慢性乙型肝炎抗病毒治疗起于探索,重在规范

自2007年起至今,慢性乙型肝炎(CHB)治疗及研究领域"热闹"非凡.由于近年在我国大陆、香港、台湾及欧洲等地对HBV感染自然史的深入了解,认为病毒负荷和肝炎预后有重要关系,而且发现HBeAg阴性CHB病毒负荷及肝功能呈波动性改变,加上抗病毒药物不断更新,病毒检测方法日趋完善,所以原有乙型肝炎治疗指南亟待改进.     

低分子肝细胞生长素对大鼠实验性肝纤维化作用的研究

与方法从病理形态、免疫组化及生化方面研究了低分子肝细胞生长素（ｈｅｐａｔｏｐｏｉｔｉｎ，ＨＰＮ）抗实验性大鼠肝纤维化作用。结果与结论免疫组化证明ＨＰＮ可抑制Ｉ．Ⅲ型胶原的合成及沉积：ＨＰＮ治疗组血清纤维化指标ＰＣⅢ及肝组织羟脯氨酸含量明显下降。表明ＨＰＮ抗肝纤维化作用可能优于秋水仙碱。     

Fas/FasL表达与HBV感染关系的研究

研究Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达与ＨＢＶ感染的方法。方法 用免疫组化方法同时检测５２例肝穿组织ＦａｓＦａｓＬ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的表达。结果 这四项指标均与病变进展程度相关，其表达的阳性程度在各型乙型肝炎的分布差异均有显著意义，但Ｆａｓ／ＦａｓＬ阳性的肝细胞并不全为ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ阳性。     

慢性乙型肝炎患者远期生存质量研究

目的 对慢性乙型肝炎患者远期生存质量进行研究,为其预后判断,药物疗效的分析及药品经济学评估提供依据。 方法 采用补充修订的SF-36健康相关生存质量量表调查101例6～l 8年前经肝穿活组织检查诊断的慢性乙型肝炎和105例门诊体检的普通人群。 结果 慢性乙型肝炎患者在生理机能、生理职能、总体健康、精神健康、肝病特有症状5个方面的远期生存质量低于普通人群,差异有显著性(μ≥2.10,P<0.05)。 结论 慢性乙型肝炎患者远期生存质量差。     

乙型肝炎病毒裸DNA转染原代大鼠肝细胞模型的建立

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)环化裸DNA转染原代大鼠肝细胞瞬时表达模型,为进一步研究肝细胞与HBV之间的互动关系奠定基础. 方法采用原代大鼠肝细胞(PRH)作为靶细胞,电转环化HBV DNA,于转染后1～10d各时点分别以Southern杂交和斑点杂交分析HBV DNA的复制中间体与复制形式,以IMX系统检测HBsAg、HBeAg,以western免疫印迹、免疫斑点印迹和免疫细胞化学法检测HBcAg,用RT-PCR检测HBV S/X mRNA,并采用电镜观察有无Dane颗粒合成.以单纯电击PRH为对照组. 结果 HBV环化裸DNA在PRH中的复制为游离型,可见rcDNA、cccDNA和ssDNA等复制中间体;表达的蛋白质产物、HBsAg于转染后各时点PRH裂解液中均可检测到(P/N值4.83～85.69,阳性≥2.1),峰值于1～3d,转染后1～10d平均P/N值为18.239±27.459;PRH培养上清液中未检测到HBsAg;HBeAg于PRH培养上清液和细胞裂解液中均呈阴性(P/N值＜2.1);HBcAg于转染后1～3d时点内检测到低度表达;HBV S mRNA为阳性,而X mRNA为阴性;电镜未观察到Dane颗粒. 结论 HBV环化裸DNA转染原代大鼠肝细胞瞬时表达模型稳定性、可重复性均良好.     

乙型肝炎患者肝组织Fas／FasL表达及其在肝细胞凋亡中的作用

研究Ｆａｓ和Ｆａｓ配体在乙型肝炎肝细胞凋亡及坏死中的作用。方法：分别用免疫组织化学方法和原位末端标记技术检测７１例各类型乙型肝炎患者肝组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达和肝细胞凋亡情况。结论：Ｆａｓ和ＦａｓＬ在肝细胞凋亡和坏死中起作用，肝细胞的直接自杀方式或自分泌及旁分泌杀伤机制，可能为乙型病毒性发病理的重要因素。     

反义乙肝病毒S基因真核载体构建及体外抗乙肝病毒作用

目的：探讨反义ＲＮＡ抗乙肝病毒（ＨＢＶ）作用。方法：构建了正，反义ＨＢＶＳ基因重组ＥＢ病毒载体ｐＭＥＰ４ｓ，ｐＭＥＰ４Ｓａｓ，ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀法将重组载体ＤＮＡ转染２．２．１５细胞，潮霉素筛选１个月得到抗性细胞克隆，ＥＬＩＳＡ，斑点杂交法分别检测抗性细胞上清ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇＨＢＶＤＮＡ水平，结果：转染后１，２月，反义载体ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ的抑制率分别达７５％，５１．６％，７０％，４６     

乙型肝炎抗病毒治疗的前瞻

乙型肝炎易于转变成慢性，最终可能发展成为肝硬化及肝癌，严重威胁人民的健康。近年，抗乙型肝炎病毒（HBV）药物的研究进展较大，如核酸类似物不断发展，免疫调节药物的研究不断深入等。我国己批准拉米夫定、阿德福韦（adefovir，ADV）酯、恩替卡韦及聚乙二醇化干扰素（pegylated interferon，PEG—IFN）等新药用于治疗慢性乙型肝炎，临床医师有较多的选择，因而美国、欧洲、亚太地区及我国相继修订指导原则，为临床医师临床诊断时提供参考。对乙型肝炎的探索在不断进展，对有些问题的认识在不断深化。     

超声微泡造影剂促进腺病毒载体感染肝细胞的实验研究

目的 探讨超声微泡造影剂促进腺病毒载体感染肝细胞的有效性。方法 将昆明小白鼠分为三组，每组5只，一组经尾静脉输入含腺病毒载体的造影剂1ml，用低频超声波照射至微泡完全消失(约5min)。第二组经尾静脉输入含腺病毒载体的微泡造影剂，不采用超声波照射。第三组既不输入腺病毒载体也不采用超声波照射，用于对照。转基因后第14d，断颈处死小鼠，立即剖腹，取出肝脏，进行冰冻切片，在荧光显微镜下观察肝组织内荧光蛋白表达情况。结果 以超声触发破坏携带腺病毒微泡方式进行感染的小鼠肝脏中，绝大多数肝细胞均有大量荧光素蛋白表达；而单纯静脉注射腺病毒载体小鼠肝脏中，仅见少数肝细胞中有荧光素蛋白的表达；对照组小鼠肝组织中无荧光素蛋白的表达。结论 利用低频超声波在肝脏局部击碎携带腺病毒的微泡造影剂，有效地提高了腺病毒载体在肝细胞的感染率。     

重新认识乙型肝炎防治中的几个问题

乙型肝炎仍为当前危害我国广大人民健康的常见病、多发病,部分病人发展成为肝硬化及肝癌,危及生命。近年来,由于核苷酸类似物抗乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)取得进展,最近对乙型肝炎的发病机理及病毒清除规律也有新的发现,使我们不得不重新认识防治乙型肝炎的有关问题。一、ＨＢＶ慢性持续感染的原因是清除病毒能力不足,还是抑制病毒复制能力低下?采用拉美夫定治疗乙型肝炎,测定ＨＢＶ的动力学改变,人体血浆内ＨＢＶ的半衰期为24ｈ,平均存活期为346ｈ,平均病毒繁殖周期为247ｈ,每日病毒更新率为50%,每日病毒繁殖量可达1011拷贝[1]。应用爱德和维(Ａ…