大补元煎通过上调BDNF/TrkB/CREB信号通路改善APP/PS1双转基因痴呆小鼠海马突触可塑性

目的:观察大补元煎对APP/PS1痴呆小鼠海马突触可塑性及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的作用,并探讨其改善突触可塑性的可能机制。方法:将APP/PS1小鼠36只分为模型组、多奈哌齐组(6.5×10~(-4)g·kg~(-1)·d~(-1))和大补元煎组(13.2 g·kg~(-1)·d~(-1)),野生鼠12只设为正常组,正常组和模型组给予等体积生理盐水,各组连续灌胃30 d。应用Morris水迷宫检测各组小鼠的学习记忆能力,应用尼氏染色和高尔基染色观察海马区神经元和突触的病理形态变化,应用免疫荧光(IF)观察海马突触后致密蛋白95(PSD95)及突触素(SYN)的蛋白表达水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马中BDNF,TrkB,CREB及磷酸化CREB(p-CREB)的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠平台潜伏期和游泳总路程增加(P0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间减少(P0.01),小鼠海马CA3区神经元胞内尼氏体减少或消失,小鼠海马CA3区神经元及树突分支数量、树突棘密度减少(P0.01),小鼠海马SYN,PSD95,BDNF,TrkB及p-CREB的蛋白表达水平减少(P0.01)。与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠平台潜伏期和游泳总路程减少(P0.05,P0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间增加(P0.05,P0.01),小鼠海马CA3区神经元胞内尼氏体数量增多,小鼠海马CA3区神经元及树突分支数量,树突棘密度增加(P0.05,P0.01),小鼠海马SYN,PSD95,BDNF,TrkB及p-CREB的蛋白表达水平增加(P0.05,P0.01)。结论:大补元煎改善APP/PS1双转基因小鼠突触可塑性的机制可能与其上调小鼠海马中BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。     

生慧汤通过调节神经递质改善阿尔茨海默病模型小鼠认知损伤和昼夜节律紊乱

目的 观察生慧汤对阿尔茨海默病（AD）小鼠血清中神经递质含量的影响，并探讨其改善AD认知损伤和昼夜节律紊乱的机制。方法 将27只APP/PS1小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组和生慧汤组，另将9只野生型C57BL/6JNju正常小鼠设为空白组。多奈哌齐组（0.92×10^-4 g·kg^-1·d^-1）和生慧汤组（13.5 g·kg^-1·d^-1）分别灌服多奈哌齐和生慧汤，空白组和模型组灌服等体积的纯水，各组连续灌胃4周。采用Morris水迷宫实验和自主活动实验评估小鼠的认知功能和昼夜节律。采用液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）技术检测小鼠血清中乙酰胆碱（ACh）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、谷氨酸（Glu）、5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）和多巴胺（DA）的表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠的平台潜伏期、游泳距离、初次抵达平台时间、光照活动时间、黑暗活动时间和总活动时间显著增加（P<0.01），穿越平台次数和目标象限游泳时间则显著减少（P<0.01）；与模型组比较，多奈哌齐组和生慧汤组小鼠的平台潜伏期、游泳距离、初次抵达平台时间、光照活动时间、黑暗活动时间和总活动时间减少（P<0.05，P<0.01），穿越平台次数和目标象限游泳时间增加（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠血清中ACh、ChAT的表达水平显著减少（P<0.01）；与模型组比较，多奈哌齐组和生慧汤组小鼠血清中ACh、ChAT的表达水平增加（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠血清中Glu的表达水平显著增加（P<0.01），NE、5-HIAA和DA的表达水平显著减少（P<0.01）；与模型组比较，生慧汤组小鼠血清中Glu的表达水平降低（P<0.05），NE、5-HIAA和DA的表达水平增加（P<0.05，P<0.01）；多奈哌齐组小鼠血清中NE、Glu、5-HIAA、DA的表达水平较模型组变化不明显，且差异没有统计学意义。各组小鼠血清中E的表达水平变化不明显，且差异没有统计学意义。结论 生慧汤可改善AD小鼠的认知损伤和昼夜节律紊乱，其机制可能与其调节神经递质有关。     

安寐丹对不同周期睡眠剥夺模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素的影响

目的:观察安寐丹对3、6、9月龄睡眠剥夺(SD)模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素(OX)的影响并探讨其最佳显效周期及可能机制。方法:根据大鼠生长周期,分别选取3、6、9月龄SD大鼠,运用随机数字表分为空白组、模型组、艾司唑仑组(0.09mg·kg-1·d-1)、安寐丹组(9.09g·kg-1·d-1),除空白组外均采用对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法建立SD模型,空白组、模型组给予等容0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃1周。运用自主活动仪监测大鼠昼夜节律,Morris水迷宫检测其学习记忆,ELISA检测大鼠血清食欲素A(OXA)、食欲素B(OXB)含量,免疫荧光检测下丘脑区OX含量表达。结果:各月龄大鼠造模后昼夜节律紊乱,其活动时间和活动距离均高于空白组(P<0.05,P<0.01);大鼠造模后下丘脑区OX含量较空白组增多,尤以9月龄大鼠OX含量增多较为明显;安寐丹能一定程度改善SD大鼠上平台潜伏期、游泳总路程、穿越站台次数和象限活动时间(P<0.05,P<0.01),且各月龄改善效果有别,但9月龄大鼠安寐丹灌胃后上平台潜伏期、游泳总路程最短(P<0.01);安寐丹能一定程度降低各月龄SD大鼠OXA、OXB含量(P<0.05,P<0.01),但各月龄降低程度有别,且安寐丹组降低9月龄大鼠OX含量较艾司唑仑组明显。结论:安寐丹能改善不同周期SD模型大鼠的昼夜节律紊乱、学习记忆障碍,其机制可能与调节OXA、OXB有关,且初步认为安寐丹对9月龄SD模型大鼠作用效果最佳。     

雷公藤多苷对比RAAS阻滞剂治疗糖尿病肾脏病有效性和安全性的Meta分析

目的系统评价雷公藤多苷(tripterygium glycosides,TG)对比肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)阻滞剂治疗糖尿病肾脏病的有效性和安全性。方法检索CNKI、CBM、VIP、万方数据、Embase、Pubmed和Cochrane Library数据库;筛选文献,对数据进行Meta分析。结果检索得到14篇文献,纳入826名患者。Meta分析结果显示,TG组治疗糖尿病肾脏病的有效率优于RAAS阻滞剂组,且差异具有统计学意义[OR=3.91,95%CI(1.91,8.01),P=0.0002];TG组UP降低程度优于RAAS阻滞剂组,且差异具有统计学意义[MD=-0.53,95%CI(-0.77,-0.29),P0.0001];TG组BUN降低程度优于RAAS阻滞剂组,且差异有统计学意义[MD=-2.20,95%CI(-2.79,-1.61),P0.00001];TG组与RAAS阻滞剂组在降低Scr方面疗效相当,差异无统计学意义[MD=-5.47,95%CI(-11.04,-0.11),P=0.05];在不良反应上,TG组与RAAS阻滞剂组相当,差异无统计学意义[MD=1.01,95%CI(0.56,1.82),P=0.46]。结论 TG治疗糖尿病肾脏病的总体疗效明显,对UP、BUN水平的降低效果优于RAAS阻滞剂,而在不良反应发生率上与RAAS阻滞剂相当。     

中药三草安神方对抑郁症失眠大鼠行为学及神经递质含量的影响

目的观察三草安神方对抑郁症失眠大鼠行为学及神经递质含量的影响。方法制备抑郁症失眠模型。将实验大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和三草安神方组。三草安神方组给予水煎三草安神方制成的药液(7.8g·kg-1·d-1,1ml·100g-1),西药组给予盐酸帕罗西汀片合奥氮平制成的溶液(盐酸帕罗西汀片:10mg·kg-1·d-1,奥氮平:3mg·kg-1·d-1,1ml·100g-1),空白组和模型组给予等体积生理盐水,连续灌胃14天,1次/日。对比观察。结果体重实验结果:造模后,造模组大鼠体重缓慢增加,此后,造模组与空白组比较具有差异性(P0.01)。与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠体重均显著上升(P0.01,P0.05)。蔗糖偏好实验结果:造模后,造模组大鼠蔗糖偏好低于空白组大鼠蔗糖偏好(P0.05),给药7d和给药14d后,西药组和三草安神方组大鼠蔗糖偏好较模型组的蔗糖偏好均得到提升(P0.01,P0.05)。ELISA检测结果:与空白组比较,模型组大鼠血清和脑皮质中5-HT含量明显降低(P0.01),模型组大鼠血清和脑皮质中NE含量无明显变化(P0.05)。与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠血清和脑皮质中5-HT含量明显升高(P0.01)。与空白组比较,模型组大鼠血清和脑皮质中Glu和GABA含量明显升高(P0.01)且Glu/GABA比值亦有升高(P0.01)。与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠血清和脑皮质中Glu和GABA含量都有所降低(P0.01,P0.05)且Glu/GABA比值亦有降低(P0.01)。结论三草安神方有助于改善抑郁症失眠大鼠抑郁和睡眠状态,其机制可能与调节脑内神经递质有关。     

酸枣仁汤通过抑制神经炎症和改善神经营养水平促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生＊

目的 观察酸枣仁汤对APP/PS1痴呆小鼠海马促炎性因子和神经营养因子的影响，并探讨其改善神经发生的可能机制。方法 32只APP/PS1小鼠随机分为模型组（Model，20 mL·kg^-1）、多奈哌齐组（Donepezil，0.92 mg·kg^-1）、酸枣仁汤低剂量组（L-SZRD，12.96 g·kg^-1）和酸枣仁汤高剂量组（H-SZRD， 25.92 g·kg^-1），8只相同月龄和相同品系的C57BL/6JNju小鼠设为空白组（Control，20 mL·kg^-1）。灌胃30天后，采用HE染色观察小鼠海马病理形态变化，采用免疫荧光（IF）对小鼠海马中5-溴脱氧尿苷（BrdU）、肾上腺皮质激素（DCX）、神经元核抗原（NeuN）进行标记，采用免疫印迹（Western blot）检测各组小鼠海马中肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6，IL-6）、c-fos、表皮细胞生长因子（Epidermal growth factor，EGF）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、脑源性神经营养因子（Brain derived neurotrophic factor，BDNF）的蛋白表达水平。结果 Control组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列整齐，细胞染色均匀，细胞数量较多且细胞连接紧密。Model组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列欠整齐，细胞核固缩明显，细胞数量明显减少。Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列稍整齐，细胞核固缩减少，细胞数量有所增加。与Control组比较，Model组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数明显减少（P < 0.01），与Model组比较，Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数增加（P < 0.01，P < 0.05）。与Control组比较，Model组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平明显升高（P < 0.01），而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平明显下降（P < 0.01），与Model组比较，Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平降低（P < 0.01，P < 0.05），而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平升高（P < 0.01，P < 0.05）。结论 酸枣仁汤可通过抑制神经炎症和改善神经营养促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生。     

基于优化后向传播神经网络的基础心音分类

针对后向传播（BP）神经网络高度依赖初始权值、收敛慢且易陷入局部极值,标准人工蜂群算法开发能力弱、局部 搜索能力差等问题,提出一种基于改进人工蜂群算法优化BP神经网络的分类方法。引入自适应和全局最优策略改进人 工蜂群算法中跟随蜂蜜源全局搜索、概率选择算法,使用当前迭代的最优解来提高其开发能力。此外,利用混沌系统产生 初始种群,以增强人工蜂群算法全局收敛性。最后,将本文算法应用到基础心音分类。结果表明本文算法较经典分类算 法分类准确率有较大的提升。梅尔频率倒谱特征参数下,本文算法的分类准确率达到94%以上。     

酸枣仁汤通过抑制APP/PS1双转基因小鼠海马神经炎症发挥神经保护作用

目的:观察酸枣仁汤对APP/PS1小鼠海马神经炎症的影响,并探讨其神经保护的可能机制。方法:将小鼠随机分为空白组,模型组,多奈哌齐组(0. 92 mg·kg-1),酸枣仁汤低、高(12. 96,25. 92 g·kg-1)剂量组。各组连续给药30 d后,采用尼氏染色观察各组小鼠海马齿状回(DG)区病理形态的变化,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠海马中TNF-α,IL-1β的mRNA表达水平,采用免疫组化(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠海马中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合蛋白(IBA1)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠海马DG区颗粒细胞排列不均匀,细胞丢失明显,部分神经元胞内尼氏体消失或固缩,血清中TNF-α,IL-1β含量显著升高(P 0. 01),小鼠海马中TNF-α,IL-1βmRNA表达显著升高(P 0. 01),海马DG区中GFAP,IBA1蛋白表达显著上调(P 0. 01);与模型组比较,多奈哌齐组、酸枣仁汤低、高剂量组小鼠海马DG区颗粒细胞排列稍整齐,神经元丢失减轻,且胞内尼氏体消失或固缩情况好转,小鼠血清中TNF-α,IL-1β含量明显降低(P 0. 05,P 0. 01),小鼠海马中TNF-α,IL-1βmRNA表达明显降低(P 0. 05,P 0. 01),小鼠海马DG区中GFAP,IBA1蛋白表达明显降低(P 0. 05,P 0. 01)。结论:酸枣仁汤能改善APP/PS1双转基因小鼠神经元丢失,其机制可能与其调节小鼠海马神经炎症有关。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨大补元煎促进APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠海马神经发生的作用机制

目的:通过研究大补元煎对淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠海马Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的作用,探讨大补元煎促进神经发生的可能机制。方法:5月龄APP/PS1小鼠30只和野生鼠10只,分为正常组、模型组、奈哌齐组(6.5×10~(-4)g·kg~(-1)·d~(-1))和大补元煎组(13.2 g·kg~(-1)·d~(-1)),灌胃30 d,正常组和模型组给予等体积生理盐水。应用水迷宫评价小鼠学习记忆力;应用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠海马神经元病理形态变化;应用免疫组化(IHC)检测5-溴脱氧尿苷(Brdu),肾上腺皮质激素(Dcx)和神经元核抗原(Neu N)的阳性细胞数;应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马中β-catenin,糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠平台潜伏期和游泳总路程显著升高(P0.01),而穿越平台次数和目标象限时间显著降低(P0.01);与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠平台潜伏期和游泳总路程降低(P0.05,P0.01),而穿越平台次数和目标象限时间升高(P0.05)。与正常组比较,模型组小鼠海马齿状回(DG)区神经元层次和数量减少,可见明显坏死的神经元;与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠海马DG区神经元层次和数量增多,坏死神经元数量减少。与正常组比较,模型组小鼠海马DG区Brdu,Dcx和Neu N标记的阳性细胞数明显降低(P0.01);与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠海马DG区Brdu,Dcx和Neu N标记的阳性细胞数增加(P0.05,P0.01)。与正常组比较,模型组小鼠海马中β-catenin mRNA和蛋白表达水平显著下降(P0.01),而GSK-3β的基因和蛋白表达水平显著升高(P0.01);与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠海马β-catenin mRNA和蛋白表达水平升高(P0.05,P0.01),而GSK-3βmRNA和蛋白表达水平下降(P0.05,P0.01)。结论:大补元煎通过调节Wnt/β-catenin信号通路促进APP/PS1双转基因小鼠海马神经发生。     

基于复杂网络技术挖掘王平论治失眠临证规律

目的:挖掘名老中医王平教授辨证论治失眠临证规律。方法:收集王平教授门诊失眠病案786份,规范其中出现的中医术语,建立Excel数据库,对症状、方剂、中药等进行描述性统计,运用NodeXL软件绘制可视化网络图,采用Infomap-SA算法对症状→证候、方剂、中药→治法进行关联规则分析。结果显示,失眠的主要症状以入睡困难、多梦、打鼾、夜间易醒、醒后难以入睡、醒后疲劳、多汗、夜尿频繁、舌淡黯红、苔薄黄、脉细为主,对症状→证候进行关联分析,症状→证候关联置信度均≥0.50,推断其临床治疗失眠主要证候为阴虚内热、心脾两虚、心肾不交等;治疗失眠多以酸枣仁汤、当归补血汤、交泰丸、四逆散、百合地黄汤、四君子汤、天王补心丹(汤)、百合知母汤、补中益气丸、增液汤、四物汤等临证加减,在遣方用药上多用酸枣仁、百合、夜交藤、黄芪等养心安神中药。对方剂、中药→治法进行关联分析,其中方剂→治法的关联置信度均≥0.50,推断其治疗失眠主要治则治法为心脾同治,治“心”包括补血、养心、滋阴、益气等,治“脾”以补气、健脾为主,用药讲究调补兼施,“调”予柴胡、川芎、酸枣仁、白芍等,“补”予黄芪、百合、知母、茯神等。结论:失眠与心脾二脏关系最为密切,病机总属阴阳失交、阳盛阴衰,是王平教授辨证失眠的主要学术思想,“心脾同治、调补兼施”乃其临床治疗失眠的主要临床经验。