HPLC法测定白术中白术内酯Ⅱ的含量

目的研究白术内酯Ⅱ的高效液相色谱测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,对白术中白术内酯Ⅱ进行含量测定,色谱柱:Kromasil-C18柱(4.6×250 mm,5μm);流动相:甲醇-水(80∶20);流速:1.0 mL/min;紫外检测波长:276 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果测定了22种不同白术样品中白术内酯Ⅱ的含量,平均加样回收率为99.8%,RSD为1.2%。结论本法简单、灵敏、结果可靠,可作为白术质量控制的定量方法。     

单孔腹腔镜与传统腹腔镜胆囊切除术治疗效果比较

目的 探讨单孔腹腔镜(SILC)与传统腹腔镜两种术式的安全性和可行性.方法 选取胆囊疾病患者54例随机分为SILC组(n=26)和三通道腹腔镜胆囊切除术(3PLC)组(n=28).收集患者年龄、体质量、身高、体质量指数(BMI)、手术时间、疼痛分数、中途转换手术率、切口满意度评分等临床资料,并进行了12个月的随访.结果 两组患者在性别、年龄、体质量、身高和BMI方面比较差异无统计学意义(P＞0.05).SILC组手术时间长于3PLC组[(56.9 ±15.8) min比(35.2±8.7) min,P＜0.01].应用相同的麻醉药品后SILC组在术后第1天较3PLC组疼痛分数更高,总的疼痛分数两者相似,差异无统计学意义(P＞0.05).SILC组患者术后伤口并发症发生率更高,但术后疝发生率相同.SILC组切口满意度评分分数更高[(11.7±0.8)分比(10.1±1.2)分,P＜0.05].结论 SILC较3PLC治疗单纯胆道疾病安全、有效.     

广地龙特异性引物序列的设计及其混伪品的鉴别

目的?通过设计特异性引物来鉴定广地龙及其混伪品。方法?提取广地龙及其混伪品的DNA。利用通用引物COⅠ序列对广地龙及其混伪品进行PCR扩增,并对扩增产物进行双向测序。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,找出广地龙的变异位点,设计出广地龙的特异性引物,用于广地龙及其混伪品的鉴定。对PCR反应条件退火温度、循环次数、DNA模板量和Taq酶用量进行适应性考察。结果?COⅠ序列不存在特异性,不同物种、不同品种的动物药均可扩增出750?bp大小的片段,无法鉴定广地龙及其混伪品。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,设计出广地龙的特异性引物PA-f/PA-r。在建立的PCR反应体系中,只有广地龙可以获得574?bp的基因片段,其他混伪品未扩增出相应条带。结论?设计的广地龙特异性引物可以准确、成功鉴别广地龙,与其他混伪品区分,为广地龙的品种鉴别提供了有效的方法。      

UFLC-MS/MS法分析蜈蚣中3种多肽成分以及在蜈蚣鉴别中的应用

  目的  建立超高效液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)法分析蜈蚣中3种酶解多肽成分TD1(LEEDLERSEERL)、TD2(EEKDKALQNAEGEVAAL)、TD3(MILPTGASSF), 比较不同品种蜈蚣中肽类成分的差异, 寻找蜈蚣特异性多肽, 用于蜈蚣的鉴别。  方法  3种肽类成分的UFLC-MS/MS法, 色谱柱为XSelect HSS T₃(4.6 mm×150 mm, 3.5 μm); 流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱。采用三重四极杆质谱检测器, 电喷雾离子化(ESI), 正离子模式下多反应监测(MRM)进行信号采集。样品采用正交试验方法, 对蛋白提取方法进行优化, 最终确定提取方法为蛋白裂解液超声处理60 min。得到的蜈蚣蛋白提取溶液经胃蛋白酶酶解并脱盐后, 注入液质联用仪分析。测定了20批蜈蚣及8批其他动物药中3种肽类成分, 并对结果进行比较。  结果  在地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎中未检出TD2和TD3, TD1与TD2在少棘巨蜈蚣与哈氏蜈蚣、墨江蜈蚣中存在较大差异, TD3在少棘巨蜈蚣与黑头蜈蚣、多棘蜈蚣中有较大差异。  结论  该方法可用于区分少棘巨蜈蚣与地龙、僵蚕、水蛭、土鳖虫和全蝎, 同时通过比较3种肽段的差异, 区分药典品种少棘巨蜈蚣和4种常见非药典品种蜈蚣, 为蜈蚣的质量评价和基础研究提供参考。      

不同来源莪术中姜黄素类成分的含量差异研究

目的：用高效液相色谱法测定不同来源的莪术中3种姜黄素成分,比较姜黄素（cur_cumin,Ⅰ）、去甲氧基姜黄素（demethoxycurcumin,Ⅱ）和双去甲氧基姜黄素（bisdemethoxycurcum_in,Ⅲ）的含量差异。方法：采用Kromasil色谱柱,流动相为乙腈-水（0.5%冰乙酸）,流速为1 mL· min-1,检测波长为425 nm。结果：姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的线性范围分别为0.04~0.16μg （r=0.9991）、0.037~0.150μg （r=0.9990）、0.00015~0.00062μg （r=0.9996）;平均回收率（n=9）分别为103.32%、100.32%、100.06%。结论：不同来源的莪术中姜黄素类成分的含量存在着明显的差异。     

加拿大一枝黄花不同部位总黄酮及芦丁的含量测定

目的建立加拿大一枝黄花不同部位中总黄酮及芦丁含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法（UV）测定样品中总黄酮含量、高效液相法（HPLC）测定样品中芦丁含量。结论测定了各产地加拿大一枝黄花不同部位中总黄酮及芦丁含量，本方法操作简便，结果可靠，重现性好。     

单吻合器在直肠癌超低位前切除术中的应用

目的:探讨单吻合器在直肠癌超低位前切除术(ULAR)中的临床应用效果。方法:对44例单吻合器直肠癌超低位吻合术的临床资料进行回顾性分析。结果:所有病例均顺利接受手术,吻合口距肛缘位置为2.5～4cm,术后肛门控便功能良好,吻合口漏2例(4.5%),无吻合口出血及狭窄,局部复发3例(6.8%),1、3年生存率分别为97.44%、79.48%。结论:单吻合器同样可以完成直肠癌超低位吻合术,且手术效果及肛门功能良好,费用较低。熟练、正确地掌握单吻合器技术操作及提高全直肠系膜切除的手术技巧是手术成败的关键。     

反相高效液相法测定滋肾利肝颗粒中芍药苷的含量

目的建立一种测定滋肾利肝颗粒中芍药苷含量的反相高效液相法。方法采用Krom asil C18柱,以甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(32∶68)为流动相,紫外检测波长230 nm,流速1 m l.m in-1。结果在所使用的色谱条件下,芍药苷出峰位置未见干扰,芍药苷在24.28~121.40μg.m l-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9)。滋肾利肝颗粒中芍药苷的平均加样回收率为98.32%,相对标准偏差为1.34%(n=9)。结论该法操作简便,重现性好,可作为滋肾利肝颗粒生产上质量控制的一种可信工具。     

白术的炮制机理及其倍半萜成分转化的研究

目的：对白术的炮制机理及其炮制过程中倍半萜类成分的转变进行研究。方法：对白术不同炮制品中白术内酯Ⅰ～Ⅲ的含量进行比较,用化学反应验证白术倍半萜类成分的转化。结果：炒制后白术内酯Ⅰ,Ⅲ含量均明显升高；温度过高时白术内酯Ⅲ的含量有所下降。苍术酮氧化后生成白术内酯Ⅱ,Ⅲ及双白术内酯；白术内酯Ⅲ加热后脱水生成白术内酯Ⅱ。结论：白术炮制过程中苍术酮可转变成白术内酯类成分,不同炮制程度会影响各成分的含量。