稳定敲低SIGIRR的人肾小管上皮细胞的构建及其初步功能的研究

目的：建立稳定敲低单免疫球蛋白白介素1相关受体(SIGIRR)基因的人肾小管上皮细胞株(HKC),并初步研究其功能。方法针对SIGIRR基因的有效靶点设计shRNA序列,与 GV248-GFP-Puro 慢病毒载体连接产生重组体( GV248-GFP-Puro-shSIGIRR)。将测序验证正确的重组体与包装质粒(pMDL、pRev、pVSVG)共转染293T细胞进行病毒包装,收集病毒并感染HKC细胞。实时荧光定量PCR( qRT-PCR)和Western blot法分析检测HKC细胞中SIGIRR干涉效率。应用白细胞介素-1β( IL-1β)刺激成功敲低SIGIRR的HKC细胞及对照细胞, Western blot法检测其下游核转录因子NF-κB(p65)的磷酸化水平,qRT-PCR分析单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、正常 T细胞表达和分泌的活化调节蛋白( RANTES) mRNA水平。结果成功构建重组慢病毒载体GV248-GFP-Puro-shSIGIRR。 qRT-PCR 和 Western blot 法均证实在HKC细胞中成功敲低SIGIRR的表达。此外, IL-1β刺激后,与对照细胞相比,敲低SIGIRR的HKC细胞( HKC/shSIGIRR)的p65磷酸化水平上调, MCP-1和 RANTES mR-NA表达水平升高。结论 HKC的炎症反应中,SIGIRR蛋白对Toll样受体/白介素1受体(TLR/IL-1R)通路起“刹车”作用。该研究为狼疮性肾炎的治疗提供了新的潜在的靶点。     

中药灯盏花研究近况

灯盏花为菊科植物短葶飞蓬Erigeronbreviscapus(Vant.) Hand.-Mazz.的干燥全草,又名灯盏细辛、东菊,主要分布于我国西部及西南部海拔1650-3000m的云南、湖南、广西、贵州、四川及西藏等地[1]。灯盏花性寒、微苦、甘温辛,具有散寒解表、祛风除湿、活血化瘀、通经活络、消炎止痛的功效[2]。目前,临床主要用于治疗心脑血管系统疾病,在糖尿病、肾病、肝病、老年性疾病的治疗上也有很好的疗效。为进一步对灯盏花开展研究,本文从灯盏花的化学成分、质量控制、药理作用等方面进行综述。     

HPLC法同时测定承德产山楂叶4种成分的含量

目的：：建立高效液相色谱法同时测定承德产山楂叶中牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷和槲皮素含量的方法。方法：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为0.5%甲酸水-乙腈-甲醇-四氢呋喃溶液,梯度洗脱;流速1.0ml/min;检测波长370nm;柱温30℃。结果：牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷和槲皮素的线性范围分别为9.38-300μg/ml、15.9-510μg/ml、4.51-144μg/ml、0.28-9.0μg/ml;平均加样回收率分别为100.2%(RSD=1.8%)、99.6%(RSD=1.5%)、99.4%(RSD=2.0%)、100.8%(RSD=1.5%)。结论：含量测定结果显示不同产地山楂叶中四种黄酮类成分含量的差异较大(RSD为9.98-31.39%）。     

类风湿关节炎相关自身抗体与并发间质性肺病的相关性研究

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者血清中自身抗体与RA并发间质性肺病(ILD)的潜在相关性。 方法 选取2015年1月—2018年12月在蚌埠医学院第一附属医院风湿免疫科住院治疗的856例RA患者,其中RA继发干燥综合征(SS)患者152例,RA并发ILD患者177例。所有RA患者根据有无ILD进行分组,分析RA患者并发ILD的影响因素。定量检测患者血清中的抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP2)和类风湿因子(RF),定性检测anti-SSA/Ro52、anti-SSA/Ro60以及anti-SSB抗体,分析这些自身抗体与RA患者并发ILD的相关性。 结果 ILD在RA与RA继发SS两组间的发病率分别为19.89%、24.34%,组间ILD发病率比较差异无统计学意义(χ2=1.511,P=0.219)。相较于无ILD的RA患者,伴有ILD的RA患者年龄更大、病程更长、anti-CCP2抗体水平以及RF滴度更高,2组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,RA患者是否继发SS、年龄、病程以及anti-CCP2抗体与ILD的发病相关(均P<0.05)。 结论 RA患者血清中anti-CCP2抗体阳性与并发ILD有关,RA继发SS患者血清中anti-SSA/Ro60、anti-SSA/Ro52和anti-SSB抗体与ILD发病无关。      

临床医学专业长学制学生对科研方法课程的需求分析

目前临床医学专业(“5+3”一体化)课程体系中关于科研方法课程的设置相对较为薄弱。为优化原有课程体系,为提高教学质量提供参考依据,该研究选取某医科大学已开设医学科研方法课程的部分临床医学专业(“5+3”一体化)学生,调查了他们对医学科研方法课程的认识和需求。     

IL-6基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨白细胞介素（interleukin,IL）6单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）（rs1800796）与系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）的易感性。方法选取SLE患者666例作为病例组,年龄、性别匹配的569例正常人作为对照组,采用TaqMan基因分型技术检测rs1800796基因型频率。结果 Rs1800796 SNP的基因型（CC,CG和GG）频率和等位基因（C和G）频率在SLE患者和对照间差异均无统计学意义（均有P〉0.05）。Rs1800796与SLE临床表现的关联性分析发现,C等位基因频率在伴有浆膜炎的SLE患者中低于不伴有浆膜炎的SLE患者（P=0.019）。但C等位基因频率的分布在是否表现有颧部红斑、盘状红斑、光敏感、口腔溃疡、关节炎及狼疮肾炎的SLE病人间差异均无统计学意义（均有P〉0.05）。结论尚未发现IL-6rs1800796在中国汉族人群与SLE遗传易感性有关。Rs1800796 C等位基因可能对SLE病人并发浆膜炎起保护作用。     

HPLC-ELSD法测定穿山龙中薯蓣皂苷元的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定穿山龙中薯蓣皂苷元含量的方法.方法:使用Agilent Eclipse C18(150×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(95:5),柱温:40℃,流速1.0ml/min;蒸发光检测器以N2为载气,载气压力3.5bar,漂移管温度为70℃.结...     

山楂叶的研究近况

山楂叶是蔷薇科山楂属植物山楂Crataegus pinnatifida Bge的叶子。经本草考证,山楂之名始载于《本草纲目》[1],在此之前,以＂赤爪草＂始载《新修本草》[2],历来为药食两用之佳品。山楂属广泛分布于北半球,北美种类很多,全世界有该属植物280余种,中国约产17种。     

安徽省某市级医院HBV感染住院患者HBV基因型检测分析

目的 了解安徽省某市级医院乙型肝炎病毒(HBV)感染住院患者的HBV基因型分布状况,并探讨HBV基因型与肝炎严重程度、疾病进展的关系.方法 HBV基因型检测采用 PCR技术结合荧光探针技术,进行荧光PCR分型检测.HBV血清标志物的检测应用化学发光微粒子免疫分析法(CMIA).HBV-DNA含量应用实时荧光定量方法检测...     

机体氧化/抗氧化指标与SLE疾病活动的相关性

目的探讨SLE患者体内的氧化航氧化状态及其与SLE疾病活动的关系。方法采用病例对照设计，应用分光光度法测定血浆氧化，抗氧化指标，ELISA法测定血浆抗核抗体（ANA）和抗dsDNA抗体滴度。应用两样本t检验，比较SLE组与正常对照组间氧化航氧化指标，采用Pearson相关分析比较机体氧化，抗氧化指标与疾病活动的临床／实验室指标间相关性。结果共检测SLE患者58例，正常人对照52例。SLE组血浆丙二醛浓度[（4．88±3．28）nmol／mL]高于正常人对照组[（2．96±1．90）nmol／mL]（t=4．70，P〈0．01），总抗氧化能力[（14．06±5．65）U／mL]高于正常人对照组[（10．78±2．75）U／mL]（t=3．59，P〈0．001），超氧化物歧化酶活力[（57．19±19．40）U／mL]低于正常人对照组[（76．76±14．33）U／mL]（t=-5．70，P〈0．001）。SLE患者ANA与抗dsDNA抗体（r=0．800，P〈0．01）、总抗氧化能力（r=0．30，P〈0．05）、SLEDAI（r=0．38，P〈0．05）间呈显著正相关。总抗氧化能力与抗dsDNA抗体（r=0．22，P〈0．05）、血浆丙二醛（r=0．22，P〈0．05）间呈显著正相关。结论SLE患者外周血氧化程度较正常人对照组高，氧化，抗氧化指标与SLE患者疾病活动情况呈显著相关。