组学方法在昆虫杀虫剂抗性机制研究中的应用

长期以来杀虫剂在卫生和农业害虫防治领域的广泛使用,使昆虫杀虫剂抗性的产生成为进化的一种必然结果,昆虫杀虫剂抗性的防控和新型杀虫剂的研究均有赖于对杀虫剂抗性机制的研究。近年来,随着基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学的发展和应用,昆虫对杀虫剂抗性机制的研究已经取得较多新进展。该文对组学方法在昆虫杀虫剂抗性机制研究中的应用作一综述,并对组学研究在昆虫杀虫剂抗性研究中的意义和应用前景进行总结与展望。     

HPV16 E6/E7对永生化口腔上皮细胞p53、p21表达的影响

目的：为了探讨人乳头状瘤病毒(HPV)转化口腔上皮细胞的作用机制，研究HPV16 E6、E7对永生化口腔上皮细胞细胞周期调节因子p53、p21表达的影响。方法：免疫细胞化学法检测HPV16 E6、E7诱导的永生化口腔上皮细胞HIOEC中野生型和突变型p53的表达；Westem印迹检测HIOEC HPV16 E6、E7、p53、p21蛋白表达，并以正常口腔上皮细胞和转染空白载体的口腔上皮细胞为对照。结果：HIOEC细胞表达HPV16 E6、E7蛋白．野生型p53和p21表达水平高于正常口腔上皮细胞和转染空白载体的口腔上皮细胞。结论：p53的失活可能不是HPV16 E6、E7诱导口腔上皮细胞永生化的主要原因。     

江苏省2015—2019年输入性疟疾疫情及病例诊断

目的 分析江苏省2015—2019年输入性疟疾疫情流行特征及诊断情况,为防止疟疾输入再传播,巩固消除疟疾成果提供科学参考。方法 疟疾疫情资料来自国家传染病监测系统和寄生虫病防治信息管理系统,采用流行病学研究方法,描述2015—2019年江苏省疟疾发病、感染来源和病例三间分布情况,对输入性疟疾病例的诊断以及发病到诊断的时间间隔进行分析。结果 2015—2019年,江苏省共报告1 439例疟疾病例,其中1 436例为境外输入病例, 3例为输血感染病例。1 439例疟疾病例中,恶性疟1 075例（占74.7%）、间日疟63例（占4.4%）、卵形疟233例（占16.2%）、三日疟65例（占4.5%）、同一时间发病的混合感染病例3例（占0.2%）。境外输入性疟疾病例中,1 400例来自非洲（占97.5%）,其他来自亚洲28例（占1.9%）,以及南美洲和大洋洲8例（占0.6%）。江苏省13个设区市均有疟疾病例报告;疟疾病例以35~<50岁男性青壮年居多,每年的1、6和10月出现病例报告高峰。82.3%的病例由医疗机构诊断,由疾控机构诊断的病例占比逐年降低（P<0.05）。2019年发病到确诊超过9 d的病人所占比明显低于前四年（P<0.01）。结论 近5年江苏省疟疾疫情稳定,绝大部分为境外输入性病例,存在少数输血感染;病人就诊到确诊间隔时间有所缩短。继续做好风险人群健康宣教,提高医疗机构诊治能力,防止发生境外输入再传播,是今后疟疾防控工作的重点。     

肝脏囊型包虫病腹腔镜与开腹根治性手术治疗的疗效比较

目的 评价和比较经腹腔镜与开腹根治性手术治疗肝脏囊型包虫病的临床疗效.方法 回顾性分析2006年5月至2013年1月收住并接受根治性手术治疗的肝脏囊型包虫病患者的临床资料,并对手术时间、术中出血量、中转开腹率、平均术后住院时间、术后并发症进行统计学分析.结果 本研究共纳入153例患者,其中41例行经腹腔镜手术(腹腔镜组)、112例行传统开腹手术(开腹组).腹腔镜组平均手术时间较开腹手术短,但差异无统计学意义(t=1.97,P＞0.05).腹腔镜组5例患者行中转开腹手术,中转开腹率为12.2％(5/41).2组术中出血量比较差异无统计学意义(t=2.00,P＞0.05).腹腔镜组平均术后住院时间为3～8 d,而开腹组为4～14d,差异有统计学意义(t=1.99,P＜0.05).腹腔镜组并发症发生率为4.9％(2/41)、开腹组并发症发生率16.0％(18/112),差异有统计学意义(x2=3.92,P＜0.05).结论 腹腔镜肝包虫根治性手术治疗较传统开腹肝脏囊型包虫病手术治疗具有术后住院时间短,并发症少,恢复快,复发率低的特点,在严格选择患者的条件下是安全和可行的.     

高通量血液透析对尿毒症患者炎症介质水平及代谢指标的影响

目的:探讨高通量血液透析(HFHD)对尿毒症患者炎症介质水平及代谢指标的影响.方法:选择2018年8月—2020年8月在江西省九江市第一人民医院肾内科治疗的86例尿毒症患者作为研究对象,按随机数字表法将其分为两组,每组各43例.对照组采用血液透析滤过(HDF)+低通量血液透析(LFHD)治疗,观察组采用HFHD+LFHD治疗.比较两组患者炎症介质[白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、代谢指标[全段甲状旁腺激素(iPTH)、血磷]及营养状态.结果:治疗前两组患者IL-6、TNF-α、iPTH及血磷水平对比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组IL-6为(17.64±3.59)ng/L、TNF-α为(29.36±4.81)ng/L、iPTH为(486.36±50.79)ng/L及血磷为(1.64±0.28)mmol/L,低于对照组的(20.09±4.50)ng/L、(34.62±5.24)ng/L、(551.72±59.18)ng/L和(2.17±0.35)mmol/L,差异有统计学意义(t=2.791、4.849,P<0.05;t=5.496、7.754,P<0.05).治疗前两组患者改良的定量主观整体评估法(MQSGA)评分及身体质量指数(BMI)对比,差异无统计学意义(P>0.05).治疗后观察组MQSGA评分为(8.69±1.53)分,低于对照组,BMI为(24.96±1.12)kg/m2,高于对照组,差异有统计学意义(t=9.311、13.606,P<0.05).结论:尿毒症患者采用HFHD治疗是安全有效的,能够清除炎症介质,改善患者代谢紊乱症状及营养状态,有助于促进患者病情的恢复.     

毛细管区带电泳法测定艾塞那肽纯度及在稳定性研究中的应用

目的:建立毛细管区带电泳(CZE)方法测定艾塞那肽纯度,并初步考察其稳定性。方法:采用未涂层熔融石英毛细管(48.5 cm×50μm,有效长度40 cm),考察了运行缓冲液p H及浓度、分离电压、温度、添加剂乙腈浓度对分离效果的影响,最终确立电泳条件:运行缓冲液为200 mmol·L-1磷酸二氢钠-磷酸氢二钠溶液(p H 6.2;含15%乙腈),分离电压为20 k V,温度25℃,检测波长214 nm,压力进样5 k Pa×10 s。结果:艾塞那肽质量浓度在0.05~4.0 mg·m L-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好;检测限为3.3μg·m L-1,定量限为8.0μg·m L-1;主峰迁移时间的日内和日间RSD分别为1.07%(n=6)和0.91%(n=9),纯度的日内和日间RSD分别为0.08%(n=6)和0.10%(n=9)。该方法与HPLC法比较,纯度测定结果基本一致,本法分离效果更好,分析时间缩短,能有效检查艾塞那肽的纯度。结论:该方法可用于艾塞那肽的质量控制和稳定性研究。     

单孔与多孔腹腔镜脾切除术比较的Meta分析

目的 系统评价单孔腹腔镜（ SILS ）与传统多孔腹腔镜脾切除术的临床安全及可行性.方法 计算机检索 PubMed、EMbase、MEDLINE、SCI、CNKI、WanFang Data 和 The cochrane Library,收集单孔与多孔腹腔镜脾切除术的随机或非随机同期对照试验,检索时限截止到 2012 年 12 月.由两名评价者按照纳入与排除标准选择试验、提取资料和评价质量后,采用 RevMan 5.0 软件进行 Meta 分析.结果 纳入 4 个非随机对照试验,共 104 例患者.Meta 分析显示两组手术时间 （ MD = -1.08;95%CI = -37.24 to 35.07;P = 0.95 ）,术中出血量（ MD = -88.57;95% CI = -211.48 to 34.33;P = 0.16 ）,住院天数（ MD = -0.10;95% CI = -0.69 to 0.49;P = 0.73 ）均无统计学差异.结论 单孔腹腔镜脾切除术是安全、可行的.由于纳入研究数量和质量存在局限性,上述结论仍需大样本、高质量 RCT 进一步验证.     

参附注射液对糖尿病大鼠心肌超微结构的保护

目的:观察参附注射液对糖尿病大鼠心肌超微结构的影响并探索其可能机制。方法:实验于2003-12/2005-01在重庆医科大学生理教研室完成。①实验分组:30只Wistar大鼠随机分为正常对照组10只、糖尿病组20只。②实验方法:所有大鼠禁食12h后,糖尿病组大鼠以链脲佐菌素(以0.1mol/L,pH=4.2的枸橼酸缓冲液溶解)按60mg/kg经腹腔注射,正常对照组以等量的枸橼酸缓冲液腹腔注射。72h后,大鼠剪尾取静脉血测定空腹血糖,当空腹血糖>16.67mmol/L并有多饮、多食、多尿者,即为1型糖尿病造模成功。糖尿病组大鼠又按分层随机法分为单纯糖尿病组和参附注射液处理组,每组10只,参附注射液组以参附注射液10mL/kg腹腔注射,1次/d。正常对照组和单纯糖尿病组大鼠均以生理盐水10mL/kg腹腔注射。所有大鼠均以普通食物喂养,自由饮水和单笼饲养20周。③实验评估:20周后测定各组血糖、血脂、血清胰岛素、血清与心肌超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量;免疫组化法检测心肌细胞膜葡萄糖转运蛋白4mRNA蛋白表达;观察各组大鼠胰岛细胞的病理结构以及心肌超微结构的变化。结果:30只大鼠均进入结果分析。①空腹血糖、血清胰岛素水平:造模后20周,参附注射液组的空腹血糖明显低于造模3d时水平(P<0.05),明显低于单纯糖尿病组,但高于正常对照组(P<0.01);单纯糖尿病组空腹血糖明显高于造模3d时水平(P<0.01)。造模后20周,参附注射液组血清胰岛素水平明显低于正常对照组,但显著高于单纯糖尿病组(P<0.05)。②血脂水平:参附注射液组和单纯糖尿病组的总三酰甘油、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于正常对照组(P<0.05),参附注射液组各值明显低于单纯糖尿病组(P<0.05);单纯糖尿病组和参附注射液组高密度脂蛋白胆固醇水平明显低于正常对照组(P<0.05),参附注射液组高密度脂蛋白胆固醇水平明显高于单纯糖尿病组(P<0.05)。③血清和心肌超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量:超氧化物歧化酶活性:参附注射液组和单纯糖尿病组明显低于正常对照组(P<0.01),参附注射液组明显高于单纯糖尿病组(P<0.05);血清丙二醛的含量:参附注射液组和单纯糖尿病组明显高于正常对照组(P<0.05),参附注射液组明显低于单纯糖尿病组(P<0.05)。④葡萄糖转运蛋白4mRNA阳性表达:参附注射液组吸光度显著低于正常对照组(P<0.01),明显高于单纯糖尿病组(P<0.01),而参附注射液组的面密度值显著低于正常对照组(P<0.01),明显高于单纯糖尿病组(P<0.01)。⑤光镜观察:参附注射液组大鼠胰岛细胞水肿或空泡样变比单纯糖尿病组数量少而且更轻;透视电镜观察参附注射液组其心肌细胞线粒体和心肌毛细血管内皮细胞的水肿较单纯糖尿病组程度更轻。结论:参附注射液对糖尿病大鼠心肌超微结构具有保护作用,这与其清除氧自由基和抗脂质过氧化物有关;参附注射液对糖尿病大鼠健存胰岛细胞的保护,提高了糖尿病大鼠的血清胰岛素水平,降低了血糖、血脂,对糖尿病大鼠心肌内微血管内皮细胞和心肌细胞线粒体的保护具有促进作用。     

脂肪酸合成酶在大肠癌中的表达及临床意义

[目的]研究脂肪酸合成酶(FAS)在大肠癌的表达状况及临床意义.[方法]用免疫组织化学染色法观察47例大肠癌中的FAS表达情况,并与Dukes分期进行比较,同时比较FAS的表达与病人生存率的关系.[结果]47例大肠癌中FAS阳性表达率为70.21%(33/47),FAS的表达与Duke's分期呈正相关,但与总体生存率无关.[结论]FAS在大肠癌呈高表达,FAS不能作为大肠癌独立的预后指标.     

重组酶介导的蓝氏贾第鞭毛虫特异性等温核酸扩增方法的建立及评价

目的　建立基于重组酶介导的等温扩增技术（RAA）的蓝氏贾第鞭毛虫核酸检测方法,并评价其检测敏感性和特异性。方法　选择蓝氏贾第鞭毛虫β?贾第素（β?giardin）基因作为检测靶基因,设计、合成特异性检测引物及荧光探针,建立荧光RAA检测体系。分别以不同拷贝数的重组质粒（含β?giardin基因靶序列）和不同浓度蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA为模板进行荧光RAA扩增,评价其检测敏感性;分别以蓝氏贾第鞭毛虫、日本血吸虫、华支睾吸虫、微小隐孢子虫、似蚓蛔线虫、沙门氏菌及志贺氏菌基因组DNA为模板进行扩增,评价其检测特异性。结果　成功建立了蓝氏贾第鞭毛虫荧光RAA检测方法,其可在等温（39 ℃）条件下实现对靶基因片段的快速、特异性扩增（20 min内）。分别以重组质粒和蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA为模板,该方法的检测敏感性可达102拷贝/μL和1 pg/μL;以日本血吸虫、华支睾吸虫、微小隐孢子虫、似蚓蛔线虫、沙门氏菌及志贺氏菌基因组DNA为模板的RAA检测结果均为阴性,具备较好特异性。结论　建立了一种操作简便、敏感、特异的可用于蓝氏贾第鞭毛虫核酸检测的荧光RAA方法。