薄层色谱法联合气相色谱法分析金银花多糖的单糖组分研究

目的:用薄层色谱法(TLC)联合气相色谱法(GC)分析金银花多糖的单糖组分与比例。方法:热水法提取金银花多糖,酸水解后用TLC联合GC分析其单糖组成。结果:组成金银花多糖的单糖包括葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖及阿拉伯糖,其比例为23.6∶3.3∶1.8∶2.3∶1.0∶4.2。结论:实验确定了金银花多糖中单糖的组成及比例,为金银花多糖的进一步研究奠定了基础。     

HPGPC联合HPLC-ELSD测定樟芝子实体中多糖分子量、多糖组成和单糖含量

目的:建立高效凝胶色谱法(HPGPC)测定樟芝子实体中多糖分子量,HPLC-ELSD法测定樟芝子实体多糖组成和单糖含量的分析方法。方法:HPGPC法采用ShodexOHPak SB-803HQ色谱柱(300 mm×8 mm);流动相:0.70%硫酸钠溶液(含0.02%的叠氮钠);柱温:35℃,流速:0.5 mL/min。HPLC-ELSD法采用Zorbax Carbohydrate色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(80∶20);柱温:30℃;流速:0.5 mL/min。联合上述两种方法进行测定。结果:采用上述HPGPC法可以成功计算出樟芝子实体多糖的分子量,采用HPLC-ELSD法可以测定樟芝多糖的组成及单糖的含量。结论:HPGPC联合HPLC-ELSD法可以简单快速的测定樟芝子实体多糖的分子量、多糖的组成和单糖的含量,可以用于樟芝子实体多糖提取纯化后的质量控制。     

广东海风藤多糖化学研究

目的:建立一种广东海风藤多糖分子量及其分布和单糖种类的质控方法.方法:分子量及其分布采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC),色谱柱为Ultrahydrogel 120 Column(300mm×7.8 mmID),以已知分子量的葡聚糖为标样,0.2 mol·L-1氯化钠为流动相,示差折光检测器.单糖种类测定采用HPLC法,色谱柱为Sugar-pakTM(16.5 mm×300 mm),50 mg·L-1,EDTA-Ca为流动相,示差折光检测器.结果:利用GPC软件处理,得到广东海风藤多糖的数均、重均分子量.构成广东海风藤多糖的单糖种类有D-葡萄糖,D-半乳糖,D-阿拉伯糖.结论:本文建立的方法简便,重现性好,可作为广东海风藤多糖的质量控制.     

野菊花多糖的分离纯化及化学组成研究

目的:从野菊花中分离纯化多糖,并对其进行相对分子质量测定及单糖组成分析。方法:经热水提取、乙醇沉淀、大孔吸附树脂LSA-21脱色与Sevag法除蛋白,再经DEAE-52纤维素柱和Sephadex G75凝胶色谱分离纯化得到野菊花多糖。采用高效凝胶过滤色谱法(HPGPC)分析其相对分子质量,并借助衍生化气相色谱法(GC)对其单糖组成进行解析。结果:从野菊花中得到3个均一多糖CIP-1’,CIP-2’和CIP-3’。结论:CIP-1’的相对分子质量为8 242 Da,由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖6种单糖组成,摩尔比为0.75∶1.48∶1.96∶0.72∶1.80∶3.00;CIP-2’的相对分子质量为8 383 Da,由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖6种单糖组成,摩尔比为1.17∶1.19∶0.23∶0.56∶1.70∶2.20;CIP-3’的相对分子质量为19 201 Da,由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖5种单糖组成,摩尔比为2.40∶1.43∶3.84∶7.45∶5.10。红外光谱表明,三者均为吡喃糖。     

熟三七多糖的结构分析及抗氧化活性研究

目的:对熟三七多糖(SPP)的结构进行分析并研究其抗氧化活性。方法:以水提醇沉法制备SPP,采用柱前衍生化-HPLC法测定其单糖组成,红外光谱分析多糖的基团组成,凝胶渗透色谱法测定其相对分子量;以清除DPPH和ABTS自由基能力检测其体外抗氧化活性。结果:SPP的单糖组成为D-无水葡萄糖∶D-半乳糖醛酸∶半乳糖∶阿拉伯糖=1∶0.043∶0.063∶0.027;分子量分布于15 554~1 044 315;红外光谱扫描发现其在4000~400 cm-1波数范围内出现了多糖特征峰;SPP具有较强的清除DPPH和ABTS自由基能力。结论:SPP具有较强的抗氧化活性,为其功能性食品和医药产品开发提供了实验依据。     

黄精多糖PSP-1-A的分离纯化及结构解析

目的:探讨黄精多糖的提取及分离纯化条件,对得到的单一多糖进行分子量测定、单糖组成分析,并对其一级结构进行初步分析。方法:制黄精经石油醚脱脂后,采用水提醇沉,DEAE-cellulose及葡聚糖凝胶(Sephadex G-200)色谱柱分离纯化;高效液相色谱法进行纯度鉴定及分子量测定;气质联用测单糖组成;红外光谱和核磁共振对其结构进行分析。结果:获得一种多糖(PSP-1-A),数均分子量为:1410,重均分子量(Mw)为:8640,分布宽度(Mw/Mn)为:6.12。单糖主要由半乳糖组成,另外含有少量葡萄糖(Glc)、鼠李糖(Rha)、木糖(Xyl)、阿拉伯糖(Ara)及甘露糖(Man),其摩尔比为93.8∶1.4∶1.3∶1.5∶1.1∶0.9。红外及核磁结构分析证明PSP-1-A是由β-1,4-半乳糖(gal)和β-T-半乳糖(gal)构成的线性多糖。结论:PSP-1-A是一种全新单糖组成的相对分子量均一的黄精多糖。     

柱前衍生HPLC分析酸枣仁汤中多糖的单糖组成

目的:建立1-苯基-3-甲基-5-吡唑琳酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法分离检测4种单糖和2种糖醛酸的方法.方法:采用水提醇沉法提取酸枣仁汤中多糖,中空纤维超滤膜法纯化,然后用硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生后,利用反相高效液相色谱法,分析单糖的PMP衍生物.以单糖PMP衍生物的峰面积大小为指标,分别对衍生化反应中反应时间、PMP与NaOH的用量、中和温度和盐酸用量进行考察,从而得到较佳的样品衍生化制备条件.并将该方法应用于酸枣仁汤中总多糖(SDP)、相对分子量＜10 kDa多糖(SDP-1)、相对分子量为10 ～ 50 kDa多糖(SDP-2)、相对分子量＞ 50 kDa多糖(SDP-3)的单糖组成分析和含量测定.结果:SDP和SDP-1均由Man-GlcUA-GalUA-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比分别为1∶0.8∶0.7∶3.4∶3.3∶2.1和1∶0.5∶0.3∶0.6∶0.6∶0.4.SDP-2由Man-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比为1∶2.0∶0.2∶0.3;SDP-3由Man-Glc组成,摩尔比为1∶5.4.结论:方法准确、灵敏度高,适用于酸枣仁汤中多糖的单糖组成测定.     

柱前衍生化毛细管气相色谱法分析松茸多糖的单糖组成

目的:采用毛细管气相色谱法测定松茸多糖的单糖组成及摩尔比。方法:采用三氟乙酸水解松茸多糖,六甲基二硅烷(HMDS)和三甲基氯硅烷(TMCS)作硅烷化试剂,将单糖衍生化为三甲基硅烷衍生物,以肌醇为内标物,用HP-50毛细管色谱柱(0.32 mm×30 m),氢火焰检测器(FID)气相色谱法测定了松茸多糖中单糖组成。结果:通过分析,6种标准单糖全部达到基线分离,分析时间为15 min;松茸多糖是由葡萄糖、木糖和半乳糖组成的杂多糖,其摩尔比为14.84∶1.42∶1.00。结论:结果表明该方法可快速有效的分析多糖中的单糖组成。     

五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定

目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成。方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分。用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成。结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×10~4,6×10~4;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等。结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究。     

对叶百部多糖的相对分子质量测定及单糖组成分析

目的 提取纯化对叶百部多糖,并对其相对分子质量及单糖组成进行研究.方法 采用乙醇沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶过滤层析法从对叶百部中纯化得到水溶性多糖,命名为STP-1,分子筛层析法测定其分子质量,柱前衍生气相色谱法对其单糖组成进行研究.结果 STP-1的分子量为4.2×104Da,单糖组成包含鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal),其摩尔比为2.35∶ 1.78∶ 1∶15.09∶ 13.56.结论 对叶百部多糖为五种单糖组成的中性杂多糖,以葡萄糖和半乳糖为主.     

北豆根显微特征指数与化学成分相关性

目的:研究北豆根石细胞的显微特征指数与其4种生物碱化学有效成分的相关性。方法:北豆根显微特征指数的测定采用容量分析法;4种生物碱成分青藤碱、蝙蝠葛苏林碱、蝙蝠葛碱、粉防己碱含量测定采用高效液相法;总生物碱含量测定采用紫外分光光度法,并将得到的数据进行相关性分析。结果:北豆根中石细胞的显微特征指数与其化学成分蝙蝠葛碱、蝙蝠葛苏林碱和总生物碱含量存在显著的相关性,而与青藤碱、粉防己碱则无相关性。结论:该研究初步建立了一种基于石细胞显微特征指数测定的北豆根质量评价新方法及技术,可为北豆根药材的质量控制提供新的技术手段,为其质量标准的制订提供参考。     

北豆根的HPLC指纹图谱研究

目的:建立同时测定承德产及其他主产区北豆根中蝙蝠葛苏林碱和蝙蝠葛碱的含量及其HPLC-UV指纹图谱.方法:采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈和-0.5％甲酸水溶剂系统梯度洗脱,检测波长为268 nm,流速1.0 mL· min-1,进样量10 μL.结果:蝙蝠葛苏林碱和蝙蝠葛碱的线性范围分别为0.072 ～2.29 g·L-1(r =0.999 6),0.053 ～ 1.70 g·L-1(r =0.999 9);平均回收率分别为98.7％ (RSD 1.5％),100.6％ (RSD 1.9％);确立了承德产北豆根的指纹图谱共有9个共有峰,其他主产区的指纹图谱共有13个共有峰.指纹图谱方法重复性、精密度良好,承德产5批北豆根(原药材)除2号样品为0.404外其他样品均＞0.9;其他主产区12批北豆根(饮片)除9号样品为0.716外其他样品均＞0.9.结论:方法重复性好,专属性强,为北豆根药材的质量控制提供科学依据.     

黄精低聚糖的分离纯化及结构分析

目的 从黄精中分离纯化低聚糖样品并进行结构分析.方法 采用80％乙醇回流提取,D101大孔吸附树脂柱层析、活性炭柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析分离纯化,得到黄精低聚糖样品.采用化学分析方法研究黄精低聚糖样品的理化性质,并通过高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、气相色谱(GC)、紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(1HNMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等方法对黄精低聚糖样品进行结构分析.结果 黄精低聚糖样品纯度较高,为均一性组分,平均分子量为1 471Da,由单一葡萄糖组成的D-吡喃葡聚糖,分子结构中葡萄糖的连接方式主要为1→3和1→4,苷键构型以β-糖苷键为主,还含有少量的α-糖苷键.结论 首次从黄精中分离并鉴定了黄精低聚糖.     

白茅根多糖IC1的分离及其相对分子质量和单糖组成的测定

目的:分离纯化白茅根多糖,建立白茅根多糖相对分子质量的测定方法,并通过高效液相色谱法测定其单糖组成和摩尔比.方法:通过多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离纯化,得到白茅根多糖IC1;采用高效液相色谱法,以右旋糖酐为标样,绘制多糖分子量的标准曲线,测定白茅根多糖IC1的相对分子质量;通过酸水解,使IC1水解成单糖,分析这些单糖的组成及其摩尔比.结果:经测定,白茅根多糖IC1的相对分子质量为8 292.2;白茅根多糖IC1由鼠李糖,木糖,果糖,甘露糖,葡萄糖5种单糖组成,其摩尔比为1∶11.45∶1.26∶1.02∶59.23.结论:多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离,效果良好,操作简便.高效液相法测定白茅根多糖分子质量及单糖组成灵敏度高,重复性好.     

黄连多糖中单糖组成的HPLC-MS~n法快速识别

目的:探讨采用HPLC-MS~n法快速识别黄连多糖中的单糖组成。方法:黄连药材经过提取、分离、除蛋白、除色素,最终得到黄连多糖,用2 mol/L的三氟乙酸水解黄连多糖,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)作单糖衍生化试剂,利用HPLC-MS~n识别黄连中单糖的组成,并解析其衍生物的裂解规律。结果:通过分析,得到的黄连多糖中含有甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖/木糖、岩藻糖,其中核糖、岩藻糖为首次在黄连多糖中报道的单糖。结论:HPLC-MS~n法对中药多糖组分中的单糖成分进行分析具有重要的指导意义。     

不同产地白术的多糖含量测定

目的：对不同产地共8批白术的多糖合量进行了测定。方法：苯酚一硫酸比色法。结果：不同产地白术的多糖含量差异较大。结论：该法为白术的质量评价及质量控制提供了研究基础。     

3,5-二硝基水杨酸法联合苯酚-浓硫酸法测定不同产地黄精中多糖含量

目的:建立一种操作简便,可排除黄精药材本身所含单糖干扰的多糖含量测定方法,建立合理客观地评价黄精药材的质量.方法:联合3,5-二硝基水杨酸法和苯酚-浓硫酸法,通过紫外分光光度法分别测定黄精原药材中还原糖和总糖的含量,取两者之差即为药材中多糖的含量,并从重复性、精密度、稳定性以及加样回收率等方面进行了方法学考察.结果:本方法具有良好的适用性,不同产地的黄精药材多糖含量测定结果表明云南产黄精药材中多糖含量较高.结论:本实验样品处理简单、方法的重复性、精密度、稳定性及加样回收率均符合要求,可用于评价黄精生药材的质量.     

卡提素生化组分的分离鉴定及质量控制

 目的 对卡提素中的生化组分进行分离鉴定并建立质量控制方法。方法 采用HPLC,GC,TLC,比色法等对其组分进行分离鉴定,以HPGPC测定多糖相对分子质量,生物法测定其免疫活性。结果 卡提素中约含80%的多糖,5%的核酸、核苷酸以及微量的氨基酸;多糖的相对分子质量约为30万;卡提素对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率(s±s)高达(53.7±3.3),吞噬指数(s±s)为(2.7±0.4);玫瑰花结增高率%(平均值)为18.0%。结论 本品主要成分为多糖、核酸,通过测定其含量及活性能达到质量控制目的。     

黄精中小分子糖提取工艺优化

目的:建立黄精中小分子糖的含量测定方法,研究其最佳提取工艺。方法:采用苯酚-硫酸法测定小分子糖含量,以小分子糖含量为考察指标,通过单因素试验和正交试验法确定黄精中小分子糖的最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺条件为提取温度90℃,料液比1∶30,提取时间2 h。结论:该工艺简便、合理、小分子糖提取率较高。