补肾方药抗衰老的作用机制研究

衰老是生命科学的终极命题,探索延缓衰老对人类社会意义重大。传统中医学以整体观辩证法认识衰老,提出补肾抗衰老的方法论,且补肾方药的运用行之有效。文章主要从机体免疫系统、中枢神经系统、性激素生成及骨质分化、骨骼肌功能等方面就目前补肾方药抗衰老的作用机制研究发现予以梳理。     

调心方对氧化损伤型类AD大鼠空间记忆能力和脑线粒体呼吸功能的影响

目的：探讨调心方对氧化损伤型类AD大鼠空间学习记忆能力，脑线粒体呼吸功能及其酶活性的影响。方法：采用二羟延胡索酸（DHF）加FeCl3-ADP左侧脑室注射，造成大鼠氧化损伤型类AD大鼠模型；Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力；Clark氧电极法测定脑线粒体呼吸功能各项指标，包括R3、R4、RCR、P／O、OPR及琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶，CytC氧化酶活性变化及调心方的作用。结果：与对照组比较，模型鼠空间学习记忆能力，脑线粒体呼吸功能和CytC氧化酶活性显著下降，调心方对模型鼠上述指标有明显改善作用。结论：调心方具有改善氧化损伤型类AD大鼠空间学习记忆障碍提高脑线粒体呼吸功能和呼吸链复合酶活性作用。可能与其对抗自由基氧化损伤作用有关。     

补肾益气方联合有氧运动对衰老大鼠骨骼肌线粒体生物合成相关信号分子表达的影响

目的观察补肾益气方及有氧运动对D-半乳糖所致衰老大鼠骨骼肌线粒体生物合成相关信号分子丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、钙调蛋白激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、心肌细胞增强因子2C(MEF2C)及细胞色素氧化酶(COXⅣ)表达的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为5组,分别为正常组、模型组、中药组、运动+中药组、美雄酮组。除正常组外,其余各组每天颈背部皮下注射10%的D-半乳糖(100μg/g)溶液,制作"拟衰老"大鼠模型。模型大鼠分别经补肾益气方药、有氧跑台运动、美雄酮干预10周后,采用ELISA法测定大鼠血清β-半乳糖苷酶(β-Galase)含量,采用甲基百里香酚蓝法(MTB)检测大鼠腓肠肌线粒体钙含量,采用Western blotting法检测大鼠腓肠肌线粒体生物合成信号通路分子p38MAPK、Ca MKⅡ、PGC-1α、MEF2C及COXⅣ蛋白表达变化。结果与正常组比较,模型组大鼠衰老生物学标志物β-Galase、线粒体钙含量显著增高,Ca MKⅡ、MEF2C、PCG-1α蛋白表达明显下降,而P38MAPK蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,中药组可显著降低血清β-GALase蛋白含量、线粒体钙含量(P0.01);运动+中药组可显著降低线粒体钙含量,上调Ca MKⅡ、PGC-1α、MEF2C及COXⅣ蛋白表达;美雄酮组显著降低线粒体钙含量,上调PCG-1α、COXIV蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论衰老大鼠骨骼肌功能减退可能与线粒体生物合成相关信号转导通路分子Ca MKⅡ、p38 MAPK、PCG-1α、MEF2C及能量代谢相关酶蛋白基因(COXIV)表达异常变化有关;补肾益气方联合有氧运动可一定程度改善上述指标的异常变化,延缓骨骼肌衰老。     

党参水提物对D-半乳糖致衰老模型小鼠肝、肾线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅳ酶活性及线粒体结构的影响

目的:研究党参水提物对D-半乳糖致衰老模型小鼠肝、肾线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅳ酶活性和线粒体结构的影响,探讨党参在延缓衰老中的作用及其机制。方法:将100只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组和党参水提物低、中、高剂量组5组。除正常对照组外,其余4组每日每只小鼠颈背部皮下注射5%D-半乳糖溶液,注射量为0.025 m L/g,正常对照组注射同体积生理盐水。党参低、中、高剂量组每日上午依次按相当于生药量5,10,15 g/kg个剂量给致衰老小鼠灌服党参水煎液,与造模同步,连续服药42 d。采用分光光度法测定肝、肾线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅳ酶活性,电镜观察肝、肾线粒体结构损伤。结果:党参水提物中、高剂量组小鼠肝、肾线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅳ酶活性均升高,其中高剂量组的肝、肾线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅳ酶活性与模型对照组对比,差别有统计学意义(P0.01)。党参水提物高剂量组小鼠肝、肾线粒体结构异常变化明显改善,党参水提物高剂量组肝、肾线粒体损伤程度显著低于模型对照组(P0.05)。结论:高剂量的党参水提物能通过某种机制减缓或阻止线粒体结构的异常改变,改善或维持其正常功能的执行,起到延缓衰老的作用,具体的机制还有待进一步的研究。     

益气、补肾、活血、健脾四组方药对老年大白鼠肝脏形态学变化影响的比较研究

本实验分别用益气、补肾、健脾、活血四类不同的方药作用于老年大白鼠。21个月龄时,取其肝脏作组织学及组织化学的比较研究。结果显示:中药组肝脏组织结构的退化程度明显较老年对照组轻。其中以益气与补肾方药组的效果为佳,健脾与活血组较为逊色。中药组大白鼠肝脏中琥珀酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酶、三磷酸腺苷酶的变化均比老年对照组较为接近青年对照组。亦以益气、补肾组的效果最佳。揭示:益气、补肾中药有延缓大白鼠肝脏衰老的作用。     

四君子汤对脾虚大鼠骨骼肌SDH活性及PGC-1α基因和蛋白表达的影响

目的观察脾虚模型大鼠骨骼肌线粒体SDH活性、骨骼肌PGC-1αmRNA及蛋白表达变化及四君子汤对其影响,探讨脾虚证能量代谢障碍机制。方法采用皮下注射利血平(0.5mg·kg~(-1)·d~(-1))方法建立脾虚大鼠模型,造模成功后,将模型组大鼠分为四君子汤组和脾虚组,每组各7只,另设正常组7只。四君子汤给药组灌胃四君子汤10g·10ml~(-1)·kg~(-1),脾虚组和正常组灌胃等量的生理盐水,每日1次,持续3周,记录大鼠的一般状况,3周后检测大鼠尿D-木糖排泄率,提取骨骼肌线粒体,检测大鼠骨骼肌线粒体SDH活性、骨骼肌PGC-1αmRNA及蛋白的表达情况。结果与正常组相比,脾虚组大鼠骨骼肌线粒体SDH活性显著降低(P0.01);大鼠骨骼肌PGC-1αmRNA及蛋白表达显著降低(P0.01);与脾虚组相比,四君子汤组大鼠骨骼肌线粒体SDH活性升高(P0.05),大鼠骨骼肌PGC-1αmRNA及蛋白表达升高(P0.05)。结论脾虚模型大鼠骨骼肌线粒体存在功能损伤,呼吸链酶活性降低,导致线粒体氧化磷酸化下降,机体生物合成、能量代谢障碍;健脾益气中药可提高线粒体氧化磷酸化水平,改善能量代谢。     

补肾防衰方对老年大鼠肾、肝、心肌、骨骼肌线粒体超微结构的影响

目的：探讨补肾防衰方抗衰老作用机理。方法：电镜观察补肾防衰方对老年大鼠肾、肝、心肌、骨骼肌线粒体超微结构变化的影响。结果：补肾防衰方有减轻肾、肝、心肌，骨骼肌线粒体肿胀的作用。其作用与维生素E-C合剂相近。结论：补肾防衰方可延缓老年大鼠线粒体老化的结构改变。     

补肾类方药及中药有效成分抗衰老的作用机制研究进展

衰老是一个涉及多个方面包括脏腑器官、细胞组织以及多种年龄相关性疾病的生命阶段。中医认为肾虚与衰老密切相关,补肾在延缓衰老方面发挥着重要作用,中药可以多途径、多靶点、多功效地起到延缓衰老的作用,文章查阅文献归纳了补肾类方药及中药有效成分在延缓衰老研究中的作用机制,包括调节氧化应激、调节内质网应激、调节细胞凋亡、调节免疫反应、促进干细胞增殖与分化、神经保护作用等,以期为中药抗衰老的研究提供借鉴。     

脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及滋补脾阴方药作用机制的实验研究

目的:本项研究旨在通过对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织线粒体DNA(mtDNA)缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的研究,探讨脾阴虚衰老状态下mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化的规律,进一步揭示脾阴虚衰老的病理实质和滋补脾阴方药的作用机制,从而为脾实质的研究提供客观依据.方法:建立大鼠脾阴虚证衰老模型,观察脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化;观察滋补脾阴方药对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的调控.结果:脾阴虚衰老状态下,大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失较青年组和正常老年组明显增多,线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活力较青年组和正常老年组明显下降,滋补脾阴方药可减少脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织的mtDNA缺失,提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活力.结论:脾阴虚衰老机体细胞mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力发生异常改变,滋补脾阴方药对脾阴虚衰老时机体mtDNA、呼吸链酶复合体活力有调控作用.     

补肾防衰方对老年大鼠肾肝心肌骨骼肌线粒体呼吸功能影响的研究

对老年大鼠肾、肝、心肌、骨骼肌线粒体呼吸功能及补肾防衰方对其的作用进行了观察。结果表明 ,补肾防衰方组能明显提高肾、肝、心肌、骨骼肌线粒体ADP/O和RCR值 ,与老年组比较 ,P <0 .0 5。维生素E -C组与老年组比较 ,肾、骨骼肌线粒体ADP/O ,有显著性差异 (P <0 .0 1) ,而肝、心肌线粒体ADP/O ,无显著性差异(P >0 .0 5 )。维生素E -C组与老年组比较 ,肾、肝、心肌、骨骼肌线粒体RCR ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。二组药物组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。机体衰老的一个重要的标志是最大有氧工作能力的下降 ,表现为最大摄氧量随增龄而降低。提示补肾防衰方具有改善线粒体的功能或减轻线粒体老化的结构改变。     

补肾健脾方对骨质疏松骨骼肌线粒体氧化应激的影响

目的:探讨补肾健脾方对骨质疏松骨骼肌线粒体氧化应激的调控作用。方法:6月龄的雌性SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、中药组和空白对照组。治疗3个月后,收集肌肉组织进行线粒体通透转换孔和细胞色素C氧化酶的活性检测。结果:在线粒体通透转换孔活性比较方面,雌激素组、空白对照组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);在细胞色素C氧化酶比较方面,空白对照组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。中药组与模型组在上述两组比较,差异均无统计学意义。结论:雌激素表现出对线粒体氧化应激功能的调控能力,因此认为以骨骼肌作为药物靶点治疗骨质疏松症是可能实现的。而中药尽管在实验中均没有出现阳性结果,但数值表明仍值得我们进一步研究。     

补肾益气化瘀方对衰老大鼠免疫功能的影响

目的：观察补肾益气化瘀方对衰老大鼠免疫功能的改善作用,并探讨其作用机理。方法：Wistar青年大鼠70只,随机分成空白对照组、模型对照组、药物（低、中、高剂量）组,共5组（n=14）。除空白对照组外,每组腹腔注射D-半乳糖连续6周,建立亚急性衰老大鼠模型。模型建立后,药物组每天分别用不同浓度补肾益气化瘀方提取液灌胃,空白对照组、模型对照组用生理盐水灌胃,连续4周,然后检测大鼠免疫功能指标。结果：补肾益气化瘀方能明显提高衰老大鼠CD4＋、CD8＋、IL-2及IL-4含量（P≤0.01）,显著提高巨噬细胞吞噬功能及半溶血素含量（P≤0.01）,及大鼠脾指数、胸腺指数。结论：补肾益气化瘀方通过调节细胞因子水平和体液免疫功能,达到抗衰老的作用。     

Effect of salvianic acid A on lipid peroxidation and membrane permeability in mitochondria

Salvia miltorrhiza Bunge is a traditional Chinese medicine and has long been used for treating liver and heart diseases in China. Salvianic acid A is the main active component of Salvia miltorrhiza Bunge. In the present study, the ability of salvianic acid A in scavenging free radicals, inhibiting lipid peroxidation and mitochondrial membrane permeability transition, as well as respiration and protein thiol oxidation in rat liver mitochondria, was evaluated. The results show that salvianic acid A scavenges superoxide anions in a dose-dependent manner (IC50 52 microg/ml). Salvianic acid A could scavenge lipid free radicals and inhibit lipid peroxidation as effectively as Vitamin E. Salvianic acid A also inhibited the mitochondrial membrane permeability transition assessed as the extent of mitochondrial swelling. Salvianic acid A inhibited the oxidation of mitochondrial protein thiols involved in the mitochondrial membrane permeability transitions. We conclude that salvianic acid A is able to reduce lipid peroxidation in the mitochondrial membrane by scavenging free radicals, and inhibit mitochondrial membrane permeability transition by reducing protein thiol oxidation. These data indicated the pharmacological potential of salvianic acid A against pathological processes related to oxidative stress.     

基于线粒体功能障碍探讨中医药防治炎症性肠病的研究进展

炎症性肠病（IBD）是一组以慢性肠道炎症为主要特征的全球性疾病,包括克罗恩病（CD）和溃疡性结肠炎（UC）,目前病因和发病机制尚不完全清楚。线粒体是细胞中的重要器官,研究发现,线粒体膜电位下降、腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）产生减少、氧化应激加剧等现象可能促使免疫系统的异常激活,引起肠道黏膜屏障的受损,导致IBD的发生,并加速炎症进展。中药含有多种生物活性成分,具有修复线粒体功能、抑制炎症反应的潜力。因此本文基于线粒体功能对中医药防治炎症性肠病进行总结梳理,发现中医药对线粒体具有缓解氧化应激、调控线粒体自噬等作用,从而发挥抗炎、抗氧化、减轻肠黏膜损伤、延缓病情的作用,且中医药调控线粒体DNA(mtDNA)突变涉及到的炎-癌转化机制是当前的研究热点。     

益气解毒方基于线粒体保护的抗缺血性脑卒中研究

目的:基于线粒体呼吸功能,研究益气解毒方对缺血性脑卒中的保护作用。方法:采取大鼠中脑动脉闭塞模型(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO),造模前15 min给予益气解毒方及相应拆方,造模12 h后,取材,提取脑组织线粒体,检测线粒体三态呼吸速率、四态呼吸速率、磷氧比、呼吸控制率、氧化磷酸化率等指标,评价益气解毒方对缺血性脑卒中的保护效果。此外,通过主成份分析(Principal Component Analysis,PCA)和变量重要性指标(Variable Importance in Projection,VIP),评价益气解毒方各组分在抗缺血性脑卒中的作用效果。结果:益气解毒方能改善缺血性脑卒中病理过程中线粒体呼吸相关的各项指标,益气解毒方各拆方对缺血性脑卒中也有较好的改善作用。PCA结果显示,与各拆方组比较,益气解毒方全方的治疗效果最好;在各拆方组中,人参皂苷和黄连素配伍后的效果最好。VIP分析结果显示,益气解毒方基于保护线粒体呼吸功能来改善缺血性脑卒中的病理过程中,黄连素的贡献度最大。结论:益气解毒方能够显著降低缺血性脑卒中病理过程中所造成机体损伤,其机制可能与保护线粒体功能有关。     

线粒体能量代谢与弱精子症的关系研究进展

弱精子症以精子活动力低下为主要表现,在男性不育中占有相当大的比例。而线粒体作为精子的供能中心,能够通过氧化磷酸化将葡萄糖等代谢底物转化为ATP,供应精子运动,所以线粒体能量代谢功能与精子活动力关系密切。通过研究分析近年的相关文献,发现精子代谢功能受损多与呼吸链复合体活性下降、线粒体膜电位(MMP)降低、mtDNA的改变及活性氧(ROS)对线粒体造成破坏等因素有关,并且中医药对弱精子症的治疗也与其能改善线粒体能量代谢有关。     

补肾活血安胎方治疗妊娠早期绒毛膜下血肿疗效研究

目的:探讨补肾活血安胎方治疗妊娠早期绒毛膜下血肿(SCH)疗效及对患者蛋白s(Ps)、蛋白c(Pc)、D-二聚体(D-D)和性激素水平的影响。方法:选取120例SCH孕妇分为中药组(n=37)、西药组(n=41)、中西药结合组(n=42),中药组予补肾活血安胎方治疗,西药组予地屈孕酮治疗,中西药结合组予补肾活血安胎方联合地屈孕酮治疗。比较三组血浆Ps、Pc、凝血因子Ⅷ、NK细胞、D-D及血清催乳素(PRL)、雌二醇(E₂)、黄体生成素(LH)、人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、促卵泡激素(FSH)、孕酮(P)水平。比较三组孕妇妊娠结局和产科并发症发生情况。结果:中西药结合组在治疗后血浆凝血因子Ⅷ、NK细胞、D-D水平显著低于西药组、中药组,Ps、Pc活性显著高于西药组、中药组(均P<0.05); E₂、P水平高于西药组、中药组,β-HCG、PRL水平显著低于西药组、中药组(均P<0.05); 中西药结合组总不良妊娠结局率、总产科并发症发生率低于西药组、中药组(均P<0.05)。结论:补肾活血安胎方可改善SCH患者Ps、Pc、D-D及血清孕激素水平,降低不良妊娠结局和产科并发症发生率。     

从保护线粒体角度谈心肌缺血再灌注损伤

近年研究表明,线粒体在心肌缺血再灌注损伤的多个环节发挥作用,其主要作用机制与活性氧、细胞凋亡、膜通透性转换孔开放等方面有关,以线粒体为靶点中药的研究近几年来备受关注,文章从保护线粒体角度出发,对中药防治心肌缺血再灌注损伤的作用机制进行综述。     

益气养阴活血方中西医结合治疗2型糖尿病临床观察

目的:观察益气养阴活血方中西医结合治疗气阴两虚型2型糖尿病的临床疗效。方法:将71例气阴两虚型2型糖尿病患者随机分为治疗组36例和对照组35例,两组患者均给予西药口服降糖药物或胰岛素治疗。治疗组在对照组的基础上加服益气养阴活血方,观察两组患者治疗后临床症状、血糖、血脂的变化。结果:益气养阴活血方中西医结合治疗组改善临床症状,降低血糖、血脂疗效显著,在防治或延缓血管并发症的发生方面明显优于单纯西药组。     

中药复方对糖尿病大鼠血管内皮功能作用的实验研究

目的：通过检测益气活血通络方对糖尿病大鼠血清一氧化氮（nitric oxide NO）、血浆内皮素（endothelin ET）含量的影响,探究糖尿病大鼠血管内皮功能变化及中药复方的干预作用。方法：采用链脲佐菌素（STZ）复制糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、中药（高、中、低剂量）组,并设空白对照组.检测体质量、血糖、血清NO、血浆ET的变化.结果：糖尿病大鼠血清NO含量明显降低,血浆ET含量明显升高,中药高剂量组与糖尿病模型组比较具有显著差异。结论：糖尿病大鼠血管内皮功能出现障碍,益气活血通络方对其具有改善作用。