珍珠梅黄酮纳米粒调控STAT3抑制人肝癌HepG2细胞侵袭和转移作用的研究

目的探讨中药珍珠梅黄酮纳米粒(5,2’,4’-trihydroxy-6,7,5’-trimethoxy flavone nanoparticle,TTF1-NP)调控STAT3抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭、转移的作用和分子机制。方法利用Western blot技术检测人肝癌HepG2细胞STAT3和p-STAT3蛋白表达,利用Transwell和细胞划痕技术检测人肝癌Hep G2细胞侵袭和转移能力,采用Western blot技术检测细胞侵袭迁移的相关蛋白MMP2和MMP9表达。结果 Western blot检测发现TTF1-NP可以抑制人肝癌Hep G2细胞STAT3的活化表达,通过抑制MMP2和MMP9表达抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭和转移。结论 TTF1-NP通过抑制STAT3的活化抑制MMP2和MMP9蛋白表达抑制人肝癌Hep G2细胞侵袭和转移。     

蜈蚣提取物对人肝癌HepG2细胞STAT3信号通路的影响

目的观察蜈蚣提取物作用于肝癌Hep G2细胞后对信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路与磷酸化相关蛋白的表达以及细胞转移侵袭能力的影响,探讨蜈蚣提取物介导STAT3信号通路抗肝癌侵袭转移的调控作用机制。方法梯度质量浓度(300、600、1 200、2 400μg/m L)的蜈蚣提取物处理人肝癌Hep G2细胞,采用CCK8法检测细胞增殖抑制率,计算半数抑制浓度(IC50)。将人肝癌细胞分为对照组,蜈蚣提取物250、500μg/m L组,5-氟尿嘧啶(5-FU)对照组,蜈蚣提取物处理人肝癌细胞48 h时,Transwell细胞侵袭实验检测Hep G2细胞的侵袭能力变化,Western blotting方法检测STAT3、p-STAT3、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达情况。结果 CCK8方法检测显示,蜈蚣提取物对人肝癌Hep G2细胞增殖有明显抑制作用(P0.05),呈剂量依赖性,IC50(48 h)值为508.3μg/m L;Transwell细胞侵袭实验结果显示,蜈蚣提取物处理48 h时,人肝癌Hep G2细胞的侵袭能力明显降低,蜈蚣提取物250、500μg/m L组和5-FU组透膜细胞数显著少于对照组(P0.05);与250μg/m L蜈蚣提取物组比较,500μg/m L蜈蚣提取物组、5-FU组透膜细胞数更少(P0.05)。Western blotting实验结果显示,蜈蚣提取物处理48 h时,STAT3通路主要以p-STAT3表达下调为主,250、500μg/m L蜈蚣提取物组p-STAT3均较对照组下调(P0.05、0.01);500μg/m L蜈蚣提取物组处理后的MMP-2、VEGF蛋白表达下调,与对照组比较差异显著(P0.05),与250μg/m L蜈蚣提取物组比较,MMP-2表达下调更显著(P0.05)。结论蜈蚣提取物主要通过降低STAT3磷酸化调控STAT3相关信号通路的过度活化,从而降低下游靶蛋白MMP-2、VEGF的表达,抑制人肝癌细胞的增殖及转移侵袭能力。     

南蛇藤提取物联合顺铂用药对人肝癌HepG2细胞的协同作用

目的观察南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)联合顺铂(Cisplatin,DDP),对人肝癌Hep G2细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的协同作用。方法将对数期Hep G2细胞,分为对照组(不加药)、COE组(40 mg·L~(-1))、顺铂组(DDP 2 mg·L~(-1))及联合组(同时加入40 mg·L~(-1)的COE和2 mg·L~(-1)的DDP)。药物作用24 h后,MTT法计算细胞增殖抑制率,划痕实验及Transwell实验分析细胞的侵袭迁移,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法分析上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)以及凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达水平。结果与对照组相比,各组药物均能抑制肝癌细胞的增殖,缩短迁移距离,促进细胞凋亡(P0.05)。Western blot结果表明,与对照组相比,各组药物均能抑制人肝癌Hep G2细胞内N-cadherin、vimentin及Bcl-2蛋白的表达水平,同时增加E-cadherin及Bax蛋白的表达量。与单一用药相比,COE联合DDP用药,作用效果更显著(P0.05)。结论南蛇藤提取物可协同顺铂,促进肝癌细胞凋亡,抑制肝癌细胞侵袭迁移,其分子机制可能与上皮间质转化及Bcl-2/Bax通路有关。     

氧化白藜芦醇对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和自噬的研究

目的:探讨氧化白藜芦醇对人肝癌细胞的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和CCK-8法检测氧化白藜芦醇对人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞增殖的影响;划痕实验、Transwell侵袭实验观察氧化白藜芦醇对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响; Western Blot检测氧化白藜芦醇处理肝癌细胞后p62和LC3蛋白的表达。结果:氧化白藜芦醇对人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞的IC50值分别为38. 5μg/m L、20. 6μg/m L,且增殖抑制效果呈剂量依赖性。氧化白藜芦醇12. 5μg/m L以上剂量能够显著抑制肝癌细胞的迁移、侵袭和自噬。结论:氧化白藜芦醇能够显著抑制体外人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞增殖、迁移、侵袭,抗癌作用与自噬无关。     

藏族药翼首草正丁醇部位提取物体外抑制人肝癌Hep3B细胞增殖和侵袭转移

目的:本研究旨在体外筛选出藏族药翼首草正丁醇部位提取物(YSC-ZDC)抑制人肝癌Hep3B细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。方法:取对数生长期Hep3B细胞,调整细胞密度为4×104/m L(MTT法)或2.5×105/m L(Western blot,heochst 33258实验),1×105/m L(划痕实验),5×104/m L(Transwell实验),培养24,48,72 h后分别加入不同质量浓度的药物(50,100,200 mg·L-1),分组设3~4个复孔。通过MTT法检测YSC-ZDC对于Hep3B细胞增殖的影响,形态观察该药对Hep3B细胞凋亡的影响。划痕实验和Transwell小室检测YSC-ZDC对Hep3B细胞侵袭、迁移的影响;Western blot检测侵袭转移相关信号通路分子表达的变化。结果:YSC-ZDC 50,100,200 mg·L-1作用于Hep3B细胞24,48,72 h后可明显抑制其增长。50,100,200 mg·L-1YSC-ZDC作用于Hep3B细胞24 h后可明显抑制其侵袭和迁移;YSC-ZDC可明显影响上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏素,N-钙黏素(E-cadherin,N-cadherin)和纤维连接蛋白(FN)的表达(P0.05)。结论:YSC-ZDC能显著抑制Hep3B细胞的增殖和侵袭转移,并诱导Hep3B细胞凋亡,其作用机制可能与EMT有关。     

南蛇藤对人肝癌HepG2细胞侵袭能力的影响

目的:研究南蛇藤乙酸乙酯提取物(Celastrus orbiculatus extracts,COE)对人肝癌HepG2细胞侵袭能力的影响。方法:不同浓度COE(20、40、80、160、320μg/ml)处理人肝癌HepG2细胞24 h后,用MTT法检测细胞毒作用;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力;Western blot法检测人肝癌HepG2细胞蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又名Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、NF-κBp65、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases2,MMP-2)、MMP-9蛋白的表达水平。结果:COE(20、40、80、160、320μg/ml)能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖能力,呈明显的剂量依赖性;COE(20、40、80μg/ml)能降低人肝癌HepG2细胞的穿膜细胞数;COE(20、40、80、160μg/ml)下调人肝癌HepG2细胞中p-Akt、NF-κBp65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结论:COE能抑制人肝癌HepG2细胞侵袭能力,其机制可能与下调p-AKT、NF-κBp65、MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

大黄素对人肝癌HepG2细胞迁移侵袭能力及E-钙黏蛋白、Slug蛋白表达的影响

目的观察大黄素对人肝癌Hep G2细胞迁移侵袭能力及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Slug蛋白表达的影响,探讨其相关作用机制。方法体外培养Hep G2细胞,大黄素低、高剂量组分别加入10、20μmol/L大黄素,阴性对照组加入等体积RPMI-1640培养液,阳性对照组加入10μmol/L 5-氟尿嘧啶。分别采用细胞-基质黏附实验、划痕修复实验、Transwell小室体外侵袭实验观察Hep G2细胞黏附率、迁移、侵袭能力;Western blot检测E-cadherin和Slug蛋白表达。结果与阴性对照组比较,大黄素低、高剂量组显著抑制Hep G2细胞黏附率、迁移、侵袭能力,E-cadherin蛋白表达水平显著升高,Slug蛋白表达水平显著降低(P0.05,P0.01),并呈浓度依赖性。结论大黄素能明显抑制Hep G2细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与增强E-cadherin及抑制Slug蛋白表达有关。     

南蛇藤提取物通过调控基质金属蛋白酶组及其抑制因子抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的研究

目的探讨南蛇藤提取物(COE)对人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和转移的影响及其分子机制。方法 MTT法检测COE对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测COE对SGC-7901细胞侵袭和转移能力的影响。Western blotting检测经COE作用后的SGC-7901细胞中金属基质蛋白酶(MMPs)MMP2、MMP9和金属基质蛋白酶抑制因子(TIMPs)TIMP1、TIMP3的蛋白水平。RT-PCR检测经COE作用后的SGC-7901细胞中MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP3的m RNA表达情况。结果 Transwell实验显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞穿膜数明显减少并呈一定的浓度依赖性。Western blotting结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞,MMP2、MMP9蛋白的表达水平明显降低,而TIMP1、TIMP3蛋白表达水平明显上调。RT-PCR结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞中MMP2和MMP9的m RNA水平有轻微升高趋势,而TIMP1和TIMP3的m RNA水平明显大幅上调(P0.001)。结论 COE能明显抑制人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和迁移,其机制可能与下调MMP2、MMP9蛋白水平直接相关。而其作用的实现,很可能是通过直接上调TIMP1和TIMP3的m RNA转录水平从而提高TIMPs蛋白表达水平实现的。     

高良姜素抑制乳腺癌转移作用机制研究

目的探究高良姜素对MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法采用MTT法观察不同浓度高良姜素对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验考察高良姜素对MDA-MB-231水平迁移能力和垂直迁移能力的影响;Transwell小室侵袭实验分析高良姜素对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响;采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法考察高良姜素对MDA-MB-231细胞PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响,免疫荧光染色实验验证高良姜素对MDA-MB-231细胞PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响;Western blotting法和免疫荧光染色实验考察高良姜素对核转录因子(NF-κB)p65磷酸化表达和入核的影响;制备乳腺癌MDA-MB-231细胞株裸鼠移植瘤模型,高良姜素200μg/kg ig给药15 d,检测肿瘤体积和质量,计算抑瘤率,Western blotting分析肿瘤组织PI3K、AKT、MMP-2、MMP-9表达及NF-κB p65磷酸化表达情况。结果高良姜素体外浓度为50、100、200μmol/L时可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖;高良姜素能剂量依赖性抑制PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9蛋白表达,降低NF-κB p65磷酸化表达和入核;200μg/kg高良姜素能抑制裸鼠乳腺癌的生长,抑瘤率为43.66%;高良姜素能抑制瘤组织中PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9表达以及NF-κB p65磷酸化表达。结论高良姜素在体内对MDA-MB-231生长有明显的抑制作用,在体外能抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭,抑制相关蛋白PI3K、Akt和MMP-2、MMP-9蛋白表达,抑制转录因子NF-κB磷酸化表达及入核,阻断其激活。     

健脾活血方阻止EMT,抑制LPS诱导的HepG2细胞迁移和侵袭研究

目的:探讨健脾活血方对LPS诱导的Hep G2细胞的迁移侵袭以及EMT的影响。方法:培养人肝癌细胞株Hep G2细胞,LPS诱导24 h后采用健脾活血方血清进行治疗,然后采用Transwell检测Hep G2细胞的迁移和侵袭,Western blot检测N-cadherin、Vimentin和E-cadherin的表达。结果:和Hep G2细胞相比,LPS+对照组中Hep G2细胞的迁移和侵袭显著增加(P均0.05),同时N-cadherin和Vimentin蛋白表达显著增加,而E-cadherin蛋白表达显著降低(P均0.05)。进一步研究表明,和LPS+对照组相比,LPS+健脾活血方能够显著能够抑制Hep G2细胞的迁移、侵袭,降低Vimentin和E-cadherin蛋白的表达(P均0.05),而促进N-cadherin蛋白的表达(P0.05)。结论:LPS处理能够促进肝癌Hep G2细胞发生EMT、迁移和侵袭,而健脾活血方治疗能够阻止LPS诱导的Hep G2细胞发生转移侵袭以及EMT。     

南蛇藤总萜对MGC-803细胞侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨南蛇藤总萜对人胃癌MGC-803细胞侵袭和迁移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养MGC-803细胞,分为南蛇藤总萜组(质量浓度分别为20,40,80 mg·L-1)、阴性对照组和阳性对照组,采用MTT法检测南蛇藤总萜对MGC-803细胞增殖的抑制作用;采用Transwell小室法检测南蛇藤总萜处理MGC-803细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力的改变;Western blotting法检测处理24 h后基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达情况。结果:南蛇藤总萜能抑制MGC-803细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;南蛇藤总萜40,80 mg·L-1能显著降低MGC-803细胞的穿膜细胞数(P<0.01),并呈浓度依赖性;南蛇藤总萜能降低MGC-803细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平,并有浓度依赖性。结论:南蛇藤总萜能抑制人胃癌MGC-803细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制MMP-2,MMP-9的表达有关。     

山慈菇提取物通过下调AEG-1表达抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭＊

目的 本研究旨在观察山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响，并探讨其分子机制。方法 取人结直肠癌SW480细胞作为研究对象，采用划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力，采用短发夹RNA（Short hairpin RNA，shRNA）干扰技术沉默SW480细胞中星形细胞上调基因-1（astrocyte elevated gene-1，AEG-1）基因的表达，利用Western blot法检测基质金属蛋白酶-2，9（matrix metalloproteinase-2，9，MMP-2，9）、E-钙粘蛋白（E-cadherin）和AEG-1等蛋白的表达变化。结果 山慈菇提取物可使人结直肠癌SW480细胞愈合率、迁移率和侵袭率均显著下降（P < 0.05），下调MMP2、MMP9和AEG-1蛋白表达水平（P < 0.05）以及上调E-cadherin蛋白表达水平（P < 0.05），上述作用均具有浓度依赖性。经shRNA干扰AEG-1基因表达后，SW480细胞中AEG-1蛋白表达水平显著下降（P < 0.05）；同时AEG-1干扰SW480细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P < 0.05），MMP2和MMP9蛋白表达水平均显著下降，同时单独或者联合山慈菇提取物组的细胞迁移率、侵袭率也降低（P < 0.05）。结论 山慈菇提取物能浓度依赖性地抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭，这可能与山慈菇提取物抑制AEG-1蛋白表达，继而下调MMP2、MMP9蛋白表达和上调E-cadherin蛋白表达有关。     

二氢丹参酮抑制人胃癌SGC7901细胞侵袭迁移作用及机制研究

目的研究二氢丹参酮(DHT)对人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其作用的分子机制。方法利用不同浓度的DHT处理细胞后,MTT法检测DHT对细胞生长活力的影响,划痕实验观察DHT对细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究DHT对细胞迁移和侵袭的影响,q RT-PCR和Western blotting检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9和Hedgehog通路调控基因Gli1和HHIP的m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,DHT可显著抑制SGC7901细胞的体外增殖及迁移能力,Transwell实验表明药物处理后穿膜细胞数明显低于对照组,并且呈剂量依赖性。Western blotting和q RT-PCR实验结果表明,DHT可显著抑制SGC7901细胞中MMP9的表达,降低Gli1基因的m RNA和蛋白表达,并提高HHIP基因的表达水平。结论 DHT能够抑制SGC7901细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与MMP9蛋白的表达降低和Hedgehog通路活性抑制有关。     

肉豆蔻醚抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制研究＊

目的 探讨肉豆蔻醚（myristicin）对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 MTT法检测肉豆蔻醚在体外对结肠癌细胞HCT116和LOVO增殖的影响；Annexin V/PI双染法检测肉豆蔻醚对HCT116和LOVO细胞凋亡的影响；划痕试验和Transwell实验分别检测肉豆蔻醚对HCT116和LOVO细胞迁移和侵袭的影响；western blot实验检测肉豆蔻醚对p-MEK1/2、p-ERK1/2、CyclinD1、E-cadherin、MMP-2以及MMP-9表达的影响。结果 肉豆蔻醚作用后，HCT116和LOVO细胞增殖、迁移和侵袭受到显著抑制，细胞出现显著凋亡；肉豆蔻醚作用后，HCT116和LOVO细胞内MEK1/2、ERK1/2、CyclinD1、MMP-2以及MMP-9蛋白表达水平显著降低，而E-cadherin蛋白表达水平显著增高。结论 本研究发现肉豆蔻醚在体外具有抑制结肠癌细胞生长的作用，为临床用药提供一定的实验依据，为肿瘤治疗提供新的靶点和策略。     

金龙胶囊对胃癌细胞MGC-803和BGC-823侵袭转移能力的影响

目的:探讨金龙胶囊对人胃癌MGC-803,BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响并对其具体机制进行探讨。方法:体外培养胃癌MGC-803,BGC-823细胞,分为金龙胶囊组(0.1,0.2,0.4,0.8 g·L~(-1)),空白组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组,采用噻唑蓝(MTT)比色法分别检测金龙胶囊对MGC-803,BGC-823细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制率(IC50);采用细胞侵袭(transwell)小室法和划痕实验检测金龙胶囊处理MGC-803和BGC-823细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力发生改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测金龙胶囊处理MGC-803,BGC-823细胞24 h后E-钙黏素(E-cadherin),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达情况。结果:金龙胶囊能明显抑制MGC-803,BGC-823细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;与空白组比较,金龙胶囊能明细减少MGC-803,BGC-823细胞的穿膜细胞数目,可明显影响2种胃癌细胞的侵袭与迁移能力,并呈明显浓度依赖性(P0.05);金龙胶囊组的划痕距离较空白组明显降低,影响MGC-803,BGC-823细胞迁移,并呈浓度依赖性(P0.05);与空白组比较,金龙胶囊组能够提高MGC-803和BGC-823细胞中E-cadherin蛋白表达,降低MMP-2,MMP-9蛋白表达水平,且呈一定的量效关系(P0.05)。结论:金龙胶囊能够抑制人胃癌MGC-803,BGC-823细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与上调E-cadherin表达,抑制MMP-2,MMP-9表达水平有关。本研究证实了金龙胶囊对胃癌MGC-803,BGC-823细胞抗侵袭转移的部分机制。     

马钱苷联合miR-3619-5p靶向迁移侵袭增强因子1对宫颈癌SiHa细胞迁移和凋亡的影响

目的 研究马钱苷联合miR-3619-5p靶向迁移侵袭增强因子1(migration and invasion enhancer 1,MIEN1)对宫颈癌SiHa细胞迁移和凋亡的影响。方法 采用qRT-PCR法检测宫颈癌SiHa、Hela、CasKi细胞和正常宫颈上皮Ect1/E6E7细胞中miR-3619-5p m RNA表达。在宫颈癌SiHa细胞中转染miR-3619-5p mimics上调miR-3619-5p的表达,给予马钱苷处理,采用CCK-8法分析细胞增殖;流式细胞术分析细胞凋亡;Transwell小室分析细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blotting法分析剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotease-2,MMP-2)蛋白表达。生物信息学软件预测miR-3619-5p的靶基因,利用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在宫颈癌SiHa细胞中共转染miR-3619-5p mimics和MIEN1过表达载体...     

南蛇藤提取物联合miR-302通过PI3K/Akt信号通路调控食管癌细胞增殖、侵袭和迁移的研究

目的探讨南蛇藤提取物(COE)联合miR-302对人食管癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及对PI3K/Akt信号通路的调控作用。方法实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测人正常食管上皮细胞Het-1A及不同食管癌细胞株中miR-302表达情况。将miR-302mimic和阴性对照mimiccontrol转染至人食管癌TE-1细胞中,q RT-PCR检测质粒转染后TE-1细胞中miR-302的表达情况。单独或联合使用COE作用TE-1细胞,CCK-8实验检测TE-1细胞增殖情况,Transwell实验检测TE-1细胞侵袭和迁移能力,Westernblotting分析PI3K/Akt信号通路中相关蛋白表达情况。结果食管癌细胞株中miR-302的表达明显低于正常食管上皮细胞(P0.05)。转染miR-302mimic能够有效提高TE-1细胞中miR-302的表达(P0.05)。单独使用COE或过表达miR-302可抑制食管癌TE-1细胞增殖、侵袭和迁移(P0.05),下调PI3K和p-Akt蛋白表达;二者联合使用对TE-1细胞增殖、侵袭和迁移抑制及对PI3K和p-Akt蛋白表达下调作用更显著(P0.05)。结论 COE联合miR-302可协同抑制食管癌TE-1细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的激活有关。     

人参皂苷Rh2对结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP侵袭迁移能力的影响

目的:观察人参皂苷Rh_2(ginsenoside Rh_2,GRh_2)对结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP迁移、侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法:细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测不同质量浓度GRh_2(0,2. 5,5,10,20,40 mg·L~(-1))对HCT116/L-OHP细胞增殖抑制作用;划痕实验,Transwell实验及黏附实验分别检测GRh_2(0,2. 5,5,10 mg·L~(-1))对细胞迁移、侵袭及黏附能力的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GRh_2(0,5,10,20,30 mg·L~(-1))对HCT116/L-OHP细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白表达水平的影响。结果:与空白组比较,GRh_2(5,10,20,40 mg·L~(-1))可显著抑制HCT116/L-OHP耐药细胞的增殖能力(P 0. 05,P 0. 01),并且呈浓度依赖性;与空白组比较,GRh_2组(5,10 mg·L~(-1))划痕愈合率明显减小(P 0. 05,P 0. 01),GRh_2组穿过小室的细胞数量明显减少(P 0. 05,P 0. 01),细胞的迁移和侵袭能力受到显著抑制,并且呈浓度依赖性; GRh_2组黏附细胞数量显著减少(P 0. 05,P 0. 01),细胞的黏附能力受到显著抑制,并且呈浓度依赖性;与空白组比较,GRh_2(10,20,30 mg·L~(-1))促进了E-cadherin的蛋白表达(P 0. 05,P 0. 01),同时抑制了MMP-9蛋白表达(P 0. 01),呈一定的浓度依赖性。结论:GRh_2可显著抑制结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP的侵袭和迁移能力,其潜在机制可能与促进E-cadherin并抑制MMP-9的表达有关。     

中药QHF复方抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

摘要：目的 研究中药QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的作用机制,为QHF的临床应用提供理论依据。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,以对数生长期的细胞为研究对象,予以不同浓度QHF复方及其他药物,CCK8法检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞生长增殖的影响。细胞划痕实验和Transwell实验检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞迁移、侵袭的影响。Western blot检测QHF复方对乳腺癌MCF-7细胞HGF/c-Met及其下游PI3K/Akt、MAPK/ERK信号通路的影响。结果 CCK8实验结果显示：中药QHF复方可不同程度抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖且这种抑制作用可显著拮抗HGF对乳腺癌MCF-7细胞增殖的促进作用。细胞划痕实验和Transwell实验结果显示：中药QHF复方能明显抑制MCF-7细胞迁移、侵袭且这种抑制作用可拮抗HGF 对MCF-7细胞迁移、侵袭的促进作用。Western blot实验结果显示：中药QHF复方可明显抑制乳腺癌MCF-7细胞HGF、p-c-Met、p-Akt、p-ERK、VEGF、MMP-2、MMP-9的表达。结论 中药QHF复方抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭的机制可能与抑制乳腺癌MCF-7细胞异常活化的HGF/c-Met及其下游PI3K/Akt、MAPK/ERK信号通路有关。