炎症、免疫与高血压

<正>高血压是一种低度炎症性疾病,从高血压的发生、发展到靶器官的损害,尤其是它参与动脉粥样硬化的发生,都与血管炎症有十分重要的关联。在实验性高血压动物早期包括血管、脑、心和肾,均有单核、巨噬细胞的浸润。Ohki等[1]体外试验,在血管压力应激下,可见人单核样细胞(THP-1细胞)反应和炎症性基因表达。Hilgers[2]高血压和一些血管活性物质,     

炎症与动脉粥样硬化关系研究进展

近几十年的研究使人们越来越清楚地认识到炎症在动脉粥样硬化的发生、发展过程中起着重要作用。1动脉粥样硬化炎症学说某些脂类如溶血磷脂、氧固醇、血小板活化因子样磷脂等作为信号分子，与细胞的受体结合后可激活基因表达，生成许多促进炎症的细胞因子，如内皮细胞表达许多粘附分子使血流中的单核细胞，T淋巴细胞粘附于受损内皮区表面，单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）使单核细胞迁移入内皮下，T淋巴细胞也有其相应的趋化诱导因子，单核细胞在巨噬细胞集落刺激因子（M—CSF）作用下分化成巨噬细胞，单核／巨噬细胞及T淋巴细胞是主要的炎症细胞，这个阶段是急性炎症阶段。[第一段]     

三苯氧胺抑制促动脉粥样硬化基因CD36在单核-巨噬细胞的表达

目的 观察抗肿瘤药物三苯氧胺(tamoxifen,Tam)对促动脉粥样硬化基因CD36在单核-巨噬细胞表达的影响。方法 分别以不同浓度Tam(1,5,10 μmol/L)和它的活性代谢物羟-三苯氧胺(OH-Tam)作用于培养的THP-1单核细胞,24 h后观察CD36蛋白在细胞表面的表达;以氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)刺激THP-1单核-巨噬细胞CD36表达,并给予Tam或OH-Tam处理,流式细胞术观察CD36的变化。结果 Tam和OH-Tam可降低单核细胞CD36蛋白表达;同时对氧化型低密度脂蛋白引起的单核-巨噬细胞CD36表达上调具有抑制作用。结论 Tam可能通过抑制CD36在单核-巨噬细胞的表面表达来发挥其抗动脉粥样硬化作用。     

肺炎衣原体致动脉粥样硬化的机理

年来许多体外实验和动物实验研究表明:肺炎衣原体(Cpn)--一种人类呼吸道病原体,可能与动脉粥样硬化(AS)的发生发展有关.而AS目前被认为是一种炎症反应:早期病理学改变是单核淋巴细胞在内皮表面的粘附,单核细胞向内膜的迁移,增生的血管平滑肌细胞从血管中层向内膜的迁移,巨噬细胞和血管平滑肌细胞中的脂质堆积[1].本文就肺炎衣原体与单核/巨噬细胞,内皮细胞和血管平滑肌细胞的关系作一综述.     

CD40-CD40L与动脉粥样硬化的研究进展

近年大量研究显示[1]炎症介质CD40-CD40L广泛存在于与动脉粥样硬化(AS)相关的各种细胞,如内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞等关键细胞成分上,而在正常动脉组织中没有表达.CD40-CD40L系统在AS各个阶段中均起重要作用,几乎贯穿了AS斑块发生、发展和破裂的全过程,被认为是这一炎症进程的关键环节.研究表明,CD40L与CD40相互作用不仅在体液免疫中起作用,而且在细胞免疫中也发挥重要作用[1].CD40-CD40L信号通路可参与AS斑块内主要细胞成分如血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和巨噬细胞等炎症反应的调节[2].目前认为,CD40-CD40L可能是AS发病的始动因素.     

丹参多酚酸盐对单核细胞分化为泡沫细胞过程中清道夫受体A表达的干预作用

使用佛波醇酯（PMA）诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞，将其分为对照组、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）组、ox-LDL＋丹参多酚酸盐组（低、中、高浓度组），应用流式细胞仪测定巨噬细胞SR-A表达水平。结果镜下观察到单核细胞株THP-1在PMA诱导下转变为泡沫细胞；ox-LDL处理组SR-A蛋白表达水平较对照组明显增加（P〈0.01）；丹参多酚酸盐组较其他两组均明显减弱（P均〈0.01），且随浓度增加SR-A表达明显减弱（P均〈0.01）。认为ox-LDL能够明显刺激巨噬细胞表达SR-A，丹参多酚酸盐能够下调ox-LDL刺激的巨噬细胞表达SR-A，可能是其抗动脉粥样硬化斑块形成的机制之一。     

T淋巴细胞在动脉粥样硬化中的研究进展

除了单核/巨噬细胞有重要的致动脉粥样硬化(AS)作用外,T细胞在AS中也起着重要作用。辅助性T细胞1型(Th1)通过强烈的致凋亡作用影响AS,其他T细胞亚群如Th2和Th17也参与AS的发生发展。调节性T细胞(Tregs)还与Th2相关细胞因子相互作用抑制AS发展。然而现在对T细胞在AS中的具体作用机制尚不明确。本文就T细胞在AS中的作用及这些细胞可能为AS研究和治疗提供的方向作一综述。     

LOX-1在动脉粥样硬化中的作用研究新进展

动脉粥样硬化(AS)是一种血管慢性炎症性病变,其中内皮细胞功能异常、单核细胞的黏附和迁移、平滑肌细胞的凋亡、泡沫细胞的形成和血小板的活化是AS形成的关键环节,最终结果是形成大、中动脉内膜下的粥样硬化斑块,造成管腔狭窄,远端组织器官供血不足甚至栓塞。低密度脂蛋白（LDL） 氧化形成的氧化型LDL（ox-LDL）在AS发生、发展过程中起着重要作用。目前在与AS发生、发展相关的细胞（如血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、单核细胞、巨噬细胞以及泡沫细胞）上已经发现和鉴定了多种oxLDL受体,其中瘦素样氧化型低密度脂蛋白受体(LOX)-1表达于血管内皮细胞、巨噬细胞、血小板上,是ox-LDL的主要受体［1］,在AS的发生、发展中起着重要作用,本文将着重阐述近年来LOX-1影响AS发生发展相关效应与机制的新进展。     

老年人急性冠脉综合征血清高敏C-反应蛋白与白介素-6相关性研究

研究表明，炎症在动脉粥样硬化（AS）的发生发展及并发症的发生中起重要的作用^[1]。炎症的存在影响了斑块的稳定性，使斑块易于破裂，形成斑拴导致急性冠脉综合征（ACS）^[2]。血清高敏C-反应蛋白（hs—CRP）是炎症的敏感指标，与斑块的进展密切相关，肝脏产生CRP的主要肝脏刺激物是白介素-6（IL-6）^[3]，CRP与IL-6可能具有相关性。有关ACS患者CRP的研究较多，而hs-CRP与IL-6相互关系报道较少，尤其在老年ACS中的变化及相关性未见报道。     

巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP-1来源巨噬细胞极化的研究

目的　分析巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导人单核细胞白血病THP?1细胞来源巨噬细胞的极化方向,探索机体对巴西日圆线虫感染的免疫应答机制。方法　建立并维持巴西日圆线虫培养的实验室循环,无菌条件下收集L3和L5虫体,分别制备虫体蛋白;建立THP?1细胞体外培养体系,经500 ng/mL佛波酯（PMA）刺激培养后呈贴壁状态的M0型细胞分别采用500 ng/mL脂多糖（LPS）+ 100 ng/mL γ?干扰素（IFN?γ）、白细胞介素4（IL?4）+ IL?13（浓度均为100 ng/mL）、L3及L5虫体蛋白（浓度均为5 mg/mL）进行刺激,同时设不加任何刺激的阴性对照组。通过显微镜镜检观察刺激后细胞形态、实时荧光定量PCR（qPCR）检测M1/M2型巨噬细胞特异性基因mRNA表达水平、流式细胞术检测巨噬细胞表面标志物及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测M1/M2型巨噬细胞分泌的细胞因子含量,观察巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP?1来源巨噬细胞的极化方向。结果　THP?1细胞经PMA刺激培养呈贴壁的M0型细胞后,经LPS + IFN?γ刺激培养后呈特征性M1型极化;经IL?4 + IL?13刺激培养后呈特征性M2型极化;经L3和L5蛋白刺激培养后均呈特征性M2型极化。阴性对照组、LPS + IFN?γ刺激组、IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组、L5蛋白刺激组间M1型巨噬细胞比例差异有统计学意义（[χ2] = 3 721.00,P < 0.001）,其中LPS + IFN?γ刺激组M1型巨噬细胞比例最高;各组间M2型巨噬细胞比例差异有统计学意义（[χ2] = 105.43,P < 0.001）。各组间C?C基序趋化因子配体2（CCL2）、肿瘤坏死因子α（TNF?α）、IL?12b、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、IL?10、甘露糖受体C型1（Mrc1）基因mRNA表达水平差异均有统计学意义（F = 191.95、129.95、82.89、11.30、9.51、12.35,P均< 0.001）,各组间CD86、CD206阳性率差异均有统计学意义（[χ2] = 24 004.33、832.50,P均< 0.001）。LPS + IFN?γ刺激组IL?1β、TNF?α表达水平均显著高于IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组及L5蛋白刺激组（P均< 0.001）;IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组和L5蛋白刺激组TGF?β1、IL?10表达水平均显著高于阴性对照组和LPS + IFN?γ刺激组（P均< 0.05）。结论　巴西日圆线虫L3和L5虫体蛋白体外均可诱导THP?1来源巨噬细胞向M2型极化。     

内毒素肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞清道夫受体A表达水平及其作用

脓毒血症为急性肺损伤(ALI)最常见病因。内毒素脂多糖(LPS)与巨噬细胞的结合是机体受到LPS刺激后的初始反应。目前认为，单核／巨噬细胞表面存在多种LPS受体，如CD14、toll样受体、β2白细胞整合素(CD11a／CD18、CD11b／CD18、CD11c／CD18)、清道夫受体A(SR-A)等。LPS与SR—A的结合被认为可能是单核巨噬细胞非炎性清除LPS的一条重要的途径。我们以内毒素肺损伤小鼠模型来观察肺泡巨噬细胞(AM)SR—A表达及其作用。     

补体、抗体和TNF-α在THP-1单核细胞系杀伤恶性疟原虫中的作用

人单核-巨噬细胞系统在抗恶性疟原虫(P.f.)红内期无性体的保护性免疫中起重要作用,但由于血源不足及混杂淋巴细胞等因素的影响,不易获得实验所需的人单核-巨噬细胞。单核细胞系THP-1是原单核细胞中的非贴壁部分,作者用PHA刺激的人外周血单核细胞培养液培育THP-1细胞,使之分化成具有呼吸爆发、表达CR3、FcγR受体等特征的贴壁型THP-1单核细胞,然后研究它在一些调理素和细胞因子杀伤P.f.中的作用。     

CD36与糖尿病动脉粥样硬化关系的研究进展

大多数急性冠脉事件都发生于动脉粥样硬化（AS）基础上,氧化低密度脂蛋白（OX—LDL）是导致AS发生的重要物质。巨噬细胞通过一种清道夫受体CD36摄取大量的OX—LDL形成泡沫细胞,故抑制CD36的表达可能与抗AS有关。本文将主要就CD36在糖尿病AS发病中的重要作用作～综述。     

白细胞介素10对人THP-1源巨噬细胞泡沫化过程中SR-A表达的影响

目的:本研究旨在观察白细胞介素-10(IL-10)对人THP-1源巨噬细胞泡沫化过程中清道夫受体A(SR-A)表达的影响,探讨在动脉粥样硬化形成中IL-10对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化的干预作用。方法:体外建立泡沫细胞培养体系,将细胞分为5组即THP-1单核细胞组,巨噬细胞组,IL-10刺激巨噬细胞组,ox-LDL刺激巨噬细胞组(泡沫细胞组),ox-LDL和IL-10联合刺激巨噬细胞组。采用RT-PCR和Westernbloting分别检测SR-A的mRNA和蛋白表达变化,脂质油红O化学染色方法检测各组细胞脂质摄取量的情况。结果:当THP-1分化为巨噬细胞时,SR-A开始大量表达;IL-10刺激可显著抑制巨噬细胞组SR-A的表达,其mRNA和蛋白分别下降为未刺激前的0.6倍和0.7倍,泡沫细胞形成率也下降为未刺激前的0.6倍。巨噬细胞经ox-LDL刺激形成泡沫细胞时,SR-A的表达进一步升高,其mRNA和蛋白分别增加为巨噬细胞组的1.5倍和1.4倍,泡沫细胞形成率提高为巨噬细胞组的1.7倍。在此过程中加入IL-10联合刺激,观察到SR-A的表达量有显著降低,其mRNA和蛋白均下降为单用ox-LDL刺激巨噬细胞组的0.4倍,ox-LDL的摄取量也下降为单用ox-LDL刺激巨噬细胞组的0.3倍。结论:IL-10抑制巨噬细胞SR-A表达,IL-10对ox-LDL诱导巨噬细胞SR-A的表达具明显干预作用。IL-10通过抑制SR-A表达可能在抗动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。     

巨噬细胞移动抑制因子与急性冠脉综合征的研究进展

研究表明,炎症反应是引发心血管疾病的重要因素,炎症反应可能参与了急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）发生、发展的全过程[1]。巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor,MIF）是具有多种生物活性的重要细胞因子,参与一系列炎症过程,在动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的形成、发展及斑块破裂过程中起到重要作用[2]。为此,本文将对MIF与ACS的研究现状作一综述。     

MCP-1及其基因多态性与糖尿病肾病的关系

糖尿病肾病（DN）的发病机制比较复杂,至今尚未完全阐明,可能与遗传易感性、糖代谢紊乱、细胞因子、炎症机制等多种因素有关[1]。近年研究发现,DN可能和单核巨噬细胞在肾组织的广泛浸润有关。而单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）是单核巨噬细胞特异性趋化因子,是单核巨噬细胞聚集活化的主要因素[2]。本文结合文献就MCP-1及其基因多态性（SNP）与DN的关系作一综述。     

RANKL和M-CSF诱导THP-1细胞向破骨细胞样细胞分化的研究

目的探讨建立有效诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞的方法。方法 THP-1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化。通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测分化来的细胞是否为破骨细胞样细胞。结果 THP-1在RANKL和M-CSF的作用下分化为TRAP阳性的破骨细胞样细胞。结论 RANKL和M-CSF可联合诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞。     

干扰素-γ对单核-巨噬细胞源性泡沫细胞ACAT-1表达的影响

目的观察干扰素-γ对THP-1、THP-1源性巨噬细胞泡沫细胞酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响.方法将THP-1细胞与PMA孵育48小时使之分化为巨噬细胞,继以100mg/ml Ox-LDL处理24小时使之形成泡沫细胞.将THP-1细胞、巨噬细胞、泡沫细胞分别用300U/ml IFN-γ干预24小时.RT-PCR检测ACAT-1mRNA水平,Western Blot检测其蛋白表达.结果 THP-1细胞分化成巨噬细胞以及形成泡沫细胞时ACAT-1mRNA及蛋白含量增加(P＜0.05),而后两种细胞之间无显著性差异.与各自的对照组相比,经IFN-γ作用后三种细胞ACAT-1mRNA及蛋白表达均增强(P＜0.05).结论 IFN-γ诱导单核、巨噬细胞、泡沫细胞ACAT-1的mRNA及蛋白表达,这可能是其促进动脉粥样硬化的机制之一.     

氧化应激在动脉粥样硬化发生发展中作用的研究新进展

心脑血管疾病占西方发达国家发病率和死亡率的首位,近年来其发病率在发展中国家也不断增加.动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作为心脑血管疾病的主要病理基础,其发生发展与氧化应激有着密切关系.正常情况下体内氧化与抗氧化处于动态平衡,过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)等内源性抗氧化酶可清除活性氧,维持细胞氧化还原自稳态.然而,当活性氧生成过多、抗氧化酶活性降低时,就会对DNA、RNA、蛋白质以及脂质等造成过氧化损伤引起细胞功能障碍,导致相关疾病的发生和发展[1]. 研究表明,氧化应激存在于AS从脂纹病变到斑块破裂的整个发展过程中,并介导了血管内皮细胞、平滑肌细胞及单核巨噬细胞功能改变及损伤[2].因此,阐明AS发生发展中细胞氧化应激分子机制对于减缓AS进展、预防急性心脑血管事件的发生具有重要意义.我们综合国内外文献探讨氧自由基的产生以及氧自由基对血管内皮细胞、平滑肌细胞和单核巨噬细胞的影响两个方面,阐述AS发生、发展过程中细胞氧化应激反应的分子机制.     

CXCR3 CCR5及其配体在类风湿关节炎患者滑液和外周血中的表达

目的 在单细胞水平上，研究类风湿关节炎（RA）患者滑液及外周血中单核/巨噬细胞，T淋巴细胞上趋化因子受体CCR5及ＣＸＣＲ３的表达。并测定CCR5的配体MIP-1β。激活正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）及T细胞亚群，探讨其在RA发病中的作用机制。方法 分离RA患者滑液单个核细胞（SFMC），外周血单个核细胞（PBMC）及正常人PBMC（对照），以三色荧光素标记物进行流式细胞术分析CD14^ ,CD3^ 细胞膜表面趋化因子受体CCR5，CCR3及细胞内趋化因子MIP-1β，RANTES和细胞因子白细胞介素（IL）-4，干扰素（IFN）-γ的表达率。结果 与PBMC相比，RA患者SFMC中的单核/巨噬细胞，T细胞上趋化因子受体CCR4及CEXR3表达显著增高；且单核/巨噬细胞分泌趋化因子MIP-1β，RANTES的百分比较高；SFMC中Th1细胞亚群（即IFN-γ^ T细胞）的表达率与滑液及外周血中T淋巴细胞上趋化因子受体CCR4及CXCR3的表达率显著相关。结论 趋化因子受体CCR5^ ,CXCR3^ 的单核/巨噬细胞，T细胞积聚在RA患者的病变关节内，且单核/巨噬细胞分泌较多趋化因子；CCR5，CXCR3可能参与调节细胞移动。与Th1细胞亚群及其“伙伴”细胞在RA关节内积聚有关；可能与RA的发病相关。