五子衍宗丸及其拆方对老年大鼠心脑线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体及ATP合成的影响

目的 :研究五子衍宗丸及其拆方对线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体及三磷酸腺苷(ATP)合成的影响。方法 :用聚合酶链反应 (PCR)、酶动力学和生物发光技术进行检测。结果 :五子衍宗丸及其拆方的枸杞子、菟丝子可减少老年大鼠脑组织线粒体DNA缺失 (P <0 0 1) ,提高脑线粒体呼吸链复合酶Ⅰ、Ⅳ活力和ATP的合成 (P <0 0 5,P <0 0 1) ;枸杞子、菟丝子还可减少老年大鼠心线粒体DNA缺失 (P<0 0 5,P <0 0 1)。结论 :五子衍宗丸、枸杞子、菟丝子对老年大鼠线粒体DNA的氧化损伤有保护作用。     

五子衍宗丸对男性老年肾虚者外周血白细胞线粒体DNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的影响

目的：研究五子衍宗丸对男性老年肾虚者外周血白细胞线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体活力的影响。方法：38例男性老年肾虚者采用单盲法，随机分为五子衍宗丸治疗组和安慰剂对照组，服药3个月。分别用聚合酶链反应（PCR）和酶动力学方法检测治疗前后外周血白细胞线粒体DNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体的活力。结果：五子衍宗丸可提高男性老年肾虚者外周血白细胞线粒体呼吸链酶复合体I、Ⅳ活力，减少线粒体DNA缺失（P＜0．05，P＜0．01）。结论：五子衍宗丸对男性老年肾虚者白细胞线粒体DNA氧化损伤有保护作用。     

肾虚衰老与线粒体DNA氧化损伤关系的研究

目的:观察肾虚衰老与外周血线粒体DNA缺失及线粒体呼吸链复合酶活力的相关性。方法:用聚合酶链反应(PCR)和酶动力学技术。结果:老年肾虚组线粒体DNA缺失较青年组和老年对照组明显增多、呼吸链复合酶Ⅰ、Ⅳ的活力较青年组和老年对照组明显降低。补肾方五子衍宗丸可明显减少线粒体DNA缺失、提高呼吸链复合酶Ⅰ、Ⅳ的活力。结论:提示线粒体DNA的氧化损伤可能是肾虚的重要原因之一。     

肾气丸对2型糖尿病阳虚证大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体及ATP酶活性的影响

目的:观察肾气丸对2型糖尿病阳虚证大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体及ATP酶活性的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组12只和造模组48只,造模组48只大鼠予以高糖高脂饲料喂养3周后,采用小剂量链脲佐菌素加氢化可的松注射造模,观察2周制备2型糖尿病(阳虚证)大鼠,随机分为模型组、肾气丸组、补阳组、罗格列酮组。给药3周后处死大鼠,采用酶联免疫分析(ELISA)法分别测定大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体及ATP酶的活性。结果:模型组Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶以及线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的活性低于正常组(P0.01);肾气丸组、罗格列酮组Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶以及线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的活性明显高于模型组(P0.05),但组间差异无统计学意义(P0.05);补阳组Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶以及线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的活性明显低于肾气丸组(P0.01)。结论:肾气丸能改善2型糖尿病阳虚证大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及ATP酶的活性。     

脾气虚大鼠小肠黏膜细胞线粒体蛋白质控的研究

目的围绕线粒体蛋白质控(mitochondrial protein quality control, MPQC)探讨脾气虚小肠黏膜细胞线粒体损伤的可能机制。方法 16只雄性SD大鼠随机分为正常组和脾气虚证(模型)组,每组8只;透射电镜观察小肠黏膜细胞线粒体超微结构;分离小肠黏膜细胞线粒体,比色法检测其ATP含量和呼吸链复合物(complex, C)I-IV活性,Western blot法检测呼吸链CV、热休克蛋白70,Lon蛋白酶,酪蛋白裂解蛋白酶XP(caseinolytic protease XP,ClpXP)表达。结果与正常组比较,模型组线粒体嵴减少,ATP水平下降(P0.05),呼吸链CIII和IV活性及CV表达降低(P0.01,P0.01,P0.05),ClpX和ClpP表达均升高(均P0.01)。结论脾气虚小肠黏膜细胞线粒体结构和功能损伤与其MPQC异常有关。     

衰老小鼠脑组织mtDNA缺失呼吸链酶复合体活性的变化以及独活作用机制的实验研究

目的:研究独活及其醇提物对衰老小鼠脑组织线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体活性的影响。方法:用聚合酶链反应(PCR)、酶动力学和生物发光技术进行检测。结果:自然衰老小鼠脑组织m tDNA缺失较青年小鼠明显增多,线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活性较青年小鼠明显下降。独活及其醇提物可减少自然衰老小鼠脑组织的m tDNA缺失,提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活性。结论:独活及其醇提物对自然衰老小鼠线粒体DNA的氧化损伤有保护作用。     

脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及滋补脾阴方药作用机制的实验研究

目的：本项研究旨在通过对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织线粒体DNA(mtDNA)缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的研究，探讨脾阴虚衰老状态下mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化的规律，进一步揭示脾阴虚衰老的病理实质和滋补脾阴方药的作用机制，从而为脾实质的研究提供客观依据。方法：建立大鼠脾阴虚证衰老模型，观察脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化；观察滋补脾阴方药对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的调控。结果：脾阴虚衰老状态下，大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失较青年组和正常老年组明显增多，线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活力较青年组和正常老年组明显下降，滋补脾阴方药可减少脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织的mtDNA缺失，提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活力。结论：脾阴虚衰老机体细胞mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力发生异常改变，滋补脾阴方药对脾阴虚衰老时机体mtDNA、呼吸链酶复合体活力有调控作用。     

脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及滋补脾阴方药作用机制的实验研究

目的:本项研究旨在通过对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织线粒体DNA(mtDNA)缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的研究,探讨脾阴虚衰老状态下mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化的规律,进一步揭示脾阴虚衰老的病理实质和滋补脾阴方药的作用机制,从而为脾实质的研究提供客观依据.方法:建立大鼠脾阴虚证衰老模型,观察脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化;观察滋补脾阴方药对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的调控.结果:脾阴虚衰老状态下,大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失较青年组和正常老年组明显增多,线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活力较青年组和正常老年组明显下降,滋补脾阴方药可减少脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织的mtDNA缺失,提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活力.结论:脾阴虚衰老机体细胞mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力发生异常改变,滋补脾阴方药对脾阴虚衰老时机体mtDNA、呼吸链酶复合体活力有调控作用.     

地黄引子改善AD大鼠脑组织线粒体生物合成与氧化损伤的机制

目的:探讨地黄饮子对阿尔茨海默病(AD)大鼠中枢神经线粒体生物合成能力、氧化损伤保护的作用机制以及对AD大鼠学习记忆能力的改善作用。方法:120只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、安理申组、地黄饮子高、中、低剂量组,除假手术组外均侧脑室注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)建立AD模型,各治疗组给予相应药物灌胃,假手术组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续30 d。通过大鼠避暗箱实验,Y迷宫实验对大鼠行为学进行观察。行为学实验后,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)表达量和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平;测定脑组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ活性;测定丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:地黄饮子可显著改善AD大鼠学习记忆和工作记忆能力。与模型组比较,在避暗箱实验中,地黄饮子可使AD大鼠的停留潜伏期明显增加(P0.05,P0.01),而错误次数显著减少(P0.05,P0.01);Y迷宫实验中,地黄饮子可显著提高AD大鼠自发交替反应率(P0.05,P0.01)。地黄饮子显著增加AD大鼠脑组织PGC-1α表达量和CREB磷酸化水平,显著提高脑组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅲ和Ⅳ活性(P0.01),而对呼吸链复合物Ⅱ活性无显著作用。地黄饮子能显著降低AD大鼠脑组织MDA含量(P0.01),提高抗氧化酶类SOD和GSH-Px活性(P0.05,P0.01)。结论:地黄饮子通过激活AD大鼠CREB/PGC-1α信号通路,提高线粒体生物合成能力,增加线粒体呼吸链酶系活性,改善线粒体功能损伤,同时通过增强抗氧化酶系活性,发挥提高机体抗氧化损伤,从而改善AD大鼠学习记忆和工作记忆能力。     

衰老小鼠脑组织mtDNA缺失呼吸链酶复合体活性的变化以及独活作用机制的实验研究

目的：研究独活及其醇提物对衰老小鼠脑组织线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体活性的影响。方法：用聚合酶链反应（PCR）、酶动力学和生物发光技术进行检测。结果：自然衰老小鼠脑组织mtDNA缺失较青年小鼠明显增多，线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活性较青年小鼠明显下降。独活及其醇提物可减少自然衰老小鼠脑组织的mtDNA缺失，提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活性。结论：独活及其醇提物对自然衰老小鼠线粒体DNA的氧化损伤有保护作用。     

五子衍宗丸中不同配伍对金丝桃苷在大鼠体内吸收及分布影响

目的观察五子衍宗丸中不同配伍对金丝桃苷在大鼠体内吸收及分布的影响,为探察其配伍规律提供实证依据。方法取SD雄性大鼠72只,随机分为金丝桃苷组(6.11 mg/kg)、菟丝子组(2.60 g生药/kg)、菟丝子+枸杞子组(5.40 g生药/kg)、菟丝子+车前子组(3.40 g生药/kg)、五子衍宗丸组(7.60 g生药/kg)及空白组,每组12只。各组按剂量连续灌胃给药7天,空白组给等量水,末次给药前禁食不禁水12 h,分别于末次给药前及给药后1、2、3、4、6、8、10、12、16、24、32、48、60、72 h时每组中随机选取6只大鼠,从眼眶静脉丛取血约0.5 mL,肝素抗凝,采用HPLC法测定血浆中金丝桃苷含量,计算药动学参数[血浆半衰期(t1/2)、药峰浓度(Cmax)、达峰时间(Tmax)、平均驻留时间(MRT)、药时曲线下面积(AUC)];分别取给药3 h后各组剩余大鼠的心、肝、脾、肺、肾、睾丸和脑组织,组织匀浆,用HPLC外标法测定组织中金丝桃苷含量。结果药动学研究结果显示:金丝桃苷在大鼠体内呈现双峰吸收现象,与金丝桃苷组比较,不同配伍各组中金丝桃苷的t1/2、Tmax、MRT、AUC均显著增加(P<0.05);与菟丝子组比较,菟丝子+枸杞子组Cmax、t1/2、Tmax均显著增加,菟丝子+车前子组t1/2明显降低,Tmax显著减小(P<0.05),五子衍宗丸组t1/2、Tmax显著下降,Cmax、MRT0-∞、AUC0-∞均显著增加(P<0.05)。组织分布研究结果显示:金丝桃苷在肝脏、肾脏、睾丸组织中含量较高,其中肾脏含量最高,与金丝桃苷组比较,菟丝子组、菟丝子+枸杞子组、五子衍宗丸组大鼠各组织中金丝桃苷含量均有所增加,其中肝脏分别增加9.63%、34.56%、74.52%;肾脏分别增加了16.02%、85.43%、109.07%;睾丸组织分别增加了34.81%、288.13%、431.66%,差异有统计学意义(P<0.05)。与菟丝子组比较,菟丝子+枸杞子组与五子衍宗丸组大鼠各组织中金丝桃苷含量均有显著增加,其中睾丸组织增幅最大,分别为187.93%和294.45%,肾脏次之,含量增幅分别为59.84%和80.21%(P<0.05)。结论菟丝子配伍枸杞子明显促进金丝桃苷的吸收及在肾脏、睾丸等组织分布,显著延长体内时间;菟丝子配伍车前子则抑制金丝桃苷的吸收及在组织中的分布;五子衍宗丸可能通过对金丝桃苷成分的正、负调控,明显增加金丝桃苷在睾丸组织中的分布,使睾丸成为全方主要靶向器官,从而充分发挥补肾益精的功效。     

基于数据挖掘的中医治疗阳痿用药规律分析

目的:探讨中医治疗阳痿病的用药规律。方法:收集古籍以及全国名老中医药专家治疗阳痿病处方,基于中医传承辅助系统软件构建数据库,采用关联规则Apriori算法和复杂系统熵聚类方法,确定处方中各药物和药物组合的使用频数及药物之间的关联规则等。结果:高频药物包括菟丝子、熟地黄、当归、枸杞子、淫羊藿等;高频药物组合包括"枸杞子、菟丝子","肉苁蓉、菟丝子","枸杞子、淫羊藿"等;置信度为0.6以上的关联规则包括"茯苓-菟丝子","熟地黄-枸杞子","柴胡-当归"等。结论:中医治疗阳痿多用温补肾阳、益气养血之品。     

补肾调冲法诱发排卵的临床研究

目的：观察补肾调冲法对治疗功能性无排卵患者的保排卵作用。方法：将60例无排卵患者随机分成2组各30例。治疗组根据补肾调冲法则，以自拟补肾益冲汤（熟地黄、当归、白芍、山茱萸、黄精、紫河车粉、鹿角胶、续断、菟丝子、巴戟天、淫羊霍、香附）和活血调冲汤（当归、川芎、红花、桃仁、皂角刺、泽兰、赤芍、牡丹皮、穿山甲、党参、菟丝子、枸杞子、黄芪）按月经不同阶段治疗；对照组以克罗米芬、己烯雌酚、安宫黄体酮治疗。疗程均为6个月经周期。B超观察排卵情况、血雌二醇（E2）、孕酮（P）及主卵泡增长等指标。结果：2组患者E2和P水平显著提高，主卵泡直径明显增大，治疗前后比较，差异有显著性意义（P＜0．01）；2组治疗后比较，差异无显著性意义（P＞0．05）。治疗组180个周期，出现排卵90个周期，痊愈率达76．7％；对照组180个周期，出现排卵92个周期，痊愈率达83．3％。2组总和效率比较，差异无显著性意义（P＜0．05）。结论：补肾调冲法具有较好的促进E2和P正常分泌、使主卵泡直径增大和诱发排卵的作用。     

8种子类药对氧化损伤人晶状体上皮细胞的影响

目的:对常用子类中药进行抗氧化研究。方法:以人晶状体上皮细胞为研究对象,对8种临床和文献典籍中常述及的子类中药进行抗氧化功能测定。结果:各组药材提取物均有一定的升高SOD酶活力的作用,其中菟丝子、女贞子、决明子、楮实子等作用较强,这些子类药物的各剂量组SOD酶活力分别比模型组高出:菟丝子(1.35倍,1.32倍,1.43倍,1.80倍);女贞子(1.18倍,1.52倍,1.37倍,1.49倍);决明子(1.28倍,1.45倍,1.40倍,1.40倍),楮实子(1.26倍,1.37倍,1.22倍,1.39倍);青葙子的高浓度组有一定的抑制细胞或SOD酶活性的作用。各浓度子类药材提取物对MDA生成均有一定程度的抑制作用,女贞子、决明子、菟丝子等抑制作用较强,其中女贞子各剂量组效应最为显著;另外枸杞子、车前子等各剂量组的效应也比较明显。结论:以人晶状体上皮细胞为研究对象,对8种子类中药进行抗氧化功能研究,研究结果更贴近临床实际。     

In vitro antioxidation activity and genoprotective effect of selected Chinese medicinal herbs

Some traditional Chinese medicinal seeds and fruits are well known for their antioxidant properties. This research aims to investigate whether Fructus Lycii, Fructus Schisandrae Chinensis, Fructus Ligustri Lucidi and Semen Cuscutae protect DNA from oxidant challenge by hydrogen peroxide (H(2)O(2)). The standard comet assay was used to assess the genoprotective effect of these medicinal herbs. Blood was taken from three healthy adults, aged from 36 to 42. Lymphocytes were isolated and treated with different concentrations of aqueous herbal extracts, while controls were treated with phosphate buffered saline. The lymphocytes were stressed with 50 μM H(2)O(2). Treated cells were embedded in agarose and layered on slides. These sandwiched lymphocytes were lysed and afterwards subjected to an electric field in an alkaline environment. Damaged DNA was pulled out from the nucleus towards the positive electrode as a comet tail; its density was related to the degree of DNA damage. Finally, the slides were stained with fluorescence dye and tails were visually scored for 100 cells. The experiment was repeated three times and DNA damage in treated cells was compared to the controls. There was no statistical difference in DNA damage among the herb treated cells and untreated cells in the comet assay. Our data demonstrated that the selected medicinal herbs did not show in vitro DNA protection in the comet assay against oxidant challenge.     

加味芍药甘草汤治疗高催乳素血症阳萎58例疗效观察

目的：观察加味芍药甘草汤治疗高催乳素血症(HPRL)阳萎的疗效。方法：对58例HPRL阳萎患者以加味芍药甘草汤(由白芍、炙甘草、当归、枸杞子、菟丝子、淫羊藿、合欢皮、麦芽组成)随症加减治疗。结果：痊愈40例，显效6例，有效5例，无效7例，总有效率87．93％。结论：加味芍药甘草汤能明显降低血清催乳素，对HPRL阳萎有较好疗效。     

养阴清利法治疗难治性肾病综合征临床观察

为观察养阴清利法对激素不敏感或激素依赖型难治性肾病综合征撤减激素的临床疗效，采用由太子参，女贞子等药物组成的基本方治疗２８例ＮＳ虱，６个月为一疗程，观察１－２个疗程。结果基本缓解７例，部分缓解１３例，无效８例，缓解率达７１．４％。     

相同性味不同归经中药对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响

目的观察比较海马和菟丝子、黄芪和谷芽两对相同性味不同归经中药对雌二醇致肾阳虚小鼠模型的影响。方法 ICR雄性小鼠84只,随机分为正常对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、海马组、菟丝子组、黄芪组、谷芽组共7组,每组12只,采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型。每组给予相应干预措施,共用药12天。期间观察小鼠体征,测量肛温、抓力、自主活动;末次给药后取血,测血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）等生化指标;取肝、肾、睾丸、精囊腺,测定脏器指数。结果与正常对照组比较,模型对照组的各指标差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）,说明造模成功。与模型对照组比较,金匮肾气丸组、海马组、菟丝子组能升高肾阳虚小鼠的肛温,增加抓力和自主活动,增加精囊腺指数,降低血清ALT、AST水平,减少肝脏指数,其中金匮肾气丸组、海马组还能增加肾脏指数,金匮肾气丸组、菟丝子组还能增加睾丸指数,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）,说明海马、菟丝子性味归经相同（同属甘温归肝肾经）,则表现出相近的药理作用,通过温阳入肝肾从而改善腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、精神委靡之肾阳虚以及肝亏虚证候;黄芪组、谷芽组能升高血清TP、ALB、TC、TG水平,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）,显示黄芪、谷芽性味归经相同（同属甘温归脾经）,也表现出相近的药理作用,通过温阳入脾从而改善蛋白和脂质失调;但因是归脾经,对肾阳虚证的主证无很好的改善作用。结论性味归经相同的中药（如海马、菟丝子均甘温归肝肾经;黄芪、谷芽均甘温归脾经）则表现出相近或相同的药理作用;但性味相同而归经不同,则药理作用差异较大。故在＂性味结合归经＂层面探讨中药功效的共同规律可能更具有意义。