NO与小鼠病毒性心肌炎发生发展的关系

目的 探讨ＮＯ在小鼠病毒性心肌炎发生发展中的作用。方法 建立柯萨奇病毒Ｂ３（ＣＶＢ３）病毒性心肌炎ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠模型及ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）培养体系。酶法测定小鼠心肌及Ｍφ分泌ＮＯ含量;免疫组化法检测心肌ｉＮＯＳ;微量滴定法测定心肌内感染性病毒;ＲＴ－ＰＣＲ法检测心肌病毒ＲＮＡ;ＴＵＮＥＬ法检测凋亡细胞;光镜、电镜检查心肌损伤状况。结果 （１）小鼠心肌内ＮＯ于ＣＶＢ３感染后７～３０     

NO与小鼠病毒性心肌炎心肌损伤的关系

目的 嗜鼠心肌Ｃｏｘａｃｋｉｅ Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）可诱导ＢＬＡＢ／Ｃ小鼠病毒性心肌炎（ＶＭＣ）。探讨自由基一氧化氮（ＮＯ）与ＶＭＣ心肌损伤的关系。方法 给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种０．１ｍｌ１００ＴＣＤ５０ＣＶＢ３ｍ,感染后分批断脊处死小鼠。应用双重荧光染色技术、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和共聚焦显微镜对小鼠心肿中细胞凋亡、ＮＯ相关合成酶（ＮＯＳ１、ＮＯＳ２和ＮＯＳ３）及其降解产物（Ｎｉｔｒｏ     

细胞凋亡与小鼠病毒性心肌炎发生发展的关系

通过对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种ＣＶＢ３ｍ后３，６，９，１２，１５，３０天批随机处死小鼠，取心脏进行检测发现，感染后９－１５天，病毒性心肌炎检出率可达９２．３０％。感染后３－９天，心肌中可分离出病毒，而病毒核酸可持续存在于感染后３个。应用电镜，原位末端标记法及免疫组化法检测发现：ＶＭＣ鼠心肌中可见心肌细胞和血管内皮细胞凋主ＴＧＦ－β１和Ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。     

低硒与Coxsackie B_(3m)病毒感染对BALB/c小鼠肝脏脂质过氧化物代谢的影响

用国产低硒食用酵母合成低硒饲料（硒０．０１３ｍｇ／ｋｇ，ＶＥ含量为２０ｍｇ／１００ｇ）喂养断奶后ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠，５周后腹腔接种嗜鼠心肌病毒ＣＶＢ３ｍ１０３ＴＣＤ５００．１ｍｌ，７天后处死建立低硒状态下病毒性心肌炎模型，测定肝脏组织中脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量及全血中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性。结果表明低硒感染ＣＶＢ３ｍ小鼠肝组织中ＬＰＯ含量明显高于常硒病毒感染组及常硒对照组（Ｐ＜０．０１）；低硒感染ＣＶＢ３ｍ病毒组小鼠全血ＧＳＨ－Ｐｘ活力也最低。结果提示：低硒因素加重病毒感染引起ＧＳＨ－Ｐｘ活力降低，ＬＰＯ堆积，降低机体的抗氧化能力     

低硒与Coxsackie B3m病毒感染对BALB／c小鼠肝脏脂质过氧化物？…

用国产低硒食用酵母合成低硒饲料（硒０．０１３ｍｇ／ｋｇ，ＶＥ含量为２０ｍ／１００ｇ）喂养断奶后ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠，５周后腹腔接种嗜鼠心肌病毒ＣＶＢ３ｍ１０＾３ＴＣＤ５００．１ｍｌ７天后处死建立低硒状态下病毒性心肌炎模型，测定肝脏组织中脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量及全血中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性。结果表明低硒感染ＣＶＢ３ｍ小鼠肝组织中ＬＰＯ含量明显高于常硒病毒感染组及常硒对照组（Ｐ〈０     

大鼠同种异位心脏移植术后血清NO及心肌组织NOS活性的观察

目的　研究内源性一氧化氮（ＮＯ）与心脏移植急性排斥反应的关系。方法　本研究以大鼠同种异位心脏移植为研究对象，观察了术后３、５、７ 天的血清ＮＯ 水平以及心肌组织一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）的活性。结果　在急性排斥反应发生的早期开始血清ＮＯ 水平就已显著升高（术后３、５、７ 天皆为Ｐ ＜ ０．０１）；心肌组织ＮＯＳ活性亦显著高于对照组（术后３ 天Ｐ ＜ ０．０５，术后５ 天Ｐ＜ ０．０１，术后７ 天Ｐ ＜ ０．０５）。结论　血清ＮＯ 水平的检测对于心脏移植急性排斥反应的发生可能具有早期的辅助诊断意义。     

丙型肝炎病毒抗原在人肝癌细胞素Hep3B中的表达

目的：研究ＨＣＶ－ＮＳ３和ＮＳ５在体外感染的人肝癌细胞素Ｈｅｐ３Ｂ中的表达情况。方法：用定量的ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清感染Ｈｅｐ３Ｂ细胞,应用ＳＡＢＣ免疫组化法检测ＨＣＶ－ＮＳ３和ＨＣＶ－ＮＳ５抗原在其感染细胞中的表达情况。结果：在感染后的７２小时,第１、２、３和４周的Ｈｅｐ３Ｂ细胞膜、细胞浆或细胞核上发现ＨＣＶ－ＮＳ３和ＨＣＶ－ＮＳ５的抗原的阳性信号。结论：ＨＣＶ能够在Ｈｅｐ３Ｂ细胞各级党委纱中表     

CVB3m对免疫功能低下小鼠心肌损伤的病理观察

目的 观察免疫功能低下小鼠感染ＣＶＢ３ｍ后心肌损伤的特点。方法 雄性昆明小鼠随机分成４组，１对照组；Ⅱ照射组；Ⅲ病毒组；Ⅳ照射＿病毒组。照射组４ＧｙＸ－射线全身照射；病毒组常规腹腔接种ＣＶＢ３ｍ；照射＋病毒组先照射，丁照射后次日接咎ＣＶＢ３ｍ。观察各组小鼠接种病毒后第３、７、１４、２１天心肌光镜改变，及第１４天心肌电镜改变。结果 病毒组小鼠注射病毒后第７在，病变最重，病毒性心肌炎（ＶＭＣ）检出率为     

丙型肝炎病毒E1，E2/NS1，NS5蛋白基因在大肠杆菌内的表达及其产物的初步应用

目的在体外表达及纯化ＨＣＶ不同功能区的病毒蛋白，用于研究ＨＣＶ各功能区抗体的临床意义。方法将ＨＣＶＥ１，Ｅ２／ＮＳ１，ＮＳ５区的部分基因片段克隆到表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中ＭＢＰ编码基因的下游，在大肠杆菌中进行表达。结果表达的融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，ＭＢＰ－ＮＳ５的分子量分别为５７０００、６５０００、６２０００，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析表明这些融合蛋白具有ＨＣＶ的抗原活性。将这三种融合蛋白纯化后作为抗原检测了丙型肝炎患者血清９５份，其中抗－ＨＣＶＥ１阳性率为１０．５％，抗－ＨＣＶＥ２／ＮＳ１为６３．２％，抗－ＨＣＶＮＳ５为５３．７％。结论本实验表达的ＨＣＶ融合蛋白在ＨＣＶ感染的血清学诊断中具有一定的价值。     

博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织表面活性物质蛋白A B C mRNA的表达

目的观察博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织表面活性物质蛋白（ＳＰ）Ａ、Ｂ、ＣｍＲＮＡ的表达。方法气管内灌注博莱霉素Ａ５，复制肺纤维化模型，分别于３、７、１４和２８天处死动物，提取肺组织总ＲＮＡ，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交。结果肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞数量增加。灌注博莱霉素后第３天ＳＰＡ、ＳＰＢ及ＳＰＣｍＲＮＡ的表达即开始下降，７天时降至最低点，而后于１４天时开始回升，至２８天时上升最明显。但仍低于正常。结论博莱霉素致纤维化大鼠肺组织ＳＰＡ、ＳＰＢ及ＳＰＣｍＲＮＡ的表达减低。肺泡Ⅱ型上皮细胞功能的改变可能参与肺纤维化的发病过程。     

小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡相关蛋白的表达

目的 探讨嗜鼠心肌Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）诱导的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠病毒性心肌炎（ＶＭＣ）细胞凋亡的机制。方法 给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种０．１ｍｌ１００ＴＣＤ５０ＣＶＢ３ｍ，感染后批断脊处死小鼠，应用双重荧光染色技术、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和共聚焦显微镜对小鼠心肌细胞凋亡及部分相关蛋白表达进行检测。结果 ＣＶＢ３ｍ可诱发小鼠ＶＭＣ。感染病毒后９～１２ｄ病变达到高峰，检出率达１     

博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织表面活性物质表面ABCmRNA？…

目的 观察博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织表面活性物质蛋白（ＳＰ）Ａ，Ｂ，ＣｍＲＮＡ的表达。方法 气管内灌注博莱霉素Ａ５，复制肺纤维化模型，分别于３，７，１４和２８天处死动物，提取肺组织总ＲＮＡ，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交。结果 肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞数量增加，灌注博莱霉素后第３天ＳＰ－Ａ，ＳＰ－Ｂ及ＳＰ－ＣｍＲＮＡ的表达即开始下降，７天时降至最低点，而后于１４天时开始回升，至２８天时上升最明显。     

丙型肝炎病毒NS5B在Huh-7细胞中的转染与表达

目的 建立丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂ表达的人肝系。方法 以脂质体共转染ＮＳ５Ｂ基因人Ｈｕｈ－７细胞,以ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ在ＤＮＡ水平检测转染的结果,以ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ证实了Ｈｕｈ－７细胞中有ＮＳ５Ｂ的蛋白表达。结果 在转这ＮＳ５Ｂ质粒的细胞系中有ＮＳ５Ｂ基因的存在和ＨＣＶ－ＲＡＮ多聚酶的表达。     

应用嗜鼠心肌CoxsackieB3病毒反复感染致BALB／c小鼠心肌损伤

应用嗜鼠心肌ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠重复腹腔注射，连续３次，间隔３０天，末次注射后１０天处死小鼠。光学显微镜检查发现，小鼠心肌可见不同时期的病灶（坏死灶、瘢痕），心肌损伤检出率达１００％。应用ＴＵＮＥＬ法检测发现，８２．５０％感染组鼠心肌中可见散在心肌细胞凋亡，与对照组（２３．０８％）比较，Ｐ＜０．０１，有极显著性差异。提示ＣＶＢ３ｍ重复感染可致ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠慢性心肌损伤，心肌细胞凋亡参与心肌损伤的发生与发展。     

丙型肝炎病毒NS_5B在Hub-7细胞中的转染与表达

目的建立丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５Ｂ表达的人肝细胞系。方法以脂质体共转染ＮＳ５ＳＢ基因人Ｈｕｂ－７细胞,以ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ在ＤＮＡ水平检测转染的结果,以ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ证实了Ｈｕｂ－７细胞中有ＮＳｕＢ的蛋白表达。结累在转染过ＮＳＳＢ质粒的细胞系中有ＮＳＳＢ基因的存在和ＨＣＶ－ＲＮＡ多聚酶的表达。结论我们在Ｈｕｂ－７细胞中建立了ＨＣＶ－ＲＮＡ多聚酶表达系统,它有助于研究ＨＣＶ复制机制和为基因治疗丙型肝炎打下基础。     

胃癌组织DCC基因（VNTR）的杂合性丢失和Bcl—2蛋白的表达

目的：为了研究ＤＣＣ基因的杂合性丢失（ＬＯＨ）和Ｂｃｌ－２蛋白过度表达在胃癌发生中的作用，方法：采用ＰＣＲ方法及免疫组织化学技术检测了胃癌组织ＤＣＣ基因的ＬＯＨ和Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：结果发现，胃癌（信息个体）ＬＯＨ发生率为５４５％（１８／３３），Ｂｃｌ－２蛋白表达阳性率为６０％（３０／５０）；ⅢⅣ期胃癌ＬＯＨ发生率（８２２％，１５／１８）显著高于ⅠⅡ期胃癌２０％，３／１５）（Ｐ＜００１）；Ｂｃｌ－２蛋白的表达与ＤＣＣ基因的ＬＯＨ及胃癌大小、分化、淋巴结转移、浆膜浸润、临床分期及Ｌａｔｌｒｅｎ’ｓ分型无显著相关。结论：以上结果提示，ＤＣＣ基因的ＬＯＨ和Ｂｃｌ－２蛋白的高表达均参与了胃癌的发生，ＤＣＣ基因的ＬＯＨ是胃癌发生的晚期事件，其致癌机制与Ｂｃｌ－２有所不同     

糖皮素激素及茶碱对哮喘小鼠气道炎症与肺内一氧化氮抑？…

目的 探讨糖皮质激素、茶碱对哮喘气道炎症和肺内一氧化氮（ＮＯ）水平、诱生型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）表达的影响。方法 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠分为６组：哮喘模型组（Ａ，１０只），正常对照组（Ｎ，１０只），地塞米松雾化吸入组（Ｃ１，７只），地塞米松腹腔注射组（Ｃ２，７只），布地奈德气雾剂组（Ｃ３，７只），茶碱组（Ｔ，１０只）。建立哮喘模型，给予糖皮质激素、氨茶碱、观察支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞总数、     

恶性疟原虫FCC—1／HN株pcDNA3—EBA175／HRPII重组质粒直？…

为观察恶性疟原虫ＦＣＣ－１／ＨＮ株ｐｃＤＮＡ３－ＥＢＡ１７５／ＨＲＰⅡ重组质粒肌肉途径接种后在宿主体内的表达。ＢＡＬＢ／ｃ小鼠分为３组,１组（实验组）经后腿股四头肌注射重组粒ｐｃＤＮＡ３－ＥＢＡ１７５／ＨＲＰⅡ１００μＧ;２组（实验对照组）注射空白质粒ｐｃＤＮＡ３１００μＧ,３组（正常对照组）注射ＰＢＳ（ｐＨ７．４）１００μｌ。每隔２０ｄ加强注射,于第１次接种后２０ｄ和第２次接种后１０ｄ取小鼠双侧     

BALB／C小鼠感染卫氏并殖吸虫后血清中循环抗原的动态

用滤纸血以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠血中循环抗原（ＣＡｇ），结果显示：小鼠感染卫氏并殖吸虫囊蚴后第３天检出ＣＡｇ，其阳性率为３８％，第１５天起ＣＡｇ达高峰，阳性率１００％，２６～５６天ＣＡｇ维持高水平，第７１天ＣＡｇ滴度下降，以后维持在一定水平，说明滤纸血可以代替血清作ＣＡｇ检测。以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫小鼠血中ＣＡｇ时，具有简便，敏感和特异的优点，可试用于肺吸虫感染的早期诊断和流行病学调查。     

HCV5‘NCR调控抑制活性的反义寡核苷酸的筛选

目的 寻找高效特异的新型抗ＨＣＶ药物,探讨针对ＨＣＶ基因的硫代修饰反义寡核苷酸（Ｓ－ＡＳＯＤＮｓ）最佳作用靶序列。方法 参考ＨＣＶ５’ＮＣＲ计算机预测的二级结构图,设计合成了１５条Ｓ－ＡＳＯＤＮ、３条正义寡核苷酸及１条随机序列,采用ＨＣＶ５’ＮＣＲ调控荧光素酶基因的瞬时表达系统,将Ｓ－ＡＳＯＤＮ与ｐＨＣＶ－ｎｅｏ４共转染,通过荧光素激活性表达高低,反映Ｓ－ＡＳＯＤＮ对ＨＣＶ调控基因的抑制活性。结果