疏肝调神针法对偏头痛大鼠脑神经激肽-1受体基因及蛋白表达的影响

目的从基因和蛋白水平,评价疏肝调神针法对偏头痛大鼠三叉神经脊束核、中脑神经激肽-1受体(NK-1R)表达情况的影响,探讨疏肝调神针法治疗偏头痛的作用机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、疏肝调神组、普通针刺组,每组8只。采用颈后皮下注射硝酸甘油制备偏头痛模型。各组大鼠每天抓取固定30 min,连续8 d,固定的同时,疏肝调神组取百会、风池(双)、内关(双)、太冲(双),普通针刺组取百会、风池(双)进行针刺,余组只抓取固定。分别采用荧光定量PCR法、Western Blot法、免疫组化法检测大鼠三叉神经脊束核、中脑NK-1R的mRNA、蛋白表达及免疫组化阳性表达情况。结果与对照组比较,模型组NK-1R的mRNA、蛋白表达及免疫组化阳性表达在三叉神经脊束核中均显著降低(P0.05),在中脑中均显著升高(P0.05)。与模型组比较,疏肝调神组、普通针刺组NK-1R的mRNA、蛋白表达及免疫组化阳性表达在三叉神经脊束核中均明显升高(P0.05),在中脑中均显著降低(P0.05)。与普通针刺组比较,疏肝调神组在中脑中NK-1R的mRNA、免疫组化阳性表达均明显降低(P0.05),在三叉神经脊束核中免疫组化阳性表达明显升高(P0.05)。结论疏肝调神针法可双向调节偏头痛大鼠三叉神经脊束核和中脑的NK-1R表达,有效治疗偏头痛,其对NK-1R表达的调节作用相较于普通针刺更具优势。     

疏肝调神针法对偏头痛大鼠受体活性修饰蛋白1、5-羟色胺1D受体表达的影响

目的:探讨疏肝调神针法对偏头痛大鼠三叉神经脊束核、中脑受体活性修饰蛋白1(RAMP1)、5-羟色胺1D受体(5-HT1DR)表达的影响,探讨本法治疗偏头痛的镇痛机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、疏肝调神组、普通针刺组,每组10只。疏肝调神组取"百会""风池""内关""太冲"、普通针刺组取"百会""风池"进行针刺,每次30min,每日1次,共8d。针刺干预结束后,于大鼠颈后皮下注射硝酸甘油复制偏头痛模型。采用荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠三叉神经脊束核、中脑RAMP1、5-HT1D R的mRNA和蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均显著升高(P0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均显著降低(P0.05)。与模型组比较,疏肝调神组、普通针刺组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均明显降低(P0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均明显升高(P0.05)。与普通针刺组比较,疏肝调神组三叉神经脊束核、中脑中RAMP1的mRNA、蛋白表达均明显降低(P0.05),5-HT1DR的mRNA、蛋白表达均明显升高(P0.05)。结论:疏肝调神针法对偏头痛的治疗作用可能与抑制中枢降钙素基因相关肽的表达、激活5-HT的表达有关。     

疏肝调神针法对偏头痛大鼠行为学及血中相关神经肽、炎性物质表达的影响

目的:观察疏肝调神针法对偏头痛大鼠的行为学及血清降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨疏肝调神针法治疗偏头痛可能的作用机制。方法:Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、疏肝调神组、普通针刺组,每组8只。疏肝调神组针刺"百会"及双侧"风池""内关""太冲",普通针刺组针刺"百会"及双侧"风池",30min/次,1次/d,连续8d。第8天针刺后采用大鼠颈后皮下注射硝酸甘油制备偏头痛模型。观察造模前后3次行为学评分变化,酶联免疫法检测各组血清中CGRP、SP、IL-1β、TNF-α的浓度。结果:造模后,各组行为学评分均较对照组明显升高(P0.05);造模后2个评分时间段(60~90min及120~150min),与模型组比较,疏肝调神组、普通针刺组行为学评分明显降低(P0.05);120~150min时,疏肝调神组与普通针刺组评分较60~90min时明显降低(P0.05)。与对照组比较,模型组大鼠血清中CGRP、SP、IL-1β、TNF-α的浓度明显升高(P0.05);与模型组比较,疏肝调神组、普通针刺组大鼠血清中CGRP、SP、IL-1β、TNF-α的浓度明显降低(P0.05);与普通针刺组比较,疏肝调神组大鼠血清中CGRP、SP、IL-1β、TNF-α的浓度显著降低(P0.05)。结论:针刺可有效防治偏头痛的发生,疏肝调神针法在抑制偏头痛大鼠血清CGRP、SP及IL-1β、TNF-α等因子的痛觉传导、减轻神经炎性反应中更具优势。     

疏肝调神和胃针法对慢性偏头痛大鼠模型血浆5-HT、CGRP、VIP的影响

目的 观察疏肝调神和胃针法对偏头痛大鼠体质量、热痛阈值及5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)、血管活性肠肽(VIP)的影响，探讨疏肝调神和胃针法治疗慢性偏头痛可能的作用机制。方法 将32只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、普通针刺组、疏肝调神和胃组，每组8只。隔日(第1、3、5、7、9天)采用大鼠腹腔注射硝酸甘油制备慢性偏头痛模型。每日固定30 min,疏肝调神和胃组针刺“百会”及“内关”(双)、“足三里”(双)、“太冲”(双),普通针刺组针刺“风池”(双)、“太阳”(双)、“外关”(双),余组只固定不针刺，连续9 d。测定造模及治疗后大鼠体质量、热痛阈值的变化。采用ELISA法检测各组血浆中5-HT、CGRP、VIP的浓度。结果 造模成功后，CM模型大鼠体质量增长缓慢、热痛阈值降低，与正常对照组比，差异具有统计学意义(P<0.05)。普通针刺组与疏肝调神和胃组体质量及热痛阈值增加，与模型组相比，差异有明显统计学意义(P<0.05)。普通针刺组与疏肝调神和胃组对比有差异，但无统计学意义，从趋势上看，疏肝调神和胃组优于普通针刺组。与正常对照组比较，模型组血浆...     

疏肝调神针法对偏头痛大鼠脑组织阿片类受体表达及血清炎性因子水平的影响

目的:观察疏肝调神针法对偏头痛大鼠行为学、血清炎性因子及前扣带皮层阿片受体表达水平的影响,探讨其介导阿片受体参与偏头痛治疗的机制。方法:Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组10只、造模组30只。于大鼠颈后平坦区域皮下注射硝酸甘油制备偏头痛模型,造模成功的30只大鼠随机分为模型组、常规针刺组、疏肝调神组各10只。常规针刺组取“百会”、双侧“风池”,疏肝调神组取“百会”、双侧“风池”“内关”“太冲”,两组均留针30 min。干预前后评估大鼠行为学评分,干预后采用实时荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠脑组织前扣带皮层μ、δ和κ阿片受体(OPRM、OPRD、OPRK)mRNA及蛋白表达,ELISA法检测血清炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。取另外40只造模成功的大鼠按随机数字表法分为抑制剂高、中、低剂量组及PBS组,分别于干预前颅内注射5μg高、中、低浓度的疏肝调神组治疗后表达变化最明显的OPRM抑制剂,PBS组注射等量PBS溶液,之后各组均行疏肝调神针法干预;干预前后评估大鼠行为学评分,干预后ELISA法检测血清IL-1β、...     

疏肝调神针法防治偏头痛的镇痛抗炎机制研究

目的:观察偏头痛大鼠行为学、血清相关炎性因子的含量以及腺苷A_1、A_(2α)受体在中枢表达的变化,研究疏肝调神针法对其表达的影响,探讨疏肝调神针法对偏头痛的治疗作用,并揭示其作用机制。方法:将实验大鼠随机分为正常组、模型组、预防组和治疗组,每组8只。偏头痛模型制备应用颈后皮下注射硝酸甘油(5 mg/kg)法,疏肝调神预防组和疏肝调神治疗组取百会、风池、内关、太冲穴每天针刺30 min,连续7 d,第8天造模,并进行行为学评分;疏肝调神治疗组初次行为学评分结束后再针刺30 min,再进行行为学评分。结果:(1)行为学评分:造模后30 min行为学评分比较,预防组和治疗组行为学评分均较模型组降低(P0.05),预防组和治疗组比较无明显差异(P0.05);造模后90 min行为学评分比较,经疏肝调神针法预防干预和治疗后,预防组和治疗组评分均较模型组明显降低(P0.01),且治疗组降低情况优于预防组(P0.05)。(2)相关炎性因子含量:①与正常组比较,模型组IL-1β、TNF-α、ICAM-1、COX-1、NF-kB的含量均增高, IL-6的含量降低,差异均具有显著性意义(均P0.01)。②疏肝调神预防组和治疗组IL-1β、TNF-α、ICAM-1、COX-1、NF-kB的含量均较模型组降低(均P0.01),且治疗组IL-1β、ICAM-1、COX-1的改变情况优于预防组(均P0.05)。③疏肝调神预防组和治疗组IL-6的含量均较模型组升高(均P0.01),且预防组改变情况优于治疗组(P0.05)。④疏肝调神治疗组与预防组TNF-α和NF-kB的含量比较差异均无统计学意义(均P0.05)。⑤疏肝调神预防组各项炎性因子的含量与预防组比较均更趋近于正常组(P0.05)。(3)腺苷A_1、A_(2α)受体在中枢的表达:模型组A_1R在TNC的表达较正常组比较均明显下降,而A_(2α)R的表达较预防组明显升高;与模型组比较,经过疏肝调神针法预防干预和治疗后,预防组和治疗组A_1R的表达均升高,A_(2α)R的表达均降低(均P0.05),且治疗组腺苷A_1R表达情况优于预防组(P0.05)。结论:疏肝调神针法能改善偏头痛模型大鼠的行为学,具有明显的镇痛镇静作用,并能通过调节相关促炎及抗炎因子的含量变化及影响腺苷A_1、A_(2α)受体在中枢的表达,产生消炎镇痛的作用,有效预防和治疗偏头痛。     

Effect of pricking blood therapy on behavior and gene expression in a rat model of migraine

目的：观察刺血法对偏头痛大鼠行为学及脑干组织c—fos、c-jun基因表达的影响。方法：以硝酸甘油造模偏头痛大鼠模型并予以刺血治疗，观察大鼠行学改变，应用免疫组化技术观察脑干组织c-fos及c-jun基因表达的变化。结果：与模型组及空白组比较，治疗组在刺血治疗后耳红、挠头次数显著减少（P〈0．05），c-fos、c-jun表达明显降低（P〈0．01）。结论：刺血治疗可以改善大鼠偏头痛行为学指标，抑制大鼠c—fos及c-jun阳性表达。     

头风颗粒对偏头痛模型脑膜组织形态及中脑导水管周围灰质c-fos、c-jun基因表达的影响

目的:研究中药头风颗粒对偏头痛模型脑膜组织形态的影响及对中脑导水管周围灰质c-fos、c-jun蛋白表达及mRNA表达的影响。方法:将120只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、头风颗粒治疗组、头风颗粒预防组,除正常对照组外;其余三组大鼠注射硝酸甘油(GTN),建立实验性偏头痛模型。造模30min后,模型组灌胃蒸馏水,治疗组灌胃头风颗粒,预防组于造模前灌胃头风颗粒1周。造模4h后,采集中脑导水管周围灰质(PAG)标本,通过苏木素-伊红(HE)染色方法,镜下观察各组大鼠脑膜组织形态,每组中随机取18只大鼠,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法,检测c-fos、c-jun mRNA表达,其余12只大鼠行免疫组化SABC法,检测c-fos、c-jun蛋白表达的阳性细胞数及灰度值。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠脑膜有明显的毛细血管扩张、大量炎性细胞渗出等现象,头风颗粒治疗组和预防组上述现象减轻。与正常对照组相比,偏头痛模型组c-fos和c-jun mRNA表达增强、c-fos和c-jun阳性细胞数明显增多,差异有显著统计学意义(P0.01);与偏头痛模型组比较,头风颗粒治疗组和头风颗粒预防组c-fos和c-jun mRNA表达明显减弱、c-fos和c-jun阳性细胞数明显减少,差异有显著统计学意义(P0.01)。结论:头风颗粒可以减轻硝酸甘油引起的神经性炎症、抑制c-fos、c-jun mRNA表达及蛋白表达,影响中脑导水管周围灰质(PAG)痛觉信息的调控,缓解偏头痛症状。     

柴胡疏肝散调节“怒伤肝”大鼠即早基因表达

目的:探讨柴胡疏肝散对受体后传导通路中第三信使即早基因表达的影响,证实柴胡疏肝散的疏肝解郁作用与脑中枢机制部位即早基因(c-fos、c-jun)表达的下调有一定的关系。方法:采用免疫组化法检测大鼠海马及大脑皮层c-fos、c-jun的表达,采用R-TPCR法检测大鼠海马及大脑皮层c-fos mRNA、c-jun mRNA的表达。结果:与模型组相比,中药中剂量组大鼠海马及大脑皮层c-fos、c-jun表达的阳性细胞数量与阳性细胞灰度数均有不同程度的降低,有统计学意义(P0.05),中药中剂量组大鼠海马及大脑皮层c-fos mRNA、c-jun mRNA的表达量降低,有显著性差异(P0.05)。结论:柴胡疏肝散对"怒伤肝"大鼠的即早基因的表达具有下调作用。     

通督醒神针法对血管性痴呆模型大鼠海马神经再生的影响

目的:探讨通督醒神针法对血管性痴呆模型大鼠海马神经再生的影响。方法:将SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、药物组。采用双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆模型。针刺组给予通督醒神针刺法,药物组予盐酸多奈哌齐灌胃治疗。免疫组化法检测脑源性神经生长因子(BDNF)与其酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)的蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组BDNF与Trk B蛋白表达明显升高(P 0. 01);与模型组比较,针刺组、药物组的BDNF与TrkB蛋白表达明显升高(P 0. 05);与药物组比较,针刺组的BDNF与TrkB蛋白表达无明显升高(P 0. 05)。结论:通督醒神针法能上调血管性痴呆模型大鼠BDNF与TrkB的蛋白表达水平,可以促进神经细胞再生,具有防治血管性痴呆的功能。     

阴阳升降理论探析与启迪

通过梳理《内经》及相关医家关于阴阳升降的论述,探讨阴阳升降的内容及阴阳升降的不同内涵。从阐述人体生理变化和脏腑特点、阐述疾病的病机、解释治则治法和方药配伍应用等方面分析阴阳升降对临床的启迪作用。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

非酒精性脂肪肝诊治的问题及对策

目的探讨非酒精性脂肪肝临床治疗中有效对策。方法结合近代非酒精性脂肪肝治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治非酒精性脂肪肝。结果中西医结合防治此病有效。结论中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》虚劳病精气神调治原则与方法

从中医精气神辨识角度认识虚劳病,总结虚劳病病因病机。通过观察面容、形态、神色、五官、舌象、脉象等辨识精气神状态,确立虚劳病精气神调治原则。在精气神辨识理论指导下,对《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》相关条文、方药进行解析,总结虚劳病相关治则治法。根据精气神调养原则,为虚劳病临床应用提供指导。     

五脏补血法理论及临床应用探讨

血液的生成与五脏关系密切,据此确立五脏补血法:养心补血法、健脾补血法、润肺补血法、滋肝补血法、益肾补血法。     

从“方药离合”看中医学的方药共荣

通过对历代方剂与本草的应用演变和发展过程的论述,揭示了中医方药共荣关系,并以黄柏、升麻等药为例,强调方药配伍运用是方药共荣的核心环节.随后,结合中医发展的现实环境,分析了坚持方药共荣的正确方向,对于防止重药轻方的错误倾向,提高中医临床疗效,启迪现代研究思路,均具有重要的学术价值和现实意义.     

丹栀逍遥散及其提取物镇静催眠作用研究

目的探讨丹栀逍遥散原方及提取物镇静催眠作用。方法将小鼠分为14组,正常对照组、原方组及各组分低中高剂量组,通过测定小鼠自主活动次数,采用戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量镇静催眠协同作用实验观察丹栀逍遥散原方及各提取物镇静催眠作用。结果丹栀逍遥散原方及提取物均无改变小鼠自主活动的功能,表明均无中枢兴奋性作用;丹栀逍遥散石油醚提取液高、中剂量具有显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的作用(P<0.01或P<0.05),石油醚提取液高剂量能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠个数(P<0.01)。结论丹栀逍遥散石油醚提取部位可能为丹栀逍遥散的中枢抑制作用的有效部位。     

全蝎配伍蜂房之祛风攻毒作用探析

通过梳理古本草文献中全蝎、蜂房的有关记载和现代临床对该药对的配伍应用,探讨并阐释该药对祛风攻毒增效的作用机制,认为全蝎配蜂房,药力迅捷,内走脏腑,外达肢节,透骨搜风,既可祛风通络止痛,又可攻毒散结消痈.尤其适宜于治疗风湿顽痹、痈疽恶疮、癌肿等.     

小青龙汤因机证治浅析

小青龙汤为温阳宣肺、蠲痰涤饮之剂,凡见哮喘、咳嗽、痰、饱胀、喘息和四肢水肿等因"外感风寒,内有寒饮"所致者,均可辨证应用小青龙汤。临证应用时注意:①寒邪不必拘泥外感;②"三水"的变化要审清;③但见寒饮,有无表证均可用此方;④注意痰饮在临床上的变化;⑤临床见喘未必治喘,要临证辨别。用此方,要抓住以下临床指征:①面色:"三水"之面色--黧黑之色;②脉象:弦脉或浮紧;③舌象:舌苔多水滑;④痰涎:咳痰较爽,痰涎清稀,泡沫状。以上"但见一证便是,不必悉俱",有效之后,应中病即止。     

高脂血症诊治研究中问题及策略

目的:探讨高脂血症诊临床治疗中有效对策。方法:结合近代高脂血症诊治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治高脂血症。结果:中西医结合防治此病有效。结论:中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。