南蛇藤提取物联合顺铂用药对人肝癌HepG2细胞的协同作用

目的观察南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)联合顺铂(Cisplatin,DDP),对人肝癌Hep G2细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的协同作用。方法将对数期Hep G2细胞,分为对照组(不加药)、COE组(40 mg·L~(-1))、顺铂组(DDP 2 mg·L~(-1))及联合组(同时加入40 mg·L~(-1)的COE和2 mg·L~(-1)的DDP)。药物作用24 h后,MTT法计算细胞增殖抑制率,划痕实验及Transwell实验分析细胞的侵袭迁移,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法分析上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)以及凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达水平。结果与对照组相比,各组药物均能抑制肝癌细胞的增殖,缩短迁移距离,促进细胞凋亡(P0.05)。Western blot结果表明,与对照组相比,各组药物均能抑制人肝癌Hep G2细胞内N-cadherin、vimentin及Bcl-2蛋白的表达水平,同时增加E-cadherin及Bax蛋白的表达量。与单一用药相比,COE联合DDP用药,作用效果更显著(P0.05)。结论南蛇藤提取物可协同顺铂,促进肝癌细胞凋亡,抑制肝癌细胞侵袭迁移,其分子机制可能与上皮间质转化及Bcl-2/Bax通路有关。     

南蛇藤提取物靶向mTOR抑制人肝癌HepG2细胞侵袭与转移能力的研究

目的探索南蛇藤提取物(COE)靶向哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)抑制人肝癌Hep G2细胞增殖、侵袭与转移的分子机制。方法用si RNA技术,构建敲除m TOR基因的Hep G2细胞模型,MTT法检测COE对Hep G2/m TOR-细胞增殖能力的影响。划痕实验及Transwell实验检测药物对细胞侵袭转移能力的影响。Western blotting法分析用药后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白的表达水平变化。结果成功构建敲除m TOR表达的Hep G2/m TOR-细胞。COE明显抑制Hep G2/m TOR-细胞的增殖(P0.05),并呈浓度依赖性。划痕实验结果显示COE降低了细胞迁移能力。Transwell实验结果表明,COE(80 mg/L)明显减少了穿膜细胞数目(P0.05)。Western blotting结果显示,COE(80 mg/L)明显降低MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平(P0.05)。结论 COE明显抑制Hep G2/m TOR-细胞的增殖与侵袭转移,m TOR通路可能是其抑制肝癌的潜在作用靶点之一。     

南蛇藤提取物靶向mTOR抑制人胃癌细胞SGC-7901的迁移能力的研究

目的 研究不同浓度的南蛇藤Celastrus orbiculatus Thunb.提取物对敲低雷帕霉素靶蛋白（Mammalian Target of Rapamycin，mTOR）表达的人胃癌SGC-7901细胞迁移能力的影响。方法 用siRNA技术，构建敲低mTOR表达的人胃癌SGC-7901细胞。MTT法检测南蛇藤提取物（10、20、40、80、160、320 μg·mL^-1）对人胃癌SGC-7901/mTOR^-细胞增殖的影响。加入不同浓度的南蛇藤提取物（20、40、80 μg·mL^-1）作用24 h后，分别用划痕实验和Transwell小室迁移实验，考察不同浓度的南蛇藤提取物对SGC-7901/mTOR^-细胞迁移能力的影响。Western blot法分析对mTOR信号转导通路相关蛋白的影响。结果 南蛇藤提取物明显抑制人胃癌SGC-7901/mTOR^-细胞的增殖，呈浓度依赖性。南蛇藤提取物明显降低人胃癌SGC-7901/mTOR^-细胞的迁移能力，减少mTOR信号转导通路相关蛋白的表达量。结论 南蛇藤提取物明显抑制人胃癌SGC-7901/mTOR^-细胞的迁移，其分子机制可能与mTOR信号转导通路相关。