河北不同产地知母药材中芒果苷及菝葜皂苷元的含量测定

目的:考察河北不同产地知母药材中芒果苷及菝葜皂苷元的含量。方法:分别采用HPLC法和HPLC-ELSD法测定芒果苷和菝葜皂苷元的含量。测定芒果苷以水∶乙腈∶0.85%磷酸(100∶25∶5)为流动相;流速为0.6mL/min;柱温30℃;检测波长为258nm。测定菝葜皂苷元以甲醇∶水(95∶5)为流动相;流速为1.0mL/min;柱温30℃;用蒸发光散色检测器检测,漂移管温度85℃。结果:河北不同产地知母药材中菝葜皂苷元含量为1.51%～1.73%,芒果苷含量为0.11%～0.73%。结论:本法测定知母药材中菝葜皂苷元及芒果苷含量,方法简单、快速、准确、重现性好,方法学考察符合含量测定的要求,可以用来控制知母药材质量。     

知母盐炙工艺研究

<正>知母为百合科植物知母Anemarrhena asphode- loides Bge.的干燥根茎,具有清热泻火、生津润燥的功效,临床常用于外感热病,高热烦渴,肠燥便秘。知母中含多种知母皂苷、黄酮等有效成分,现代药理研究表明知母皂苷及皂苷元为其清热泻火、生津润燥的主要活性成分,其中菝葜皂苷元作为指标成分被药典用于知母药材的质量监控。芒     

栽培西陵知母与野生知母药材质量比较

目的:对栽培西陵知母与野生知母药材质量进行全面分析,并在此基础上进行比较,阐明二者内在质量的异同.方法:对收集的易县各乡镇栽培样品和野生知母样品进行全面分析.选取皂苷、黄酮、多糖3大类,6种有效成分作为指标.HPLC-ELSD内标法测定菝葜皂苷元含量;HPLC-ELSD同时测定知母皂苷C和知母皂苷AⅢ的含量;高效液相色谱法同时测定新芒果苷和芒果苷含量;硫酸-苯酚法测定总多糖含量.结果:栽培样品中菝葜皂苷元含量略低于野生样品;栽培品中知母皂苷C和知母皂苷AⅢ含量高于野生样品;3种皂苷类指标成分含量差异均不显著.栽培品新芒果苷含量低于野生品,芒果苷含量高于野生样品,2种黄酮含量总和没有显著性差异.栽培品多糖含量显著高于野生品.结论:易县栽培知母主要有效成分的含量与易县野生知母药材比较接近,没有显著差别.栽培西陵知母与野生知母药材具有一致的优良内在质量.     

不同产地的知母中总皂苷和菝葜皂苷元的含量测定

目的 考察不同产地知母中总皂苷、菝葜皂苷元的含量.方法 采用香草醛-高氯酸法测定不同产地知母中总皂苷的含量;采用高效液相色谱-蒸发光散射法测定不同产地知母中菝葜皂苷元的含量,色谱柱Waters Nova-Pak C18;流动相为甲醇:水=90:10;流速为1.0 ml·min-1;柱温室温,漂移管温度45℃;载气流速30 psi.结果 河北、安徽、广东知母中总皂苷的含量为6.04%～7.91%,回收率为99.28%,RSD为2.83%(n=6);菝葜皂苷元的线性范围为1.65～6.6 μg(r:0.999 7),河北、安徽、广东知母中的菝葜皂苷元含量为0.72%～0.97%,回收率为106.34%,RSD为2.43%(,n=6).结论 各产地知母中菝葜皂苷元含量间变异较大,以河北知母中总皂苷及菝葜皂苷元的含量最高.     

HPLC-CAD法测定盐制前后知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元

目的：利用HPLC-电雾式检测器（charged aerosol detector,CAD）联用技术建立知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的测定方法,并比较知母盐制前后两种成分的变化。方法知母皂苷BⅡ以乙腈-水（25∶75）为流动相,进样量为10μL;菝葜皂苷元以甲醇-水（95∶5）为流动相,进样量为20μL;其他色谱条件均采用Thermo C18柱（250 mm＆#215;4.6 mm,5μm）,体积流量为1 mL/min,柱温为30℃;Corona参数：氮气压力为241.3 kPa,Filter：High,Range：200 pA。结果知母皂苷BⅡ在0.305-4.880μg线性关系良好,r＝0.9994,平均回收率为99.1%,RSD值为1.2%;菝葜皂苷元在0.490-7.840μg线性关系良好,r＝0.9991,平均回收率为98.0%,RSD值为1.3%。知母中知母皂苷BⅡ为3.16%-5.92%,盐制后为4.15%-7.20%;知母中菝葜皂苷元为0.42%-1.39%,盐制后为0.52%-1.54%。结论 CAD检测器具有较为平稳的基线和较高的灵敏度,更加适用于知母皂苷类及含有较弱或无紫外吸收成分的测定,知母盐制后知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的量均有所升高。     

HPLC法测定生知母和盐知母中芒果苷和菝葜皂苷元

目的 建立测定生知母和盐知母中芒果苷和菝葜皂苷元的方法.方法 分别采用HPLC-UV法和HPLC-ELSD法测定芒果苷和菝葜皂苷元.测定芒果苷的色谱条件:Kromasil柱(250 mm×4.6 mm,5μm);水-乙腈-0.85%磷酸(100:25:5)为流动相;体积流量为0.6 mL/min;柱温为30℃;检测波长为258 nm.测定菝葜皂苷元的色谱条件:Kromasil柱(250 mm× 4.6 mm,5μm);甲醇-水(95:5)为流动相;体积流量为1.0 mL/min;柱温30℃;用蒸发光散射检测器检测,漂移管温度85℃.结果 盐知母中芒果苷和菝葜皂苷元的量均有所升高.结论 本方法可用于生知母和盐知母中芒果苷和菝葜皂苷元的测定,并为其全面质量控制提供参考.     

知母及含知母成药中菝葜皂甙元的薄层扫描法测定

用薄层扫描法测定了知母药材及含知母中成药中菝葜皂甙元的含量。苯-丙酮(9:1)为溶剂,香草醛-硫酸显色,测定波长445nm,参比波长600nm。     

“西陵知母”有效成分动态积累研究

目的 揭示栽培“西陵知母”一年中不同时期有效成分变化趋势.方法 分别以菝葜皂苷元、知母皂苷AIII、芒果苷、新芒果苷为指标,分析该四年生知母在采挖当年3～11月份之间各类指标成分的动态变化情况,其中菝葜皂苷元、知母皂苷AIII采用HPLC-ELSD进行检测,芒果苷、新芒果苷采用HPLC-UV检测.结果 菝葜皂苷元的含量在4月份最高,达到13.05 mg·g-1,至11月份达到最低的6.10 mg·g-1;知母皂苷AIII含量在六月达到全年的最高峰的8.54 mg·g-1,然后快速下降,在8月降至接近全年的最低点的2.49 mg·g-1;而芒果苷和新芒果苷的含量在整个年度中的变化波动较大,且两者的变化趋势基本相反.结论 明确了西陵知母一年中各成分变化趋势和规律,验证了西陵当地知母于每年春、秋季采挖,春季优于秋季的采挖习惯.     

纤维素酶法提取知母甾体总皂苷元工艺研究

目的:优化知母甾体总皂苷的提取工艺。方法:以甾体菝葜皂苷元的提取率为指标,应用L9(34)正交试验设计优化了知母中甾体皂苷的纤维素酶法提取工艺。结果:影响酶法提取甾体皂苷的主次因素为:酶用量>提取温度>固液比>水解时间。纤维素酶处理能显著提高甾体皂苷的提取率,加酶后甾体菝葜皂苷元提取率的平均值为84.6%,而未加酶的结果则为58.1%。结论:酶法提取新工艺能显著提高知母甾体皂苷的提取率。     

大孔树脂法提取知母总皂苷

采用菝葜皂苷元作为含量监测指标,分别用正交设计法优化醇提工艺和大孔树脂精制工艺.最佳工艺如下:知母500 g,加75%乙醇6倍,加热回流提取3次,每次60 min,滤过,合并滤液,浓缩至液料比为1:1,分别用X-5和D392大孔树脂吸附、脱色,洗脱液为80%乙醇,减压回收乙醇,真空干燥,得白色或类白色知母总皂苷粉末.皂苷类物质提取率达85%以上,纯度达95%以上,菝葜皂苷元含量为30%.     

知母组织培养的初步研究

目的以知母种子为试验材料,对知母的组织培养进行了初步研究,以期建立知母的再生体系。方法采用植物组织培养和单因子试验的方法对知母无菌体系的建立、分蘖芽的增殖、分蘖愈伤组织的诱导和再分化以及再生苗的移栽进行研究。结果 知母种子最佳的消毒方式是75%酒精处理30 s后用0.1%HgCl2处理15 min;知母分蘖芽增殖的最佳培养基是MS+KT 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;知母分蘖愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;知母愈伤组织再分化的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;知母愈伤组织再生芽最佳的生根培养基是1/2MS+NAA 0.5 mg/L;知母试管苗最佳的移栽基质是腐殖土。结论本实验建立了知母的再生体系,为知母试管苗的工厂化生产奠定了技术基础。     

知母种子质量分级标准的研究

目的:研究制定知母种子的质量分级标准。方法:通过对不同产地20个批次知母种子的净度、千粒质量、含水量、生活力、发芽率等指标测定和外观形态观察,利用Excel 2010、SPSS 20.0软件对以上数据进行相关分析、主成分以及K-均值聚类分析,初步确定知母种子质量分级指标和分级标准,且以各等级知母种子分别在田间对比种植,通过测定1年产苗量,2年药材产量及有效成分含量,验证知母种子质量分级标准的合理性。结果:Ⅰ级知母种子发芽率不低于85%,千粒质量不低于7.5 g,净度不低于95%;Ⅱ级知母种子发芽率不低于70%,千粒质量不低于7.0 g,净度不低于85%;Ⅲ级知母种子发芽率不低于65%,千粒质量不低于6.0 g,净度不低于80%;各级种子含水量均小于10%。结论:发芽率和千粒质量为知母种子质量分级标准的主要指标,净度和含水量为参考指标。不同等级知母种子种植后对知母种苗产量、药材产量及质量会有显著影响。该研究制定的知母种子质量分级标准科学可行、符合生产实际,为知母的种子质量评价和规范化栽培提供参考依据。     

知母中芒果苷提取方法考察及知母毛皮肉中芒果苷含量比较

目的考察知母中芒果苷的提取方法并比较知母毛皮肉中芒果苷的含量。方法采用HPLC法比较不同溶剂、不同提取方法从知母中提取出的芒果苷的含量及知母毛皮肉中芒果苷含量。结果采用50%乙醇、超声提取的方法提取较完全且简便易行,毛皮肉中芒果苷的含量分别为0.305%、0.519%、0.826%。结论本方法中芒果苷与其它成分能很好地分离开,且快速、准确、重现性好。知母毛皮肉中均含一定量的芒果苷。     

不同来源知母种子千粒重及发芽率比较分析及相关性研究

目的:了解不同来源知母种子千粒重和发芽率的总体状况,并分别研究安国药材市场和知母产区的种子现状及千粒重与发芽率之间的相关性。方法:采用常规方法并结合数理统计方法对知母种子的千粒重和发芽率进行测定分析。结果:30份知母种子的千粒重和发芽率较为相近,种子总体状况良好,其中流通在安国药材市场中的15份知母种子质量无参差不齐的现象,知母产区中的15份种子质量也很稳定;相关性分析结果显示,千粒重和发芽率之间呈负相关性,但两者并无明显的相关关系。结论:市场中会有一定数量的陈种子出售,而在知母产区采收的种子则无此种现象发生,建议选择知母产区收集优质种子。     

知母种苗质量分级标准研究

目的:研究制定符合生产实际的知母种苗质量分级标准,为知母药材规范化生产提供依据。方法:对知母主产区基地以及药材市场销售的种苗进行质量指标调查,通过相关分析、主成分分析,并结合生产实践确定知母种苗的质量分级指标,通过K-均值聚类分析将知母种苗分为3个等级,并以不同等级种苗为处理材料进行田间试验,连续2年观测植株生长、药材产量及质量指标。结果:确定种球直径和百株质量作为知母种苗的质量分级指标,将种苗分为3个质量等级,Ⅰ级种苗:种球直径≥1.2 cm,百株质量≤2.0 kg;Ⅱ级种苗:种球直径≥0.8 cm,百株质量≤1.5 kg;Ⅲ级种苗:种球直径≥0.5 cm,百株质量≤1.0 kg且≥0.5 kg。不同等级种苗对植株根系生长、药材产量有显著影响,均表现为:Ⅰ级>Ⅱ级>Ⅲ级。不同等级种苗种植后药材的有效成分含量差异不显著,但均高于《中华人民共和国药典》的标准。结论:本研究制定的知母种苗质量标准即具科学性,也更符合生产实际,可为知母药材的规范化栽培提供理论依据。     

中药川贝母定量分析方法研究

目的:研究常用中药川贝母的定量分析方法。方法:应用高效液相色谱法。以4种川贝母共有的有效成分贝母辛为指标;采用AgilentHypersilBDS C₁₈(4. 0mm×2 5 0mm ,5 μm)色谱柱,以乙腈水 二乙胺(37∶6 3∶0 .0 3)为流动相,流速1 0mL·min^-1;Alltech 2 0 0 0蒸发光散射检测器检测,外标两点法定量。结果:贝母辛在0 . 0 3188～1. 0 2 0mg·mL^-1呈线性,回收率为10 2. 1% (n=5 ) ,RSD 3. 86 %。根据33批不同产地或来源的川贝母药材中贝母辛的含量结果,确定贝母辛的含量限度为0 . 0 0 70 %。结论:本法为良好的贝母辛的定量分析方法,可用于川贝母药材的质量控制。     

知母治疗湿热痹证有效物质组纯化工艺优选

目的:优选知母治疗湿热痹症有效物质组纯化工艺参数.方法:以芒果苷为指标,HPLC测定含量,对8种不同类型树脂进行考察,优选最佳树脂型号及其纯化条件.结果:确定最佳纯化条件为HPD-400型大孔树脂,加2 BV提取液进行吸附,分别用3 BV水,6 BV 30％乙醇洗脱.纯化后芒果苷纯度比原药液中含量提高6.6倍,总固体物减少87.3％.结论:纯化后药液中多糖等杂质明显减少,以芒果苷为代表的皂苷类成分得以较好的保留,为知母治疗湿热痹证研究提供前期研究基础.     

HPLC—ELSD测定丹七片中人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含量

目的：建立用高效液相色谱配备蒸发光散射检测器（HPLc—ELsD）测定丹七片中人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl含量的方法。方法：采用色谱柱为UltimateTMXB—C18柱（150mm×4．6mm）;流动相为乙腈：水,0-22min,乙腈22—45％;漂移管温度110℃,载气流速3．OL／min;柱温：35℃。结果：人参皂苷Rg1和人参皂苷Rbl的线性范围分别为20一600μg／mL和15—500μg／mL,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1平均回收率分别为100．01％和99．66％结论：HPLc-ELSD测定丹七片中人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl含量,不仅操作简便、准确,而且重现性好。     

HPLC-ELSD法测定苍耳子及其制剂中羧基苍术苷和苍术苷含量

目的:建立苍耳子及其制剂(辛芩片和辛芩颗粒)中毒性成分羧基苍术苷和苍术苷的高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)定量测定方法。方法:采用Kromasil 100-5C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-10 mmol/L乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~30 min,12%A→20%A;30~31 min,20%A→12%A;31~35 min,12%A),柱温35℃,体积流量1.0 m L/min,蒸发光散射检测器检测(漂移管温度95℃,N2载气流速1.6 L/min)。结果:羧基苍术苷在0.681~4.086μg线性关系良好,线性回归方程为Y=1.4973X+3.9461(r=0.9996),平均回收率96.4%(n=6,RSD=1.2%);苍术苷在0.731~4.383μg线性关系良好,线性回归方程为Y=1.4619X+4.0630(r=0.9991),平均回收率97.7%(n=6,RSD=0.9%)。结论:HPLC-ELSD法定量测定羧基苍术苷和苍术苷方法简便,重复性良好,可用于苍耳子及其制剂的质量控制。     

HPLC—ELSD法测定芪芍通络口服液黄芪甲苷含量研究

目的：建立芪芍通络口服液中黄芪甲苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱一蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）法定量分析芪芍通络口服液中黄芪甲苷的含量,色谱柱：Aglient Eclipse×DBC18（150mm×4．6mm,5μm）,以乙腈一水（35：65）为流动相,流速1．0mL／min,柱温：25℃;蒸发光散射（ELSD）检测器,漂移管温度55℃,载气流速1．6L／min。进样量：10μL。结果：黄芪甲苷在0．274～5．48μg范围内呈良好的线性关系,r＝0．9997;平均回收率为98．8％,相对标准偏差（RSD）=1．2％,在常温下10h内稳定性较好。结论：HPLC—ELSD法简便快速、准确,重现性好,结果可靠;测得的该芪芍通络口服液每mL含黄芪以黄芪甲苷（C41H68O14）计为63．9μg;该黄芪甲苷含量测定法可作为控制芪芍通络口服液质量的方法。