中药物质基础研究思路与方法

中药物质基础研究是中药现代研究的基础。近年来,随着现代分析、分离技术的不断发展,中药物质基础研究取得了较大进展,新思路和新方法不断涌现。为了促进中药物质基础研究和基于中药、天然药物资源的活性先导化合物及创新药物的发现,对当前中药物质基础研究的思路和方法进行综述,并重点介绍基于二维高通量制备液相色谱(2D-pHPLC)技术的中药化学成分高效分离技术、基于液相-质谱-数据库(LC-MS-DS)/制备液相色谱(pHPLC)技术的中药化学成分快速识别与高效制备技术、基于LC-DAD-MSn技术的中药化学成分研究与数据库的构建等中药物质基础研究的新方法、新技术,以供参考。     

超高效/高分离度快速/超快速液相色谱在中药及其制剂研究中的应用

超高效液相色谱(UPLC)、高分离度快速液相色谱(RRLC)和超快速液相色谱(UFLC)是近几年来推出的一种新的液相色谱技术,峰容量、分析效率、灵敏度和分辨率较常规HPLC有了很大的提高。其主要用于中药成分分析、中药指纹图谱、中药及其复方定量测定。此外,与TOF-MS、MS/MS联用还可用于中药代谢产物、中药复方血清化学成分和药动学等复杂体系的生物分析,以及药物的研究与开发,是复杂体系中药分离分析的重要手段。着重就其在中药及其复方研究中的应用进行介绍。     

高效液相色谱-质谱联用技术在中药研究中的应用

综述了高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）的发展状况以及近年来该技术在中药化学成分分析、中药质量控制、中药代谢产物鉴定和中药药物动力学研究等方面的应用,为进一步扩大高效液相色谱-质谱联用技术在中药研究中的应用提供参考。     

论何首乌血清药物化学研究的创新与发展

探索新的何首乌物质基础研究方法.通过分析现行的何首乌物质基础研究方法的局限性,结合笔者近年来在中药物质基础研究和中药血清药物化学研究中的体会,提出了用血清药物化学的研究方法进行何首乌物质基础研究并在研究中引入高效液相色谱-二极管陈列检测器-质谱联用(HPLC-DAD-MS)指纹图谱技术的设想.     

超高分辨质谱-高速逆流色谱-半制备液相色谱联用快速测定分析红三叶草中环氧合酶-2抑制剂

利用超高效液相-质谱联用技术(UPLC-MS)对红三叶草乙醇提取物中化学成分进行分析鉴定,以环氧合酶-2作为生物靶分子,运用超滤质谱技术以"受体-配体"亲和及超滤法作为分析方法筛选具有酶抑制,共鉴定出7个活性化学成分,分别为大豆苷、芒柄花苷、大豆苷元、印度黄檀苷、芒柄花素、德鸢尾素、鹰嘴豆芽素A。利用半制备型高效液相色谱(Semi-preparative HPLC)和高速逆流色谱(High-speed counter-current chromatography,HSCCC)技术对环氧合酶-2抑制剂进行分离和纯化,7种成分纯化至 80%,其中6种成分 92%。结果表明采用超滤质谱-半制备液相色谱-高速逆流色谱联用技术可以快速鉴定、筛选和纯化红三叶草中环氧合酶-2抑制剂。为天然药物的开发提供了理论基础和技术平台,可推广应用于其他酶抑制剂的鉴定和分离。     

葛根中黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选分离及质谱分析

目的建立液相色谱-高分辨质谱(UPLC-Q Exactive MS)和半制备液相色谱(Semi-preparative HPLC)联用技术对葛根药材中黄嘌呤氧化酶抑制剂进行快速筛选分离及鉴定的新方法。方法实验以黄嘌呤氧化酶作为生物靶分子,以超滤技术为研究手段筛选酶抑制剂,采用Semi-preparative HPLC技术分离纯化筛选所得到的活性成分,利用核磁共振波谱技术对单体活性成分进行进一步结构鉴定。结果从葛根药材中筛选并分离出5个纯度均大于90%的活性成分(葛根素、葛根素-6"-O-木糖苷、大豆苷、6"-O-乙酰基大豆苷和大豆苷元)。结论利用液相色谱-超滤-质谱-半制备高效液相色谱联用技术可以快速鉴定、筛选、分离葛根药材中活性化合物。此方法对于筛选黄嘌呤氧化酶酶抑制剂具有快速和灵敏等优势,为痛风等治疗药物的筛选与开发提供了科学有效的技术支持。     

细胞膜色谱及质谱联用技术在中药活性成分筛选中的应用

由于中药作用的整体性、成分和作用机制的复杂性,化学成分(群)作为中药及其复方制剂发挥治疗作用的物质基础,因此,采用多种方法分离分析中药及其复方中的化学成分一直是中药治病防病研究中一个有待解决的关键重要问题。传统方法存在操作繁琐、耗时耗事、浪费溶剂和样品的不可逆吸附等缺陷,并且分离过程中无法给出药理参数的基本信息,因而无法对活性成分进行高效准确定位。近年来从细胞层次研究药物成分与受体的结合为中药活性成分的筛选研究提供了一种新的途径。目前研究二者相互作用的方法之一—细胞膜色谱法(CMC),将现有色谱及质谱技术、细胞生物学与受体药理学结合起来,能够正确反映活性部位、活性成分与细胞膜及膜受体的相互作用,对复杂中药体系中有效部位筛选、活性成分的分离和高通量筛选具有独特优势。该文综述了CMC的原理、特点、中药活性成分筛选领域中的细胞膜模型及其与气相色谱-质谱(GC-MS)及液相色谱-质谱(LC-MS)联用的研究现状,并对其今后研究方法和未来的开发前景进行了探讨,为CMC在中医药领域的深入研究和开发利用提供理论依据和实践指导。     

RRLC(超高速液相)在中药化学实验教学中的应用

超高速液相(RRLC)和超高效液相色谱(UPLC)、超快速液相色谱(UFLC)一样是近几年推出的一种新的液相色谱技术,其峰容量、分析效率、灵敏度和分辨率较常规HPLC(高效液相色谱)有了很大的提高,其主要用于中药化学成分的分析、中药指纹图谱、中药及复方定量测定.本文着重研究RRLC在中药化学实验教学中的应用与其优点.     

受体色谱：中药靶向活性成分高效筛选技术

中药活性成分高效筛选技术是化学、生物学和医药学等众多领域的前沿研究问题之一。笔者课题组将G-蛋白偶联受体（GPCRs）识别药物的高特异性和高效液相色谱（HPLC）的高分离能力相结合,提出了 受体色谱概念,探索了多种受体固定化方法,建立了系列受体色谱模型,成功将其应用于药物-受体相互作用研 究及中药活性成分筛选,为中药受体靶向活性成分高效筛选提供了新方法。     

川芎内生真菌次级代谢产物中1个新的内酯化合物

目的研究川芎内生真菌Alternaria sp. IS275代谢产物的化学成分。方法采用硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、反相中压液相色谱、制备薄层色谱以及半制备高效液相色谱等分离技术,对川芎内生真菌发酵液的醋酸乙酯提取部位进行分离纯化,利用现代波谱学手段对分离的化学成分进行结构鉴定。结果从川芎内生真菌Alternaria sp. IS275代谢产物的醋酸乙酯提取部位分离得到1个新的内酯类化合物,鉴定为(+)-4,11-二羟基-2-十二烯-5-内酯。结论化合物1为首次从川芎内真菌中分离得到的新内酯化合物,命名为芎孢内酯A。     

制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用

本文介绍了制备型高效液相色谱法的研究概况,制备型高效液相色谱的特点,影响制备型高效液相色谱分离纯化的因素,及其在中药研究中的实际应用,并对制备型高效液相色谱的研究现状与发展方向做了总结。     

淫羊藿水提部位化学成分的HPLC-ESI-Q-TOF-MS分析

目的:采用高效液相-电喷雾四级杆飞行时间串联质谱(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对淫羊藿水提取部分中的化学成分进行定性分析。方法:采用液相色谱-串联质谱(LC-MS-MS),C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱;质谱使用ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。结果:通过正、负离子质谱信息及元素组成,分析与相关文献数据对照,共鉴定出10个化合物。结论:通过超高效液相色谱分离,质谱测定相对分子质量及相关文献数据信息检索确定淫羊藿水提取部分中的化学成分,为阐明淫羊藿水提部分的药效物质基础提供有力的证据。     

HPLC-ESI-Q-TOF-MS分析天葵子乙醇提取物中化学成分

目的:采用高效液相色谱与电喷雾四极杆飞行时间质谱仪串联技术(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)对天葵子95%乙醇提取部位中的化学成分进行定性分析。方法:采用液质联用色谱方法(LC-MS-MS),C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,质谱使用ESI离子源,正离子模式采集数据。质量扫描范围为m/z 50~1 500。结果:通过质谱数据分析,并与相关文献对照,从天葵子95%乙醇提取部位共鉴定出11种化合物,分别为4-(甲氧羰基)-2-氨基丁酸、紫草氰苷、耧斗菜内酯、蝙蝠葛内酯、蝙蝠葛氰苷、菲律宾厚壳树苷、天葵氰苷、橙黄胡椒酰胺、对苯二甲酸二丁酯、胡萝卜苷及邻苯二甲酸-二-2-乙基-己酯。结论:基于HPLC-ESI-Q-TOF技术,通过高效液相色谱分离,质谱测定相对分子质量、裂解数据,文献分析检索,能够快速准确地对天葵子95%乙醇提取部位的化学成分进行分离鉴定,为进一步研究天葵子的药效物质基础提供有力证据。     

黄芪当归合剂水煎液醋酸乙酯萃取部位 化学成分HPLC-ESI-TOFMS分析

目的：采用液相色谱与质谱仪联用技术(HPLC-ESI-MS)对中药复方黄芪当归合剂水煎剂中醋酸乙酯萃取部位的化学成分进行分析，并对主要成分进行鉴定。方法：液相色谱运用Zorbax SB C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱，以水(A)-乙腈(B)梯度洗脱，254 nm检测；质谱使用ESI离子源，正离子与负离子模式下采集数据。结果：通过一级质谱分析结合对照品数据以及相关文献共鉴定了20个化学成分的结构，主要结构类型为：黄酮及黄酮苷类、皂苷类、苯酞类化合物、寡糖类和氨基酸类。结论：经液相色谱分离，质谱测定相对分子质量及其他信息可以鉴别中药复方中的成分，为阐明黄芪当归合剂的药效物质基础提供部分基础，为中药复方成分的鉴定提供一种快速准确的分析方法。     

近10年来对中药十八反毒理及其物质基础的研究进展

将中药十八反分为乌头组、甘草组及藜芦组进行综述.近10年来对于中药十八反的毒理及其物质基础的研究取得了一定的成就,如基于药物代谢酶机制的探讨,对细胞色素P450酶及其同功酶与毒性关系作了研究,充分利用现代药物分析和色谱学技术研究反药配伍前后化学成分的变化,对十八反药物作用于机体后产生毒性的机理和物质基础做了一定探讨,但...     

柱切换高效液相色谱法分析4种鼠尾草属植物的化学成分

目的应用柱切换高效液相色谱技术实现鼠尾草属植物中水溶性和脂溶性化学成分在不同色谱柱上的分析,实现更多成分的分离。方法在HPLC基础上利用二位十通切换阀实现水溶性成分和脂溶性成分的切割,以Megres-C18色谱柱(4.6 mm×10 mm,5μm)为预吸附柱,用Zorbax Sb-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)完成水溶性成分分析,用Eclips XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)完成脂溶性成分分析。结果建立了柱切换高效液相色谱技术分离鼠尾草属植物化学成分的方法,完成其中7种成分(丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA)的定性和定量分析。结论利用柱切换高效液相色谱技术可以很好地实现鼠尾草植物中极性差异较大化学成分的分离和分析,为复杂中药的质量控制提供了一种方法借鉴。     

玄参的化学成分及其体外抗肿瘤活性研究

研究玄参的化学成分及其体外抗肿瘤活性.采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱和半制备高效液相色谱等方法对玄参乙酸乙酯部位进行分离纯化,通过核磁、质谱等波谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定.从玄参乙酸乙酯部位中分离鉴定出23个化合物,分别为苄基-β-D-(3',6'-二-O-乙酰基)葡萄糖苷(1)、5-O...     

基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱质谱的 胃复春片化学成分研究

目的:基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q-Orbitrap HRMS）技术对胃复春片的物质基础进行了全面的研究，对主要化学成分进行快速鉴定。方法:采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，3 μm)，以0.05%甲酸水-乙腈为流动相的梯度洗脱进行分离。质谱采用正、负离子检测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能（Full MS/dd MS2）采集数据。通过化合物的最大紫外吸收波长、精确相对分子质量及二级碎片离子信息，与对照品的保留时间、mzVault 2.0质谱数据库及相关文献报道进行比对，鉴定胃复春片的主要化学成分。结果:共鉴定出164种化学成分，其中包括人参皂苷类42个、黄酮类97个、二萜类19个、其他6个。结论:UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术能够快速、准确、较全面地鉴定胃复春片中化学成分，为明确药效物质基础研究及提升质量标准提供了理论依据。     

山莨菪中1个新的降碳香根螺烷型倍半萜

目的 研究山莨菪Anisodus tanguticus的化学成分及其生物活性.方法 采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备薄层色谱和半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,运用多种现代波谱学手段对化合物进行结构鉴定,进一步通过X-ray单晶衍射分析和计算电子圆二色光谱(electronic circular dichroism...     

中药标准组分的高效液相色谱/质谱联用(HPLC/MS)表征

高效液相色谱/质谱联用表征是化学袁征的重要内容,本文通过高效液相色谱/质谱联用方法系统表征中药标准组分,采用了电喷雾电离源(ESI)、大气压化学电离源(APCI)的正负离子扫描模式,获取标准组分在统一分析条件下,不同表征模式中化合物的光谱、质谱信息。通过对不同标准组分中大量表征数据的比对和分析可发现和归纳色谱、质谱规律,用于不同药材的成分差异性研究,以及由系统制备得到的同种药材不同层次标准组分中成分与含量的变化,为制备成分的确定和高效制备条件及参数的优化提供基础。建立包含分析方法的标准组分色谱质谱数据库,结合色谱、质谱规律,实现已知化合物的搜索匹配与自动质谱解析；预测和发现结构类似的未知化合物,提高研究效率,加强中药物质基础研究的系统性和深入性。