK3R1、GRB2等27个,GO和pathway分析柴胡桂枝干姜汤主要参与细胞调节等生物过程及免疫系统相关通路发挥治疗作用,对10个核心成分进行分子对接所得,方中柴胡中柴胡皂苷A、柴胡皂苷D与桂枝中的过氧麦角固醇与SARS-CoV-23CL水解酶蛋白和ACE2有较好的亲和力。结论通过网络药理学与分子对接技术预测柴胡桂枝干姜汤可用于初期寒湿郁肺型COVID-19治疗,方中柴胡、桂枝等中药含有的潜在抗病毒成分可通过调控免疫系统等发挥治疗作用,阐释了中药"多成分-多靶点-多疾病"的作用特点,为临床用药提供理论依据。     

柴胡和黄芩配伍的研究进展

配伍是中药复方用药的特色和优势,而药对则是最常见的配伍形式。柴胡、黄芩配伍出自《伤寒论》的小柴胡汤方,是张仲景柴胡系列方剂中最具代表意义的基本配伍,也是和解少阳的基本结构。柴胡和黄芩配伍的临床应用十分广泛,如治疗心血管系统疾病、消化系统疾病、呼吸系统疾病、精神神志系统疾病以及发热等都有显著疗效。研究显示,柴胡、黄芩配伍具有保肝利胆、抗病毒、解热抗炎、抗惊厥抗癫痫等药理作用,故从临床研究和实验研究两方面对柴胡、黄芩配伍进行综述,根据黄芩的主要药效成分黄酮类及柴胡和柴胡的主要成分柴胡皂苷均具有抗抑郁作用,且配伍后黄芩苷和柴胡皂苷溶出率均提高,以及临床治疗抑郁症常用的柴胡类方(柴胡为君药)多常配伍黄芩清热泻火等推断,即柴胡配伍黄芩可能具有一定程度的抗抑郁作用,但仍需学者进一步证实。     

HPLC测定生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷溶出的影响

目的:研究配伍生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷在水煎液中溶出的影响。方法:采用水煎煮法,以HPLC测定柴胡皂苷a和黄芩苷的含量,考察配伍生姜对小柴胡汤中柴胡皂苷a和黄芩苷溶出的影响。结果:配伍生姜对小柴胡汤中黄芩苷的溶出没有显著性影响(P>0.05),而不配伍生姜组的柴胡皂苷a的含量高于配伍生姜组,且两者存在显著性差异(P<0.05)。结论:配伍生姜对黄芩苷的溶出无影响,而对柴胡皂苷a的溶出有影响,且生姜降低小柴胡汤中柴胡皂苷a的含量。     

柴胡黄芩配伍抗大鼠急性酒精性肝损伤作用的实验研究

目的研究柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍(2∶1,1∶1,1∶2)对大鼠急性酒精性肝损伤的防治作用。方法采用白酒灌胃造成大鼠急性酒精性肝损伤模型,以单味柴胡黄芩和小柴胡冲剂作为对照药,通过血清和肝匀浆乙醇脱氢酶(ADH)的测定和肝组织病理学的观察,探讨柴胡黄芩配伍对急性酒精性肝损伤的影响。结果柴胡黄芩1∶2组对各项检测指标影响最显著。结论不同比例配伍的柴胡黄芩抗急性酒精性肝损伤中发挥作用的强弱趋势不同,以柴胡黄芩1∶2组疗效较佳。     

柴胡药材中的矿质元素与有效成分的相关性分析

目的:通过分析柴胡药材中的矿质元素与有效成分之间的关系,探究其对柴胡药材质量的影响,为提高栽培种柴胡的药材质量提供参考。方法:采用微波消解法消解,采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定24批样品中Fe,Mg等16种矿质元素的含量,根据《中国药典》2015年版标准,利用HPLC测定指标成分柴胡皂苷a,d的含量,流动相为水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~5 min,35%~40%B;5~15 min,40%~45%B;15~25 min,45%~55%B;25~30 min,55%~90%B;30~45 min,90%~35%B),流速1.0 mL·min~(-1),进样量20μL,柱温25℃,检测波长210 nm。利用SPSS 17.0软件进行双变量相关方法分析24批样品中矿质元素与有效成分之间的相互关系。结果:不同柴胡样品中矿质元素和有效成分含量都有较大差异,有效成分柴胡皂苷a,d的含量与Cu元素相关系数分别为0.349和0.425,呈显著正相关,与Na元素的相关系数分别为-0.517和-0.420,呈显著负相关。结论:柴胡药材中有效成分柴胡皂苷a,d含量与Cu和Na等矿质元素之间的存在一定关系,建议通过外源施入矿质元素的栽培措施来调控柴胡皂苷a,d在柴胡根中合成,为栽培种柴胡质量的提高提供实验依据。     

UPLC-MS背景扣除法联合代谢组学技术分析柴胡-白芍药对配伍前后化学成分变化

目的探究柴胡-白芍药对配伍前后化学成分的整体变化情况。方法 UPLC-MS背景扣除法联合代谢组学技术对柴胡-白芍配伍前后的化学成分进行整体分析,采用UPLC-MS分析柴胡、白芍及柴胡-白芍药对各8批提取物的化学成分,并用质谱背景扣除法将柴胡-白芍药对合提物的质谱数据分别扣除白芍、柴胡单提物的质谱数据得配伍后柴胡、白芍的单提物的质谱数据,将柴胡、白芍配伍后的化学成分分别与配伍前各自的化学成分进行主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),分析柴胡-白芍药对组成药味柴胡、白芍配伍前后整体化学成分的变化情况。结果 UPLC-MS检测柴胡-白芍药对共提物、柴胡及白芍单提物化学成分共57个,结合文献报道指认出其中32个。多元统计结果显示,柴胡-白芍药对配伍前后柴胡中含量发生显著变化的成分有6个,鉴定其中3个成分;白芍中含量发生显著变化的成分有3个,鉴定其中2个成分。分别为柴胡中柴胡皂苷a、3″-O-乙酰化柴胡皂苷a、4″-O-乙酰化柴胡皂苷a配伍后含量降低;白芍中芍药苷、没食子酰基芍药苷或其异构体配伍后含量升高。结论从整体化学组成上比较了柴胡-白芍药对配伍前后的差异,为其配伍机制的阐释奠定了基础。     

柴胡三种萃取物抗惊厥作用有效成分探讨

探讨柴胡三种萃取物抗惊厥作用的有效成分。采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)及高效液相色谱仪(HPLC)分析超临界CO_2萃取(SFE-CO_2)获得的柴胡皂甙部分、挥发油部分及水溶性部分三者的化学成分,共鉴定出40种化学成分,其中,对最大电休克(MES)电惊厥模型有明显拮抗作用的柴胡皂甙部分及挥发油部分,它们的挥发性化学成分都以亚油酸为主,而能有效对抗戊四唑(PTZ)化学惊厥模型的水溶性部分,它的挥发性化学成分则主要为丙三醇和木糖醇,故推测柴胡所含的亚油酸可能有抗电惊厥作用,所含的两种醇可能对化学性惊厥起拮抗作用。     

近红外光谱法测定柴胡药材中柴胡皂苷A含量

目的:利用近红外光谱法快速测定柴胡药材中柴胡皂苷a的含量.方法:利用HPLC测定柴胡样品中柴胡皂苷a的含量,运用偏最小二乘(PLS)法建立其含量与NIR光谱之间的多元校正模型,并对未知样品进行含量预测.结果:建立柴胡皂苷a定量模型准确性较好,内部交叉验证均方差(RMSECV)、内部交叉验证决定系数分别为0.321,0.934.经外部验证,NIR预测值与HPLC测定值之间的相关系数为0.931,预测回收率为103.84％.结论:利用近红外光谱法快速测定柴胡药材中柴胡皂苷a含量是可行的,该法可以为柴胡药材的快速无损检测提供参考和依据.     

醋柴胡对龙胆苦苷在小鼠体内分布的影响

目的:考察醋柴胡对龙胆苦苷在小鼠体内分布的影响,探讨醋柴胡肝引经作用机制。方法:将192只雄性昆明种小鼠随机分为4组,包括龙胆苦苷空白组和龙胆苦苷-醋柴胡低、中、高剂量组,分别于0.08,0.25,0.5,0.75,1,1.5,2,4 h(每个时间点6只动物)采集血浆、肝、心、脾、肺、肾组织,预处理后利用HPLC-MS/MS测定药物含量,分析其药动学过程,以相对摄取率(Re)和相对综合靶向效率(RTE)评价醋柴胡对龙胆苦苷在小鼠体内分布的影响。结果:不同剂量醋柴胡均可增加龙胆苦苷在肝脏的RTE,低、中、高剂量醋柴胡组肝脏的RTE分别为0.25,0.13,0.33。但并不增加龙胆苦苷肝内摄入,而是显著减少药物在其他组织的分布。结论:醋柴胡通过减少龙胆苦苷在其他组织分布达到增加肝RTE的作用。     

PITC柱前衍生HPLC测定柴胡炮制前后17种氨基酸含量

目的:建立一种同时测定鳖血柴胡中17种氨基酸含量的方法,为该药材的质量控制提供参考。方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,采用Prevail C18色谱柱,流动相[乙腈-水(4∶1)]-[乙酸钠缓冲溶液(p H 6.5)-乙腈(97∶3)]梯度洗脱,检测波长254 nm,测定柴胡炮制前后氨基酸的含量。结果:17种氨基酸在32 min内可良好分离;样品平均加样回收率93.4%~107.1%,RSD 1.8%~3.9%。结论:与其他柱前衍生测定氨基酸含量的方法相比,该方法具有可操作性强、成本低、易推广等优势,可作为柴胡及其炮制品中氨基酸的含量测定方法。     

宁夏产柴胡药材与其对照药材的HPLC指纹图谱及近红外光谱比较

目的:通过宁夏13批柴胡药材与对照药材的HPLC指纹图谱和近红外图谱研究,对宁夏柴胡药材进行质量评价。方法:分别建立HPLC指纹图谱和近红外光谱,比较13批柴胡药材与对照药材HPLC和近红外光谱的相似度,并分别对13批柴胡药材和对照药材的共有峰面积和近红外吸收进行配对样本t检验。结果:13批柴胡药材与对照药材色谱指纹图谱和近红外图谱的相似度分别0.901和0.982,结合13批柴胡药材与对照药材共有峰面积(近红外为对应点吸收)的配对样本t检验验证,均无显著差异,验证了13批柴胡药材与对照药材质量的一致性较高。结论:本研究基于色谱指纹图谱与近红外图谱,并结合配对样本t检验对分析结果进行验证,认为13批宁夏产柴胡药材与对照药材质量无显著差异。研究采用两种综合性较强的检测手段,避免了分析中因指纹图谱相似度阈值限定不明确而引起的误判,为分析结果提供了可靠的依据,为完善中药材质量控制方法提供了新的思路。     

柴胡萃取成分抗惊厥作用的实验研究

目的：研究柴胡萃取物的抗惊厥作用。方法：采用超临界CO2萃取法得到柴胡皂甙部分及挥发油部分,用戊四唑阈值发作模型（MSTT）及最大电休克模型（MES）来研究其抗惊厥作用。结果：柴胡挥发油300mg/kg与柴胡皂甙150mg/kg配伍组有较强的抗戊四唑惊厥作用（P＜0．01）;挥发油300mg/kg,皂甙150mg/kg与冰片36．4mg/kg配伍后则有显著的抗EMS作用（P＜0．001）。结论：柴胡挥发油部分与柴胡皂甙部分合理配伍后有较强的抗惊厥作用。     

基于均匀设计法评价柴胡-黄芩的配伍比例及抗抑郁机制

目的:研究柴胡-黄芩药对发挥抗抑郁功效的最佳配伍比例,探讨其可能的抗抑郁机制。方法:取柴胡、黄芩在2015年版《中国药典》中的规定用量,按照二因素七水平均匀设计表进行配伍分组。采用慢性不可预见温和应激(CUMS)方法造模,抑郁症模型小鼠灌胃给予柴胡-黄芩不同配伍比例的水煎剂,观察其对模型小鼠糖水偏好、强迫游泳、悬尾、开野等行为学试验的影响。将所得数据进行回归分析,通过回归方程求解最佳配伍比例。对优选的配伍比例进行验证,并测定小鼠脑海马环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化的水平及脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,探讨柴胡-黄芩药对可能的抗抑郁机制。结果:与空白组小鼠相比,模型组小鼠糖水偏好率显著降低(P 0. 01),开野穿格次数显著减少(P 0. 01),强迫游泳不动时间和悬尾不动时间显著延长(P 0. 01);给予柴胡-黄芩水煎剂可增加模型小鼠的糖水偏好率(P 0. 05,P 0. 01)和穿格次数(P 0. 05,P 0. 01),缩短强迫游泳不动时间和悬尾不动时间(P 0. 05,P 0. 01)。验证试验显示,柴胡与黄芩配伍后可改善模型小鼠抑郁样行为,增加小鼠的糖水偏好率(P 0. 01),缩短强迫游泳不动时间和悬尾不动时间(P 0. 05,P 0. 01);柴胡-黄芩(1∶1)配伍组及柴胡-黄芩(8∶3)配伍组均可显著增加模型小鼠穿格次数(P 0. 05,P 0. 01);柴胡-黄芩(1∶1)配伍组在强迫游泳试验和悬尾试验中优于柴胡-黄芩(3∶8)和(8∶3)配伍组(P 0. 05,P 0. 01),在糖水偏好试验和开野试验中显著优于柴胡-黄芩(3∶8)配伍组(P 0. 05),且柴胡-黄芩(1∶1)配伍组促进海马中CREB磷酸化和增加海马中BDNF表达的效果最佳。结论:柴胡-黄芩药对可改善CUMS小鼠抑郁样行为,发挥抗抑郁功效,其最佳配伍比例为1∶1,最佳用量均约为5 g,其抗抑郁的作用机制可能与促进海马中CREB磷酸化和增加海马中BDNF表达有关。     

柴胡黄芩配伍应用对小鼠急性癫痫模型的影响

目的:观察柴胡黄芩配伍应用对小鼠急性癫痫模型的影响。方法:60只昆明小鼠被随机分为6组,即模型组(A组),柴胡黄芩5∶2组(B组),柴胡黄芩1∶1组(C组),柴胡组(D组),黄芩组(E组),地西泮组(F组),每组各10只,制备小鼠最大电休克(MES)急性癫痫模型;另取180只昆明小鼠按上述分组方法分别制备小鼠戊四氮(PTZ)、士的宁(STR)、匹罗卡品(PLCP)急性癫痫模型。结果:B、F组可显著降低MES小鼠惊厥率(P<0.05),明显延长PTZ小鼠发作性阵挛潜伏期、发作性强直潜伏期以及死亡潜伏期(P<0.05),以及STR小鼠死亡潜伏期(P<0.01)。仅F组可延长PLCP小鼠强直及死亡潜伏期(P<0.01)。结论:柴胡黄芩配伍应用有抗惊厥、抗癫痫作用,其中以柴胡黄芩5∶2组效果最为明显。