肥胖患者皮下及内脏脂肪组织中11β-羟基类固醇脱氢酶1的表达

目的检测肥胖患者皮下及内脏脂肪组织中11β-羟基类固醇脱氢酶1（11β—HSD1）含量,了解11β—HSD1在脂肪组织的分布以及与肥胖症之间的关系。方法选取急性阑尾炎手术患者23例,根据BMI分为肥胖组及正常体重组。术中采集肥胖及正常体重者皮下和内脏脂肪组织,运用RT—PCR法及免疫印迹法检测皮下和内脏脂肪组织中11β—HSD1的表达。结果RT-PCR和免疫印迹检测结果显示11β—HSD1在肥胖组及正常体重组皮下及内脏脂肪组织均有表达,其中两组内脏脂肪组织的表达均显著高于皮下脂肪组织表达。组间比较显示,肥胖组内脏脂肪组织中检测到11β-HSD1表达量要显著高于正常体重组,但在两组间皮下脂肪组织中的表达量无明显差异。结论人皮下及内脏脂肪组织均有11β—HSD1的表达,脂肪组织中11β-HSD1的表达与肥胖有关,其主要促进内脏脂肪组织的堆积。     

脂联素mRNA在肥胖症患者腹部皮下与网膜脂肪组织中表达水平的研究

目的探讨肥胖症患者腹部皮下脂肪组织与大网膜脂肪组织脂联素的表达水平及与BMI、WHR、血脂、胰岛素敏感性的关系。方法用半定量RT-PCR方法检测19例肥胖症患者(BMI≥25·0kg/m2)和28例非肥胖症患者(BMI<25·0kg/m2)腹部皮下与大网膜脂肪组织脂联素mRNA的表达水平,并测量BMI、WHR、BP,FPG、FIns、血脂和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果(1)肥胖组大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达水平显著低于非肥胖组(P<0·05),肥胖组大网膜脂肪组织脂联素mRNA水平显著低于皮下脂肪组织(P<0·05)。(2)肥胖组FIns、HOMA-IR、BP、TG与VLDL-C均高于非肥胖组(P<0·05~P<0·01)。(3)非肥胖组中网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量与BMI(r=-0·513,P<0·05)、VLDL-C(r=-0·733,P<0·01)显著负相关。结论肥胖症患者网膜脂肪组织脂联素mRNA表达水平显著降低,它可能在肥胖相关的代谢综合征的发病中起一定作用。     

2型糖尿病患者皮下、大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达的定量研究

目的　探讨 2型糖尿病患者皮下及大网膜脂肪组织脂联素 (adiponectin)表达水平及与血脂联素、体重指数、腰臀比 (WHR)、胰岛素敏感性的相关关系。方法　用实时荧光定量RT PCR检测 2型糖尿病患者和非糖尿病患者皮下及大网膜脂肪组织脂联素mRNA的表达水平 ,用ELISA方法测定血浆脂联素水平。结果　 2型糖尿病患者大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达水平较非糖尿病组显著下降 (P <0 .0 5 ) ;糖尿病组与非糖尿病组的血浆脂联素水平差异无显著性 ;糖尿病组大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达与WHR成负相关 (r=- 0 .5 1,P <0 .0 5 )。糖尿病组血浆脂联素水平与大网膜脂肪组织脂联素mRNA的表达成正相关 (r=0 .5 7,P <0 .0 1)。结论　 2型糖尿病患者大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达显著降低。内脏脂肪组织脂联素mRNA的表达水平可以作为胰岛素抵抗的重要参数。     

2型糖尿病患者脂肪组织中的HO-1表达及临床意义

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者脂肪组织中血红素加氧酶-1(HO-1)基因及蛋白表达的临床意义。方法选择T2DM患者46例(T2DM组),其中伴肥胖者23例(T2DM+FAT组)、单纯T2DM 23例(单纯T2DM组);非T2DM患者56例(非T2DM组),其中单纯非T2DM患者33例(单纯非T2DM组)、伴肥胖者23例(非T2DM+FAT组)。采用RT-PCR技术检测各组腹部皮下及大网膜脂肪组织的HO-1 mRNA表达,蛋白免疫印迹技术检测其HO-1蛋白表达,分析其与临床及实验室相关指标的关系。结果①在腹部皮下及网膜脂肪组织中,单纯T2DM组及T2DM+FAT组的HO-1 mRNA表达量分别低于单纯非T2DM组及非T2DM组+FAT组,且T2DM+FAT组低于单纯T2DM组(P均<0.05)。网膜脂肪组织中的HO-1 mRNA表达量与BMI、HbA1c呈负相关(P均<0.01)。②在腹部皮下和网膜脂肪组织中,单纯T2DM组及T2DM+FAT组的HO-1蛋白表达量分别低于单纯非T2DM组及非T2DM组+FAT组(P均<0.05),其中T2DM+FAT组网膜脂肪组织的表达量与BMI、FPG、TG呈负相关(P均<0.05)。③相关分析显示,T2DM患者网膜脂肪组织HO-1蛋白表达量与血清脂联素水平呈正相关(P<0.05)。结论 T2DM患者的HO-1基因及蛋白表达明显降低,BMI越高,其表达量越低,HO-1表达降低可能与胰岛素抵抗及T2DM发生、发展有关。     

维吾尔族肥胖患者脂肪和血清内脂素、脂联素的改变及相关因素

目的 探讨维吾尔族肥胖患者内脂素、脂联素(APN)在腹部网膜、皮下脂肪组织的表达和血清水平改变及其与体重指数(BMI)、腰臀围比(WHR)和血脂的关系.方法 用半定量RT-PCR方法检测41例肥胖患者和20例非肥胖对照脂肪组织内脂素和APN mRNA表达水平,ELISA法检测血清内脂素和APN浓度,并测量腰围(WC)、臀围(HC)、血压(BP)、空腹血糖(FPG)和血脂等.结果 ① 网膜脂肪组织内脂素mRNA表达水平在肥胖组与非肥胖对照组之间差异无显著性,肥胖组APN mRNA表达水平显著低于非肥胖对照组(P<0.05);内脂素、APN在两组网膜和皮下脂肪组织mRNA的表达水平均无显著性部位差异;血清内脂素肥胖组显著高于非肥胖对照组(P<0.05),APN在两组之间比较差异无显著性.② 肥胖组舒张压(DBP)和收缩压(SBP)均显著高于非肥胖对照组(P<0.01和P<0.01),高密度脂蛋白(HDL-C)明显低于非肥胖对照组(P<0.05).③ 网膜脂肪组织内脂素mRNA表达量与血清内脂素、BMI和TG显著正相关,APN mRNA表达量与血清APN显著正相关,与BMI、LDL-C显著负相关.结论 维吾尔族肥胖患者血清内脂素水平升高,网膜和皮下脂肪组织内脂素mRNA表达水平无显著性部位差异;APN mRNA在网膜脂肪组织的表达显著降低,内脂素和脂联素可能在维吾尔人中心性肥胖相关的代谢紊乱性疾病中起一定作用.     

风湿性心脏病心房颤动患者心房肌11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ表达研究

目的 探讨心房颤动(房颤)患者心房肌组织11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ(11βHSD2)mRNA和蛋白表达的改变. 方法 入选进行人工心脏瓣膜置换术的风湿性心脏病患者25例,其中窦性心律(窦律)组12例,持续性房颤组13例(房颤时间≥6个月).上述患者均于术前进行经胸超声心动图检查并留取有关资料,于手术时取左、右心房侧壁组织,用实时荧光定量PCR和Western blot分别测定11βHSD2 mRNA及其蛋白在心房肌组织中的表达情况,用免疫组化染色检测11βHSD2在心房肌细胞中的分布. 结果 与窦律组比较,房颤组左房内径显著扩大(P＜0.01);房颤组患者11βHSD2 mRNA表达明显增加(右房:0.86 ±0.14与0.33 ±0.12,左房:0.95 ±0.15与0.37 ±0.10,P均＜0.01);同时房颤组11βHSD2蛋白表达也较窦律组明显增加(右房:1.18±0.64与0.71 ±0.21,P＜0.01;左房:1.36±0.58与0.85 ±0.15,P＜0.05),但左、右心房之间无论是在窦律或房颤时,11βHSD2 mRNA及其蛋白表达差异均无统计学意义(P＞0.05);免疫组化染色证明,11βHSD2主要分布在心房肌细胞胞质中,且在房颤时其染色密度明显增加. 结论 房颤时心房肌组织11βHSD2表达增加,并可能参与和介导了房颤的心房重构过程.     

2型糖尿病患者大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达的研究

目的研究2型糖尿病（T2DM）患者大网膜脂肪组织脂联素mRNA的表达水平及其与腰围（WC）、BMI、腰臀比（WHR）、FPG、TG、TC、HDL-C、LDL-C、BP、病程等相关指标的关系。方法用半定量RT-PCR法检测T2DM患者（DM组）和非糖尿病患者（non-DM组）大网膜脂肪组织脂联素mRNA的表达水平。常规检测FPG、TG、TC、HDL-C、LDL-C、BP,计算BMI、WHR。结果与non-DM组相比,DM组大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达水平显著下降（P〈0.05）,并与WC、TG、FPG、WHR明显负相关,其中以WC的相关性最大;未发现与BMI、HDL-C、LDL-C、TC及BP相关。结论T2DM患者大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达显著降低;WC、TG、FPG、WHR、病程等临床指标可间接反映胰岛素抵抗程度,其中以WC的参考意义最大。     

11β羟类固醇脱氢酶1型与代谢综合征

糖皮质激素可诱导胰岛素抵抗 ,11β羟类固醇脱氢酶 1型 (11βHSD1)催化无活性的可的松转化为有活性的氢化可的松 ,调节局部糖皮质激素水平。 11βHSD1促进脂肪细胞增生、肥大 ,导致中心性肥胖 ;可增加肝糖输出 ,导致胰岛素敏感性下降 ,产生糖尿病 ;动物实验表明 11βHSD1基因高表达可导致高血压。 11βHSD1将成为代谢综合征干预的又一靶点。     

肥胖人群网膜脂肪中抵抗素mRNA的表达及相关因素的研究

目的了解肥胖人群网膜脂肪中抵抗素mRNA的表达以及相关因素。方法43例患者分为肥胖组和正常对照组,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测大网膜脂肪组织抵抗素表达情况;测定血清胰岛素、血糖、血脂、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、游离脂肪酸（FFA）、抵抗素。结果肥胖组网膜脂肪抵抗素mRNA表达以及血清抵抗素水平均显著高于正常对照组。相关分析显示,网膜脂肪抵抗素mRNA表达与血清TNF-α、FFA、抵抗素、体重指数（BMI）、腰臀比（WHR）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈显著正相关;逐步回归分析示对抵抗素表达有显著影响的因素为WHR、BMI。结论肥胖患者的网膜脂肪组织中抵抗素表达以及血清抵抗素均明显增高,两者之间存在明显相关性。肥胖可能是网膜脂肪组织抵抗素表达水平的独立影响因素。     

脂联素及其受体mRNA表达与血清游离脂肪酸、肿瘤坏死因子α的研究

目的 了解肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和游离脂肪酸(FFA)与脂联素及脂联素受体mRNA表达的关系.方法 19例肥胖和29例正常体重受试者,采用RT-PCR检测腹部皮下与大网膜脂肪组织中脂联素及其受体mRNA的表达水平,同时测定血清脂联素、TNF-α、FFA等指标.结果 (1)肥胖患者的血清TNF-α、FFA高于正常体重组;脂联素降低.(2)肥胖组中网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量低于皮下脂肪组织和正常体重组网膜脂肪组织.(3)网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量与脂联素水平呈负相关.(4)腹部皮下脂肪组织的脂联素受体1、脂联素受体2 mRNA表达水平与血清脂联素、FFA呈负相关.结论 肥胖人群的血清TNF-α、FFA升高,脂联素降低,且其网膜脂肪组织中脂联素mRNA表达量亦降低;血清FFA升高与腹部皮下脂联素受体表达下调相关.     

叉头状转录因子O1对肥胖者内脏脂肪组织葡萄糖转运体4 mRNA及蛋白表达的影响

目的 利用RNAi技术沉默肥胖者内脏脂肪组织中叉头状转录因子O1(FOXO1)基因后检测葡萄糖转运体4(GLUT4)的mRNA和蛋白表达,探讨肥胖者FOXO1与胰岛素抵抗的关系及机制.方法 构建转录因子FOXO1特异性siRNA载体pSIREN-DNR-DsRed-siFOXO1(FOXO1-siRNA)质粒并鉴定;选取5例肥胖者大网膜脂肪组织利用脂质体为媒介转染FOXO1-siRNA质粒;半定量RT-PCR检测FOXO1 mRNA表达,测定抑制效率;半定量RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达量,Westernblot检测GLUT4蛋白表达量.采用t检验进行统计分析.结果 成功构建FOXO1-siRNA质粒,转染此质粒的脂肪组织细胞FOXO1 mRNA表达水平与对照组相比下降约49%(P＜0.05),说明转染成功;FOXO1-siRNA质粒转染组GLUT4 mRNA较对照组增加约1.33倍(P=0.001),FOXO1-siRNA质粒转染组GLUT4蛋白较对照组增加约1.25倍(P＜0.05).结论 抑制肥胖者网膜内脏脂肪组织FOXO1基因的表达可引起GLUT4 mRNA及蛋白表达增加.     

脂肪因子网膜素1与妊娠期糖尿病胰岛素抵抗的相关性研究

目的通过检测GDM患者血清及大网膜脂肪组织中网膜素1(Omentin-1)及胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)的表达,探讨脂肪因子Omentin-1与GDM患者IR的关系。方法将研究对象分为GDM组26例、正常对照组(GNGT)24名。产前ELISA测定空腹血清Omentin-1水平;剖宫产术中收集大网膜脂肪组织,RT-PCR及Western blot检测其Omentin-1、IRS-1、IRS-2mRNA及蛋白表达。结果 GDM组血清中Omentin-1较GNGT组低[(217.88±72.15)vs(272.08±107.30)ng/ml,P=0.048]。GDM组大网膜脂肪组织中IRS-1mRNA及蛋白表达较GNGT组降低(P0.05),IRS-2在两组大网膜组织表达比较,差异无统计学意义;Omentin-1在GDM组大网膜脂肪组织中及蛋白表达降低,但差异无统计学意义。大网膜脂肪组织中Omentin-1 mRNA表达与IRS-1(r=0.755,P=0.000)及IRS-2mRNA(r=0.352,P=0.012)呈正相关。结论 Omentin-1表达降低与GDM患者IR有关。     

11β-羟基类固醇脱氢酶和支气管哮喘

11β-羟基类固醇脱氢酶（11-βHSD）作为糖皮质激素（GC）的代谢酶,可调节GC在局部组织器官中的水平,并可能参与了以Ⅱ型糖尿病、肥胖、胰岛素抵抗、高血压等为主要表现的代谢综合征,近年来引起了人们的广泛关注。目前支气管哮喘（哮喘）治疗的首选药物是GC。11-βHSD可分为两型（11-βHSD1、11-βHSD2）,其于不同时期在哮喘患者肺部、胎盘等组织的表达水平变化与哮喘的发病和治疗效果有关,寻求适当的方法调节该酶在局部器官组织的表达水平,可控制局部激素水平从而发挥治疗效果。     

11β-HSD1对下丘脑-腺垂体-肾上腺轴及海马的影响

糖皮质激素(GC)受11β-羟类固醇脱氢酶(HSD)1的调节,对大脑活动产生广泛的影响。11-βHSD1催化无活性的11-脱氧皮质酮转化为有活性的GC,从而提高组织局部的GC浓度,加强GC的作用。GC对下丘脑—腺垂体—肾上腺轴的负反馈调节作用受11-βHSD1的影响。海马是与认知、学习、记忆功能密切相关的重要脑区,极易受到随年龄增加的GC神经毒性的损伤。11-βHSD1活性降低有助于减轻与年龄相关的认知障碍。     

糖尿病肥胖大鼠垂体糖皮质激素受体和11β-羟类固醇脱氢酶1 mRNA表达的改变

将大鼠以高脂喂养结合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导,取血测皮质酮和促肾上腺皮质激素(ACTH)的节律后,留取下丘脑和垂体,用实时定量PCR观察下丘脑和垂体糖皮质激素受体和11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)mRNA表达的改变.对照组、单纯肥胖组和肥胖糖尿病组大鼠的ACTH和皮质酮的水平没有明显改变(P=0.07),但肥胖组和肥胖糖尿病组皮质酮的节律消失.下丘脑糖皮质激素受体mRNA的表达组间无差异,但肥胖糖尿病组11β-HSD1 mRNA的表达高于对照组(P<0.05).垂体糖皮质激素受体和11β-HSD1 mRNA的表达肥胖糖尿病组低于肥胖组,肥胖组又低于对照组(均P<0.05).上述结果提示肥胖伴糖尿病大鼠的负反馈调节机制受损可能与垂体11 β-HSD1和糖皮质激素受体的表达下降有关.     

SIRT1 mRNA在新诊断的2型糖尿病患者脂肪组织的表达及意义

目的探讨新诊断的2型糖尿病（T2DM）患者脂肪组织SIRT1 mRNA表达水平及其与体质指数（BMI）、腰臀比（WHR）、血糖、血浆胰岛素、胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）关系。方法采用RT—PCR方法检测了40例对照组和40例T2DM患者脂肪组织SIRT1 mRNA水平,并分析了SIRT1水平与BMI、WHR、血脂、HbA1C、血糖、血浆胰岛素和HOMA—IR等的关系。结果新诊断的T2DM患者SIRT1 mRNA水平显著低于对照组（1．49±0．47VS1．12±0．32,P〈0．01）;线性相关分析表明,SIRT1与Fins、HOMA—IR呈显著负相关（r=-0．421,P〈0．01和r=-0．511,P〈0．01）。以SIRT1为因变量,年龄、WHR、BMI、TG、TC、LDL—C、HDL—C、HbA1C、FPG、Fins和HOMA—IR为自变量,进行多元线性逐步回归分析,结果表明HOMA—IR是影响SIRT1的独立相关因素。Logistic回归分析表明控制性别、年龄、WHR、BMI、TC、TG、HDL—C、LDL—C后,发现SIRT1与T2DM发病呈负相关,OR〈1。结论脂肪组织中SIRT1 mRNA水平的变化与IR和T2DM相关。     

非肥胖多囊卵巢综合征患者网膜脂肪PPARγ2 mRNA表达及与IR的关系

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)基因在非肥胖多囊卵巢综合征(PCOS)患者网膜脂肪组织的表达水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法选取非肥胖PCOS患者(观察组)11例和非PCOS患者18例(对照组),采用RT-PCR法检测两组网膜脂肪组织PPARγ2mRNA表达水平,测定空腹血糖、空腹胰岛素(FINS),计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果观察组HOMA-IR明显高于对照组,P<0.01;余指标比较无统计学差异。相关性分析示,PPARγ2 mRNA表达水平与FINS、HOMA-IR等均无相关性。结论非肥胖P-COS患者网膜脂肪组织PPARγ2 mRNA的表达水平与IR无明显相关性。     

蒙古沙鼠幽门螺杆菌相关性胃炎Sonic hedgehog基因、IL-1β及TNF-α的表达

目的研究形态基因Sonic hedgehog(Shh)以及IL-1β和TNF-α在H pylori相关性胃炎中表达的相关性及作用.方法♂蒙古沙鼠50只给予悉尼菌株灌胃造成H pylori感染模型,另设50只♂蒙古沙鼠作为对照.应用RT-PCR的方法对沙鼠胃黏膜组织中的Shh,IL-1β以及TNF-α mRNA表达水平进行检测;应用免疫组化的方法对于Shh蛋白进行细胞定位以及半定量分析其表达水平.结果H pylori灌胃36和48 wk后,Shh mRNA表达水平明显降低(0.28 vs 0.48,t=3.24,P＜0.05;0.18 vs 0.45,t=3.01,P＜0.05).Shh mRNA表达水平与IL-1β,TNF-α mRNA表达之间以及与炎症分级之间呈显著负相关(r=-0.37,P＜0.01;r=-0.30,P＜0.05;r=-0.39,P＜0.001).Shh蛋白主要表达于胃体壁细胞胞质中,H pylori灌胃36和46 wk,表达Shh抗原的阳性细胞数明显减少(Z=4.84,P＜0.001;Z=4.57,P＜0.001).Shh蛋白的表达与IL-1βmRNA,TNF-α mRNA的表达以及慢性炎症分级之间也呈显著负相关(r=-0.321,P＜0.05;r=-0.313,P＜0.05;r=-0.371,P＜0.001).结论蒙古沙鼠胃黏膜感染H pylori后,IL-1β和TNF-α表达上调,并与炎症程度呈显著正相关;Shh表达下调,并与炎症分级及IL-1β和TNF-α表达呈显著负相关.     

性别对超重人群皮下脂肪脂联素mRNA表达的影响

目的探讨性别因素对超重人群皮下(SC)脂肪组织脂联素(APN)mRNA(SA mRNA)表达的影响。方法选取22例男性超重患者体质量指数(BMI)≥27kg/m2,OBM组、26例女性超重(BMI≥25kg/m2,OBF组)以及40例正常体质量者(BMI25kg/m2,男性为NM组,女性为NF组),实时荧光定量PCR测定腹部SA mRNA的表达,同时测定血糖\血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、胰岛素水平等生化指标。结果在超重人群中,OBF组的SA mRNA明显高于OBM组(P0.05);但OBF组SA mRNA仍低于NM组(P0.01)。SA mRNA与BMI、腰臀比(WHR)、TC和TG水平呈负相关(r=-0.290,r=-0.178,r=-0.247,r=-0.178,P0.05)。逐步回归分析以SA mRNA为因变量,BMI,WHR,TC,TG以及HOMA等作为自变量,结果显示,在整体人群中,BMI和TC入选(R2=0.030,P0.05,R2=0.169,P0.01)。在OBM组中,只有TC入选(R2=0.274,P0.01)。结论女性超重人群SA mRNA高于超重男性,提示SA mRNA的性别差异主要表现在超重人群中,体重适中者则无此关联。     

Tom-1基因在糖尿病胰岛素抵抗患者网膜脂肪组织表达定量研究

目的探讨Tom-1基因在2型糖尿病胰岛素抵抗(T2DM-IR)患者网膜脂肪组织表达水平。方法取T2DM-IR患者与非糖尿病无IR者(对照组)网膜脂肪组织,用荧光定量RT-PCR技术测定Tom-1 mRNA的表达量。结果Tom-1 mRNA的表达量在T2DM-IR组为4440±617拷贝/百万看家基因,对照组为1360±82拷贝/百万看家基因,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在人腹腔网膜脂肪组织中Tom-1 mRNA有表达,在T2DM-IR组呈上调表达。因此,这条基因可能与T2DM的IR有关。