基于代谢组学研究黄连-黄芩药对治疗脑缺血大鼠的作用机制

运用代谢组学方法研究黄连-黄芩药对对脑缺血模型大鼠代谢的作用机制。采用线栓法致大脑中动脉阻塞复制缺血再灌脑损伤大鼠模型(MCAO)。通过超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)的方法、Markerlynx软件、以及主成分分析法和偏最小二乘判别法分析正常大鼠、脑缺血模型大鼠以及分别给予黄连(HL)、黄芩(HQ)和黄连-黄芩药对(LQ)干预后大鼠尿液样本中的内源性代谢物的差异,结合内源性代谢物的一级及二级碎片离子的精确信息,检索并鉴定可能的生物标志物,进而在MetPA数据库中构建代谢通路。结果在脑缺血模型大鼠的尿液中发现并鉴定出了20种生物标志物,并对其相对含量及代谢途径进行分析。主要涉及神经递质调节、氨基酸代谢、能量代谢、脂质代谢等。这些代谢通路在脑缺血模型大鼠的体内发生紊乱,主成分分析表明,正常与脑缺血模型得到明显区分,而给予HL,HQ,LQ后可以使之向着正常状态转变。此研究对脑缺血大鼠代谢组及黄连-黄芩药对干预的作用机制进行阐释,体现代谢组学可反映生物体的生理及代谢状态,能较好地体现药对是中医遣方用药的特色优势,具有内在的组合变化规律以及中医药的整体观、系统观以及多成分协同或拮抗作用的特点。     

尼莫地平含药脑脊液对体外PC12细胞损伤的保护作用

目的观察尼莫地平含药脑脊液对多种PC12细胞损伤模型的保护作用,对脑脊液药理实验条件的规范化及其应用进行探讨。方法采用噻唑蓝（MTT）法,观察不同取样时间、不同添加量、不同灭活方法处理的尼莫地平大鼠含药脑脊液对氯化钾损伤的PC12细胞存活力的影响,确定尼莫地平大鼠含药脑脊液的制备条件。并进一步考察该条件制备的尼莫地平大鼠含药脑脊液对过氧化氢、连二亚硫酸钠及谷氨酸钠等因素引起的PC12细胞损伤的保护作用。结果尼莫地平含药脑脊液对氯化钾致PC12细胞损伤的保护率随添加量的增加而提高;相同添加量多次给药（2次·d^-1×3.5d）含药脑脊液的保护率均高于单次给药的含药脑脊液;热灭活、乙醇灭活及丙酮灭活含药脑脊液对PC12细胞均有显著保护作用,其保护率与未灭活含药脑脊液无显著性差异;根据确定条件制备的尼莫地平大鼠含药脑脊液对过氧化氢、连二亚硫酸钠及谷氨酸钠等因素损伤的PC12细胞均具有显著的保护作用。结论尼莫地平含药脑脊液的制备以连续多次给药方案,无需灭活处理,体外添加终体积的10%为宜;对氯化钾等多种原因引起的PC12细胞损伤均具有明显保护作用。     

黄芩中四种主要黄酮成分与环氧酶-2的分子对接研究

目的:黄芩中四种主要黄酮与COX-2进行分子对接。方法:采用软件Molegro Virtual Docker(MVD),以选择性COX-2抑制剂SC-558和6COX共结晶复合物作为受体模板,建立COX-2的活性位点,并对黄芩苷等四种黄酮进行分子对接。结果:黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素与6COX发生分子对接的MVD分值分别为-121.64KJ/moL、-124.76KJ/moL、-96.11KJ/moL和-96.68KJ/moL。黄芩苷、汉黄芩苷以及SC-558均能作用于以Leu352,Phe518,Gly526,Val523,Ala527和Ser353等氨基酸残基组成的活性位点。结论:黄芩苷等四种黄酮与COX-2能够成功进行分子对接,其对接位点信息有助于该类化合物抑制COX-2的活性机制的阐释。     

5种中药复方对局灶性脑缺血大鼠的影响及作用机制比较

目的 比较通塞脉片、通心络胶囊、步长脑心通胶囊、复方血栓通胶囊、血塞通胶囊对局灶性脑缺血大鼠模型治疗作用的差异。方法 采用大脑中动脉电凝法建立大鼠局灶性脑缺血模型,每天2次ig给予通塞脉片（0.239 g/kg）、通心络胶囊（0.281 g/kg）、步长脑心通胶囊（0.432 g/kg）、复方血栓通胶囊（0.405 g/kg）、血塞通胶囊（0.027 g/kg）治疗,连续给药3 d,观察5种药物对脑缺血大鼠行为学评分、脑梗死面积、血浆中血管紧张素I、II（AngI、AngII）及血清中C反应蛋白（CRP）及脑组织中核因子-κB（NF-κB）表达的影响。结果 5种中成药均可降低模型大鼠脑梗死面积,抑制NF-κB的表达,其中血塞通胶囊组大鼠行为学评分显著降低,通塞脉片组、通心络胶囊组、步长脑心通胶囊组和复方血栓通胶囊组大鼠血清IL-6的量显著降低,血塞通胶囊和步长脑心通胶囊组CRP的量显著降低,通塞脉片组大鼠血浆AngII的量显著降低（P＜0.05、0.01）。结论 5种中成药均可不同程度地抑制炎症因子的释放,降低模型大鼠NF-κB的表达,从而改善脑缺血,另外通塞脉片还能通过降低AngII水平缓解缺血症状。     

围手术期预防性使用抗菌药物分析

目的了解某三甲医院外科围手术期患者抗菌药物的应用情况,评价其应用的合理性。方法采用回顾性分析的方法,对某三甲医院外科2010年4-6月住院患者120份病历资料进行了调查,探讨围手术期抗菌药物合理应用情况。结果外科围手术期患者的抗菌药物总的使用率96.7%,平均用药时间9 d,最长预防用药时间为20 d;其中用药>3 d者占74.2%;用药>7 d者占51.7%;抗菌药物使用占前8位的分别为奥硝唑、头孢替安、氨曲南、头孢唑林、头孢曲松、左氧氟沙星、头孢米诺、莫西沙星;其中单一、二联和三联用药分别为37.1%、48.3%、14.6%。结论某三甲医院不合理用药表现在选药不恰当,术后用药时间偏长,联合用药不合理,更换药品频繁,标本送检率低等,应加强监管,促进围手术期合理使用抗菌药物。     

面向中药产业新型分离过程的特种膜材料与装备设计、集成及应用

人类社会的发展历程是以材料为主要标志的。《学术引领系列·国家科学思想库·未来10年中国学科发展战略:材料科学》指出:材料科学已经成为现代科学技术赖以发展与深化的实质性环节,对科学技术的发展起着基础和先导作用;一类新材料的出现还可以带动一个产业领域的诞生。过程工业对资源、能源的过度消耗和对环境的污染已经成为制约人类社会可持续发展的瓶颈问题,而化学工程一直是实现物质高效转化和能量有效利用的重要手段,进入21世纪,化学工程的目标已转化为:依托性能优越、环境友好和功能齐备的新型结构功能材料发展新的过程工业技术,形成新的工艺流程和集成技术,以达到高效、低耗、无污染的目的。膜技术以先进分离材料为载体,可在温和、低成本条件下实现物质分子水平的分离,特别适合现代工业对节能、低品位原材料再利用和消除环境污染的需要,已成为解决当代人类面临的能源、水资源、环境等领域重大问题的共性关键技术。膜材料与装备应用于中药产业可显著提升生产效率。通过分析膜材料与技术在国外医药产业和国内中医药产业的应用概况,面向中药产业应用过程的产业升级与绿色发展,提出将材料化学工程理论与方法引入中医药领域,开展具有自主知识产权的原创研究,构建以膜分离技术为核心的新型分离过程、分离流程及其专属装备,实现中药生产过程的节能减排。通过阐述20年来本课题组在中药及其复方水提液体系、油水混合体系等复杂体系分离过程产业化基础研究探索与工程化应用实践,为建立以特种膜技术为核心的中药新型分离过程的设计、集成与应用提供理论基础与应用示范。     

生津润燥颗粒对干燥综合征模型大鼠及迟发型超敏反应的影响

目的 考察生津润燥颗粒(紫苑、北沙参、桃仁、乌梅、石膏、麦冬等)对干燥综合征模型大鼠及迟发型超敏反应的影响.方法 利用弗氏佐剂和三联疫苗制备干燥综合征大鼠模型,观察模型大鼠的饮水量及血清中IgG、Fas、Fas-L、TNF-α、IL-2R水平;另外以2,4-二硝基氯苯诱发小鼠迟发型超敏反应,观察小鼠耳肿胀率、脾脏系数和胸腺系数.结果 生津润燥颗粒能显著降低干燥综合征模型大鼠饮水量及血清中IgG、Fas、Fas-L、TNF-α、IL-2R水平;同时能明显降低迟发型超敏反应小鼠耳肿胀率及脾脏指数.结论 生津润燥颗粒对干燥综合征模型大鼠具有一定的治疗作用,干预迟发型超敏反应是其发挥作用的环节之一.     

脑脊液药理实验条件规范化初探——当归芍药散精简方的神经保护作用

目的:通过观察当归芍药散精简方(FBD)含药脑脊液对过氧化氢所致PC12细胞损伤模型的保护作用,对脑脊液药理实验条件规范化进行初步探讨。方法:以MTT法观察不同实验条件下(给药方案、添加量、处理方法、批次及保存时间),FBD大鼠含药脑脊液对过氧化氢损伤的PC12细胞存活率的影响。结果:过氧化氢损伤的PC12细胞存活率随FBD含药脑脊液添加量增加而提高;相同添加量多次给药(2次/d×3.5 d)含药脑脊液的保护率均高于单次给药的含药脑脊液;未处理含药脑脊液与经56℃、乙醇、丙酮处理含药脑脊液对PC12细胞均有显著的保护作用(P<0.01),各组保护率无明显差异;同时观察到不同批次大鼠及不同保存时间的含药脑脊液对受损PC12细胞均有显著保护作用,但随保存时间的延长,其保护率下降。结论:含药脑脊液的制备可采用连续多次给药方案,无需灭活处理,一般以体外添加终体积的10%,-20℃冻存不超过30 d为宜。     

六味地黄方含药血清对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的：观察六味地黄方大鼠含药血清对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）损伤血管内皮细胞（VEC）的保护作用。方法：以MTT法观察人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的活力和流式细胞仪测定内皮细胞凋亡率,并通过测定胞内丙二醛（MDA）含量及细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）含量与超氧化物歧化酶（SOD）活力,探讨六味地黄方对血管内皮细胞损伤的保护作用及机制。结果：六味地黄方含药血清能促进ox LDL损伤的血管内皮细胞增殖、抑制ox LDL造成的内皮细胞凋亡、降低胞内MDA含量、减少细胞LDH释放量,提高SOD活力及NO含量。结论：六味地黄方对氧化低密度脂蛋白损伤的血管内皮细胞有一定的保护作用。     

当归芍药散防治老年期痴呆的物质基础与作用机理研究VI——当归芍药散精简方含药脑脊液对PC12细胞的保护作用

目的通过观察当归芍药散精简方(FBD)含药脑脊液对不同因素所致的PC12细胞损伤模型的保护作用,来探讨当归芍药散精简方(FBD)防治痴呆的作用机理.方法以MTT法观察FBD含药脑脊液对谷氨酸、过氧化氢、连二亚硫酸钠和氯化钾造成的PC12细胞损伤模型中细胞存活率的影响.结果连续多次给药(1.62g生药·kg-1)后0.5h～2.5h的FBD含药脑脊液对过氧化氢损伤的PC12细胞均有明显保护作用(P＜0.05～0.01),其中以1.5h的FBD含药脑脊液保护作用最明显;该时间点FBD含药脑脊液对谷氨酸、连二亚硫酸钠和氯化钾造成的PC12细胞损伤模型亦有显著保护作用,且随脑脊液添加量增加保护率捉高.结论FBD含药脑脊液对PC12细胞损伤有显著保护作用,其机制与抑制细胞内钙超载、对抗自由基的氧化损伤和谷氨酸的兴奋性毒性等有关.