中空纤维测定法在抗肿瘤药物研究中的应用

中空纤维测定法是NCI建立的体内抗肿瘤药物筛选方法.本文介绍了中空纤维测定法的基本实验方法和疗效评判标准,回顾了近年基于中空纤维测定法的抗肿瘤药物方面的研究成果,认为中空纤维测定法不仅适用于药物筛选,在快速研究抗肿瘤药物药效和机制方面也具有重要的应用价值.     

瑞香狼毒药效组分诱导人肝癌细胞凋亡及对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的影响

目的:探讨瑞香狼毒药效组分Zp1111对人肝癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用及机制。方法:MTT法比较瑞香狼毒药效组分Zp1111对体外培养的人来源肝癌细胞与正常肝细胞LO2抑制作用,采用流式细胞术检测用药前后BEL-7402细胞凋亡的变化并分析Zp1111对DNA周期分布的影响,荧光共振能量转移法检测Zp1111对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的抑制作用。结果:Zp1111对体外培养的肝癌细胞HepG2、BEL-7402、SMMC-7721均有较好的抑制作用,IC50分别为37.75μg/ml、28.60μg/ml、29.22μg/ml,而对正常肝细胞LO2抑制作用不明显,在25μg/ml及以下的浓度对LO2细胞反而有一定促进作用。Zp1111能诱导BEL-7402细胞发生凋亡,一定药物浓度范围内凋亡率具有药物浓度依赖关系;Zp1111还能调控体外培养的BEL-7402细胞周期分布,显著下调S期的细胞比例,并且对CDK2具有较好的抑制作用。结论:瑞香狼毒药效组分Zp1111具有一定诱导凋亡作用,可使BEL-7402细胞周期阻滞在G1期,其作用机制可能与抑制CDK2有关。     

中药穴位热敷治疗胃癌腹膜转移患者术后胃肠功能紊乱的临床研究

目的:研究中药小茴香穴位热敷治疗胃癌腹膜转移患者接受肿瘤细胞减灭术后出现胃肠功能紊乱的临床疗效。方法:收集2020 年4 月—2020 年9 月期间接受肿瘤细胞减灭术的胃癌腹膜转移患者65 例,临床分期均为Ⅳ期,分为中药热敷组34 例(术后中药热敷治疗+ 围手术期常规治疗)和对照治疗组31 例(术后仅予围手术期常规治疗),比较两组首次自主排便时间、气虚证主要症状评分以及营养状态评分。结果:首次自主排便时间:经治疗后,中药热敷组首次自主排便时间为(7.19±1.52)d,比对照治疗组(8.41±1.96)d 短,差异具有统计学意义(P =0.007)。主要症状评分比较:术后7 d,中药热敷组体倦乏力症状评分比对照治疗组低,差异具有统计学意义(P =0.031)。术后14 d,两组的症状评分较术后7 d 均有所下降,中药热敷组恶心呕吐、腹胀腹痛、体倦乏力3 项症状评分和总积分均比对照治疗组低,差异具有统计学意义(P ＜ 0.05)。营养状态评分比较:术后7 d,两组营养状态评分差异无统计学意义;术后14 d,中药热敷组营养状态评分(9.95±2.39)比对照治疗组(7.91±2.71)高,差异具有统计学意义(P =0.001)。结论:中药穴位热敷可以促进胃癌腹膜转移患者术后排便功能恢复,缓解恶心呕吐、腹胀腹痛、体倦乏力等气虚证症状,并有利于改善患者营养状态,具有积极的临床意义。     

中药防治肠道菌群相关性结直肠癌的研究进展

结直肠癌发病率和死亡率居我国全部恶性肿瘤的第 3 和第 5 位,严重威胁居民健康。结直肠癌病因复杂,其中 肠道微生态是影响癌变过程的关键环节。肠道菌群是维持人体胃肠道及机体健康的重要因素,肠道微生物病原体在结直肠 癌发病机制包括微生物代谢、宿主免疫和炎症途径的调节、氧化应激与抗氧化防御调节、细菌基因毒素等环节。传统中药 给药方式主要为口服,中药进入胃肠道后不可避免与肠道微生物发生相互作用。中药主要通过调节肠道菌群结构,从而调 节宿主免疫功能,以及氧化应激与抗氧化防御调节等途径实现防治结直肠癌的作用。实验研究证实,中药对肠道微生态系 统的平衡具有很好的保护作用,对菌群失调具有改善作用;中药可以提高宿主抗癌免疫反应以及通过调节肿瘤微环境下的 骨髓来源的细胞功能发挥抗肿瘤疗效;促进有氧培养菌的耐酸能力并抑制了厌氧培养菌的耐酸能力,从而增强了整体肠道 菌群的抗氧化性。另外,中药亦能改善微生物的代谢、减轻代谢性炎症,以及抑制产生大肠杆菌的体外和体内基因毒性, 中草药的药效成分经肠道微生物转化后发挥抗炎、镇痛和抗肿瘤等药理作用。综上,肠道菌群在部分结直肠癌的发生发展 中具有重要作用,调节肠道菌群是中医药防治结直肠癌的重要靶标。     

制吴茱萸提取物在肠外翻中的吸收研究及与P-gp的关系

目的:用肠外翻模型研究制吴茱萸提取物不同剂量在大鼠不同肠段的体外肠吸收特征及其与P-gp的关系.方法:采用大鼠肠外翻模型,以吴茱萸碱(evodiamine, Evo)和吴茱萸次碱(rutaecarpine, Rut)为制吴茱萸提取物中代表成分,用HPLC对其进行检测,计算Evo和Rut的吸收参数来分析其在肠道的吸收特征.结果:不同剂量时制吴茱萸提取物中Evo和Rut在各肠段经时吸收均为线性,符合零级吸收;Evo和Rut在空肠和回肠中的吸收速率常数(Kα)比较没有差异,符合主动转运;结肠中Evo低剂量Kα较低,但在中、高剂量时达到平衡,说明其为主动转运;Rut在结肠中的Kα随剂量增加而增加,符合被动转运.在给药剂量为4mg/mL时,Evo和Rut在各肠段的吸收没有明显差异,加入P-gp抑制剂维拉帕米(verapamil, Ver, 100μM),对Evo和Rut的吸收没有明显影响.结论:制吴茱萸提取物中Evo和Rut为零级吸收,Evo在各肠段均为主动转运,Rut在空肠和回肠中为主动转运,在结肠中为被动转运.Evo和Rut的转运不受P-gp影响.     

对中药有效成分和有效部位新药长期毒性试验剂量设计的思考

分析目前中药有效成分和有效部位新药申报资料中长期毒性试验剂量设计的现状和常见问题,从把握长期毒性试验原则和目的、正确看待中药毒性问题以及长期毒性试验剂量设计要点等方面,阐述此类新药制剂长期毒性试验剂量设计要重视的问题。     

对中药有效成分和有效部位新药长期毒性试验剂量设计的思考

分析了目前新药申报资料中常见的中药有效成分和有效部位新药长期毒性试验剂量设计方面存在的问题,对此类新药制剂长期毒性试验剂量设计时的考虑要点进行了剖析阐述。     

醋制法对瑞香狼毒毒效影响的研究

目的:为探讨有毒中药瑞香狼毒炮制解(减)毒理论的科学性,并了解瑞香狼毒醋制前后对药效的影响。方法:PHLC-MS技术比较瑞香狼毒醋制前后成分差异;建立H22皮下移植瘤模型,比较醋制前后对荷瘤小鼠与正常小鼠的致死作用及体重变化;荷瘤小鼠连续灌胃给药后比较醋制前后对肿瘤及免疫器官的影响;荧光报告基因法研究瑞香狼毒提取物对肿瘤细胞作用的靶标基因TGF-β,AP1,NF-κB的影响。结果:瑞香狼毒提取物Zp1102与醋制后的提取物Zp1103的LD50分别为9.89,16.85 g·kg-1,Zp1103半数致死剂量高于Zp1102。药效试验表明,药物为2 g·kg-1时,Zp1102对小鼠皮下移植瘤H22有显著抑制作用,抑瘤率为36.24%(P<0.01),Zp1103的抑瘤率略低,为34.40%(P<0.05);药物为1 g·kg-1时,Zp1102抑瘤率为34.52%(P<0.05),而Zp1103抑瘤率明显降低,为21.55%。Zp1102,Zp1103对报告基因AP1基本无影响;Zp1102对HepG2细胞经刺激内源性NF-κB浓度升高后的报告基因有上调作用,且能下调TGF-β的表达,但Zp1103仅能上调NF-κB的表达,对TGF-β无影响。结论:瑞香狼毒醋制后的提取物较未经炮制而提取工艺相同的提取物毒性降低,同时体内药效学实验结果表明其抗肿瘤活性也略有降低,其机制可能与药物对转化生长因子TGF-β的调节有一定关联。     

香辛方外敷对肺癌骨癌痛小鼠炎性介质和MCP-1的影响

目的:应用活体荧光成像肺癌骨转移癌模型,探讨香辛方外敷缓解骨转移癌痛的机制。方法:通过股骨内注射表达绿色荧光蛋白的人肺腺癌A549细胞建立肺癌骨转移癌模型,随机分为中药外敷组、扶他林组、模型组,每组10只。中药外敷组香辛方0.5 g/(kg·d)外敷,造模后7～21 d 1次/d;扶他林组0.1g/(kg·d)外涂,造模后7～21 d 1次/d;模型组生理盐水0.5 mL/只外涂,1次/d;另设假手术组生理盐水0.5 mL/只外涂,1次/d。造模21 d后检测小鼠血脊髓单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNFα)以及白介素-6(IL-6)的表达水平。结果:MCP-1表达模型组脊髓MCP-1表达水平[(1.88±0.18) mg/L]比假手术组[(1.21±0.19) mg/L]高,中药外敷组脊髓MCP-1表达水平[(1.51±0.09) mg/L]比模型组和扶他林组[(1.67±0.11) mg/L]降低(均P0.05)。IL-1β水平扶他林组[(99.11±10.52) ng/L]和模型组[(104.46±11.07) ng/L] IL-1β水平比假手术组[(75.69±16.57) ng/L]高,中药外敷组IL-1β水平[(85.97±11.88) ng/L]比模型组和扶他林组低(均P0.05)。TNFα水平中药外敷组[(447.91±44.67) ng/L]、扶他林组[(504.14±44.30) ng/L]和模型组[(534.84±48.89) ng/L] TNFα水平均比假手术组[(357.69±35.96) ng/L]升高,中药外敷组TNFα水平比模型组和扶他林组低(均P0.05)。IL-6水平各组小鼠IL-6水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:香辛方可能通过减少脊髓MCP-1蛋白的表达,抑制中枢敏化;同时降低血IL-1β和TNFα水平。本方可能通过下调炎性介质表达,起到缓解骨转移癌痛的作用。     

急诊护士职业倦怠影响因素及应对策略

探讨了急诊护士职业倦怠的影响因素并给予应对策略。影响因素主要包括个体因素、职业因素、社会因素等方面；应对策略主要包括情绪管理、增加社会支持、改善从业环境等。认为针对急诊护士职业倦怠，应进行人性化管理，促进急诊护士的心身健康，改善护理管理工作。