血虚模型动物制备及当归补血汤的作用研究

目的：对原有的血虚模型进行改进,并观察当归补血汤的作用。方法：采用乙酰苯肼60mg/kg和环磷酰胺160mg/kg联合造成小鼠的血虚状态。取血测定小鼠的外周血象,取股骨测定骨髓有核细胞数量,及以电镜观察骨髓超微结构,观察模型小鼠的游泳时间、体温及放免法测定血浆 cAMP、cGMP的比值。同时观察了当归补血汤改善血虚证的作用。结果：当归补血汤能显著增加模型小鼠的红细胞、白细胞、骨髓有核细胞的数量,改善网织红细胞在外周血中的比例及骨髓超微结构,并能延长模型小鼠的游泳时间、升温体温、提高血浆cAMP/cGMP比值。结论：实验制备的血虚动物模型属于血虚证的范围,反映了血虚证的主要特征,可作为血虚证模型之一。当归补血汤通过补气补血显著改善模型小鼠的气血两虚状态。     

四物汤对环磷酰胺所致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤治疗环磷酰胺所致小鼠血虚证的作用机理。腹腔注射环磷酰胺制成小鼠血虚证模型;测定小鼠外周血象;骨髓细胞集落形成;CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例;小鼠胸腺指数。结果表明四物汤具有明显促进骨髓造血和增强免疫的作用,并可升高血虚证小鼠的外周血象。四物汤增强免疫、促进造血可能是四物汤治疗小鼠血虚证的机理之一。     

DS-1226对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用

目的:探讨DS-1226胶囊对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的影响.方法:将小鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、DS-1226 3个剂量组(37.5、75、150mg·kg-1·d-1).模型组、DS-1226组腹腔注射环磷酰胺(200mg·kg-1)造模,同时DS-1226组给予不同剂量的DS-1226灌胃,对照组、模型组给予蒸馏水灌胃,共8d.检测小鼠的一般状况、外周血象、骨髓有核细胞、骨髓结构、胸腺指数及淋巴细胞转化率.结果:DS-1226能改善骨髓抑制小鼠的一般状况,升高外周血象和骨髓有核细胞数量,促进骨髓腔内造血组织的增生,提高胸腺指数及淋巴细胞转化率.结论:DS-1226具有改善环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的作用,其机制可能与增强免疫功能,促进造血功能恢复有关.     

熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响

目的 :观察熟地黄多糖 (RGP)对模型小鼠外周血象、骨髓造血干细胞、骨髓有核细胞的影响。方法 :各组小鼠连续灌胃 8～ 9d ,腹腔注射环磷酰胺 (CY)致化学损伤血虚模型 ,取全血测外周血象、骨髓有核细胞计数 ;各组小鼠尾静脉注射同种供体小鼠骨髓细胞悬液 ,取脾脏固定 ,观察外源性脾结节形成 ,各组小鼠以⁶⁰Coγ全身照射7.25Gy ,取脾脏观察内源性脾结节形成 ;各组小鼠⁶⁰Coγ全身照射 7.5Gy ,复制出放射性损伤模型 ,测外周血象和骨髓有核细胞数量。结果 :RGP各组对CY血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,与模型组比较 ,有显著差异。对小鼠脾结节的形成有明显的促进作用 (P<005,P<001) ,对于小鼠外周血象的放射性损伤 ,RGP高剂量组可明显抑制小鼠全血细胞减少 (P<005) ,RGP低剂量组虽可提高损伤小鼠血细胞数量 ,但无统计学意义。结论 :熟地黄多糖对于不同血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,对小鼠造血干细胞具有促进增殖、分化作用。     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用,用60 Coγ射线身全照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34＋细胞在骨髓有核细胞中的比例,细胞固定后PI染色测定细胞周期,Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡,结果：四物汤对小鼠骨髓造 血干祖细胞,外周血细胞的恢复有明显促进作用,有保护骨髓和促进骨髓细胞由G1期进入S期的效应,四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡,促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一。     

环磷酰胺所致血虚证小鼠骨髓CD34~ 细胞的变化

目的 :研究环磷酰胺 (CTX)诱发的血虚证小鼠骨髓中干祖细胞的数量和骨髓细胞周期的动态变化。方法 :采用CTX大小两个剂量分别对两组小鼠进行腹腔注射制作小鼠血虚证模型。在不同时相点 ,双荧光标记测定CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例 ,骨髓细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果 :①注射CTX后CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例下降后迅速上升 ,然后又下降。②注射CTX后骨髓细胞增殖受抑 ,然后动员骨髓细胞增殖 ,但药后 10d细胞增殖又受抑。与CD34 细胞在骨髓有核细胞中比例的变化规律有一致性。结论 :CTX可以动员骨髓造血干祖细胞进入细胞周期而增殖 ,增加了骨髓中造血干祖细胞的数量 ,但此过程加速了干祖细胞池的耗竭 ,从而对骨髓造成更大损伤 ,这可能是CTX诱发小鼠血虚证的机理之一。     

环磷酰胺所致血虚证小鼠骨髓CD34^＋细胞的变化

目的：研究环磷酰胺（CTX）诱发的血虚证小鼠骨髓中干祖细胞的数量和骨髓细胞周期的动态变化。方法：采用CTX大小两个剂量分别对两组小鼠进行腹腔注射制作小鼠血虚证模型,在不同时相点,双荧光标记测定CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例,骨髓细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果：（1）注射CTX后CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例下降后迅速上升,然后又下降。（2）注射CTX后骨髓细胞增殖受抑,然后动员骨髓细胞增殖,但药后10d细胞增殖又受抑。与CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中比例的变化规律有一致性。结论：CTX可以动员骨髓造血干祖细胞进入细胞周期而增殖,增加了骨髓中造血干祖细胞的数量,但此过程加速了干祖细胞池的耗竭,从而对骨髓造成更大损伤,这厅能是CTX诱发小鼠血虚证的机理之一。     

原花青素对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的预防及保护作用

目的:研究原花青素对环磷酰胺引起小鼠骨髓抑制及毒性是否具有保护作用。方法:将ICR小鼠随机分为5组,空白对照组、模型组、原花青素组(高、中、低剂量),每组16只。GPC组按相应剂量隔天一次喂养3周,空白对照组给予等量生理盐水,3周后除空白对照组外均给予环磷酰胺100mg·kg-1,连续3天造模,空白对照组给予等体积生理盐水,GPC组继续按原剂量给药,于造模结束后第l、7日停药采外周血检测血常规;取胸腺和脾称重,计算胸腺指数、脾指数;提取骨髓计算骨髓有核细胞计数;并制作骨髓组织病理切片。从实验造模前一天开始,每天称量小鼠体重。结果:模型组小鼠外周血细胞数、骨髓有核细胞计数、胸腺指数、脾脏指数明显减少,而原花青素中高剂量组外周血象、胸腺、脾脏指数显著提高,且明显改善骨髓组织形态变化。结论:原花青素对环磷酰胺诱导的骨髓抑制等毒性具有保护作用。     

四物汤中不同组分对血虚模型小鼠造血功能的影响

目的:探讨四物汤中不同组分对血虚小鼠模型造血功能的作用及其机理.方法:实验各组采用3.5Gy60Coγ射线全身一次照射制作小鼠血虚证模型,造模后连续灌胃7 d,进行外周血象检测及造血祖细胞集落培养.结果:四物汤的多糖部分及非多糖部分均有补血作用.60%～80%醇沉物、80%醇沉上清部位正丁醇萃提物、80%醇沉上清部位乙酸乙酯、正丁醇萃提后剩余物均能升高辐射损伤性血虚证小鼠外周血中白细胞、红细胞数;但20%～40%醇沉物、40%～60%醇沉物及60%～80%醇沉物的补血作用均不及20%～80%醇沉物.芍药苷具有补血作用.结论:四物汤通过多成分、多环节改善血虚证小鼠的造血功能.     

三康胶囊对放射性损伤小鼠造血功能的影响

目的:建立放射性损伤的小鼠血虚证模型,观察三康胶囊的药理作用。方法:选取昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组及三康胶囊低、中、高剂量组。采用60Co-γ射线照射的方法造成小鼠血虚证模型,分别观察给药后第14、21、28、60天外周血象以及骨髓细胞形态学改变,以此考察三康胶囊的疗效。结果:①低、中、高剂量三康胶囊给药后第14、21、28、60天对放射性损伤的小鼠血虚证所致的红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)和血红蛋白(HB)降低均具有显著升高作用(P<0.05或P<0.01);②60天镜下观察可见:正常对照组小鼠骨髓增生极度活跃,巨核细胞、粒细胞、红细胞大小、形态正常;模型组有8例小鼠骨髓增生不良,退化细胞胞浆不完整,胞浆胞核溶解,涂片中有空泡;其余4例骨髓增生极度活跃,有大量的粒细胞(以中性杆状粒细胞、中性分叶核细胞为主),幼稚红细胞;各剂量给药组小鼠骨髓增生极度活跃,有粒细胞、晚幼粒细胞、中性杆状粒细胞、中性分叶核细胞及幼稚红细胞逐步增多;三康胶囊低、中、高剂量组分别有6、4、3例小鼠骨髓增生不良退化,细胞胞浆、胞核不完整逐步减少。阳性对照组小鼠骨髓增生极度活跃,有大量的粒细胞...     

虚证动物模型的研究现状

目前文献报道的虚证动物模型包括气虚、血虚、阳虚和阴虚4种类型.在中医证候模型上,以扶正固本理论为指导研究中药的干预作用,对于阐述中医从整体出发、调动机体内在因素、提高机体抗病能力,以达到治疗虚证的目的具有重要意义.多年来经过学者们的积极探索,现已建立了40多类中医证候动物模型,但目前的虚证动物模型既有其特点,又存在一定的片面性.如何使动物模型更接近临床,已经成为当前虚证动物模型研制工作中的重大问题.由于反映扶正固本药物的综合干预作用多需要通过2种以上的虚证模型做出综合评价,因此为更全面了解虚证模型的制备及应用情况,就近年来虚证动物模型的制备方法、检测指标以及扶正固本药物在虚证动物模型上的应用情况进行综述,以期为虚证模型在药物研究方面的应用提供参考.     

气虚血瘀证动物模型的研究进展

中医证候模型研究起步较晚,发展迅猛,近年来随着中医病证方药的研究不断加深,为了中医现代化的发展,要求中医证候模型研究更加具体和深入。气虚血瘀证作为一种临床上常见证型,在心脑血管疾病、消化系统疾病、慢性肾病、癌症等疾病中多有出现。随着我国人口老龄化程度的不断加重,因老年人多气虚,多血瘀的体质特点,气虚血瘀证的研究已成为中医学界的热点问题。综合近年来气虚血瘀证动物模型造模方法,将其造模思路概括为病理造模、病因造模、病证结合造模三方面。通过观察实验动物出现符合中医理论的宏观表征、肢体行为学表现,以及血液流变学等指标,评价造模方法,为气虚血瘀证造模方法提供思路与借鉴,针对气虚血瘀证类模型的研究应遵循因-脉-证-治的思路,即病因-外在表征-病理机制-辨证论治,将中医证候模型研究同现代科学结合,令造模方法规范化发展,构建相对完善的气虚血瘀动物模型造模方法,为今后探究气虚血瘀证的发病机制及新的治疗思路提供模型支持。     

三圣丸口服液活血化瘀作用研究

目的:探讨三圣丸口服液活血化瘀作用。方法:采用2种血瘀证动物模型,外伤血瘀模型采用悬垂重物砸伤方法,阳虚血瘀模型采用禁食加冷冻的方法;结果:外伤血瘀模型组血浆纤维蛋白原浓度、血小板聚集功能和凝血时间3项指标明显延长,血浆黏度和凝血斜率明显下降。阳虚血瘀模型组纤维蛋白原浓度、血小板聚集功能、凝血时间明显下降,血浆黏度未见明显变化,凝血斜率显著上升。结论:虽然2种血瘀证的血液流变学检测指标都具有明显的统计学意义,可表现形式却差别很大。三圣丸口服液对2种血瘀证动物模型均有明显的改善作用,但对外伤模型组的作用更强些。     

基于中西医临床病症特点的心力衰竭动物模型分析

心力衰竭(heart failure,HF)发病率逐年升高,其对病人的生活质量和预期寿命都有不良影响。复制出符合临床病症特点的动物模型是开展心力衰竭相关实验研究的前提。基于心力衰竭的中医、西医临床病症特点,对现有的常用心力衰竭动物模型进行探讨,以心力衰竭中西医临床诊断标准为依据,分析已有动物模型的临床吻合度。经分析对比可知,目前已有的造模方法中,多为单因素动物模型,与临床多因素、相互作用共同导致心力衰竭的特点存在一定差距,且造模方法多以西医为指导,在造模过程中缺少中医致病因素,与临床上心力衰竭的中、西医诊断标准仍存在一定差异。从辨证分型来看,中医将心力衰竭主要分为心肺气虚证、气阴两亏证、心肾阳虚证、气虚血瘀证、阳虚水泛证、痰饮阻肺证、阴竭阳脱证,已有的动物模型多将其混为一谈,至今尚无有效且公认的造模方法,在中医药相关研究中存在较大局限性。因此,该文以心力衰竭中、西医临床病症特点为依据,分析已有动物模型,明确其优缺点及应用前景,进而提为心力衰竭相应动物模型的进一步完善、模型评价的规范化提出建议,以提高动物模型与中、西医的临床吻合度,使心力衰竭动物模型更好地服务于科研工作,促进相关机制研究、病理变化研究及药物的筛选。     

原发免疫性血小板减少症动物模型研究进展

原发免疫性血小板减少症(ITP)是一种以血小板减少、伴或不伴皮肤黏膜瘀紫、鼻衄、内脏出血等为特征的自身免疫性疾病,ITP动物模型是深入研究ITP发病机制与治疗方法的主要手段,在ITP的研究中一直发挥着重要作用。因此,如何制备与临床接近的动物模型是ITP研究领域的关键问题。目前原发免疫性血小板减少症动物模型的研究方法众多,主要有免疫造模、自发免疫模型、转基因造模以及其他造模方法。免疫造模是最常用的方法,实验用动物主要是小鼠,常用的注射途径是腹腔注射,常用的免疫原有抗血小板血清、单克隆/多克隆抗体、血小板等,自发模型与转基因模型比较少用。此外也有结合中医理论开展病证结合模型的研究,主要有ITP热盛证模型,ITP肾阴虚证模型,ITP气不摄血证模型等,为该病的证候研究提供了基础。本文对近些年来ITP疾病、病证结合动物模型的研究进展进行了比较系统的分析与总结,希望对该疾病的动物模型的进一步研究提供参考。     

两种温病湿热证模型的TNF-α与TG水平研究

目的:通过对小鼠肝炎病毒(MHV-A59毒株)与大肠杆菌导致的两种小鼠温病湿热证模型TNF-α与TG水平的研究,从炎症因子和血脂水平的角度评价两种温病湿热模型特征;方法:将18只小鼠随机分为正常组、病毒组、肠菌组,造模成功后分别取小鼠血液和提取血清,用ELISA法和磷酸甘油氧化法分别测试各组的TNF-α与TG水平,数据分析采用单因素方差分析,组间用q检验,两组间采用t检验,P0.05为显著性差异,P0.01为非常显著性差异。结果:病毒组与肠菌组血清TNF-α水平明显增高,且病毒组比肠菌组升高显著;两种模型小鼠TG水平虽有升高但组间变化无差别。结论:"内湿"的形成可能主要与肥甘饮食、湿热外环境有关,MHV-A59作为生物致病因子所致的湿热证模型炎症反应更加剧烈。     

关于肾虚质动物模型建立方法的思考

结合相关文献与研究成果，运用中医理论为指导，从文献对肾虚质的认识、实验动物的选择、模型建立的手段、试验指标的判定等多个方面，提出探讨建立具有中医特色的肾虚体质实验动物模型。     

补肾填精方对再障模型小鼠骨髓造血干（祖）细胞CFU—GM、CFU—E的影响

目的：观察补肾填精方对再生障碍性贫血（简称再障）模型小鼠骨髓造血功能的影响。方法：小鼠在接受给予环磷酰胺及苯油1周后每天经灌胃分别给予补肾填精方悬液3个剂量（20mg·kg^-1·d^-1、30mg·kg^-1·d^-1、40mg·kg^-1·d^-1）35天后眶动／静脉采血法检测外周血细胞数,取小鼠左侧股骨骨髓制备骨髓有核细胞悬液并进行有核细胞（BMNC）计数,甲基纤维素半固体法测定红系祖细胞集落（CFU—E）及粒单系祖细胞集落（CFU—GM）。结果：模型组小鼠红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）、BMNC、CFU—E及CFU—GM数目较空白组明显减少（P〈0．01）,中药中、高剂量组上述指标较模型组升高（P〈0．05）。结论：补肾填精方具有促进骨髓造血干／祖细胞造血,提升外周血细胞作用。     

辽参对脾虚与免疫抑制小鼠IL-4和脾细胞活性影响的比较研究

目的:比较辽宁人参对脾虚和免疫抑制小鼠IL-4和脾细胞活性的影响。方法:免疫抑制模型方法为皮下注射氢化可的松,70mg/kg,连续7天。脾虚造模方法为每只小鼠每日灌胃100%番泻叶水煎剂0.5mL,连续10天。造模后,空白组和两种模型组正常饲养;辽宁人参治疗组以辽宁人参水煎剂0.2mL ig,5g/kg,1次/d,连续14天。ELISA法检测血清IL-4含量,CCK-8法检测脾细胞活性。结果:免疫抑制模型IL-4含量下降比脾虚模型下降要明显(P<0.05)。但是辽参提高两种模型小鼠血清IL-4含量的能力无差别(P>0.05)。脾虚和免疫抑制模型组小鼠脾细胞活性较空白组均明显下降(P<0.01),两种模型无差异(P>0.05),但是辽参提高脾虚模型小鼠脾细胞活性的能力要优于免疫抑制模型(P<0.01)。结论:辽宁人参可以有效改善两种免疫低下模型所导致的血清IL-4含量和脾细胞活性的降低。