补骨脂化学成分研究

目的:研究补骨脂的化学成分。方法:采用各种柱色谱法分离其成分,运用多种波谱方法鉴定化合物结构。结果:从补骨脂的乙酸乙酯部位中分离得到7个化合物,分别鉴定为:异补骨脂素(1)、补骨脂素(2)、补骨脂查耳酮(3)、4″,5″-去氢异补骨脂定(4)、对羟基苯甲酸甲酯(5)、补骨脂定(6)、补骨脂异黄酮(7)。结论:化合物4、5为首次从该属植物中分离得到。     

植物抗突变剂——黄酮类化合物

通过提取和柱层析的方法从豆科植物补骨脂的种子中分离出补骨脂酚bakuchiol(17)、异补骨脂查耳酮isobavachalcone(7)、甲基补骨脂黄酮abbavachin(6)、新补骨脂异黄酮neobavaisoflavone(5)。用类似方法也从同科植物鹰嘴豆的种子中分离出鹰嘴豆芽素A     

补骨脂化学成分的研究

目的:对补骨脂的化学成分进行研究.方法:运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析等手段进行分离,运用UV、IR、1HNMR、13CNMR、MS等波谱方法进行结构鉴定.结果:共分离鉴定了7个化合物,分别为异补骨脂素(isopsoralen,1),补骨脂素(psoralen,2),补骨脂定(psoralidin,3),补骨脂查耳酮(bavachalcone,4),补骨脂二氢黄酮(bavachin,5),大豆苷(daidzin,6)和尿嘧啶(uracil,7).结论:化合物6和7为首次从补骨脂属植物中分离得到.     

补骨脂化学成分的研究

从补骨脂(Psoralea corylifolia L.)中分得八个化合物,经光谱鉴定为:异补骨脂素(Ⅰ),补骨脂素(Ⅱ),补骨脂定(Ⅲ),补骨脂宁(Ⅳ),补骨脂色烯素(Ⅴ),补骨脂查耳酮(Ⅵ),对羟基苯甲醛(Ⅶ),补骨脂乙素(Ⅷ)。对羟基苯甲醛为首次从该属植物中分得。     

补骨脂种子提取物的粗组分对骨钙化的影响

一年生草本植物补骨脂(Psoralea corylifolia)主要分布于印度至东南亚。其种子在传统医学中作为滋补药,治疗阳萎、月经病药物用于临床。几种已知的化合物如呋喃香豆素(补骨脂素或补骨脂内酯、异补骨脂素或异补骨脂内酯)、黄酮类(补骨脂甲素、补骨脂甲素甲醚、补骨脂查耳酮及其异构体)和补骨脂酸为种子的次生代谢物。种子的非极性组分能增加实验小鼠类固醇骨质疏松的股骨硬度,然而这些组分不能增加骨质。为此进一步研     

HPLC测定复方补骨脂缓释片中补骨脂香豆素类和黄酮类成分的含量

目的:测定复方补骨脂缓释片(补骨脂等)中香豆素和黄酮类成分的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:SUPELCO Discovery C18柱;流动相:甲醇-水梯度洗脱;流速:1 mL/min;λ:320 nm。结果:补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂黄酮、补骨脂甲素、补骨脂宁、补骨脂乙素、补骨脂双氢黄酮甲醚、补骨脂定、补骨脂查耳酮分别在30.4~152.0、26.4~132.0、13.6~66.0、27.2~136.0、31.2~156.0、48.8~244.0、50.4~252.0、36.0~180.0、8.8~44.0μg/mL之间线性关系良好,补骨脂素、补骨脂甲素的回收率分别为98.7%、97.6%。结论:该方法准确可靠,重现性好,适用于复方补骨脂缓释片的质量控制。     

补骨脂化学成分的研究

目的：对补骨脂的化学成分进行研究。方法：运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析等于段进行分离，运用UV、IR、^1H NMR、^13CNMR、MS等波谱方法进行结构鉴定。结果：共分离鉴定了7个化合物，分别为异补骨脂素(isopsoralen，1)，补骨脂素(psoralen，2)，补骨脂定(psoralidin，3)，补骨脂查耳酮(bavachalcone，4)，补骨脂二氢黄酮(bavachin，5)，大豆苷(daidzin，6)和尿嘧啶(uracil，7)。结论：化合物6和7为首次从补骨脂属植物中分离得到。     

星点设计-效应面法优化补骨脂炮制工艺

目的:首次采用星点设计-效应面法(central composite design,CCD)优化补骨脂炮制工艺.方法:以具有抗骨质疏松活性的成分补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂甲素(补骨脂二氢黄酮)、补骨脂乙素(异补骨脂查耳酮)的总含量为指标.以闷润时间、炒炙时间、炒炙温度为考察因素,采用星点设计-效应面法优选炮制条件,并进行预测分析.结果:最优炮制工艺为闷润10.3h,炒炙12 min,炒炙温度为170℃.结论:以抗OP(Osteoporosis)成分为炮制指标,采用星点设计-效应面法可优选得到最佳补骨脂的盐炙工艺,并且预测性良好.     

HPLC法同时测定补骨脂药材中6种成分的含量

目的:建立同时测定补骨脂药材中6种成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法同时分析补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂异黄酮、补骨脂定和补骨脂查耳酮6种成分。用AlltechC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,1%冰醋酸溶液和乙腈为流动相,采用梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长245nm。结果:6种成分线性关系良好,r>0.9991,平均加样回收率均大于95.0%,RSD均小于3.0%。结论:该方法适用于补骨脂药材中6种成分的同时测定,可作为药材质量的综合评价方法。     

一测多评法测定补骨脂中不同类型成分的含量

目的:探讨一测多评法在补骨脂质量评价中的应用.方法:以补骨脂药材为研究对象,选取补骨脂素为指标,确定该成分与其他药效成分——异补骨脂素、补骨脂甲素(补骨脂二氢黄酮)、补骨脂乙素(异补骨脂查耳酮)间的校对因子.考察一测多评法和外标法测得结果的差异性,并研究不同仪器及色谱柱对相对校正因子的影响.结果:补骨脂素对异补骨脂素的相对校正因子、补骨脂素对补骨脂甲素的相对校正因子及补骨脂素对补骨脂乙素的相对校正因子分别为0.8630(1.17％),0.299 6(0.86％),0.201 3(0.37％);一测多评法和外标法测得的数据间RSD均＜3％;不同仪器及色谱柱所得的相对校正因子无显著性差异.结论:一测多评法用于补骨脂的质量评价是可行的.     

补骨脂对初老小鼠体内雌孕激素水平作用实验研究

目的:探讨补骨脂对初老小鼠体内雌孕激素水平作用实验研究。方法:采用12月龄的初老化小鼠分成6组:初老组、倍美力组、补骨脂大剂量组、补骨脂中剂量组、补骨脂小剂量组和青年对照组。每天灌胃给药1次,七天休息一天,连续1个月。通过观察小鼠血清中E2、P、LH、FSH含量以及卵巢、子宫系数的变化,从而探讨补骨脂对初老小鼠体内雌孕激素水平的影响。结果:各组小鼠体重变化不大,倍美力组的子宫系数最高。初老组卵巢系数略高于补骨脂大剂量组和中剂量组。补骨脂中剂量组的E2含量较高,倍美力组和补骨脂小剂量组的E2值较初老组有显著意义的上升。补骨脂大剂量组小鼠血清的P含量最高。倍美力组、补骨脂中剂量组和小剂量组FSH含量均较青年组减少,并有显著差异;除初老组外,其他各组血清中LH含量均较青年组升高。初老组的FSH/LH值最大。结论:补骨脂可改善初老小鼠体内雌孕激素水平,中剂量组效果最好。     

反相高效液相法测定温胃舒片中补骨脂素和异补骨脂素的含量

目的 建立一种测定温胃舒片中补骨脂素和异补骨脂素含量的反相高效液相法.方法 采用Kromasil C18柱,以甲醇-水(5545)为流动相,紫外检测波长246 nm,流速1 ml·min-1.结果 在所使用的色谱条件下,补骨脂素和异补骨脂素出峰位置未见干扰,补骨脂素和异补骨脂素分别在5.06～30.36 μg·ml-1和5.02～30.12 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9).温胃舒片中补骨脂素和异补骨脂素的平均加样回收率分别为97.64%和99.42%,相对标准偏差分别为1.16%(n=6)和0.86%(n=6).结论 该法可信度高,操作简便,重现性好,可用于温胃舒片生产上的质量控制.     

补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素含量与其果实饱满程度的相关性研究

目的：研究补骨脂药材中补骨脂素、异补骨脂素的含量与其饱满程度的相关性。方法：同批药材根据饱满程度不同进行分组,各组分别测定补骨脂素与异补骨脂素的含量。结果：饱满样品的含量明显低于干瘪样品的含量。结论：补骨脂中补骨脂素及异补骨脂素的含量与其外观饱满程度明显有关。     

补骨脂素对人脐静脉内皮细胞活力及TNF-α诱导组织因子产生的影响

目的:通过补骨脂素对TNFα诱导血管内皮细胞组织因子的影响,以明确补骨脂素在血栓形成过程中的作用,探讨补骨脂素对心血管系统的调节作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein cells,HUVECs),采用MTT方法,检测补骨脂素对HUVECs细胞活力的影响;以肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激HU-VECs,利用ELISA方法检测补骨脂对TNF-α诱导HUVECs组织因子(Tissue Factor,TF)水平的影响。结果:补骨脂素可以增强正常HUVECs活力,最大浓度约为10-7M。在10-7、10-8M浓度下补骨脂素对TNF-α诱导HUVECs分泌TF呈现显著抑制作用(P<0.01和P<0.05)。结论:补骨脂素能够降低TNFα诱导HUVECs的TF释放,降低血栓形成风险。     

合川补骨脂药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立补骨脂药材的指纹图谱,从整体上控制补骨脂药材的质量。方法:采用HPLC法,用二级管阵列进行检测,以补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂黄酮类成分分离效果为评价指标,筛选流动相及检测波长。结果:以70%乙醇回流提取1h,用乙腈-0.1%乙酸梯度洗脱效果较佳,检测波长为315nm。补骨脂药材在组分上相似度较好。结论:经统计分析,该法稳定,重现性好,简便可行,适用于补骨脂药材的质量控制。     

莪术油对肺腺癌A549细胞周期及组织蛋白酶K表达的影响

目的 :探讨莪术油对A549细胞增殖抑制作用及组织蛋白酶K表达的影响。 方法 : MTT法观察莪术油对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期阻滞;Western blot检测组织蛋白酶K的表达情况。 结果: 莪术油作用后①MTT法结果显示莪术油在60 mg ·L^-1~200 mg ·L^-1对A549细胞增殖有抑制作用, IC50随作用时间的延长显著前移。②流式细胞术结果出现凋亡峰,与未处理组细胞相比,给药组细胞G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。③Western blot结果显示,莪术油处理细胞24 h后,组织蛋白酶K表达明显上调,100 mg ·L^-1达最大值。 结论 : 莪术油能抑制肺腺癌A549细胞增殖,阻滞细胞周期的作用,其机制可能与上调组织蛋白酶K表达水平有关。     

中药活性成分逆转K562/ADM耐药性聚类模糊研究

 目的在具有耐药逆转作用的数种中药成分中进行聚类分组和优选排序。方法选用补骨脂素、苦参碱、人参皂苷Rb1、槲皮素、姜黄素、贝母碱、川芎嗪、大黄酸8种中药成分,MTT比色法测定药物对K562/ADM细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪测定细胞内化疗药物ADM荧光强度,测定细胞P糖蛋白表达;就测定的相关数据,通过多元统计中的聚类分析方法进行药物分组,以及采用模糊理论中的集值统计方法进行优选排序。结果8种药物逆转倍数在4.4～15.4之间,K562/ADM细胞中ADM浓度在(8.53±3.51)～(26.17±9.21),K562/ADM细胞P-gp表达率在(26.91±12.19)～(66.91±12.29);8种药物之间的相似性聚类分析成4组:补骨脂素、人参皂苷Rb1、槲皮素3种药物为第1组,苦参碱、贝母碱、姜黄素3种药物为第2组,大黄酸为第3组,川芎嗪为第4组。集值统计优选药效次序为:第4组、第3组、第1组、第2组。结论根据药物间相关性可用聚类分析分组,集值统计方法可以结合药效结果的区间表示进行定量计算,进而得出组间排序。     

补骨脂素对淀粉样蛋白损伤海马神经元胆碱能系统的保护作用研究

目的:探讨补骨脂素对淀粉样蛋白(Aβ)诱导海马神经元胆碱能系统损伤的保护作用。方法:应用Aβ损伤补骨脂素预处理的体外培养海马神经元,分别测定海马神经元乙酰胆碱含量,乙酰胆碱酯酶和胆碱乙酰基转移酶活性。结果:补骨脂素可以提高乙酰胆碱酯酶活性和乙酰胆碱水平,对乙酰胆碱酯酶作用不明显。结论:补骨脂素对损伤神经元Aβ损伤海马神经元胆碱能系统有保护作用。     

3种补肾中药有效成分对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的调控作用

目的:观察3种补肾代表中药淫羊藿、补骨脂、女贞子各自有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸对去卵巢3个月大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用。方法:40只Sprague Dawley(SD)雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组(后3组合称治疗组)。模型组和治疗组切除双侧卵巢,正常对照组切除卵巢周围部分脂肪组织。治疗组于造模第2d开始按20mg/kg给予对应药物每日1次灌胃,连续12周。造模后第4周开始称量体质量,每周1次。造模后12周大鼠处死,取第4腰椎进行micro-CT扫描,评价骨量改变情况。采用全骨髓贴壁培养法培养原代BMSCs,于取材后第7d干细胞基因芯片技术检测mRNA表达。结果:造模后大鼠体质量增加,补骨脂素能减少增加幅度,而淫羊藿苷和齐墩果酸没有明显作用。Micro-CT显示,去卵巢12周后,模型组与正常对照组之间,骨形态计量学参数骨体积与组织体积之比BV/TV,骨小梁数目Tb.N,骨小梁厚度Tb.Th明显减少,骨小梁空间距离Tb.Sp明显增加。淫羊藿苷和齐墩果酸显著增加Tb.Th,对其他参数也有改善的趋势。补骨脂素有改善的趋势,但没有统计学差异。大鼠全基因表达谱显示在被检测的26 420个基因中,模型组比正常对照组下调2倍的基因有4 193个,约占15.87%,淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸比模型组上调2倍的基因分别有3 226,1 701和3 232个。模型组比正常对照组上调2倍的基因有5 015个,约占18.98%,3个有效成分比模型组下调2倍的基因分别有3 549,1 660和3 545个。基因功能分类分析显示3个有效成分共同改变的基因涉及的功能包括:细胞成分中的初级内体、分子功能相关的磷酸跨膜转运蛋白活性、GDP结合、内肽酶活性、酶调节剂活性、谷氨酸受体结合、转移酶活性、5-羟色胺受体活性、血清素结合;细胞外基质、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性、氨基酸结合、RNA甲基转移酶活性、磷蛋白磷酸激酶抑制剂活性等。结论:补肾中药可能从增加BMSCs细胞外基质、促进生长因子相关信号通路、增加蛋白质合成等方面发挥促进BMSCs成骨分化的作用,最终实现治疗骨质疏松的疗效,但其确切的机制还有待深入研究。     

姜黄素抗C_(57BL/6)小鼠肺纤维化与CathepsinK相关性研究

目的:探讨姜黄素抗C57BL/6小鼠肺纤维化分子机制。方法:博来霉素气管注射造小鼠肺纤维化模型,随机分组:对照组(气管内注入0.1mL生理盐水),模型组(气管内注入0.025U博来霉素),姜黄素组(气管内注入0.025U博来霉素);造模第2天,对照组和模型组给予生理盐水灌胃,姜黄素组给予200mg/kg/d姜黄素灌胃,分别于造模后第7、14、28天取材。采用Mallory染色观察肺组织胶原表达变化;应用免疫组化检测Cathepsin K蛋白的表达,经图像分析各组之间的差异;在免疫组化的基础上,Re-al Time RT-PCR,Western-blot进一步验证Cathepsin K mRNA及蛋白在各组之间表达的差异。结果:Mallory染色结果显示姜黄素组、模型组与对照组比较胶原表达都比对照组高,姜黄素组与模型组比较胶原表达减少;姜黄素组、模型组与对照组比较,Cathepsin K表达都有不同程度增加;但姜黄素组与模型组比较Cathepsin K蛋白表达显著增加,其中第14天(P=0.006);第7天(P=0.015);28天(P=0.027);Real Time RT-PCR分析CathepsinK mRNA表达,姜黄素组与模型组进行比较发现,姜黄素组比模型组明显增加,第7天(P=0.047),第14天(P=0.001),第28天增加不明显(P=0.053)。结论:姜黄素通过增加Cathepsin K的表达从而降解胶原而实现抗纤维化作用。