人白血病相关蛋白16基因对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取及过氧化物酶体增殖物激活受体γ活性的影响

目的探讨人白血病相关蛋白（LRP）16对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取及过氧化物酶体增殖物激活受体（PRAR）γ活性的影响。方法利用脂质体转染及慢病毒介导的RNA干扰技术构建LRP16过表达、抑制表达及对照细胞系。检测LRP16对细胞葡萄糖摄取的影响。Luciferase法检测LRP16对PPAR反应元件（PPRE）相对荧光素酶活性的影响。Western Blot法检测LRP16对PPARγ及葡萄糖转运蛋白（GluT）-4表达的影响。结果（1）成功构建LRP16过表达、抑制表达及对照细胞系。（2）过表达LRP16抑制细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取;抑制表达LRP16促进细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取。（3）LRP16剂量依赖性的抑制COS-7细胞PPRE的相对荧光素酶活性;（4）LRP16抑制脂肪细胞PPARγ及GluT-4蛋白表达。结论LRP16通过下调PPAR7活．眭抑制3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取导致胰岛素抵抗。     

高糖对小鼠胰岛和胰岛b细胞株INS-1E的长期作用

目的探讨高糖对胰岛B细胞INS-1E和小鼠胰岛的慢性作用。方法雌性NMRI小风6-10周龄,苯巴比妥腹腔注射麻醉,应用胶原酶技术消化胰腺分离胰岛。传代培养的INS-1E细胞和分离的小鼠胰岛分别于含11．1,25．0mmol/L葡萄糖的RPMll640培养液中培养72h,然后于含3．3,16．7mmol／L葡萄糖的Krebs-Ringer缓冲液中培养60min,留取上清液行胰岛素测定。INS-1E细胞在含不同浓度的葡萄糖的RPMI1640培养液中培养72h,提取其总RNA,合成相应的cDNA,再行RT-PCR检测胰十二指肠同源异形盒-1（Pdxl）,胰岛素1（Insl）,胰岛素2（Ins2）和葡萄糖转运子2（Glut2）的基因表达。结果高糖培养后INS-1E细胞和小鼠胰岛的基础INS分泌增加[INS-1E细胞：（10．47±0．78）vs（7．71±0．59）ng／10000细胞,P〈0．01;小鼠胰岛：（3．85±0．26）vs（2．18±0．21）μg／L,P〈0．001],糖刺激的INS分泌减少[INS-1E细胞：（17．11±1．98）vs（30．76±2．20）ng／10000细胞,P〈0．001;小鼠胰岛：（14．78±1．03）VS（20．46±1．49）μg／L,P〈0．01];高糖处理后INS-1E细胞的Pdxl,Insl,Ins2和Glut2的mRNA水平下降。结论高糖对胰岛β细胞具有慢性毒性作用。     

人参皂甙Rb1促进3T3-L1脂肪细胞分化并抑制脂解

目的 观察人参皂甙Rb1（Rb1）对3T3-L1脂肪细胞分化和脂肪分解的作用，并探讨人参抗糖尿病的作用机制。方法 在3T3-L1脂肪细胞诱导分化过程中，分别加入不同浓度的Rb1作用6d，各组脂肪细胞分别进行油红O染色，甘油三酯（TG）含量、^3H-葡萄糖转运率检测，并用实时定量PCR和免疫印迹对脂肪细胞PPARγ2、CCAAT增强子结合蛋白（C／EBPα）、脂肪酸结合蛋白（ap2）和葡萄糖转运体（Glut）1、Glut4的mRNA和蛋白水平进行测定；运用表面等离子体共振技术（SPR）测定Rb1与PPARγ结合亲和力；在分化成熟的脂肪细胞加入Rb1孵育后，测定释放到上清液的甘油含量。结果Rb1能促进3T3-L1脂肪细胞的分化程度，并呈剂量依赖关系，10μmol／L浓度使细胞内TG含量增加约56％，同时PPARγ2和C／EBPα的mRNA和蛋白水平均显著升高，其下游基因ap2的mRNA水平也明显增加。分化过程中加入Rb1的脂肪细胞基础和胰岛素介导的葡萄糖转运率增加。Glut4的mRNA和蛋白水平均上升，而Glut1则未见显著变化；SPR检测结果显示Rb1具有PPARγ结合活性，提示Rb1是PPARγ的配体；在诱导分化成熟的脂肪细胞中，Rb1抑制基础脂肪分解，10μmol／L浓度使上清甘油含量下降约50％，但对异丙肾上腺素介导的脂解没有影响。结论 Rb1作为PPARγ的配体，通过上调PPARγ2,2C／EBPα的表达促进脂肪细胞的脂肪形成；增加基础和胰岛素刺激的葡萄糖利用；同时抑制基础脂解。以上结果表明人参和人参皂甙抗糖尿病的作用可能与促进脂肪细胞分化，增加胰岛素敏感性和抑制基础脂解有关。     

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响

目的探讨选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对人肝癌HepG2细胞株的生长抑制、诱导凋亡及其对bcl-2表达的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期、凋亡及凋亡相关蛋白bcl-2的表达。结果NS-398抑制HepG2的增殖活性，经20、40、80和160μmol／L的NS-398处理细胞48h后，其抑制率分别为6．72％、16．21％、20．86％和25．34％，呈剂量依赖效应关系；细胞经160bLmol／L的NS-398处理24h、48h和72h后，G。／G1期细胞由76．07±0．75％分别减少至62．27±0．74％、59．17±1．47％和53．03±1．60％（P〈0．05），S期细胞由11．40±0．79％分别增加至13．23±0．81％、16．20±1．95％和16．60±1．25％（P〈0．05），G2／M期细胞无明显变化；凋亡细胞增多，凋亡率分别为8．47％、16．3％和23．9％；细胞经160μmol／L的NS-398处理48h后bcl-2蛋白与对照组比，表达下调（P〈0．01）。结论NS-398对人肝癌细胞株HepG2有抑制增殖、诱导凋亡作用，细胞凋亡的机制可能与细胞凋亡相关基因bcl-2表达下调有关。     

叉头状转录因子O1与吡格列酮干预对肝癌HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响

目的研究叉头状转录因子O1（FoxO1）及吡格列酮干预对高胰岛素诱导的肝癌HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响及机制。方法1×10^-6mol／L胰岛素培养HepG．2细胞24h后,诱发培养基葡萄糖消耗减少建立细胞模型,将细胞分为对照组、空白质粒组、FoxOlsiRNA载体组、1×10^-5mol／L吡格列酮组。以普通培养基培养的细胞作为空白对照组。37℃、5％CO2培养箱中孵育24h,葡萄糖氧化酶法检测培养基中葡萄糖含量,逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测FoxO1mRNA和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）mRNA表达,Westernblot法检测PPAR-γ蛋白表达。将FoxO1mRNA、PPAR-γ mRNA、PPAR-γ蛋白表达与葡萄糖消耗量进行相关分析和曲线拟合。采用单因素方差分析及多样本均数两两比较进行统计学分析。结果高胰岛素培养24h较未诱导细胞培养基的葡萄糖消耗降低[分别为（1．36±0．03）和（2．93±0．05）mmol／L,P〈0．01],细胞Fox01mRNA升高（分别为0．513±0．016和0．425±0．011,P〈0．05）,PPAR-γmRNA降低（分别为0．260±0．025和0．441±0．012,P〈0．05）,PPAR-γ蛋白降低（分别为0．312±0．032和0．600±0．046,P〈0．05）。在抑制FoxO1和吡格列酮干预后此趋势有所缓解,逐渐接近于空白对照组。FoxO1mRNA、PPAR-γ mRNA和PPAR-γ蛋白表达与葡萄糖消耗量高度相关。结论FoxO1表达升高或降低对葡萄糖代谢产生不利影响;增强PPAR-γ表达可有效恢复高胰岛素诱导的高糖,增加肝细胞的胰岛素敏感性。     

LRP16通过下调PPARγ表达抑制细胞葡萄糖摄取

目的 探讨人白血病相关蛋白16(LRP16)基因对细胞葡萄糖摄取的影响及分子机制.方法 将LRP16基因表达载体pcDNA3.1-16转染3T3-L1脂肪细胞、C2C12成肌细胞和HepG2肝癌细胞,建立LRP16基因高表达细胞系;利用2-脱氧-[~3H]-D-葡萄糖检测LRP16对葡萄糖摄取的影响;免疫印迹法检测LRP16对PPARγ葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)和GLUT-2表达的影响.结果 成功建立LRP16基因高表达细胞系,3组细胞中LRP16表达均为对照细胞的2倍;对照3T3-L1脂肪细胞、C2C12成肌细胞和HepG2肝癌细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取率明显高于LRP16高表达细胞(P＜0.01);对照333-L1脂肪细胞、C2C12成肌细胞和HepG2肝癌细胞的PPARγ及GLUT-4或GLUT-2蛋白表达明显高于LRP16高表达细胞(P＜0.05).结论 LRP16通过下调PPARγ表达抑制细胞葡萄糖摄取.     

三氧化二砷对细胞周期素B2基因转录水平的上调作用

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对细胞周期素B2启动子（cyclinB2p）转录水平的调节作用。方法根据文献确定cyclinB2的启动子区域，聚合酶链反应（PCR）扩增cyclinB2p，克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中，构建pCAT3-cyclinB2p报告载体；以该质粒转染人肝HepG2细胞，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测氯霉素乙酰转移酶（CAT）的表达活性；并以不同剂量（5、10、50、100μmol／L）的As203刺激HepG2细胞，用ELISA法检测CAT的表达活性。结果正确克隆了cyclinB2p。用5～50μmol／L的As203刺激pCAT3-cyclinB2p转染的HepG2细胞，CAT活性有剂量-反应关系；10μmol／LAs20，刺激pCAT3-cyclinB2p瞬时转染的HepG2细胞后，报告基因CAT的表达活性为pCAT3-Basic空载体的5-84倍（0．485／0．083），是报告载体pCAT3-cyclinB2p的1．95倍（0．485／0．249）。结论克隆的cyclinB2p有顺式激活下游基因表达的活性；一定剂量的As2O3对HepG2细胞cyclinB2有上调作用。     

吡格列酮对不同浓度脂肪酸培养HepG2细胞脂联素受体1和受体2mRNA表达的影响

目的探讨肝细胞脂联素受体在噻唑烷二酮类药物改善胰岛素敏感性中所起的作用。方法孵育48h的HepG2细胞随机均分为对照组、吡格列酮组、3组不同浓度（100、200、400μmol／L）饱和脂肪酸（PA）培养组和3组相应浓度PA＋吡格列酮（PGT）处理组。继续培养24h后，提取总RNA，使用RT-PCR半定量分析脂联素受体mRNA表达的改变。结果与对照组相比，PA组脂联素受体2（R2）mRNA的表达下降，当PA的浓度加至200μmol／L以上时，R2 mRNA表达的下降呈现明显差异（P〈0．01）。在PA＋PGT的各组中，R2 mRNA的表达均较同PA浓度组增高，尤其是在PA浓度大于200μmol／L时（P〈0．05或P〈0．01）。结论R2很可能是胰岛素增敏剂吡格列酮改善肝脏胰岛素敏感性的重要作用机制之一。     

高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对NIT-1细胞增殖、胰岛素分泌水平及IRS-2表达的影响

目的探讨高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对胰岛B细胞增殖、胰岛素分泌功能的影响及机制。方法取对数生长期NOD鼠胰岛β细胞株NIT-1,以胰酶消化离心、收集细胞,按5×10^4个细胞／孔移至24孔培养板,继续培养48h后分别用葡萄糖浓度为5．6—27．6mmol／L的RPMI1640培养基处理,24h后随机分为对照组、罗格列酮1～3组,分别加入浓度为0～10^-5mol／L的罗格列酮培养;分别于干预24h和48h时收集细胞培养上清液,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,放射免疫法检测胰岛素水平;Western blot技术检测胰岛素受体底物（IRS）-2蛋白表达水平。结果①四组细胞增殖活性及胰岛素分泌水平均随葡萄糖浓度升高而降低,其中罗格列酮1-3组细胞增殖活性和胰岛素分泌量均显著高于对照组（P〈0．05、0．01）。②罗格列酮3组在葡萄糖浓度为22．5、27．6mmol／L培养24h及葡萄糖浓度为11．1mmol/L培养48h时胰岛素分泌水平均显著高于对照组（P〈0．05、0．01）;不同浓度葡萄糖培养下罗格列酮3组细胞中IRS-2蛋白水平均显著高于对照组（P〈0．05、0．01）,且变化趋势同上。结论在高浓度葡萄糖条件下罗格列酮可促进NIT-1细胞增殖、胰岛素分泌,机制可能与其上调IRS2表达有关。     

2型糖尿病患者单核巨噬细胞PPARγ的mRNA表达及人参皂苷对其表达的影响

将研究人群分为对照组、T2DM组,年龄、性别、BMI等基本相配,T2DM组随机分为：DM1组;DM2组。分离人外周血单核巨噬细胞,采用逆转录PCR技术扩增PPARγ基因片段,检测其表达水平,及血清葡萄糖（BG）、甘油三脂（TG）、胆固醇（TC）水平。结果：T2DM患者外周血单核巨噬细胞PPARγ,mRNA表达比对照组明显减少（P〈0．01）,1．41g／d人参皂苷X14d使PPARγ mRNA表达显著增加（P〈0．05）,并能降低血TG及TC（P〈0．05,P〈0．05）水平。结论：T2DM患者单核巨噬细胞PPARγ mRNA表达减少,而人参皂苷能有效提高PPARγ mRNA的表达,同时降低血清TG、TC含量。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ2在超重患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）基因在我国汉族人腹部皮下脂肪和网膜脂肪组织中的表达水平，及其与胰岛素抵抗的关系。方法 选取28例非超重[体质指数（BMI）〈25kg／m^2]和19例超重患者（BMI≥25kg／m^2），采用RT-PCR方法检测大网膜与腹部皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA的表达水平，并测量体重、腰臀围、血压，空腹胰岛素（FIns）、血糖、血脂和胰岛素抵抗指数（IRI）。结果（1）超重组血浆甘油三酯、极低密度脂蛋白胆固醇、FIns、IRI、收缩压、舒张压均高于非超重组（P〈0．05或P＜0．01）。（2）超重组网膜和皮下脂肪组织的PPARγ2 mRNA表达水平均高于非超重组（P〈0．01）；超重组及非超重组，其网膜和皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA表达水平比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。（3）超重组、非超重组及两组合并再分析显示，网膜和皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA表达水平与其他测量及计算指标均无明显相关性（P〉0．05）。结论 超重患者网膜和皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA表达水平升高。     

TAM对人肝癌细胞增殖及ER表达的影响

目的研究他莫昔芬（TAM）对人肝癌HepG2细胞增殖和雌激素受体（ER）表达的影响。方法将7．5、15、30μmol／L的TAM分别作用于HepG2细胞（观察组），对照组不加TAM，每孔加入1×10^5／ml细胞0．1ml，培养24、48、72h，采用MTT法测定HepG2抑制率；细胞免疫组化染色观察HepG2细胞ER的表达。结果TAM作用后HepG2细胞增殖随浓度增加及处理时间延长，细胞抑制率增加。结论TAM可抑制肝癌细胞增殖，其机理可能为降低ER表达。     

叶下珠提取物抗乙肝病毒及乙肝病毒X基因的研究

目的：研究叶下珠提取物在体外抗HBV以及抑制HBX表达的作用。方法：选用2．2．15细胞以及建立HepG2X、HepG2X-HIV-1-LTR-luciferase细胞系，用不同浓度的叶下珠药液进行细胞培养试验。确定药液对试验细胞的药物最大无毒浓度（TC0）以及半数药物有效浓度（IC50）。实验时，将细胞分空白对照组、HepG2CAT-HIV-1-LTR-luciferase细胞对照组，以及不同药物浓度的试验组（15mg／ml，7．5mg／ml，3.75mg／m1），并以β—action作为内参照。用real time-PCR、RT-PCR，以及抑制荧光素酶（luciferase）等方法，定量检测HBV DNA含量以及HBX表达量。结果：叶下珠提取物最大无毒剂量是15mg／ml，对HepG2．2．15细胞HBVDNA和HepG2-X细胞HBX半数有效量皆为3．75mg／ml（P〈0．05）。而7．5mg／ml、15mg／ml剂量与空白对照组相比较，分别为P〈0．01，P〈0．001。对HBX的抑制荧光素酶试验，叶下珠对细胞对照组及空白对照组抑制不明显，而高剂量用药组（15mg／ml），用药72小时与24小时比较，抑制率上升了10倍。结论：叶下珠不仅对全基因的HBV有抑制作用，还可能直接时X基因表达有抑制作用。     

人工合成多肽cSN50.1对肝癌细胞HepG2恶性行为的影响及其机制

目的 探讨c SN50.1对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭和集落形成能力的影响及机制。方法 将HepG2细胞分为6组：c SN50.1 0μmol/L、10μmol/L、30μmol/L、50μmol/L、70μmol/L、90μmol/L组，采用CCK-8实验研究不同浓度c SN50.1对HepG2细胞增殖的影响，并计算半数抑制浓度（IC50）；将HepG2细胞分为4组：c SN50.1 0μmol/L、10μmol/L、30μmol/L、50μmol/L，采用细胞划痕、Transwell和细胞克隆实验研究不同浓度cSN50.1对HepG2细胞迁移、侵袭和集落形成能力的影响；将HepG2细胞分为3组：Control组、SP600125组（AP-1信号通路抑制剂）和cSN50.1组，研究AP-1信号通路在cSN50.1对肝癌细胞作用中的影响，采用RT-PCR和Western Blot检测CXCL5和TNF-α的表达以及细胞质和细胞核中c-Jun蛋白的表达；将HepG2细胞分为3组：Control组、PDTC组（NF-κB信号通路抑制剂）和cSN50.1组，研究NF-κB信号通路在cSN...     

用单细胞凝胶电泳观察氟砷单独及联合对淋巴细胞DNA损伤

目的 观察氟、砷单独及联合作用对正常人淋巴细胞DNA的损伤作用及特点。方法 采用单细胞凝胶电泳（SCGE）实验，观察不同剂量氟、砷单独及联合应用对正常人淋巴细胞DNA的损伤。结果 人淋巴细胞在浓度为0．1、0．5μmol／L的NaAsO2及浓度为10、50μmol／L的NaF染毒24h后，均引起明显的DNA泳动（彗星尾）并呈现明显的剂量-效应关系；氟砷联合作用淋巴细胞，在0．5μmol／L NaAsO2＋50μmol／L NaF的剂量下，细胞DNA的损伤呈现出协同作用（P〈0．01）。结论 NaAsO2与NaF均可引起DNA损伤；低剂量NaAsO2与NaF联合作用时，则呈现协同作用。     

糖尿病动脉粥样硬化大鼠血清中二羰基化合物含量的变化及其临床意义的观察

目的 观察糖尿病动脉粥样硬化（AS）大鼠血清中二羰基化合物的表达。方法20只GK大鼠采用左旋硝基精氨酸甲酯（L-NAME）和高脂饲料喂养法制备糖尿病AS模型（Model组），另选20只健康Wistar大鼠作为对照（NC）组。应用气相色谱-质谱联用仪（CA-MS）对大鼠血清进行分离、纯化，测定其中二羰基化合物甲基乙二醛（WIG）和3—脱氧葡萄糖醛酮（3-DG）的含量。结果Model组血清中二羰基化合物MG和3-DG；含量分别为（216．7土15．6）μmol／L和（19．5±3．8）μmol／L，与NC组（85．3±24．9）μmol／L和（8．2土2．4）μmol／L相比，含量升高（P〈0．05）。结论二羰基化合物含量升高可能是糖尿病As的发病机制之一。     

沉默信息调节因子1活性受抑导致肝细胞糖代谢紊乱促进丙型肝炎病毒复制北大核心CSCD

目的利用携带HcV复制子的Huh7．5细胞探讨HCV复制对沉默信息调节因子1（SIRTl）表达和肝细胞葡萄糖代谢的影响。方法应用流式细胞仪、比色法测定细胞活性氧（ROs）变化和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）＋／还原型NDA（NADH）比值变化,应用液体闪烁计数仪、实时荧光定量-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western印迹法检测SIRTl活性、mRNA和蛋白的表达,应用放射核素法和葡萄糖氧化酶法测定肝细胞葡萄糖摄取率和糖异生,RT-PCR检测SIRTl下游调节糖代谢基因mRNA水平。计量资料比较采用t检验。结果与Huh7．5细胞相比,复制子细胞ROS水平升高（3．8±0．5比1．0±0．2,t=12．736,P〈0．01）,NAD＋／NADH比值下降（0．03±0．01比0．12±0．03,t=6．971,P〈0．01）,SIRTl活性（0．3±0．1比1．0±0．2,t=7．668,P〈0．01）、mRNA（0．4±0．1比1．0±0．3,t=4．648,P〈0．01）和蛋白（0．3±0．1比0．8±0．2,t=5．941,P〈0．01）水平下降。SIRT1受抑后,不仅增加胰岛素受体底物-1（IRS-1）磷酸化（0．7±0．2比0．4±0．1,t=3．286,P〈0．01）,降低蛋白激酶B（Akt）磷酸化（0．3±0．1比0．6±0．2,t=3．286,P〈0．01）,下调葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）基因表达（0．4±0．1比1．0±0．2,t=6．573,P〈0．01）,抑制葡萄糖摄取率（每分钟计数值：4600±500比21000±4600,t=8．682,P〈0．01）;而且降低叉头蛋白转录因子01（Fox01）磷酸化（0.2±0．1比0．5±0．1,t=5．196,P〈0．01）,上调磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（2．8±0．6比1．0±0．3,t=6．573,P〈0．01）和葡萄糖-6-磷酸酶（2．6±0．5比1．0±0．2,t=7．278,P〈0．01）基因表达,增加糖异生（2．5±0．5比1．0±0．2,t=5．543,P〈0．01）。结论HCV复制降低NAD＋／NADH比值,下调SIRTl活性和表达,改变其下游调节糖代谢相关基因表达,降低葡萄糖摄取能力,增加糖异生,导致肝细胞葡萄糖代谢紊乱,促进HCV复制。     

氧化型和正常极低密度脂蛋白对猪主动脉平滑肌细胞脂类堆积的不同影响

为了观察氧化型及正常极低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞内脂类堆积的不同影响，探索平滑肌细胞摄取氧化型极低密度脂蛋白的受体途径，用200mg/L的氧化型及正常极低密度脂蛋白与猪主动脉平滑肌细胞温育48h后，细胞内甘油三酯含量分别为对照组的3．2倍和10．6倍（P〈0．01），且两个实验组之间相比，差异也有显著性意义（P＜0．01）；细胞内总胆固醇明显升高（P＜0．05）．但是两个实验组之间无显著差异（P＞0．05）。荧光素异硫氰酸酯标记的氧化型极低密度脂蛋白结合试验表明；平滑队细胞可通过低亲和力受体途径可饱和性地摄取完整的氧化型极低密度脂蛋白（Kd＝48．82mg／L，Bmax＝2067μg／g）。与正常极低密度脂蛋白相比（Kd＝37．17mg／L，Bmax＝2596μg／g），Kd值升高，Bmax值减小。竞争抑制实验表明，氧化型极低密度脂蛋白、正常极低密度脂蛋白及正常低密度脂蛋白均对荧光素异硫氰酸酯标记的氧化型极低密度脂蛋白的结合摄取表现出明显的竞争作用（50％），而乙酰化低密度脂蛋白仅能抑制10％。提示氧化型极低密度脂蛋白通过低密度脂蛋白受体和／或极低密度脂蛋白受体途径进入平滑肌细胞。     

吡格列酮对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素受体底物表达的影响

目的探讨毗格列酮对胰岛索抵抗（IR）HepG2细胞胰岛素受体底物（IRS）蛋白表达的影响。方法胰岛素抵抗HepG2细胞模型建立后,培养液中加入吡格列酮共同孵育,观察吡格列酮对模型细胞葡萄糖掺入率的影响;应用免疫细胞化学染色法观察吡格列酮对IR HepG2细胞IRS-1、IRS-2表达的影响。结果与模型细胞组比较,1×10^-5mol／L吡格列酮显著提高了HepG2细胞的葡萄糖掺入率（P〈0．01）,使IRHepG2细胞IRS-1、IRS-2蛋白的表达显著增加（P〈0．05）。结论吡格列酮的胰岛素增敏作用可能与胰岛素信号转导分子IRS-1、IRS-2蛋白的表达增强有关。     

bcl-2反义寡核苷酸联合三氧化二砷对膀胱癌细胞生长的抑制作用

目的观察bcl-2反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides，ASODN）与三氧化二砷（As2O3）对膀胱癌细胞生长的抑制作用，比较联合或单独用药的抑制效果。方法人工合成包含bcl-2翻译起始位点的ASODN及无义核酸（NSODN），以质脂体（Lipofectamine）作为载体转染T-24膀胱癌细胞株。分为对照组（加PBS）、反义组（ASODN 1μmoL/L）、无义组（NSODN 1μmoL/L）、As2O3组（2μmoL／L）、As2O3＋反义组（联合用药组：As2O3 1μmol／L，ASODN0．5μmol／L）。采用肿瘤细胞生长曲线、四氮唑蓝（MTT）实验和集落形成实验，观察药物对肿瘤细胞生长的抑制作用，流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果从细胞生长曲线看出，与对照组相比，联合用药组肿瘤细胞数减少了62．09％，反义组减少了31．04％，As2O3组减少了39．08％，无义组减少了21．84％。MTT实验，肿瘤细胞抑制率联合用药组为（86．11±7．35）％，As2O3组为（67．21±8．99）％，反义组为（50．23±5.46）％，无义组为（8．22±0．33）％，组间比较差异有统计学意义（F=180．2，P〈0．01）。半数抑制浓度（IC50）联合用药组为（0．98±0．12）μmol／L，As2O3组为（1．53±0．32）μmol／L。反义组的为（1．96±0．22）μmol／L，无义组为（4．33±0．33）μmol／L，组间比较差异有统计学意义（F=354.0，P〈0．01）。肿瘤细胞集落生存率联合用药组为53．76％，反义组为76．32％，As2O3组为75．25％，无义组为90．33％。肿瘤细胞凋亡率联合用药组为（22．66±1．66）％，组间比较均差异有统计学意义（F=232．15，P〈0．01）。结论Bcl-2反义寡核苷酸与As2O3联合应用可明显提高对膀胱癌细胞生长的抑制作用。