黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞的作用

目的: 探讨黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞(Treg)免疫活性的影响。方法: 建立B16-F10荷瘤小鼠模型,C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺(CTX)组、黄芪多糖低剂量组(0.15 g·kg^-1)、黄芪多糖高剂量组(0.3 g·kg^-1)。造模后第2天开始ig给药,给药14 d后处死各组小鼠,取肿瘤称重计算抑瘤率,取脾脏制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Treg的比例,通过实时定量PCR检测小鼠脾脏中转化生长因子-β (TGF-β)mRNA,白细胞介素-10(IL-10) mRNA的表达。结果: 黄芪多糖能够抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长(P<0.05),降低脾脏中Treg的比例(P<0.01),降低脾脏中TGF-β mRNA, IL-10 mRNA(P<0.05)的表达。结论: 黄芪多糖可能通过降低荷瘤鼠脾脏中Treg数目,抑制TGF-β, IL-10分泌,从而实现其抑瘤作用。     

白术多糖通过TLR4信号通路对结肠癌CT26荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫调节的影响

目的探讨白术多糖对结肠癌CT26荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫调节的影响及与Toll样受体4(TLR4)信号通路的作用关系。方法采用BALB/c小鼠建立结肠癌CT26荷瘤小鼠模型,建模成功后随机分为模型组、阳性对照香菇多糖组和白术多糖低、中、高剂量组,另设置空白对照组,每组6只,连续灌胃给药21 d。观察肿瘤体积并绘制生长曲线;检测抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数;流式细胞术检测外周血CD4⁺T细胞,CD8⁺T细胞及肿瘤组织髓来源的抑制性细胞(MDSCs)比例,并计算CD4⁺/CD8⁺比值;ELISA法检测血清TNF-α及IL-2水平;Western blot检测脾脏组织中TLR4信号通路相关蛋白TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、TNF受体相关因子6(TRAF6)和核因子-κB(NF-κB p65)表达。结果与模型组比较,除低剂量组外,其他给药组CT26荷瘤小鼠肿瘤生长缓慢,胸腺和脾脏指数、血清TNF-α和IL-2水平、外周血CD4⁺T细胞亚群比例以及CD4⁺/CD8⁺比值均提高,而CD8⁺T细胞亚群比例以及MDSCs细胞水平均降低。此外,中、高剂量组小鼠脾脏组织TLR4、MyD88、TRAF6以及NF-κB p65等蛋白表达升高,而香菇多糖组无显著影响。结论白术多糖具有明显的抑制结肠癌CT26荷瘤小鼠肿瘤生长以及增强CT26荷瘤小鼠免疫功能的作用,其机制可能与激活TLR4信号通路转导有关。     

香菇多糖对荷瘤鼠脾细胞因子和NK活性的调节作用

目的 探讨香菇多糖对荷瘤鼠脾细胞因子和NK活性的调节作用.方法 昆明小鼠40只,随机分为4组:正常对照组,肿瘤(S180)模型组,环磷酰胺对照组,香菇多糖实验组.MTT法检测各组小鼠脾脏NK细胞杀伤活性,放免法检测各组小鼠脾组织匀浆TNF-α、IL-2和IL-6含量,ELISA法检测IL-10的含量.结果 香菇多糖能使荷瘤鼠脾组织匀浆中TNF-α、IL-2、IL-6水平升高,使IL-10的水平显著下降,P值均<0.01.荷瘤鼠应用香菇多糖后,脾NK活性恢复接近正常.结论 香菇多糖对脾NK活性具有促进效应,可影响多种脾细胞因子的分泌水平,提高机体免疫功能.     

从抑制髓源抑制性细胞的募集探索肺瘤平联合化疗对肺癌的作用和机制＊

目的 观察肺瘤平膏和化疗药物对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的影响，并通过分子生物学方法探索其内在的作用机制。方法 通过注射Lewis肺癌细胞悬液建立荷瘤小鼠模型并分为生理盐水、环磷酰胺、肺瘤平、环磷酰胺+肺瘤平4组，分别给与相应干预，记录各组小鼠的瘤块变化、食物消耗量。提取小鼠外周血、脾脏和肿瘤局部的细胞，流式细胞术检测其中Gr-1+CD11b+髓源抑制性细胞（Myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）的比例，取肿瘤组织和外周血血清采用Western Blot法和ELISA法检测炎症通路和肿瘤相关细胞因子的表达。结果 肺瘤平+环磷酰胺组小鼠的肿瘤体积最小，消耗食物最多，同时该组小鼠外周血、脾脏、肿瘤组织中的MDSCs比例在各组中最低，并伴有TNF-α/IL-1-NF-κB/STAT3炎症通路的抑制和MCP-1、VEGF、MMP-2、MMP-9等炎性因子表达的下调。结论 化疗与肺瘤平膏可协同抑制肺癌生长，而这种协同作用部分是因为二者联用可以抑制TNF-α/IL-1-NF-κB/STAT3炎症通路、调控肿瘤局部微环境从而抑制肿瘤对骨髓来源细胞的募集来实现的。     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

三叶青地上部分多糖对乳腺癌小鼠的抗肿瘤作用

目的探讨三叶青地上部分多糖对乳腺癌小鼠的抗肿瘤作用。方法小鼠乳房接种4T1细胞以建立乳腺癌荷瘤模型后,随机分为空白组、模型组、环磷酰胺组(40 mg/kg)及多糖低、中、高剂量(50、150、250 mg/kg)组,每组10只。给药28 d后,测定瘤质量及瘤体积,计算抑瘤率及脏器指数,观察肺组织转移灶,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群比例。结果与模型组比较,多糖组瘤质量、瘤体积、肝脏指数、肺转移灶数显著降低(P0.05,P0.01),但脾脏、胸腺指数无明显变化(P0.05);中、高剂量组CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例显著降低(P0.01),胸腺CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+比例及脾脏CD3~+CD4~+、CD4~+/CD8~+比例显著升高(P0.05,P0.01)。结论三叶青地上部分多糖能有效抑制乳腺癌小鼠肿瘤生长及远端肺转移,其机制可能与增加机体CD4~+、CD8~+T细胞比例,抑制Treg细胞数量和功能,提高机体免疫应答有关。     

黄芪注射液与白细胞介素2增强树突细胞抗肿瘤转移作用的比较研究

目的观察比较黄芪注射液与白细胞介素(IL)-2增强树突细胞(DCs)的抗肿瘤转移作用。方法制备C57BL／6小鼠骨髓来源的DCs,用Lewis肺癌特异性多肽Mutl预激DCs,并联合黄芪注射液或IL-2治疗转移性肺癌小鼠,通过流式细胞仪分析其脾细胞内T淋巴细胞亚群比例的变化,用Elisa法检测荷瘤小鼠血清IL-2、IL-4含量。结果肿瘤抗原多肽致敏的DCs与黄芪注射液或IL-2联合治疗后,肺癌结节减少,小鼠脾脏中T淋巴细胞亚群(CD4^+和CDs^+)升高,血清IL-2／IL-4比值也明显升高。在观察期间,经DCs联用IL-2和DCs联用黄芪注射液免疫小鼠成瘤率均低于单用DCs组。结论黄芪注射液和IL-2均能增强DCs的抗肿瘤转移作用,有效地促进荷瘤宿主的免疫应答,具有显著的体内抑制肺癌转移的效果。对正常动物免疫保护作用更加明显。     

狼毒多糖对S180荷瘤鼠免疫功能的调控作用

目的:观察狼毒多糖(EFP-AW1)对S180荷瘤鼠免疫逃逸功能的影响。方法:将50只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、狼毒多糖100 mg.kg-1组、环磷酰胺100 mg.kg-1组(CTX)、联合给药组(EFP-AW1+CTX)。分组给药10 d后,通过噻唑蓝(MTT)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、流式细胞术(FCM)之方法,检测荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖情况、转化生长因子β1(TGF-β1)、T淋巴细胞亚群(CD4+T,CD8+T)表达。结果:狼毒多糖可增加刀豆蛋白A(ConA)/脂多糖(LPS)诱导的荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖能力(P<0.05),降低血清中TGF-β1的分泌(P<0.05),增加CD8+T细胞百分含量(P<0.05)。结论:ESP-AW1可通过增强荷瘤鼠抗肿瘤免疫应答功能,抑制肿瘤细胞在体内转移和复发。     

黄芪多糖联合化疗治疗胃癌恶性腹水的临床观察

目的:观察黄芪多糖联合化疗对胃癌恶性腹水的临床效果,探讨黄芪多糖抗肿瘤机制。方法:将98例进展期胃癌合并恶性腹水患者随机分为联合组及对照组。两组患者均采用腹水抽吸+腹腔化疗药物注射方案。联合组在化疗方案基础上加用黄芪多糖治疗。21 d为1个疗程。1个疗程结束后评价治疗效果。结果:联合组治疗有效率为73.5%,对照组治疗有效率为49.0%,联合组有效率高于对照组(P0.05);两组患者治疗前在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+上差异无统计学意义(P0.05);治疗后,联合组在CD3+、CD4+及CD4+/CD8+上均明显高于对照组(P0.01);两组患者化疗前腹水中TNF-α、IL-6及IL-10差异无统计学意义(P0.05);化疗后联合组腹水中TNF-α、IL-6及IL-10均低于对照组(P0.05)。结论:黄芪多糖可提高化疗对于胃癌合并恶性腹水的治疗效果,其抗肿瘤机制可能与增强细胞免疫CD4+、抑制炎性因子分泌有关。     

白头翁皂苷对B16-F10黑色素瘤荷瘤小鼠炎症因子的影响及机制初步研究

目的探讨白头翁皂苷(Pulsatilla saponins,PS)对B16-F10黑色素瘤荷瘤小鼠炎症因子的作用及初步作用机制。方法通过皮下接种B16-F10黑色素瘤细胞建立荷瘤小鼠模型,灌胃给予白头翁皂苷低、中、高剂量(100、200、400 mg/kg)的药物,测量肿瘤体积及瘤重观察白头翁皂苷抗肿瘤作用;采用流式细胞术检测荷瘤小鼠血清中IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、INF-γ等细胞因子的水平变化;采用RT-PCR法进一步检测IL-6、INF-γmRNA表达;采用Western blot法检测肿瘤中Akt、p-Akt蛋白表达。结果与模型组比较,白头翁皂苷中、高剂量组均能抑制B16-F10皮下移植瘤的生长(P0.05)。给药组均能不同程度抑制血清中炎症因子IL-6、TNF-α、INF-γ水平;抑制肿瘤组织中INF-γ、IL-6 mRNA的表达以及p-Akt蛋白表达。结论白头翁皂苷能抑制B16-F10黑色素瘤荷瘤小鼠肿瘤的生长及炎症因子的表达,其机制可能与调控Akt信号通路有关。     

黄芪多糖对小鼠食管癌前病变的影响及机制研究

目的:探讨黄芪多糖(APS)对小鼠食管癌前病变的影响及其作用机制。方法: 将100只C57BL/6小鼠随机分为正常组26只、模型组26只、黄芪多糖组24只和全反式维甲酸组24只。除正常组外,其他组通过4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)喂养15周诱导制备食管癌前病变小鼠模型。造模完成后,黄芪多糖组50 mg/kg灌胃给药,1次/d; 全反式维甲酸组7.5 mg/kg灌胃给药,每2 d 1次; 正常组和模型组灌胃给予0.9%氯化钠溶液,1次/d,共10周。HE染色法观察食管上皮组织病理学改变,透射电子显微镜观察食管上皮细胞超微结构改变; 流氏细胞仪检测血液中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞和NK细胞比例; RT-PCR法、Western blot法检测食管上皮组织信号传导和转录激活因子3(STAT3)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达。结果: 与正常组比较,模型组小鼠食管上皮组织呈现癌前病变或癌变,癌变率66.67%; 食管上皮细胞可见胞核大小不等、核分裂相增多等超微结构改变; 血液中CD3⁺、CD4⁺T细胞和NK细胞比例降低,CD4⁺/CD8⁺比值降低,CD8⁺ T细胞比例升高(P<0.05); 食管上皮组织STAT3、HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达量均升高(P<0.05)。与模型组比较,黄芪多糖组和全反式维甲酸组癌变率降低(P<0.05); 上皮细胞超微结构改变明显改善; CD3⁺、CD4⁺ T细胞和NK细胞比例均升高,CD4⁺/CD8⁺比值升高,CD8⁺ T细胞比例降低(P<0.05); STAT3、HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达量均降低(P<0.05)。黄芪多糖组对各指标的调控作用均优于全反式维甲酸组(P<0.05)。结论: 黄芪多糖对小鼠食管癌前病变进展具有抑制作用,可能与提高细胞免疫功能及抑制STAT3、HIF-1α、VEGF转录表达有关。     

Astragalus polysaccharides regulate T cell-mediated immunity via CD11cCD45RB DCs in vitro

Ethnopharmacological relevance

Astragalus polysaccharides (APS) isolated from one of the Chinese herbs, Astragalus mongholicus, are known to have a variety of immunomodulatory activities. However, it is not yet clear whether APS can induce the activation and differentiation of dendritic cells (DCs) and subsequently activate T cells.

Aim of the study

This study was carried out to investigate the effect of APS on the differentiation of splenic DCs and its influence on T cell-mediated immunity through interleukin (IL)-12-producing CD11c^highCD45RB^low DCs in vitro.

Methodology

MACS microbeads were used to isolate splenic DCs, CD11c^highCD45RB^low DCs, CD11c^lowCD45RB^high DCs and CD4⁺ T cells. Phenotypes were analyzed by flow cytometry, and cytokine levels were determined with cytometric bead array or ELISA.

Result

The percentage of CD11c^highCD45RB^low DCs was significantly increased after treatment with APS compared to their counterparts. The cytokine secretion pattern of CD11c^highCD45RB^low DCs and CD11c^lowCD45RB^high DCs was detected, and it was found that unlike the stable IL-10 secretion pattern of CD11c^lowCD45RB^high DCs induced by APS, CD11c^highCD45RB^low DCs showed a dose-dependent relationship between IL-12 production and APS stimulation. In order to verify whether the activation of CD4⁺ T was associated with the differentiation of splenic DCs mediated by APS to CD11c^highCD45RB^low DCs, anti-IL-12 receptor (IL-12R) as well as anti-IL-10R monoclonal antibody was used to inhibit the effect of CD11c^highCD45RB^low DCs and CD11c^lowCD45RB^high DCs in CD4⁺ T mixed lymphocyte reaction culture. After treatment with anti-IL-12R or anti-IL-10 monoclonal antibody in CD4⁺ T+CD11c^highCD45RB^low DCs or CD11c^lowCD45RB^high DCs mixed lymphocyte reaction, the inductions of these DCs on T cells were inhibited dramatically.

Conclusion

APS might induce the differentiation of splenic DCs to CD11c^highCD45RB^low DCs followed by shifting of Th2 to Th1 with enhancement of T lymphocyte immune function in vitro. Also, the effect of APS on T-cell differentiation to Th1 was not associated with the inhibition of IL-10 production in CD11c^lowCD45RB^high DCs.     

益气温阳法联合顺铂对荷瘤小鼠调节性T细胞的影响

目的:研究益气温阳法联合顺铂对Lewis肺癌小鼠调节性T(T Regulatory,Treg)细胞的影响。方法:建立40只近交系C57BL/6纯系雄性小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型后,将40只造模后的小鼠随机分为模型组、中药组、顺铂组及联合用药组,每组10只,单笼饲养。模型组以0.4 mL生理盐水连续灌胃12 d;中药组以0.4 mL中药液连续灌胃12 d(20 g生药/kg);顺铂组以0.2 mL顺铂溶液腹腔注射,分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射顺铂溶液(4 mg顺铂/kg);联合用药组以0.4 mL中药液连续灌胃12 d(20 g生药/kg),在第1天、第3天、第5天腹腔注射顺铂溶液0.2 mL(4 mg顺铂/kg)。给予药物干预12 d后,用流式细胞术检测各组小鼠脾脏组织Treg细胞的比例。结果:流式细胞术结果表明,益气温阳法治疗可显著降低Lewis肺癌小鼠脾脏组织Treg细胞,与模型组比较,中药组、顺铂组和联合用药组小鼠脾脏组织内CD4+CD25+Treg细胞比例与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例均显著降低(P<0.05)。结论:益气温阳法通过降低Treg细胞的水平增强机体的抗肿瘤免疫应答而发挥抑瘤作用。     

黄芪注射液增强树突细胞的抗肺癌作用

目的：研究黄芪注射液联合．MHC Ⅰ类限制性肿瘤抗原多肽Mut1致敏的树突细胞(DCs)对肺癌小鼠的治疗作用及其免疫学原理。方法：制备小鼠骨髓来源的树突细胞，用转移性Lewis肺癌特异性多肽Mut1预激DCs并联合黄芪注射液治疗肺癌小鼠，通过FACS分析其脾细胞内T淋巴细胞比例的变化，用Elisa法检测荷瘤小鼠血清内IL-2、IL-4浓度的变化，间接提示Th1／Th2比例的变化。同时免疫正常小鼠，观察宿主对随后肿瘤细胞攻击的保护作用。结果：肿瘤抗原多肽致敏的DCs与黄芪注射液联合治疗后，比单用．DCs更有效的治疗转移性肺癌，小鼠脾细胞内CD4^ T和CD8^ T细胞明显比例升高，联合治疗组的IL-2／IL-4比例也明显升高。在观察时间内经黄芪注射液和DCs联合免疫的小鼠成瘤率低于对照组和单用DCs组。结论：以肿瘤抗原多肽致敏的DCs与黄芪注射液联合治疗能更有效的促进荷瘤宿主的免疫应答，具有显著的体内抑制肺癌转移的效果。对正常动物免疫保护作用更加明显。     

An Asparagus polysaccharide fraction inhibits MDSCs by inducing apoptosis through toll‐like receptor 4

Despite decades of research, malignant tumors are extremely difficult to eliminate with conventional methods. Although surgical resection potentially eradicates the problem, only a few cases are suitable for operation, and other approaches often involve harmful consequences. Revolutionary methods are desperately needed to improve patient outcomes and diminish harmful side effects. Myeloid‐derived suppressor cells (MDSCs), downregulators of the innate and adaptive immune systems, have been widely studied over the past 2 decades. MDSCs inhibit the antitumor immune response by suppressing T cell proliferation, cytokine production, and tumor cell killing. With MDSCs becoming novel targets in cancer therapy, our research has focused on the anti‐MDSC function of Asparagus polysaccharide (AP), extracted from asparagus, a traditional Chinese herb. In this study, we have used MDSCs isolated from the spleen of mice with colon cancer as an in vitro model to assess the efficacy of AP. Treatment of MDSCs with AP significantly decreased cell proliferation and induced apoptotic cell death through a toll‐like receptor 4 dependent way. Subsequent studies showed that the AP treatment enhanced the expression of Bax and Caspase‐9 and inhibited the expression of Bcl‐2, suggesting that AP induced apoptosis in the MDSCs via the intrinsic pathway. Altogether, the results showed that AP exhibited a significant anti‐MDSC activity and attenuated suppression of the antitumor immune response, thereby indicating its potential use in cancer therapy.     

桂枝茯苓丸对S180荷瘤鼠移植性肿瘤细胞转移影响的实验研究

目的:探讨桂枝茯苓丸(GFW)对S180荷瘤小鼠肿瘤转移的影响。方法:复制S180荷瘤小鼠模型,分为模型组、桂枝茯苓丸组、环磷酰胺组、联合用药组。采用ELISA法检测各组小鼠血清中VEGF的含量,SABC免疫组化法检测肉瘤组织中转移抑制基因nm23H1表达及细胞黏附分子CD44表达。结果:与模型组相比,GFW能显著降低荷瘤鼠血清中VEGF的含量(P<0.05)。GFW可促进转移抑制基因nm23H1的表达,抑制细胞黏附分子CD44的表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GFW具有一定的抑制肿瘤转移的作用。     

肺积方对肺癌免疫逃逸干预作用的临床研究

目的观察肺积方对肺癌免疫逃逸的干预作用。方法采用前瞻性随机对照研究方法,将60例气阴两虚型中晚期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组（30例）和对照组（30例）,观察治疗前后外周血CD4^＋CD2^＋5Tr、IL-10、VEGF、sCD44v6及TGF-β1表达水平,并从肺癌患者瘤体变化、Karnofsky（KPS）评分、中医证候临床方面评价肺积方临床疗效。结果（1）与对照组比较,治疗组可降低外周血CD4^＋CD2^＋5Tr、VEGF、sCD44v6、TGF-β1、IL-10水平;（2）治疗组瘤灶稳定率（78.26%）优于对照组（50.00%,P〈0.05）;（3）治疗组KPS评分增加稳定率76.67%,对照组为43.33%;治疗组KPS改善情况优于对照组（P〈0.01）。（4）治疗组气阴两虚证候改善明显优于对照组。结论（1）肺积方可稳定瘤体,改善气阴两虚型中晚期非小细胞肺癌患者的临床症状,提高生存质量。（2）肺积方可以通过多途径干预肺癌免疫逃逸,恢复机体的免疫监视作用,提高临床疗效。     

CD_4~+CD_(29)~+T细胞在湿热型溃疡性结肠炎中的表达及意义

目的:探讨CD4+CD2+9T细胞在湿热型溃疡性结肠炎中的表达及意义。方法:按照年龄及性别构成无统计学差异的原则,将临床观察对象入选分为正常组(n=32)、单纯湿热组(n=18)、非湿热型UC组(n=29)及湿热型UC组(n=16)共4组;将40只SD大鼠随机分为健康组(n=10)、单纯湿热组(n=10)、非湿热型UC组(n=10)及湿热型UC组(n=10)共4组,采用高脂、高糖饲料联合人工气候箱法造出大鼠湿热型模型,再结合三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法制作湿热型UC模型,非湿热型UC组单独用TNBS法。使用流式细胞分析仪检测以上各组患者和大鼠外周血CD4+CD2+9T细胞所占的百分比。结果:单纯湿热组、非湿热型UC组和湿热型UC组患者和大鼠外周血中CD4+CD2+9T细胞的表达均显著升高(P<0.05),其中以湿热型UC组表达最高。结论:CD4+CD2+9T细胞在湿热型UC患者和大鼠中表达显著升高,可能参与了湿热型UC的发病。     

洛罗兰糖苷激活Bcl-2通路诱导髓样抑制性细胞凋亡研究

[目的]促进髓样抑制性细胞（MDSCs）凋亡是抑制肿瘤生长的一个有效途径。因此，该实验旨在探究盘龙参活性成分络罗兰糖苷对MDSCs的抑制效应以及可能机制。[方法]采用MTT法分别检测洛罗兰糖苷对MDSCs细胞系（MSC-2）的毒性；采用流式分析法检测洛罗兰糖苷对MSC-2的促凋亡作用；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测洛罗兰糖苷作用后MSC-2细胞内凋亡相关基因的蛋白表达水平。[结果]细胞活性检测证实洛罗兰糖苷可以抑制MSC-2的活性；凋亡抗体染色结果显示洛罗兰糖苷可以促进MSC-2凋亡；Western Blot结果表明，洛罗兰糖苷作用下，JNK2、细胞色素C、caspase-9、caspase-3表达明显上调，而Bcl-2表达下降。[结论]洛罗兰糖苷可以通过激活Bcl-2信号通路，促进MDSCs凋亡增强免疫正调控，从而达到抗肿瘤的效果。     

云芝黄芪有效组分对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:应用云芝黄芪有效组分单方及复方治疗肿瘤小鼠,以此来验证云芝黄芪有效组分单方及复方抗肿瘤的免疫调节活性。方法:建立艾氏腹水癌(EAC)实体型荷瘤小鼠动物模型,随机分为6组,每组10只:生理盐水组(NS,0.1 mL.kg^-1.d^-1)、阿霉素单纯化疗组(AMD,4 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL,连续3 d)、云芝糖肽组(PSP,250 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL)、黄芪多糖组(APS,250 mg.kg^-1.d^-1,0.2 mL)、云芝黄芪复方组(PSP+APS,250 mg.kg^-1.d^-1,0.1 mL)和阿霉素云芝黄芪综合治疗组(AMD+PSP+APS,用量同上)。分别治疗30 d后采用免疫细胞化学法检测荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化情况,计算脏器指数、抑瘤率,并与对照组及化疗组进行比较。结果:云芝糖肽组和云芝黄芪复方组小鼠的CD3⁺,CD4⁺T细胞百分率以及CD4⁺/CD8⁺均显著高于对照组(P<0.05),CD8⁺T细胞的百分率较阿霉素化疗组显著降低(P<0.05);综合治疗组CD3⁺,CD4⁺T细胞百分率显著高于单纯化疗组(P<0.05);单纯化疗组小鼠胸腺指数较对照组明显降低(P<0.05),而综合治疗组的胸腺指数显著高于单纯化疗组(P<0.01);并且各给药组肿瘤质量均显著低于NS对照组(P<0.05)。结论:云芝糖肽、云芝黄芪复方对荷瘤小鼠及经化疗后的荷瘤小鼠均具有免疫增强作用。