择时艾灸对实验性RA大鼠足肿胀度、血清TNF-α含量及其昼夜节律的影响

目的:研究不同时辰艾灸治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)对其主要炎性细胞因子——肿瘤坏死因子-α(TNF-α)血清浓度的影响及其昼夜节律的调控机制。方法:将96只Sprague-Dawley(SD)成年大鼠随机分为空白对照组(空白组)、RA模型组(模型组)、卯时艾灸治疗组(卯时组)、酉时艾灸治疗组(酉时组),每组24只,雌雄各半。各组又按4个取材时间点分为0AM组、6AM组、12N组、6PM组,每组6只大鼠。各组大鼠全程予以12 h/12 h的光暗授予。除空白组外,各组大鼠予以右后足垫部皮下注射弗氏完全佐剂(FCA)塑造RA模型。卯时组、酉时组大鼠分别在对应的时辰(卯时组5:00–7:00,酉时组17:00–19:00)接受"肾俞""足三里"穴麦粒灸治疗,双侧交替,每日1次,6次为一疗程,疗程之间休息1 d,共治疗3个疗程;其余组大鼠同法固定,但不治疗。造模前、造模后以及治疗结束后分别测量右足足容积,治疗结束后分别在各组相应时间点活体取血,采用ELISA法检测血清TNF-α含量。采用SPSS 21.0统计软件包以及Halberg余弦法统计分析实验数据。结果:干预后,与空白组相比,模型组、卯时组、酉时组足肿胀度显著升高(均P0.01);与模型组相比,卯时组、酉时组足肿胀度显著降低(均P0.01)。与空白组相比,模型组、卯时组血清TNF-α平均含量显著升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,卯时组、酉时组血清TNF-α平均含量显著降低(均P0.05)。各组血清TNF-α均存在昼夜节律性(均P0.05),且峰值出现在暗置时相;与空白组相比,模型组中值明显升高(P0.05),峰相位后移,振幅增高(P0.05);与模型组相比,卯时组和酉时组中值显著下降(均P0.05),峰相位前移,振幅降低(均P0.05)。结论:艾灸可显著降低实验性RA大鼠血清TNF-α含量从而缓解实验性RA大鼠的足肿胀度。艾灸可良性调整RA大鼠TNF-α的昼夜节律从而节律性发挥其抑制TNF-α分泌合成的效应,卯时与酉时艾灸未见疗效差异。     

加味四逆散对身心应激模型大鼠胃肠组织GASR、VIPR2mRNA表达的影响

目的:建立慢性应激性胃溃疡大鼠模型,探讨加味四逆散对应激模型大鼠胃液pH、胃黏膜溃疡指数(UI)、胃粘膜病理形态及胃组织胃泌素受体(GASR)和空肠组织血管活性肠肽II型受体(VIPR2)mRNA表达的影响,阐明加味四逆散干预应激性胃粘膜损伤的机制。方法:将Wistar大鼠60只随机分为正常对照组、模型对照组、奥美拉唑组、加味四逆散高、中、低剂量组,每组10只,采用慢性心理性应激方法建立应激性胃溃疡大鼠模型,经加味四逆散等干预后,检测胃液pH并评估胃黏膜溃疡指数(UI),常规HE染色镜下观察胃粘膜形态学改变,RT-PCR法检测胃组织GASR、空肠组织VIPR2mR-NA表达的变化。结果:与模型组比较,加味四逆散方各剂量组、奥美拉唑组大鼠胃液pH不同程度升高,而胃粘膜溃疡指数明显减小,差异均具有显著性意义(P<0.05~0.01);与奥美拉唑组比较,加味四逆散中、高剂量组胃液pH无显著性差异(P>0.05),而胃粘膜溃疡指数明显减小,差异有显著性意义(P<0.05~0.01);胃粘膜HE染色结果显示模型组大鼠胃粘膜弥漫出血、溃疡糜烂,较正常组损伤明显,加味四逆散高、中、低剂量组大鼠胃粘膜损伤较模型组不同程度减轻。正常组及各治疗组胃组织GASRmR-NA表达均较模型组升高,空肠组织VIPR2mRNA表达则降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01),加味四逆散中、高剂量组胃组织GASRmRNA表达均较奥美拉唑组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01),中药高剂量组空肠组织VIPR2mRNA表达较奥美拉唑组则明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:加味四逆散可显著减轻应激性胃粘膜损伤程度,抑制应激所致胃酸分泌,并可改善胃组织GASR、空肠组织VIPR2mRNA表达。     

加味四逆散对身心应激模型大鼠胃粘膜细胞超微结构及下丘脑环核苷酸系统的影响

目的 建立慢性身心应激胃溃疡大鼠模型,探讨加味四逆散对模型大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)、粘膜超微结构、下丘脑环核苷酸系统(cAMP、cGMP)的影响,阐明加味四逆散干预应激性胃粘膜损伤的机制.方法 大鼠随机分为正常组,模型组,奥美拉唑组,加味四逆散高,中,低剂量组,采用慢性身心应激方法建立应激性胃溃疡大鼠模型,经加味四逆散等干预后评估胃粘膜溃疡指数(UI),透射电镜法观察腺胃区胃粘膜组织细胞及细胞间连接的超微结构改变,放射免疫法检测大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量变化.结果 与模型组比较,各用药组及正常组胃粘膜溃疡指数明显减小(P＜0.05或P＜0.01).与奥美拉唑组比较,加味四逆散高,中剂量组胃粘膜溃疡指数明显减小(P＜ 0.05或P＜0.01);电镜观察显示正常组大鼠胃粘膜上皮细胞间连接紧凑,胞膜完整,细胞器均匀分布,且形态正常,胞核形态及大小正常;模型组大鼠胃粘膜上皮细胞间连接松解,胞膜结构部分缺失,胞质中细胞器崩解,内质网扩张,线粒体肿胀,胞核形态极不规则,染色质明显边集、浓缩或均一化分布;其余治疗组均较模型组不同程度好转.与模型组比较,各治疗组及正常组大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量显著降低,差异有显著性(P ＜0.05～0.01).结论 加味四逆散可显著减轻应激性胃粘膜损伤程度,显著改善模型大鼠胃粘膜组织细胞的微观病理形态,可通过影响环核苷酸系统对慢性心理应激反应进行调控,进而改善胃肠功能.     

不同时点给药对5／6肾切除大鼠肾组织低氧诱导因子的影响

目的：观察不同时段给药对肾组织低氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）的影响。方法：建立5／6肾大部切除大鼠模型。随机分为6组，每组20只。治疗组大鼠在造模后次日分别于卯时及酉时两个不同时段予苯那普利灌胃。模型对照组及假手术组分别以等量生理盐水灌胃。检测各组大鼠肾功能；卯时酉时尿蛋白排泄率、24小时尿蛋白定量；免疫组化法检测肾组织HIF—1α及VEGF表达；RT—PCR法检测HIF—α及VEGF mRNA的表达；Westem—blot法检测HIF-1α及VEGF蛋白质的表达。结果：造模后大鼠SCr、BUN水平明显上升，模型对照组和假手术组的卯时及酉时SCr、BUN水平无明显差异；自第4周开始苯那普利卯时组SCr、BUN水平低于酉时组，苯那普利卯时组24小时尿蛋白定量及尿蛋白排泄率略高于酉时组，但没有统计学差异。免疫组化、RT—PCR及Western—blot检测显示苯那普利卯时组与酉时组HIF-1α的表达有明显差异。结论：不同时点给予苯那普利对HIF—1α表达的调节作用不同，对肾功能影响不同，早期肾衰病人酉时给药为最佳时机。     

加味四逆散对慢性应激模型大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

目的:观察加味四逆散对慢性应激模型大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响。方法:选择OPEN-FIELD法评分相近的40只成年SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组、加味四逆散小剂量组和加味四逆散大剂量组,每组各8只。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠慢性应激抑郁状态。以HPLC-EC法对照研究大鼠下丘脑单胺类神经递质的改变。结果:与对照组比,模型组大鼠下丘脑NE升高,5-HIAA和5-HT降低。与模型组比,氟西汀组、加味四逆散组NE降低而5-HIAA和5-HT升高。结论:慢性应激模型大鼠下丘脑单胺能神经功能活动失常,以去甲肾上腺素的升高和5-羟色胺的下降为主,加味四逆散的作用机理可能与平衡下丘脑单胺能神经的功能状态有关。     

蛇床子催眠活性组分对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠海马钟基因与氨基酸类神经递质表达的影响

目的观察蛇床子催眠活性组分(SCZ)对失眠大鼠海马神经递质及钟基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法采用ip对氯苯丙氨酸(PCPA)建立大鼠失眠模型,ig给予低(25 g/kg)、中(50 g/kg)、高(100 g/kg)剂量SCZ,并设阳性对照(地西泮)组,给药3 d,免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)受体蛋白的表达;高效液相色谱法和免疫组化法检测大鼠海马GABA和Glu含量的变化;实时荧光定量PCR检测大鼠海马Clock、Bmal1、Cry1、Cry2、Per1、Per2、Per3等生物钟基因的表达水平。结果免疫组化结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著升高,Glu表达水平显著降低(P0.01)。HPLC结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马组织Glu表达水平显著降低(P0.05),SCZ高、低剂量组大鼠GABA表达水平显著升高(P0.01)。生物钟基因表达水平检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著升高(P0.05),Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组比较,SCZ中剂量组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著降低(P0.01);SCZ高剂量组大鼠Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著增高(P0.05、0.01),SCZ低剂量组大鼠Per1基因表达水平显著增高(P0.01)。结论蛇床子催眠活性组分通过降低海马Clock、Bmal1表达,提高Cry1、Per1、Per2基因的表达水平,增加抑制性、减少兴奋性氨基酸类神经递质的表达,从而调节睡眠-觉醒周期,达到治疗失眠的效果。     

加味四逆散对肠易激综合征大鼠不同脑区核团c-fos蛋白表达的影响

目的:观察加味四逆散对肠易激综合征大鼠不同脑区核团c-fos蛋白表达的影响。方法:采用束缚制动加灌服番泻叶改良的方法制备肠易激综合征大鼠模型,将24只W istar大鼠随机分成正常组、模型对照组、加味四逆散组和得舒特组,用免疫组织化学法检测大鼠大脑皮质和纹状体c-fos阳性神经元的变化。结果:加味四逆散可明显降低大鼠脑皮质和纹状体c-fos阳性神经元的数目。结论:加味四逆散能够降低c-fos在IBS大鼠不同脑区核团的蛋白表达,干预脑肠轴紊乱的调控机制。     

加味四逆散对慢性心理应激抑郁症大鼠海马损伤的保护作用

目的观察加味四逆散对慢性心理应激抑郁症大鼠海马损伤的保护作用。方法采用多种应激源制作慢性心理应激抑郁症大鼠模型。30只Wistar大鼠分为正常组、模型组、中药组。观察各组大鼠海马神经元凋亡率，测定海马脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体TrkB蛋白含量及神经元内Ca^2＋浓度。结果模型组大鼠海马神经元凋亡率较正常组增加，海马BDNF及其受体TrkB蛋白表达降低，神经元内Ca^2＋浓度升高（P〈0．05或P〈0．01）。中药组可降低海马神经元凋亡率，增加BDNF与TrkB蛋白表达，降低神经元内Ca^2＋浓度。结论加味四逆散可能通过上调海马BDNF的表达，降低胞内Ca^2＋，实现抗抑郁的作用。     

四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的实验研究

目的研究调和肝脾之四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法实验设正常组、模型1组、模型2组、四逆散组。除正常组外其余各组用电刺激法制备慢性应激动物模型,并给予相应的处理。观察大鼠行为学指标的变化,测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量,同时检测大鼠下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA含量变化。结果四逆散能改善大鼠行为表现,降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量及下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA的过度表达。结论四逆散可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

加味四逆散对大鼠肝星状细胞株HSC-T6JAK2-STAT3信号通路的影响

目的观察加味四逆散对大鼠肝星状细胞株HSC-T6 JAK2-STAT3信号通路的影响。方法正常大鼠灌胃加味四逆散药物煎剂7 d,制备含药血清;应用蛋白印迹试验检测加味四逆散对100 mg/L瘦素刺激HSC-T6中JAK2、STAT3蛋白的表达水平。结果加味四逆散作用6 h后,JAK2、STAT3蛋白表达水平开始降低,且JAK2降低较为明显,24 h STAT3降低最明显。结论加味四逆散能降低增殖后的肝星状细胞JAK2、STAT3蛋白表达,并阻断JAK2-STAT3经典通路的信号转导作用,这可能是加味四逆散抗肝纤维化的作用之一。     

针灸治疗昼夜节律失调性睡眠障碍研究进展

简要介绍了近年来针灸治疗昼夜节律失调性睡眠障碍的临床和实验研究概况,分析了针灸治疗的特点、临床研究的不足之处以及针灸作为非光性授时因子调整昼夜节律失调性睡眠障碍的可能机制,指出了今后该领域研究的方向和思路。     

失眠颗粒对昼夜节律紊乱性睡眠障碍的调节作用研究

目的:探讨失眠颗粒对昼夜节律紊乱性睡眠障碍的调节作用。方法:选取符合西医昼夜节律失调性睡眠障碍诊断的医护人员60名,随机分为对照组和治疗组各30例。对照组和治疗组在给予简单的认知行为疗法及睡眠指导常规治疗,在此基础上对照组口服安慰剂,治疗组口服失眠颗粒。观察两组治疗前后ESS(爱泼沃思睡量表)、ISI(失眠严重指数量表)、PSQI评分(匹兹堡睡眠质量指数)及中医症状评分等指标。结果:治疗组总有效率为93.33%高于对照组的83.33%,两组间治疗后差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者ESS评分、ISI评分、PSQI评分均显著降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的中医症状评分降低(P<0.05);治疗后治疗组症状评分大多低于对照组(P<0.05)。结论 :对于昼夜节律紊乱性睡眠障碍患者治疗疗效显著,具有疏肝清热、养心安神的功效,治疗过程中不良反应少,安全性能高。     

不同光照条件对果蝇昼夜节律与睡眠时间的影响

目的 探讨环境中光照变化对果蝇昼夜节律和24h睡眠时间的影响.方法 收集8h内羽化未交配的果蝇.在CO2小气流麻醉后,将果蝇按照简单随机抽象的方法分为正常光照组、昼夜颠倒组、24 h光照组和24 h黑暗组,雌雄各4组,32只/组.分别采用不同光照条件对果蝇生活环境进行干预,以果蝇活动监测系统(DAMS)监测器和数据采集系统评价,观察比较不同光照条件下果蝇昼夜节律和睡眠时间的变化.结果 与正常光照组比较,昼夜颠倒组果蝇昼夜节律明显颠倒；24h光照组果蝇活动次数明显增多,昼夜节律的周期性变化减弱；24h黑暗组果蝇昼夜节律尚在,但白天活动频繁,19:00的活动高峰消失.结论 果蝇昼夜节律和睡眠时间随光照条件的改变而改变.     

高钠饮食对内皮源性血管活性物质昼夜节律的影响

目的观察高钠饮食下大鼠血钠及血浆和心肌组织中血管活性物质内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及eNOSmRNA昼夜节律变化,探讨高钠饮食引起血压昼夜节律异常的分子生物学机制。方法将64只SD大鼠随机分为2组,高钠组32只饮用含0.9%NaCl盐水,对照组32只饮去离子水。喂养8周后分别于2:00,8:00,14:00,20:00每组各随机处死8只,取血检测血钠及血浆ET-1、NO、eNOS水平;取心肌组织,检测ET-1、NO、eNOS表达情况及eNOSmRNA表达情况。结果对照组血及心肌组织中NO、ET-1、eNOS水平及心肌组织中eNOSmRNA表达量分别于8:00及20:00出现峰值,高钠组分别于2:00及14:00出现峰值,高钠组峰值出现时间较对照组提前6 h,相同时点2组血及心肌组织中NO、ET-1、eNOS水平及心肌组织中eNOSmRNA表达量比较差异均有统计学意义(P均0.05);对照组血钠于2:00出现峰值,高钠组于20:00出现峰值,高钠组较对照组提前6 h,但组内各时点血钠浓度及2组间血钠浓度比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论高钠饮食使血管内皮功能受损,内皮源性血管活性物质峰值时相提前,高钠饮食可能通过影响内皮源性血管活性物质昼夜节律而对血压昼夜节律产生影响。     

高血压病患者昼夜血压节律与靶器官损害的关系

目的探讨高血压患者昼夜血压节律改变与靶器官损害的关系。方法对117例高血压病患者进行动态血压监测,应用超声心动图检测室间隔厚度、左心室后壁厚度,应用彩色多普勒超声检测颈动脉斑块。结果动态血压监测显示24 h血压呈非勺型者61例(52.1%),呈勺型者56例(47.9%);非勺型组24 h收缩压、24 h舒张压、夜间收缩压、夜间舒张压均高于勺型组(P均0.05);非勺型组室间隔肥厚、左心室后壁肥厚、颈动脉斑块检出率均较勺型组高(P均0.05)。结论高血压病患者50%以上血压有昼夜节律异常,血压昼夜节律异常者左室肥厚、颈动脉斑块发生率明显增加。     

酸枣仁汤通过调控昼夜节律治疗失眠的现代研究进展

失眠是一种常见的临床病症,其特征是难以开始或不能维持睡眠,并在清醒时伴有易怒或疲劳等症状。部分西药在一定程度上可以缓解失眠,但存在着较多不良反应,长期使用后甚至会形成对药物的耐受性和依赖性。酸枣仁汤作为治疗失眠的经方,以其显著的临床疗效且无不良反应被诸多医家推崇。昼夜节律与生命活动息息相关,昼夜节律的破坏会导致睡眠、情绪等发生变化。大量的实验研究表明,酸枣仁汤可通过调节哺乳动物的昼夜节律来发挥治疗失眠的作用。文章旨在梳理酸枣仁汤通过调控昼夜节律治疗失眠的相关基础实验文献,介绍酸枣仁汤通过调节相关基因、神经递质及其受体的表达,影响下丘脑视交叉上核的肽能神经元、星形胶质细胞和授时因子,进而调控昼夜节律,从而发挥治疗失眠的作用,以期为进一步探索酸枣仁汤治疗失眠的作用机制提供思路和方向。     

不同时辰针刺对金黄地鼠自发活动及体温昼夜节律的影响

目的:研究针刺调整生物昼夜节律的时间规律性.方法:在子、午、卯、酉不同时辰电针金黄地鼠"肾俞"穴,运用时间生物学研究方法观察分析不同时辰针刺对动物自发活动及体温昼夜节律的不同影响.结果:对于自发活动昼夜节律,午时针刺使其节律振幅降低(P<0.05),卯时针刺使其节律峰相位迟后(P<0.05),酉时针刺使其节律峰相位超前(P<0.05);对于体温昼夜节律,卯、酉时针刺对节律峰相位有一定程度的影响,卯时针刺使峰相位迟后22.36度,酉时针刺使峰相位超前39.32度.     

安寐丹对不同周期睡眠剥夺模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素的影响

目的:观察安寐丹对3、6、9月龄睡眠剥夺(SD)模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素(OX)的影响并探讨其最佳显效周期及可能机制。方法:根据大鼠生长周期,分别选取3、6、9月龄SD大鼠,运用随机数字表分为空白组、模型组、艾司唑仑组(0.09mg·kg-1·d-1)、安寐丹组(9.09g·kg-1·d-1),除空白组外均采用对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法建立SD模型,空白组、模型组给予等容0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃1周。运用自主活动仪监测大鼠昼夜节律,Morris水迷宫检测其学习记忆,ELISA检测大鼠血清食欲素A(OXA)、食欲素B(OXB)含量,免疫荧光检测下丘脑区OX含量表达。结果:各月龄大鼠造模后昼夜节律紊乱,其活动时间和活动距离均高于空白组(P<0.05,P<0.01);大鼠造模后下丘脑区OX含量较空白组增多,尤以9月龄大鼠OX含量增多较为明显;安寐丹能一定程度改善SD大鼠上平台潜伏期、游泳总路程、穿越站台次数和象限活动时间(P<0.05,P<0.01),且各月龄改善效果有别,但9月龄大鼠安寐丹灌胃后上平台潜伏期、游泳总路程最短(P<0.01);安寐丹能一定程度降低各月龄SD大鼠OXA、OXB含量(P<0.05,P<0.01),但各月龄降低程度有别,且安寐丹组降低9月龄大鼠OX含量较艾司唑仑组明显。结论:安寐丹能改善不同周期SD模型大鼠的昼夜节律紊乱、学习记忆障碍,其机制可能与调节OXA、OXB有关,且初步认为安寐丹对9月龄SD模型大鼠作用效果最佳。     

耳针、艾灸对D-半乳糖致衰老大鼠血清褪黑素含量及其昼夜节律性的影响

目的:探讨耳针、艾灸延缓衰老的可能作用机理.方法:通过皮下注射D-半乳糖建立衰老模型大鼠,在造模过程中,各治疗组分别给予耳针、艾灸、耳针 艾灸治疗,治疗6周后,测定各组血清褪黑素(MT)昼夜含量、血清MT昼夜节律性振幅变化、松果体细胞数.结果:(1)与模型组相比,各治疗组夜间血清MT含量增加、MT昼夜节律性振幅变大、松果体细胞数增多,其中以耳针 艾灸组最为显著.(2)各组日间血清MT含量比较,差异无显著性意义(P＞0.05),各组血清MT含量呈现昼低夜高的特点.结论:耳针、艾灸通过对MT及松果体的调节而起到延缓衰老的作用.