通心络对缺血性脑卒中大鼠微血管新生及血流灌注状态的影响

目的观察通心络对缺血性脑卒中大鼠脑组织微血管新生及血流灌注状态的影响。方法利用开颅结扎法阻断大鼠一侧大脑中动脉制作局灶性脑缺血模型（MCAO）,筛选后随机分为假手术组、模型组、通心络大、中、小剂量组和尼莫地平组,给药14天后,免疫组化方法测定MCAO大鼠微血管密度（CD31）表达,激光扫描共聚焦显微镜观察脑组织微血管形态及血流灌注量。结果通心络大、中剂量组,尼莫地平组CD31蛋白阳性分布密集且着色显著,均强于模型组;通心络大、中剂量组,尼莫地平组均能够促进脑缺血皮层区微血管的血流灌注量（P〈0．01,P〈0．05）,其中通心络大剂量组效果显著（P〈0．01）。结论通心络显著增加缺血侧脑组织微血管密度,促进脑缺血后微血管新生,增加缺血脑组织的血流灌注量,发挥一定的血流代偿作用。     

脑心通胶囊对体外模拟脑缺血再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用

 目的观察脑心通胶囊对体外模拟脑缺血再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用。方法建立体外培养大鼠脑微血管内皮细胞模拟脑缺血再灌注损伤模型,模拟脑缺血3h,再灌注1,3,6,12,24,36,48,72h后损伤内皮细胞的活性、死亡率变化以及脑心通胶囊的影响,测定体外培养大鼠脑微血管内皮细胞模拟脑缺血3h,再灌注24h时脑心通胶囊含药血清对细胞裂解液SOD活性、MDA及NO含量的影响。结果体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞在模拟缺血再灌注损伤后,细胞内线粒体活力下降,死亡率升高,脑心通胶囊0.24,0.48g·kg^-1能不同程度改善细胞损伤(P<0.05,P<0.01),明显提高裂解液中SOD活性(P<0.05,P<0.01),降低裂解液中MDA和NO含量(P<0.05,P<0.01),对大鼠脑微血管内皮细胞模拟脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用。结论脑心通胶囊对体外培养大鼠脑微血管内皮细胞模拟脑缺血损伤有保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用有关。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠细胞间黏附分子-1表达的影响

目的：研究电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠ICAM-1表达的影响。方法：采用SD大鼠80只，随机分为正常对照组、假手术组、模型组、电针组，每组20只。采用大脑中动脉线栓法制备MCAO缺血再灌注模型，神经功能障碍评分参照Zea—Longa评分标准；分别应用免疫组化SABC方法检测脑缺血再灌注大鼠缺血脑区微血管内皮细胞ICAM-1的表达和ELISA法检测外周血中sICAM-1含量及电针对其的影响。结果：脑缺血再灌注后，缺血脑区微血管内皮细胞CAM-1表达水平和外周血中sICAM-1含量均增高（模型组与正常组、假手术组比较P〈0．01）；电针治疗后缺血脑区微血管内皮细胞ICM-1表达水平和外周血中sICAM-1含量下调（电针组与模型组比较P〈0．05）。结论：脑缺血再灌注后缺血脑区微血管内皮细胞释放ICAM-1，对脑组织产生炎性损伤；电针治疗可减少ICAM-1的表达，从而发挥脑保护作用。     

通心络对猪急性心肌梗死再灌注后内皮素-1的影响

目的评价急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）再灌注后内皮素-1（endothelin-1,ET-1）的变化及通心络对其影响,探讨无再流的可能机制。方法中华小型猪40只,随机分成模型组,小、中和大剂量通心络治疗组和假手术组,每组8只。冠状动脉结扎3h,松解1h制备AMI再灌注模型。采用放射免疫方法（RIA）测定造模前、后和再灌注后血清及AMI再灌注后心肌组织ET-1含量;逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）的方法观察正常、缺血和无再流区心肌组织ET-1 mRNA的表达。结果（1）与造模前比较,模型组造模后5min时、造模后3h、再灌注5min和1h的血ET-1水平显著升高,且呈递增趋势（均P〈0．01）。而ET-1升高幅度中、大剂量通心络组均低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。（2）与正常区心肌组织比较,模型组和3个通心络组一样,缺血区和无再流区心肌组织中ET-1含量均显著升高（均P〈0．01）,且无再流区ET-1含量升高比缺血区更显著（均P〈0．01）。与模型组比较,中和大剂量通心络组仅缺血区心肌组织中ET-1含量显著降低（P〈0．01）。（3）与正常区心肌组织比较,模型组和通心络各组缺血区心肌组织中ET-1mRNA表达均显著上调（均P〈0．01）,而无再流区心肌组织ET-1mRNA表达均显著下降（均P〈0．01）。与模型组比较,中和大剂量通心络组仅缺血区ET-1mRNA表达上调幅度显著降低（P〈0．01）。结论内皮细胞受损可能是无再流发生的重要机制之一,通心络可能通过保护内皮细胞起到了减少无再流的作用。     

复方水蛭合剂对脑缺血再灌注大鼠脑保护机制的研究

目的：探讨复方水蛭合剂对缺血再灌注大鼠脑的保护机制。方法：检测Wisfar大鼠脑缺血再灌注模型的脑匀浆,血清SOD,Na^ -K^ -ATP酶活性,NO,C3,C4,MDA及检查其病理改变。结果：药物组脑匀浆,血清SOD,脑匀浆Na^ -K^ -ATP酶活性明显高于对照组（P＜0．01或＜0．05）,NO,C3,C4,MDA含量明显低于对照组（P＜0．01或＜0．05）,药物组病理损伤比对照组轻,结论：复方水蛭合剂可提高SOD Na^ -K^ -ATP酶活性,降低脑缺血再灌注大鼠NO,C3,C4,MDA含量,对缺血再灌注大鼠脑有保护作用。     

电针对脑缺血再灌注损伤大鼠血清CK LDH的影响

目的：研究电针对实验性脑缺血再灌注损伤大鼠血清中肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的影响。方法：采用可逆性脑缺血再灌注损伤大鼠模型，通过电针“人中”穴、双侧“中冲”穴及“风府”穴，利用CK及LDH测试盒测试酶活性。结果：缺血再灌注组与空白对照组相比，血清中CK和LDH的含量明显上升，都有显著性的意义（P〈0．05，P〈0．01）。针刺组与缺血再灌注组比较，血清中CK和LDH的活性有明显下降，有显著性的意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论：电针能明显降低脑缺血再灌注损伤大鼠血清CK和LDH的含量。     

清开灵有效组分对体外缺血再灌注损伤大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用

目的:建立脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注损伤模型,研究细胞生存活性和NO含量的变化,探讨清开灵有效组分的保护作用。方法:体外培养大鼠脑微血管内皮细胞,氧糖剥夺法模拟缺血再灌注损伤,MTT法测定细胞生存活性变化并结合硝酸酶还原法测定细胞上清NO含量。结果:模型组细胞OD值明显低于正常组,NO含量明显升高(P<0.01);清开灵各组分都显著降低上清中NO含量,而且胆酸、黄芩苷、栀子苷(12.5μg.mL-1)组和新清开灵注射液(0.03%)明显增高OD值(P<0.05)。结论:清开灵有效组分通过提高细胞生存活性、减少NO分泌而保护体外缺血再灌注损伤的脑微血管内皮细胞。     

加减清营汤对H2O2损伤的血管内皮细胞存活率和SOD活力的影响

目的：观察加减清营汤对H2O2损伤的血管内皮细胞存活率和SOD活力的影响。方法：体外培养内皮细胞ECV304，用380μmol／L H2O2损伤细胞，随机分成正常组、模型组、血清对照组、丹参组、加减清营汤含药血清组。用血清药理学方法给药，继续培养后应用MTT法观察细胞存活率，检测SOD。结果表明：加减清营汤含药血清组MTT的OD值在24h点高于H2O2模型组（P〈0．01），与血清对照组无明显差异（P〉0．05），36h后与血清对照组有明显差异（P〈0．01）。加减清营汤含药血清组SOD值高于模型组、血清对照组（P〈0．01）。结论：加减清营汤可降低H2O2对ECV304的损伤程度，其机理可能与抗氧化作用有关。     

L-Arg和L-NAME对大鼠脑缺血再灌注早期P-选择素及炎症损伤的影响

目的研究一氧化氮（N0）底物L-精氨酸（L—Arg）和NO合酶抑制剂N-亚硝基-L-精氨酸甲酯（L—NAME）对大鼠脑缺血再灌注（I／R）早期P-选择素及炎症损伤的影响。方法建立大鼠I／R模型，并设立假手术组。入选I/R模型大鼠随机分为3组，分别于缺血早期给予L—Arg、L—NAME和等体积生理盐水。测定缺血2h再灌注8h后脑组织NO、P-选择素含量、髓过氧化物酶（MPO）活性及脑梗死体积。结果I／R加L—Arg组再灌注后NO含量明显高于I／R加盐水组（P〈0．01），而P-选择素表达和MPO活性显著降低（P〈0．01），同时脑梗死体积减小（P〈0．05）；而给予L—NAME后减少了脑NO含量（P〈0．01），增加了P-选择素表达（P〈0．05），导致脑缺血再灌注损伤的加重。结论大鼠脑缺血早期使用L—Arg可以通过减低P-选择素的表达对脑缺血再灌注起到保护作用。     

益气复脉汤对脑缺血再灌注损伤大鼠ET及CGRP影响的实验研究

目的：观察益气复脉汤对脑缺血再灌注模型大鼠血浆内皮素（ET）和降钙素基因相关肽（CGRP）含量变化的影响，探讨大鼠脑缺血再灌注损伤的中医药治疗方法。方法：采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型，分别用益气复脉汤高、低剂量组、尼莫地平水溶液予以治疗，然后采用放射免疫法检测血清ET和CGRP含量。结果：模型组脑缺血再灌注大鼠血浆ET含量明显增高，而CGRP下降，治疗后ET值比对照组下降明显（P〈0．01），CGRP值比对照组增高明显（P〈0．05）。结论：益气复脉汤通过降低ET和增高CGRP，能够对脑缺血再灌注损伤脑起保护作用，其疗效优于尼莫地平。     

三七总皂苷对脑缺血再灌注后细胞外基质破坏及氧化应激的影响

目的：研究三七总皂苷（PNS）对脑缺血再灌注后细胞外基质破坏及氧化应激的影响,探讨三七总皂苷抗缺血性脑损伤的机制。方法：将C57BL/6小鼠随机分成假手术组、模型组、PNS组及依达拉奉组,连续给药4天后结扎双侧颈总动脉20min,再灌注24h后检测基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）及组织基质金属蛋白酶抑制物-1（tissue inhibitor of meta11oproteinase-1,TIMP-1）在脑组织的表达;脑缺血20min再灌注60min后测定脑组织丙二醛（Malonaldehyde,MDA）、还原型谷胱甘肽（Glutathione,GSH）、一氧化氮（NitricOxide,NO）含量和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）、一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase,NOS）活性。结果：.脑缺血再灌注后,脑织织MMP-9表达增强,与假手术组比较,差异具有统计学意义（P〈0.01）,而TIMP-1表达无显著性变化;脑缺血再灌注后脑组织MDA含量显著升高,SOD活性和GSH含量显著降低,NO含量和NOS活性均显著升高,与假手术组比较,差异均具有统计学意义（P〈0.01）。PNS可显著升高脑缺血再灌注后TIMP-1蛋白表达,降低MMP-9蛋白表达,与模型组比较,差异均具有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）;PNS可显著降低MDA和NO含量,与模型组比较,差异均具有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）,但对SOD、NOS活性和GSH含量无显著影响。结论：三七总皂苷对脑缺血再灌注后的细胞外基质破坏及氧化应激损伤具有抑制作用。     

黄芪含药血清对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型细胞活性的影响

目的：观察养心汤方中单味中药黄芪不同浓度含药血清对H：O：诱导人脐静脉内皮细胞（HU—VEC）氧化损伤模型细胞增殖的影响及对损伤HUVEC的保护作用,以进一步研究养心汤对冠心痛不稳定型心绞痛的确切作用机制。方法：以浓度为1．03g·mL^-1的黄芪药液灌胃大鼠1周,于末次给药后取血离心制备含药血清。将HUVEC与不同剂量浓度（2％、4％、6％）单味黄芪含药血清、基础培养液、空白血清培养液一起培养,共分5组,培养24h后加入H2O2作用2h,通过MTT法及形态学方法观察不同浓度黄芪含药血清对H2O2损伤HUVEC生长活性变化。结果：黄芪含药血清2％、4％、6％各组细胞OD值均较H2O2模型对照组明显升高,与H2O2模型组相比较均有统计学意义（P〈0．01）,且2％、4％、6％组间比差异有统计学意义（P〈0．05）。形态学方面,黄芪含药血清可使细胞体积变小,间隙变大,但彼此之间存在联系,脱落细胞较少;皱缩的程度明显改善。结论：黄芪含药血清可以促进H2O2损伤人脐静脉内皮细胞的增殖,增强HUVEC抗氧化损伤能力,逆转和改善内皮功能障碍,具有一定剂量依赖关系。     

电针经穴对脑缺血再灌注损伤大鼠血清白细胞介素的影响

目的从免疫调控角度研究电针经穴对脑缺血再灌注损伤大鼠血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素咱（IL-6）的影响。方法采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注损伤模型，将Wistar大鼠随机分为5组，正常组、假手术组、模型组、电针非经穴组和电针经穴组，各组随机分为1d、3d、7d三个时间点，运用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法检测大鼠血清中IL-1β、IL-6含量变化。结果与正常组比较，模型组各指标的测定结果均有显著性差异（P〈0．01，P〈0．05）：在1d、3d时间点，与模型组、电针非经穴组比较，电针经穴组能明显降低模型大鼠血清IL—1β含量（P〈0．05，P〈0．01）：与模型组、电针非经穴组比较，电针经穴组能明显升高模型大鼠血清IL-6含量（P〈0．05，P〈O．01）。结论电针经穴对脑缺血再灌注损伤大鼠血清IL-1B、IL-6的调节具有相对特异性，电针经穴通过调节免疫细胞因子IL-1D、IL-6的含量变化可能是发挥脑缺血再灌注损伤后脑保护作用机制之一。     

缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞因子VEGF mRNA的变化及通心络对其的影响

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）mRNA在大鼠缺血/再灌注损伤（MCAO）脑组织的表达情况及通心络对其的影响。方法采用MCAO模型并予通心络灌胃,应用反转录集合酶链式反应（RT-PCR）检测缺血再灌注损伤后5d、7d、14d、21d、30d神经干细胞增殖分化相关细胞因子VEGF mRNA的变化。结果缺血再灌注模型组VEGF mRNA在不同时间段均有表达,VEGF mRNA在造模后第3天开始表达增强,第5天表达最高;给予通心络处理后第3天缺血侧VEGF mRNA开始表达增强,5d、7d、14d、21d、30d时PCR表达灰度值均高于缺血对照组。结论缺血/再灌注损伤大鼠脑组织细胞因子VEGF mRNA表达增强,通心络胶囊可强化此反应,进而可能诱导神经干细胞增殖。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用及机制的实验研究

目的：探讨三七总皂苷注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：40只Wistar大鼠被随机分为4组：假手术组、缺血再灌注损伤模型组、尼莫地平对照（Nim）组、三七总皂苷注射液处理组（PNS）。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型，对脑水肿和脑梗死进行测量，并采用硫代巴比妥酸盐法测定MDA含量、邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。结果：PNS组与模型组比较，脑组织含水量减少（P〈0．01），脑梗死面积显著减小（P〈0．05）；SOD活力显著升高（P〈0．05），MDA含量显著降低（P〈0．05）。结论：MDA是反映组织损伤程度的物质、SOD是体内重要的内源性保护物质，三七总皂苷注射液可降低缺血脑组织MDA的含量、增加SOD活性而发挥对脑的保护作用。     

黄芪提取物对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠行为学及脑组织中NO含量的影响

目的：探讨黄芪提取物对局灶脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：采用MCAO（大脑中动脉阻塞法）制备局灶性脑缺血动物模型，然后将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪提取物组（AST组，80mg·kg^-1）、尼莫地平组（0．5mg·kg^-1），用药后，观察药物对脑缺血引起的神经功能缺损症状以及脑组织内NO含量的影响。结果：黄芪提取物组不仅能减轻大鼠的神经功能缺损症状；通过治疗后，各治疗组大鼠大脑皮质神经元病变有一定程度的改善。结论：黄芪提取物对脑缺血再灌注损伤有一定保护作用，其作用机制可能与降低NO浓度，达到减少对脑组织的刺激而产生作用。     

苓桂术甘汤预防性给药对心肌缺血再灌注损伤NO、NOS含量的影响

目的：通过苓桂术甘汤预防性给药,观察心肌缺血再灌注损伤家兔血清一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）含量的变化,探讨其防治心肌缺血再灌注损伤的可能机制。方法：40只健康家兔随机分成5组,结扎左冠状动脉前降支制备心肌缺血再灌注损伤模型,再灌注3h后采血并检测血清中NO和NOS含量,取左心室心肌组织做病理切片。结果：各组NO及NOS含量比较,假手术组与空白组间无统计学差异（P＞0.05）;模型组NO及NOS含量明显下降,较假手术组具有统计学差异（P＜0.01）;高剂量组、低剂量组分别与模型组比较,NO及NOS含量均显著升高,具有统计学差异（P＜0.01）,且病理结果显示,高剂量组疗效优于低剂量组.结论：苓桂术甘汤预防性给药对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其可能机制与升高NO和NOS含量有关,且高剂量组疗效显著优于低剂量组。     

人参皂苷Rb1联合亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 观察人参皂苷Rb1联合亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其可能的作用机制.方法 SD大鼠40只,按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、模型组（M组）、人参皂苷Rb1治疗组（G组）（40mg/kg）、亚低温治疗组（H组）,控制肛温在（33±1）℃,缺血后持续2h,亚低温联合人参皂苷Rb1治疗组（HG组）.除Sham组外,其余各组均采用Zea Longa法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型（MCAO模型）,各组于再灌注后24h对其进行神经功能缺损程度评分;评分后麻醉取血,测血清中S100β的变化.断头取脑组织,采用TTC法进行脑梗死体积测定.结果 神经功能缺损程度评分除Sham组之外,其余各组大鼠于再灌注24 h后均出现神经缺失症状.单独使用H或G能够显著改善24 h时间点神经功能,梗死率和降低S100β表达（P＜0.05）,联合应用疗效均明显增强（P＜0.01）,且联合用药与单独应用任一药物相比在各项指标差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 大鼠脑缺血后即刻实施亚低温（33±1）℃或40 mg/kg腹腔注射人参皂苷Rb1均有不同程度的脑保护作用,两者联合应用具有增强作用.