水疱性口炎病毒纯化抗原制备多克隆抗体的检测结果分析

目的水疱性口炎病毒纯化抗原制备兔抗VSV多克隆抗体,免疫学方法检测其结果分析比较。方法纯化的抗原制备兔抗VSV多克隆抗体,采用双向琼脂扩散试验,间接ELISA方法和中和试验测定效价。结果兔抗VSV多克隆抗体最高效价双向琼脂扩散试验为1∶32,间接ELISA法为1∶640,中和试验为1∶256。结论试验结果分析比较表明,建立纯化抗原制备的兔抗VS多克隆抗体,中和试验特异性好、敏感性高,可做为VSV的血清学检测和流行抗学调查抗供技术保障。     

中药物质基础研究的思路与方法

本文以中药现代化和国际化为导向，论述了中药研究中的重点与难点问题。阐述了中药研究的主要发展方向是突破中药化学物质基础研究，并提出了以活性导向的标准组分模式的中药物质基础研究新思路、新观点。强调中药物质基础研究的关键技术发展的重要性，并介绍了现代中药分离分析与表征的方法与技术。     

多重荧光定量PCR甄别3种霍乱弧菌相关毒素基因

目的为了判定霍乱弧菌是否携带相关毒力因子,研发一种快速、准确、特异检测霍乱弧菌3种毒素基因的多重荧光定量PCR方法。方法针对霍乱弧菌ctxA、ace、zot基因设计引物和探针,建立PCR体系,对70株霍乱弧菌分离株进行鉴定,采用直接测序方法对鉴定结果进行验证。结果建立的多重实时荧光定量PCR方法可同时准确、特异地鉴定霍乱弧菌菌体携带的3种毒素基因,不携带毒素基因的菌株均未出现阳性检测结果。菌体检测的最低检出限度ctxA基因：102 CFU/mL,ace基因和zot基因：10CFU/mL。构建了3种毒素相关基因阳性质粒,ace基因和zot基因的最低检出限度为10copies/μL,ctxA基因的最低检出限度为102 copies/μL,定量检测批间和批内的变异系数均小于5%;对70株霍乱弧菌分离株进行评价,结果显示其中40株（57.2%）携带ctxA毒素基因、31株（44.3%）携带ace毒素基因、46株（65.7%）携带zot毒素基因,通过测序方法验证,符合率达到100%。结论本文建立的多重实时荧光定量PCR方法操作简便、特异性好、灵敏度高,为霍乱弧菌的现场流行病学调查和疫情监测提供了快速、可靠的鉴定工具。     

中药标准组分系统分离制备研究

以中药强极性组分、类组分、同系组分、微量组分为研究重点，采用新颖的分离表征策略和发展新型分离材料进行中药标准组分系统分离制备。发展硅胶基质的亲水性色谱填料分离中药强极性组分，以组合大孔树脂技术研究类组分，发展组合分子印迹技术分离同系组分，以差异化富集策略研究微量组分。同时，采用多模式、多柱色谱及其联用技术进行标准品的制备，建立标准品资源库，推动中药物质基础的研究。     

中药标准组分的高效液相色谱/质谱联用(HPLC/MS)表征

高效液相色谱／质谱联用表征是化学表征的重要内容，本文通过高效液相色谱／质谱联用方法系统表征中药标准组分，采用了电喷雾电离源（ESI）、大气压化学电离源（APCI）的正负离子扫描模式，荻取标准组分在统一分析条件下，不同表征模式中化合物的光谱、质谱信息。通过对不同标准组分中大量表征数据的比对和分析可发现和归纳色谱、质谱规律，用于不同药材的成分差异性研究，以及由系统制备得到的同种药材不同层次标准组分中成分与含量的变化，为制备成分的确定和高效制备条件及参数的优化提供基础。建立包含分析方法的标准组分色谱质谱数据库，结合色谱、质谱规律，实现已知化合物的搜索匹配与自动质谱解析；预测和发现结构类似的未知化合物，提高研究效率，加强中药物质基础研究的系统性和深入性。     

板蓝根化学成分、药理及质量控制研究进展

目的对板蓝根各方面研究进展进行综述。方法按照化学成分、药理作用、质量控制方法、制剂工艺将文献分类综述。结果与结论板蓝根具有抗菌、抗病毒、促进免疫的作用 ,质量标准和提取工艺有待于改进     

超高效液相色谱(UPLC)用于丹参药材水溶性成分指纹图谱研究

目的利用超高效液相色谱技术建立丹参药材水溶性成分指纹图谱分析方法.方法实验采用1.7μm的小粒径填料填充的Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1×100mm,1.7μm)以0.5%甲酸乙腈(v/v)-0.5%甲酸水(v/v)为流动相梯度洗脱;流速0.2mL/min;色谱柱柱温30℃;检测波长优化选择280nm;进样量2μL.结果对12批陕西商洛药材基地产丹参药材进行测定,标定共有峰,并通过国家药典指纹图谱相似度计算软件中"中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版"计算出其相似度均在0.95以上.结论相对于常规HPLC而言,UPLC有更好的分离效率、峰容量以及灵敏度.本方法操作简单,大大缩短了分析时间,重现性、精密度和稳定性良好,可用作丹参药材质量控制.     

大孔树脂联用分离大黄水提组分

本文以大黄水提组分的系统制备为目标，研究了通过树脂联用进行预分离的方法，为在反相制备色谱上的纯化制备提供了简单、分离互补性较好的样品。在相同吸附洗脱条件下，系统地分析比较了D4020、NKA-2、X-5、AB-8、XAD1600、XAD1180、XAD4、XAD7HP及XAD16九种大孔吸附树脂分离大黄水提组分的总体情况。利用不同类型树脂之间分离选择性的差别，设计并实现了以树脂XAD7HP与树脂XAD16联用的方法分离大黄水提组分的实验，对其它中药水提组分的互补分离研究具有一定指导意义。     

中药标准组分的高效液相色谱/质谱联用(HPLC/MS)表征

高效液相色谱/质谱联用表征是化学袁征的重要内容,本文通过高效液相色谱/质谱联用方法系统表征中药标准组分,采用了电喷雾电离源(ESI)、大气压化学电离源(APCI)的正负离子扫描模式,获取标准组分在统一分析条件下,不同表征模式中化合物的光谱、质谱信息。通过对不同标准组分中大量表征数据的比对和分析可发现和归纳色谱、质谱规律,用于不同药材的成分差异性研究,以及由系统制备得到的同种药材不同层次标准组分中成分与含量的变化,为制备成分的确定和高效制备条件及参数的优化提供基础。建立包含分析方法的标准组分色谱质谱数据库,结合色谱、质谱规律,实现已知化合物的搜索匹配与自动质谱解析；预测和发现结构类似的未知化合物,提高研究效率,加强中药物质基础研究的系统性和深入性。     

淡水鱼华支睾吸虫囊蚴 LAMP 检测方法的建立

目的 建立一种高效灵敏的环介导等温扩增(LAMP)方法检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴。 方法 以华支睾吸虫 ITS2 基因序列为靶序列,合成 Cs-1、Cs-2、Cs-3 三组 LAMP 引物体系。 以华支睾吸虫囊蚴 DNA 样本为模板,日本血吸虫成虫、带绦虫成虫、蛔虫虫卵及其他吸虫囊蚴 DNA 样本为参考,比较三组引物体系的特异度;以不同浓度的华支睾吸虫成虫基因组 DNA 为模板,比较三组引物体系的灵敏度;用 LAMP 法及 PCR 法平行检测 16 份华支睾吸虫囊蚴样本和 23 份其他吸虫囊蚴样本,评价 LAMP 法的敏感性和特异性。 结果 三组引物体系的灵敏度及特异度以 Cs-3 为最优,以其建立的 LAMP 法反应体系,检测华支睾吸虫成虫 DNA 的最低检出浓度可达到 3. 33×10^-4ng / μL,敏感性和特异性与 PCR 法一致,均为 100%。 结论 成功建立了一种可用于检测淡水鱼中华支睾吸虫囊蚴的 LAMP 方法,为淡水鱼寄生虫病监测工作提供了便捷高效的检测手段。