沙苑子黄酮对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用

目的:观察沙苑子黄酮对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。方法:采用MTT法观察沙苑子黄酮对人肝癌HepG2细胞的抑制作用,进一步观察沙苑子黄酮对HepG2细胞形态、超微结构、生长曲线以及集落形成的影响。结果:沙苑子黄酮可明显抑制HepG2肿瘤细胞的增殖和集落的形成,50μg/mL剂量组集落形成率为25.6(P<0.01),远低于对照组;光镜及透射电镜可以发现细胞形态有凋亡特征变化。结论:沙苑子黄酮体外对人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

番荔枝子油化学成分GC-MS分析

目的：研究番荔枝子油的化学组成及相对含量。方法：采用石油醚提取番荔枝子油,对番荔枝子油进行甲酯化后,应用GC-MS分析其主要成分及相对含量。结果：番荔枝子的得油率为8.27%,GC-MS分析鉴定出14个化学成分,主要成分为棕榈酸（12.5%）、亚油酸（13.2%）、油酸（24.3%）、硬脂酸（16.3%）和反油酸（12.8%）。结论：番荔枝子油富含不饱和脂肪酸,相对含量为58.2%。     

番荔枝子去蛋白多糖制备及其体外降糖作用研究

目的:研究番荔枝子去蛋白多糖对HepG2细胞糖消耗及胰岛素抵抗HepG2细胞糖消耗的影响。方法:水提醇沉法制备番荔枝子粗多糖,经过Sevag法除蛋白得番荔枝子去蛋白多糖,用苯酚-硫酸法检测其总糖含量。取对数生长期的HepG2细胞,分别给予不同浓度的番荔枝子去蛋白多糖,检测其对HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;建立高胰岛素抵抗模型,同法测定其对细胞液中葡萄糖消耗的影响。结果:番荔枝子去蛋白多糖能轻度促进HepG2细胞的葡萄糖消耗,其作用与剂量呈正相关;番荔枝子去蛋白多糖能明显促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗作用,在浓度为0.08 mg·mL-1时,效果最佳(P<0.01)。同时,番荔枝子去蛋白多糖与生理胰岛素具有一定的协同作用。结论:番荔枝子去蛋白多糖具有较好的体外降糖作用。     

荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用血清药理学方法制备荔枝核、环磷酰胺含药血清以及对照血清,作用于HepG2细胞,MTT法检测各种血清对HepG2细胞增殖的影响,Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:荔枝核含药血清处理HepG2细胞后,呈剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖活性;并出现细胞核浓染与核碎裂;流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率明显高于对照组。结论:荔枝核含药血清能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,其机制可能与诱导HepG2细胞凋亡有关。     

芹菜素对人肝癌HepG2细胞糖酵解的影响及体内实验研究

目的:探究芹菜素对人肝癌细胞(HepG2)体内、外糖酵解的影响及其作用机制。方法:体外采用溴脱氧尿苷(BrdU)掺入免疫荧光实验检测芹菜素对HepG2细胞增殖的影响;检测芹菜素对肿瘤细胞葡糖糖摄取和乳酸生成的影响;Western blot检测芹菜素对糖酵解相关蛋白-丙酮酸脱氢酶激酶1(PDHK1)、己糖激酶II(HKII)和乳酸脱氢酶A(LDHA)表达的影响;EMSA检测芹菜素对HepG2细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与DNA结合活性的影响;体内利用HepG2细胞裸鼠模型研究芹菜素对瘤体积、瘤重及瘤组织内糖酵解相关蛋白的影响。结果:在体外,芹菜素在20～80μmol/L可以浓度依赖性地抑制HepG2BrdU阳性细胞的比例(P0.01),抑制HepG2细胞葡糖糖摄取和乳酸生成(P0.01),同时降低糖酵解相关蛋白(PDHK1,HKII,LDHA)的表达(P0.01),并抑制HIF-1α与DNA结合活性(P0.01)。在体内,芹菜素在100、200、400 mg/kg可以抑制裸小鼠移植瘤的生长,抑瘤率分别为22.33%、37.32%和53.67%;芹菜素还可以降低瘤组织内糖酵解相关蛋白的表达。结论:芹菜素在体内外均可以抑制肝癌细胞的增殖和糖酵解,其机制可能是通过抑制HIF-1α与DNA结合活性而起作用的。     

沙煲暗罗精油化学成分的GC-MS分析及抗肿瘤活性

目的:研究沙煲暗罗精油的主要化学成分,初步研究其抗肿瘤活性,为进一步研究开发沙煲暗罗提供实验依据。方法:采用水蒸气蒸馏法从沙煲暗罗鲜叶中提取精油,计算收率,利用气相色谱-质谱(GC-MS)对其化学成分进行分析。MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测精油对白血病细胞(K-562),肝癌细胞(BEL-7402),肺癌细胞(SPC-A-1)和胃癌细胞(SGC-7901)增殖抑制作用。结果:水蒸气蒸馏法提取沙煲暗罗叶精油收率为0.83%,分离出65个峰,鉴定出44种化学成分,占精油总量的84.382%。其中主要成分为邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(16.824%),二苯胺(10.321%),邻苯二甲酸二异丁酯(8.904%)和桉油烯醇(4.920%)。结论:抗肿瘤活性结果表明沙煲暗罗叶精油对4种肿瘤细胞株显示较好的抑制活性,在高剂量组中对K-562,BEL-7402,GSC-7901的细胞增殖抑制率均可以达到80%以上。其中对白血病细胞K-562和肝癌细胞BEL-7402均表现出很好的抑制活性,其半数抑制浓度(IC_(50))分别为3.78,8.14 g·L~(-1),且2种活性都强于阳性对照药丝裂霉素C。精油对胃癌细胞SGC-7901也表现一定的抑制活性,其IC50为22.94 g·L~(-1)。     

傣百解体外细胞毒活性评价及其化学成分预实验

目的:研究傣百解不同溶剂提取物和不同萃取部位的体外抗肿瘤细胞增殖活性,探索活性部位的化学成分。方法:分别以水、50%乙醇水溶液、95%乙醇水溶液3种溶剂对傣百解进行回流提取,采用系统溶剂法对傣百解95%乙醇水溶液提取物进行萃取,采用SRB法测定不同浓度提取物和萃取部位对人胃癌细胞SGC7901、人肝癌细胞HepG2、人宫颈癌细胞Hela、人卵巢癌细胞SKOV3和人胰腺癌细胞SW1990 5种肿瘤细胞增殖的影响;采用试管法、纸反应法等,对傣百解活性部位的化学成分进行初步研究。结果:傣百解抗肿瘤活性部位为乙酸乙酯萃取部位,对SGC7901、HepG2、Hela和SKOV3肿瘤细胞增殖的IC_(50)分别为8.5、20、18.2、12.2μg·mL~(-1)。乙酸乙酯部位可能含有甾体皂苷、挥发油和有机酸等化学成分。结论:傣百解95%乙醇水溶液提取物的乙酸乙酯萃取部位具有广谱细胞毒活性,化学成分以甾体皂苷为主。     

芒果苷与顺铂联用对肝癌细胞HepG2增殖及PTK活性的影响

目的:观察芒果苷与顺铂(DDP)联用对肝癌细胞HepG2增殖及PTK活性的影响。方法:不同剂量芒果苷和(或)顺铂处理HepG2细胞24,48,72h后,用MTT法检测药物对细胞生长的抑制率,用ELISA法测定癌细胞中蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性,并计算两药相互作用系数,比较其协同性。结果:不同浓度的芒果苷和顺铂单独用药或联合用药均可抑制人肝癌HepG2细胞株生成及HepG2细胞中PTK的活性,并且具有明显的剂量-时效关系,抑制作用随着药物浓度的提高、作用时间的延长而增强。不同浓度的芒果苷与顺铂联用较单用对HepG2细胞增殖及PTK活性的抑制率均明显增加(P<0.05);用药72h后,单独用药顺铂(2.0μg/ml)、芒果苷(20.0μg/ml)及联合用药顺铂+芒果苷(2.0μg/ml+20.0μg/ml)对HepG2细胞生长增殖的抑制率达到最大值,分别为72.49%、36.49%与88.67%;对PTK活性的抑制率也达最大值,分别为36.47%、63.84%与76.27%,这表明顺铂对癌细胞增殖抑制作用强于芒果苷,而芒果苷对PTK活性抑制作用则明显强于顺铂;两药联用对细胞增殖及PTK活性抑制率的相互作用系数均在0.3～0.7之间,协同作用明显。结论:芒果苷与顺铂联用抑制HepG2细胞增殖具有明显的协同性与互补性,其机制与顺铂抑制癌细胞DNA复制和芒果苷抑制肿瘤细胞中PTK活性有关。     

文冠果壳提取物体外抑制HepG2细胞增殖活性部位筛选研究

目的:筛选文冠果壳体外抑制肝癌Hep G2细胞增殖活性部位。方法:分别用水、10%、30%、50%、70%、95%的乙醇水溶液,从文冠果壳中提取得到A、B、C、D、E和F 6个提取部位(XSHE),采用MTT法来筛选抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性部位。结果:显示6个提取部位均有抑制HepG2细胞增殖作用,其中提取部位F(95%乙醇水溶液提取物)抑制HepG2细胞增殖作用最强,当95%XSHE给药质量浓度为75. 00μg·mL~(-1)时,其对HepG2细胞增殖的抑制率高达(80. 44±2. 33)%,高于等浓度的阳性对照丝裂霉素C(MMc),且Hep G2细胞在95%XSHE干预下形态发生变化,具体表现为细胞皱缩,细胞间隙变大,从培养板脱落等作用。结论:文冠果壳提取物在体外具有良好的抑制Hep G2增殖的生物活性,为我们进一步探索文冠果壳提取物抗肿瘤作用机制奠定了基础。     

乌骨藤提取物对人肝癌细胞（HepG2）增殖的实验研究

目的:研究乌骨藤提取物体外对培养的人肝癌细胞(HepG2)增殖的影响。方法:用两种方法(A、B)制备乌骨藤提取物含药血清,采用不同浓度的含药血清分别作用于培养的HepG2细胞通过细胞形态学和MTT法检测乌骨藤提取物含药血清对HepG2细胞增殖的影响。结果:乌骨藤提取物A对HepG2细胞的最大无毒浓度大约为0.648mg/mL;药物浓度在0.389、0.648、1.08、1.8、3mg/mL时的抑制率分别为-5.15%、-13.29%、29.16%、63.19%、61.89%;用回归法求出乌骨藤提取物A对HepG2细胞增殖的半数抑制浓度为1.8mg/mL。乌骨藤提取物B对HepG2细胞的最大无毒浓度大约为0.648mg/mL;药物浓度在0.389、0.648、1.08、1.8、3mg/mL时的抑制率分别为-10.4%、-12.69%、20.74%、63.14%、65.13%;用回归法求出乌骨藤提取物B对HepG2细胞增殖的半数抑制浓度为1.86mg/mL。结论:乌骨藤提取物体外对人肝癌细胞(HepG2)的增殖有明显抑制作用。     

苘麻子中脂肪酸成分的GC-MS分析

目的: 分析苘麻子中脂肪酸的组成并测定主要脂肪酸成分的含量。方法: 采用索氏提取法提取其脂肪酸,经甲酯化处理后,用GC-MS联用仪对其脂肪酸组成进行分析和鉴定。采用毛细管气相色谱法,甲酯化后以二十一酸甲酯为内标同时测定苘麻子中棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸的含量。结果: 共分离出10种脂肪酸,占脂肪油总量的99.43%。棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸的线性分别为33.6~336 mg·L^-1(r=0.999 0), 6.58~65.8 mg·L^-1 (r=0.999 9),33.4~334 mg·L^-1 (r=0.999 8),128.3~1 283 mg·L^-1 (r=0.999 5)。各成分的平均回收率分别为100.4%,100.6%,101.6%,101.0%,RSD分别为1.3%,1.5%,1.6%,2.1% (n=9)。结论: 鉴定了苘麻子中的10种脂肪酸并首次建立了其中4种主要脂肪酸成分的含量测定方法,可为苘麻子的质量评价提供依据。     

番荔枝子中番荔枝内酯类化学成分研究

目的研究番荔枝Annona squamosa种子的化学成分。方法运用渗漉、萃取、柱色谱等方法进行分离和纯化,并结合化合物的理化性质及紫外、核磁、质谱数据进行结构鉴定。结果从番荔枝种子醋酸乙酯部位分得7个番荔枝内酯类化合物,分别鉴定为3-[7-[5-[1,4-二羟基-4-[5-(1-羟基十三烷基)-2-呋喃基]丁基]四氢-2-呋喃基]-2-羟基庚基]-5-甲基-2(5H)-呋喃酮(1)、3-[9-[5-(1-羟基-4-十七烯基)四氢-2-呋喃基]羟基壬基]-5-甲基-2(5H)-呋喃酮(2)、bullatalicin(3)、番荔枝塔宁A(4)、番荔枝塔宁D(5)、泡番荔枝辛(6)、10-羟基-巴婆双呋内酯(7)。结论化合物1和2为新化合物,分别命名为泡泡素I和索拉宁B。     

番荔枝子中4个新的邻双四氢呋喃型番荔枝内酯

目的 研究番荔枝Annona squamosa种子的化学成分。方法 通过多种现代色谱技术对番荔枝子超临界CO₂提取物的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和谱学数据确定其结构。结果 从番荔枝子中分离得到7个化合物,分别鉴定为3-[12-[5-[5-(1-羟基十二烷基)-2-四氢呋喃基]-2-四氢呋喃基]-9,12-二羟基十二烷基]-5-甲基-2(5H)-呋喃酮（1）、3-[11-[5-[5-(1-羟基癸烷基)-2-四氢呋喃基]-2-四氢呋喃基]-8,11-二羟基十一烷基]-5-甲基-2(5H)-呋喃酮（2）、3-[9-[5-[5-(1,3-二羟基十四烷基)-2-四氢呋喃基]-2-四氢呋喃基]-9-羟基壬烷基]-5-甲基-2(5H)-呋喃酮（3）、3-[8-[5-[5-(1-羟基十四烷基)-2-四氢呋喃基]-2-四氢呋喃基]-2,8-二羟基辛烷基]-5-甲基-2(5H)-呋喃酮（4）、阿诺西林甲（5）、annosquacin A（6）和乙酰紫玉盘素（7）。结论 化合物1～4为4个未见报道的新邻双四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物,分别命名为顺式-11-羟基鳞状辛素丙（1）、10-羟基鳞状辛素（2）、鳞状亭素戊（3）和鳞状亭素己（4）。     

三尖杉种仁挥发油的化学成分及生物活性研究

目的:研究三尖杉种仁挥发油的化学成分及其生物活性.方法:采用索氏回流法提取三尖杉种仁的挥发油,利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分离和鉴定其化学成分,并通过滤纸片扩散法和MTT法初步研究挥发油的抑菌及细胞毒活性.结果:从三尖杉种仁的挥发油中共鉴定出23种化学成分,主要为油酸(34.53％)、棕榈酸(12.04％)、亚油酸丁酯(9.56％)、油酸乙酯(9.31％)等;活性检测表明挥发油样品对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、大肠埃希菌Escherichiacoli和沙门氏菌Salmonella typhl显示较强的抑制作用,对慢性粒细胞白血病细胞株K562具有较高细胞毒活性,并呈剂量-效应依赖关系,IC5016.14 mag·L-1.结论:三尖杉种仁的挥发性成分主要为脂肪酸类、脂肪烷烃类及萜类,有抗菌、抗肿瘤活性,具有进一步开发利用的价值.     

树发挥发油成分和脂溶性成分的GC-MS分析

目的:研究树发的挥发油和脂溶性成分。方法:利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对树发挥发油和脂溶性成分进行分析。结果:共鉴定出34个挥发油成分,占总量的17.93%,其成分类型主要包括萜类(6.71%),酮类(4.19%)及醇类(3.27%),主要成分为4-戊烯-2-酮(4.19%),cis-7-十四烯醇(3.03%),3,7-二甲基辛烯(1.30%),新己烷(1.28%)和大牦牛儿烯D(1.01%);共鉴定出33个脂溶性成分,占总量的89.63%,其成分类型主要包括脂肪酸类(81.65%),烷烃类(4.49%)和醇类(1.67%),主要成分为反亚油酸甲酯(34.98%),油酸甲酯(10.94%),14-甲基-十五烷酸甲酯(7.40%)和硬脂酸甲酯(4.13%)。结论:首次从树发中提取并鉴定了挥发油和脂溶性成分,为树发的开发利用提供了科学依据。     

番荔枝种子中2个新番荔枝内酯

目的 研究番荔枝Annona squamosa种子的化学成分。方法 利用常压硅胶柱、中压制备液相与高压制备液相色谱等现代仪器方法进行分离纯化,结合化合物的理化性质和紫外、核磁、质谱数据鉴定化合物结构。结果 从番荔枝种子超临界CO₂提取物中分得10个邻双四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物,分别鉴定为3-[（13R）-13-[（2R,2''R,5R,5''R）-5''-[（1S）-1,5-二羟基壬基]八氢[2,2''-双呋喃]-5-基]13-羟基十三烷基]-5-甲基-2（5H）-呋喃酮（1）、3-[（2R,9R）-2,9-二羟基-9-[（2R,2''R,5R,5''R）-八氢-5''-[（1S）-1-羟基十五烷基][2,2''-双呋喃]-5-基]壬基]-5-甲基-2（5H）-呋喃酮（2）、6-羟基-去乙酰紫玉盘辛素（3）、6-羟基-4-去氧-番荔枝太辛（4）、bullanin（5）、10-羟基-巴婆双呋内酯（6）、刺叶番荔枝素A（7）、多鳞番荔枝辛素I（8）、多鳞番荔枝辛素C（9）、番荔辛I（10）。结论 化合物1和2为新化合物,分别命名为28-羟基-番荔枝素L和4-羟基-番荔枝素Y,化合物3~7为首次从番荔枝中分离得到。     

当归不同栽培品种(品系)种子含油量及组分分析

目的:对当归不同栽培品种(品系)不同成熟期种子油脂肪酸成分进行定性定量分析。方法:采用索氏提取法提取样品,气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行成分分析。结果:综合运用MassworksTM质谱解析软件、谱库检索等解析手段鉴定出当归种子油中11种脂肪酸成分,对样品进行主成分分析,得出己酸、油酸、癸酸是当归不同栽培品种(品系)不同成熟度种子共有的特征性脂肪酸组成;对样品进行聚类分析可将当归不同栽培品种(品系)不同成熟度种子样品进行分类。结论:确定当归主产地种子最佳采收期为8月22日至8月30日;建议岷归3号、岷归4号可以作为重点推广的优良品种。     

基于组效关系的石上柏挥发油抗肿瘤有效成分的辨识

目的:基于GC-MS分析,建立了石上柏挥发油的化学成分与其抑制人肺癌A459细胞株和肝癌7721细胞株的谱效关系模型,寻找与药效显著相关的活性成分。方法:采用噻唑蓝法(MTT)测定石上柏挥发油抑制人肺癌A459细胞和肝癌7721细胞活性,以半数抑制浓度(IC50)为评价指标;采用GC-MS分析,确定了11个特征峰;利用Simca-p11.5软件的正交投影偏最小二乘法(Orthogonal Partial least squares,OPLS)和SPSS 18.0软件的双变量相关分析(Bivariate),研究特征峰与药效的相关性,根据S-载荷图、变异权重参数值(variable importance in projection,VIP)和皮尔逊相关系数(Pearson)来辨识显著活性成分。结果:GC-MS分析石上柏共得到71个化合物,鉴定出其中64个化合物,其相对峰面积分别占总峰面积的98.19%。主要包括萜类,脂肪酸及其烃类化合物。不同产地石上柏挥发油对A549和7721细胞株具有一定的抑制作用,其中抑制A549细胞最高的IC50为46.81 mg·L-1(S6);抑制7721细胞最高的IC50为34.02 mg·L-1(S5)。通过OPLS和Bivariate数据分析,发现5个挥发油成分,即芳樟醇、橙花叔醇、新植二烯、亚油酸甲酯、植酮,与石上柏挥发油抑制肺癌A549细胞和肝癌7721细胞活性显著相关。结论:该方法能快速、有效地建立石上柏挥发油谱效相关关系,可为石上柏挥发油化学成分药理性质的研究提供参考依据。     

尼泊尔酸模中分离到的1个新萘酮类化合物

对尼泊尔酸模根的化学成分进行研究。综合运用多种色谱分离技术对尼泊尔酸模根的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,通过核磁共振和高分辨质谱等波谱学分析方法确定化合物的结构。该研究从尼泊尔酸模根中分离到1个新萘酮类化合物,命名为酸模酮A(1),并采用人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞SGC7901、人乳腺癌细胞MDA-MB-231评价其体外细胞毒性。