Th17/Treg平衡与正常妊娠及子痫前期关系的研究

目的:探讨Th17及CD4+CD25+Foxp3+调节性T(regulatory T,Treg)细胞介导的免疫反应在子痫前期发病中的作用。方法:选取在山东大学齐鲁医院进行产前检查的子痫前期患者25例及正常晚孕期妇女27例,并选取育龄期健康未孕妇女20例。利用流式细胞技术检测3组患者血样中分泌IL-17的Th17及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞亚群占CD4+T淋巴细胞的百分比,并计算Th17/Treg比率,比较其在子痫前期与正常妊娠时的变化;再用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组患者外周血中IL-17、IL-10、TGF-β1等细胞因子的表达并进行比较。结果:(1)与正常未孕组及正常妊娠组相比,子痫前期患者外周血中分泌IL-17的Th17细胞占CD4+T淋巴细胞百分比明显升高(P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞百分比明显降低(P<0.01);与正常未孕组相比,正常妊娠组Th17细胞的比例明显降低(P<0.01),Treg细胞比例明显升高(P<0.05);(2)子痫前期患者外周血中Th17/Treg比率明显高于正常未孕组及正常妊娠组(P<0.01),正常妊娠组外周血中Th17/Treg比率与健康未孕组相比明显降低(P<0.01);(3)子痫前期患者外周血中IL-17及TGF-β1的TGF-β1表达明显高于正常未孕组及正常妊娠组(P<0.05),而IL-10的表达未见明显差异(P>0.05);与正常未孕组相比,正常妊娠组外周血中IL-17、IL-10及TGF-β1的水平均未见明显变化(P>0.05)。结论:正常妊娠可能依赖于Treg细胞介导的免疫耐受状态,子痫前期患者外周血中Th17/Treg之间的平衡失调而倾向于Th17介导的促炎状态,这一机制可能参与了子痫前期的发生发展。     

Th17和Treg细胞在子宫内膜异位症患者手术和GnRH-a治疗前后的变化及意义

目的探讨子宫内膜异位症(内异症)患者手术前后及促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)治疗前后,外周血中辅助性T淋巴细胞17(Th17)和调节性T淋巴细胞(Treg)及其相关细胞因子的变化和意义。方法选取2019年1月至12月于青岛大学附属医院行腹腔镜手术的卵巢子宫内膜异位囊肿患者共40例作为内异症组,术后1个月根据是否用药分为单纯手术组(未用药)22例,手术+GnRH-a组(腹腔镜手术后联合GnRH-a药物治疗3个周期)18例;12例因输卵管绝育术要求行输卵管复通术的妇女为对照组。收集术前、术后1个月、术后3个月或GnRH-a治疗3个周期后的外周血,采用流式细胞仪检测外周血中Th17、Treg细胞的比例,ELISA方法检测血清中白细胞介素(IL)6、IL-10、IL-17A和转化生长因子β(TGF-β)的水平。结果(1)与对照组相比,内异症组患者术前的Th17细胞比例(21.5±8.0)%显著升高,Treg细胞比例(5.6±2.7)%显著降低,Th17/Treg比值(2.9±1.1)显著升高(P均<0.05);IL-6、IL-10和IL-17A水平[分别为(122.8±40.0)、(147.5±48.9)和(6.3±3.9)ng/L]显著升高,TGF-β水平(32.9±12.3)μg/L显著降低(P均<0.05)。(2)与术前相比,内异症组患者术后1个月的Th17细胞比例(11.8±2.9)%显著下降,Treg细胞比例(7.5±2.4)%显著升高,Th17/Treg比值(1.8±0.4)显著下降(P均<0.05);IL-10、IL-17A水平[分别为(69.3±29.7)、(3.9±2.4)ng/L]显著降低,TGF-β水平(48.0±13.1)μg/L显著升高(P均<0.05)。对照组术后1、3个月分别与术前相比,Th17、Treg细胞比例和Th17/Treg比值均无显著差异(P>0.05)。(3)单纯手术组、手术+GnRH-a组Th17、Treg细胞比例及Th17/Treg比值均有小幅变化,分别与内异症组术后1个月相比,均表现为Th17细胞比例升高,Treg细胞比例降低,Th17/Treg比值升高,但差异均无统计学意义(P>0.05);单纯手术组与手术+GnRH-a组分别比较,差异也均无统计学意义(P>0.05)。单纯手术组、手术+GnRH-a组IL-6、IL-10、TGF-β水平变化更趋近于对照组的水平;而与内异症组术后1个月相比,IL-17A水平升高,且差异有统计学意义(P<0.05);单纯手术组与手术+GnRH-a组各指标分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论内异症患者存在Th17/Treg细胞失衡,腹腔镜手术治疗可以部分恢复其免疫失衡状态,GnRH-a药物治疗对免疫平衡无明显影响。     

宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者外周血Treg/Th17细胞及相关细胞因子的检测与临床意义

目的:探讨Treg/Th17平衡失调在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌病情进展中的作用及其参与CIN及宫颈癌免疫逃避的具体机制。方法:研究对象分为3组:宫颈癌组(34例),CIN组(47组),对照组(30例)。采用流式细胞术检测CIN及宫颈癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞及Treg细胞的表达频率,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测相关细胞因子(IL-23、IL-10、IL-17、IL-6、TGF-β)的浓度。结果:与对照组相比,Treg细胞及其相关细胞因子(TGF-β、IL-10)在CIN及宫颈癌患者外周血中的表达均明显增高(P<0.05),且宫颈癌组的表达亦明显高于CIN组(P<0.05)。与对照组相比,Th17细胞及其相关细胞因子(IL-23、IL-17、IL-6)在CIN及宫颈癌患者外周血中的表达均明显降低(P<0.05),且宫颈癌组的表达亦明显低于CIN组(P<0.05)。结论:随着CIN向宫颈癌的进展,Treg/Th17平衡向Treg细胞偏离,这一失衡参与了CIN的进展及宫颈癌的免疫逃避,其具体机制可能与二者在肿瘤免疫内环境相关的细胞因子调节有关。     

上皮性卵巢癌患者肿瘤局部微环境中Treg/Th17比例平衡的研究

目的:探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者外周血、卵巢癌组织和癌旁腹膜中Treg/Th17是否存在失衡。方法:选取2011年9月至2013年12月同济大学第一妇婴保健院收治的16例EOC(EOC组)、11例良性上皮性肿瘤(良性肿瘤组)及14例健康成年女性(对照组),收集患者外周血并分离淋巴细胞;收集4例EOC患者腹水并分离淋巴细胞。流式细胞术检测外周血及腹水中Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例。选取同一时间段在本院手术患者术中留取的卵巢肿瘤组织、腹膜组织及转移灶组织,包括13例EOC、16例EOC种植灶癌旁腹膜、5例良性卵巢肿瘤组织及腹膜,用免疫荧光染色分析Th17及Treg细胞在良性卵巢肿瘤、EOC原发灶和癌旁腹膜中的浸润情况。结果:(1)EOC患者外周血中Treg比例为(5.16±3.85)%,显著高于对照组[(2.41±1.76)%])和良性肿瘤组[(2.3873±2.336)%](P=0.025,P=0.043),后两组比较无统计学差异。EOC患者外周血中Th17细胞比例为(3.15±3.045)%,显著高于对照组[(1.22±1.13)%](P=0.044);良性肿瘤患者[(1.93±1.745)%]与EOC患者和对照组比较,差异均无统计学意义;Treg/Th17细胞比值在3组间均无统计学差异。EOC患者腹水与外周血中的Th17、Treg细胞比例及Treg/Th17比值比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(2)EOC组肿瘤组织中Treg和Th17细胞比例及Treg/Th17比值分别为(0.1062±0.077)%、(0.143±0.056)%和0.80±0.56,与良性肿瘤组织[0%、(0.0789±0.11)%、0]比较,均显著增高(P均0.05)。(3)卵巢良性肿瘤腹膜中未见Treg及Th17细胞浸润,EOC腹膜种植灶癌旁腹膜中Treg、Th17细胞比例及Treg/Th17比值分别为(0.1024±0.1)%、(0.2254±0.23)%和0.8113±1.097,较良性肿瘤组均显著提高(P0.05)。(4)早期和晚期EOC组织中Th17、Treg比例以及Treg/Th17比值比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:卵巢癌患者外周血Treg和Th17比例升高,但并未发现失衡。卵巢癌组织及癌旁腹膜微环境中存在失衡,这一失衡可能促进肿瘤增殖与迁移。     

外周血叉头框蛋白P3的表达与原因不明复发性流产关系的研究

目的:探讨外周血叉头框蛋白P3(Foxp3)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法:选择2018年5月至2020年5月于本院进行治疗的126例URSA患者作为URSA组,选择同期于本院进行产前检查的82例健康孕妇作为对照组。比较两组的一般资料;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Foxp3的mRNA表达;多因素Logisitic回归分析影响URSA发生的相关因素;Pearson相关性分析外周血Foxp3水平与导致URSA发生的危险因素的相关性;流式细胞术检测Foxp3对Th17/Treg平衡的调控作用;ROC曲线分析Foxp3水平对发生URSA的预测价值,并评价其准确度和有效性。结果:两组的孕酮、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、转化生长因子-β(TGF-β)、Foxp3、Th17、Treg、Th17/Treg差异均有统计学意义(P0.05)。孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平及IL-6、IL-17、Th17水平、Th17/Treg比值均是影响URSA发生的独立危险因素(OR1,P0.05)。Foxp3分别与孕酮、IL-10、TGF-β、Treg呈显著正相关(r0,P0.05),与IL-6、IL-17、Th17、Th17/Treg呈显著负相关(r0,P0.05);Foxp3刺激CD4~+T细胞12小时和24小时能够显著降低Th17细胞比例和Th17/Treg比值,增加Treg细胞比例。ROC曲线分析Foxp3预测URSA发生的曲线下面积为0.795,准确度和有效性较好。结论:孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平降低及IL-6、IL-17、Th17水平及Th17/Treg比值增加均可能导致URSA的发生风险增加,Foxp3对Th17/Treg平衡具有调控作用。     

Th17及相关细胞因子在妊娠早期母-胎免疫耐受中的作用

目的:研究Th17细胞及相关细胞因子IL-22、IL-23在人孕早期不明原因的自发性流产母-胎免疫耐受中的作用。方法:以10例正常人工流产患者为正常早孕组,收集18例染色体正常自发性流产患者为自然流产组。分离两组患者外周血单个核细胞及蜕膜组织免疫细胞,用流式细胞术检测上述细胞中Th17细胞比例及相关细胞因子的表达,探讨其与自发性流产的关系。结果:自然流产组外周血Th17细胞比例显著高于正常早孕组(P<0.05),IL-23显著低于正常早孕组(P<0.01),但两组IL-22无显著差异;自然流产组蜕膜局部Th17细胞比例显著高于正常早孕组(P<0.01),IL-23亦显著高于正常早孕组(P<0.01),IL-22则显著低于正常早孕组(P<0.01)。结论:Th17细胞在孕早期蜕膜局部及外周血中的数量增多可能导致母胎免疫耐受失衡,在早期自然流产中发挥重要的正诱导作用,而IL-22、IL-23等细胞因子在其中的调控效应则具有明显的微环境相关性。     

Treg和Th17在原因不明性复发性流产发病中作用的探讨

目的:探讨原因不明性复发性流产(URSA)患者和正常孕妇间Treg和Th17细胞因子的表达差异。方法:选择URSA患者20例为研究组,正常早孕妇女20例为正常对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测两组蜕膜组织及外周血中Foxp3、ROR-γt、IL-17A及EBi3 mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中IL-17A及IL-35的含量。结果:URSA组蜕膜及外周血中Th17因子(ROR-γt、IL-17A)的表达均显著高于正常对照组(P=0.000),而Treg因子(Foxp3、EBi3)的表达均显著低于正常对照组(P=0.000)。两组蜕膜中各因子表达量均显著高于外周血(P<0.05)。正常孕妇组蜕膜中Foxp3、ROR-γt、EBi3 mRNA的表达与外周血中的表达显著相关(P=0.000、0.007、0.000,r=0.901、0.612、0.943);URSA组仅ROR-γt mRNA在蜕膜及外周血的表达存在相关性(P=0.012),且相关系数不佳(r=0.548<0.75)。URSA组、正常对照组血清中IL-17A含量分别为(16.120±4.155)pg/ml、(5.460±2.036)pg/ml,IL-35含量分别为(11.525±2.262)pg/ml、(31.515±3.473)pg/ml,差异显著。结论:Treg和Th17细胞因子在URSA患者和正常孕妇间存在显著差异,表明Treg和Th17细胞比例失调可能在原因不明性复发性流产的发病中起一定作用。     

垂体抑制对冻融胚胎不明原因反复胚胎植入失败患者Th17/Treg细胞失衡的影响

目的:探讨垂体抑制对冻融胚胎不明原因反复胚胎植入失败(uRIF)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T(Treg)细胞平衡的影响及其降调的可能机制。方法:选择82例35岁以下冻融胚胎uRIF的患者,其中46例单纯激素替代治疗(HRT)为HRT组,36例HRT联合促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)降调为GnRHa降调组,选择正常妊娠早期妇女50例作为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测HRT组和GnRHa降调组在HRT备内膜前以及黄体酮转化日外周血中Th17、Treg细胞及Th17/Treg细胞比值,并与对照组比较。结果:与对照组相比,HRT前Th17百分比在GnRHa降调组和HRT组中均升高;Treg细胞百分比均降低,Th17/Treg细胞比值均升高(P0.05),Th17/Treg细胞平衡向Th17转移。与HRT前相比,黄体酮转化日HRT组和GnRHa降调组Th17百分比降低(P0.05),Treg细胞百分比升高(P0.05);黄体酮转化日GnRHa降调组Th17/Treg细胞比值较HRT组明显降低(P0.05),Th17/Treg细胞平衡向Treg细胞转移。GnRHa降调组雌二醇(E_2)水平略高于HRT组,差异无统计学意义(P0.05)。结论:uRIF患者Th17和Treg细胞数量分别增加和减少,Th17/Treg细胞比值失衡。GnRHa降调可能通过阻断Th17/Treg细胞比值失衡对子宫内膜容受性发挥免疫调节作用,并且这些效应不依赖于外周血中的雌激素水平。     

复发性流产患者外周血T细胞亚群变化及相关转录因子的表达

目的:检测复发性流产患者外周血中Th1、Th2和Th17细胞的变化情况及相关转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3mRNA的表达水平。方法:对30例复发性流产(RSA)非孕期患者和30例正常非孕(NNP)妇女抽取抗凝静脉血5ml,Ficoll分离外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17细胞的比例,PBMC培养5小时后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中IFN-γ、IL-4和IL-17的水平,同时检测T-bet、GATA-3和STAT-3mRNA的表达水平。结果:RSA患者Th1细胞的百分比和Th17细胞的百分比均高于NNP组(P<0.05),Th2细胞的百分比低于NNP组(P<0.05)。RSA组PBMC培养上清中IL-4水平低于NNP组(P<0.05),而IFN-γ和IL-17水平明显高于NNP组(P<0.05)。RSA患者GATA-3mRNA表达较NNP组减少(P<0.05),而T-bet和STAT-3mRNA明显高于NNP组(P<0.01)。结论:RSA患者PBMC合成IFN-γ和IL-17的水平明显增高,合成IL-4的水平明显降低,表明存在T细胞亚群的分化失衡状态。这种失衡状态可能受到相应的核转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3的调控。     

Treg细胞/Th17细胞比例失衡在卵巢癌的生长以及微血管、淋巴管生成中的作用

目的:探讨Treg细胞/Th17细胞比例失衡对移植瘤生长及微血管和淋巴管生成的影响。方法:构建卵巢癌裸鼠皮下和原位移植瘤模型,用磁珠分选人外周血CD3+淋巴细胞,加曲古抑菌素A(TSA)刺激使其Treg/Th17细胞比例失衡,采用流式细胞仪检测Treg/Th17细胞比例。分别将Treg/Th17细胞比例较高和较低的淋巴细胞与人卵巢癌细胞系SKOV3按1∶20比例注射入裸鼠皮下和卵巢包膜下,分别于注射后28天和35天处死称重,观察其对移植瘤生长的影响;免疫组化CD31和LYVE-1染色检测微血管(MVD)和淋巴管(LVD)的表达。结果:Treg高组能促进皮下和原位卵巢癌的生长。皮下模型:注射后第21和28天,Treg高组的肿瘤总荧光强度值均大于Th17高组和对照组;Treg高组的肿瘤重量为(0.60±0.07)g,Th17高组(0.35±0.24)g,对照组(0.25±0.22)g,Treg高组肿瘤重量较Th17高组和对照组重。原位模型:注射后第28天Treg高组肿瘤总荧光强度值均大于其他两组;Treg高组(0.34±0.20)g,Th17高组(0.06±0.03)g,对照组(0.17±0.05)g,Treg高组肿瘤重量比Th17高组重。Treg高组的MVD和LVD表达高于Th17高组和对照组(P0.05)。结论:Treg细胞/Th17细胞比例失衡在卵巢癌裸鼠移植瘤生长中起着重要作用,且Treg高组能影响卵巢癌的生长、微血管和淋巴管的形成。     

吲哚胺2,3-双加氧酶在哮喘小鼠肺组织的表达及与γ干扰素的关系

目的检测小鼠肺组织中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达和血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ干扰素(IFN-γ)的水平,探讨IDO在支气管哮喘发病机制中的作用与IFN-γ的关系。方法选择SPF级BALB/C小鼠21只,随机分成对照组、干预组、哮喘组各7只。尘螨提取液致敏、激发建立小鼠哮喘模型,苏木精-伊红染色观察气道炎症细胞改变,BALF行细胞学分析,ELISA法检测BALF中IFN-γ水平,免疫组织化学、Western Blot检测肺组织IDO蛋白的表达。结果哮喘组:炎症细胞浸润、气道的平滑肌细胞增生、管腔狭窄均明显;干预组:少量炎症细胞侵润,有气道平滑肌细胞的增生,管腔稍狭窄;对照组:无明显变化。哮喘组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数高于干预组及对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。哮喘组血清及BALF中IFN-γ水平低于干预组及对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。哮喘组肺组织IDO灰度值低于对照组及干预组,差异均有统计学意义(P<0.05)。IFN-γ水平在血清中与BALF中呈正相关(P<0.01);肺组织内IDO蛋白的表达与IFN-γ水平在血清中及BALF中均呈正相关(P<0.01)。结论小鼠肺组织中IDO蛋白表达量降低,导致体内免疫耐受缺陷和(或)减弱,促使支气管哮喘的发生发展。     

哮喘患儿诱导痰辅助性T细胞亚群及相关细胞因子变化研究

探讨支气管哮喘患儿诱导痰中辅助性T细胞（Th）亚群及相关细胞因子的变化及意义。方法　观察2009年9月至2010年1月深圳儿童医院收集的20例哮喘患儿及20例同年龄对照组儿童,采用流式细胞术检测哮喘患儿外周血Th1、Th2、Th17、CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）数量;同时收集哮喘患儿和对照组儿童的诱导痰,进行炎性细胞计数与分类,荧光定量聚合酶链反应（Real Time PCR）测定外周血单个核细胞及诱导痰T-bet、IFN-γ、GATA3、IL-4、Foxp3、TGF-β、RORrt、IL-17A、IL-8、TNF-α等mRNA表达水平。结果　（1）急性期哮喘患儿外周血Th1、Treg细胞比例降低（P < 0.05）、Th2细胞、Th17细胞比例与正常对照组差异无统计学意义（P > 0.05）。（2）急性发作期哮喘患儿外周血单个核细胞T-bet、Foxp3、IFN-γ、TGF-β表达降低（P < 0.05）,GATA3、RORγt、IL-4、IL-17A 与正常对照组差异无统计学意义（P > 0.05）。（3）急性发作期哮喘患儿诱导痰中性粒细胞、嗜酸性粒细胞数量增加（P < 0.05）。（4）急性发作期哮喘患儿诱导痰中RORγt、IL-17A、GATA3、IL-4、IL-5、IL-8、TNF-α表达增高（P < 0.05）,T-bet、IFN-γ、Foxp3、TGF-β表达与正常对照组差异无统计学意义（P > 0.05）。结论　哮喘患儿诱导痰Th2与Th17转录因子和细胞因子增多,可能是导致儿童哮喘气道炎症反应的重要原因。     

CD4~+T细胞在甲状腺自身抗体阳性患者中的比例及其对IVF-ET治疗结局的影响

目的:探究甲状腺功能正常甲状腺自身抗体阳性(ATA~+)患者外周血中CD4~+T细胞的比例及其对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法:选择在青岛大学附属烟台毓璜顶医院生殖医学科就诊接受IVF治疗甲状腺功能正常的患者,其中行新鲜周期胚胎移植的ATA~+患者28例(ATA~+组),甲状腺自身抗体阴性(ATA~-)患者32例(ATA~-组)。取卵日、移植第5天、移植第14天抽取两组患者的外周血采用流式细胞学的方法检测CD4~+T细胞。结果:(1)ATA~+组的生化妊娠流产率明显高于ATA~-组(P0.05)。ATA~+组的着床率、囊胚率、临床妊娠率和活产率与ATA~-组比较有降低趋势,早期流产率与ATA~-组比较有升高趋势,差异无统计学意义(P0.05)。(2)取卵日外周血中Th1细胞的比例在ATA~+组明显高于ATA~-组;移植第14天外周血中Th2细胞的比例在ATA~+组显著低于ATA~-组;ATA~+组中Th17细胞的比例在取卵日、移植第5天、移植第14天的外周血中均显著高于ATA~-组;而ATA~+组中Treg细胞的比例在不同时间点外周血中均显著低于ATA~-组(P0.05)。(3)ATA~+组中Th1/Th2比值在取卵日、移植第14天外周血中明显高于ATA~-组;ATA~+组中Th17/Treg比值在取卵日、移植第5天、移植第14天外周血中均明显高于ATA~-组(P0.05)。结论:ATA~+患者不同时间点外周血中Th1细胞与Th2细胞、Th17细胞与Treg细胞之间的平衡被打破,使免疫反应倾向于细胞免疫应答,向加剧炎性反应方向发展,可能是导致ATA~+患者IVF-ET治疗不良妊娠结局的免疫学机制之一。     

儿童急性白血病外周血Th17细胞表达及其临床意义分析

摘要：目的　探讨辅助性T细胞17（Th17）细胞表达与儿童急性白血病的发生发展及疾病状态的关系。方法　将2008年8月至2009年12月在华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科住院的42例急性白血病患儿分为未缓解组（A组,23例）和缓解组（B组,19例）。18名健康儿童作为对照组（C组）。采用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测各组外周血单个核细胞（PBMC）刺激培养上清液中白细胞介素-17（IL-17）和白细胞介素-23（IL-23）的水平,利用流式细胞术分析PBMC中CD4+ IL-17+细胞的比例。结果　A组和B组IL-17和IL-23均低于C组,差异有统计学意义（P < 0.05）,A组IL-17低于B组,差异具有统计学意义（P < 0.05）,但两组IL-23差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。A组和B组Th17的比例均低于C组,且A组Th17低于B组,差异均具有统计学意义（P均< 0.05）。结论　Th17细胞可能通过分泌IL-17参与了儿童急性白血病发生及病情发展,其水平高低部分反映白血病的疾病状态。     

IL-4与IL-10联合免疫对趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3的选择性诱导对自然流产模型小鼠胚胎丢失率的影响

目的:观察IL-4与IL-10对趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3的选择性诱导对自然流产模型小鼠胚胎丢失率的影响,探讨趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法:建立自然流产小鼠模型与正常妊娠小鼠模型,观察细胞因子IL-4与IL-10对CCR3、CCR5、CXCR3的选择性诱导作用,用双标记流式细胞分析技术,检测正常妊娠模型组孕鼠(CBA/J×BALB/c)、自然流产模型无干预组孕鼠(CBA/J×DBA/2)、自然流产模型IL-4免疫组孕鼠、自然流产模型IL-4+IL-10联合免疫组孕鼠和自然流产模型-生理盐水(NS)免疫组孕鼠中外周血CD4+T细胞CCR3、CCR5、CXCR3等3类趋化因子受体的表达率,并观察各组孕鼠胚胎丢失率。结果:(1)流产模型无干预组胚胎丢失率显著高于正常妊娠模型组,差异有统计学意义(P<0.01),IL-4免疫组、IL-4+IL-10联合免疫组胚胎丢失率皆明显低于NS组与流产模型无干预组(P<0.01,P<0.01);(2)自然流产模无干预组外周血CD4+T细胞CCR3表达水平明显低于正常妊娠模型组(P<0.01),而CCR5、CXCR3表达率明显高于正常妊娠模型组(P<0.01);转输IL-4、IL-4+IL-10后CCR3表达率明显上调、CXCR3表达率明显下降,均与流产模型无干预组差异有显著性(P<0.01)。此外,IL-4+IL-10联合免疫组外周血CD4+T细胞上CCR5表达率也明显低于流产模型无干预组(P<0.05),但IL-4免疫组与流产模型无干预组无明显差异(P>0.05)。结论:CD4+T细胞上CCR3、CCR5、CXCR3表达异常可能在自然流产发病中起重要作用,细胞因子IL-4与IL-10联合作用可能通过诱导CCR3高表达,抑制CCR5与CXCR3表达来诱导妊娠免疫耐受,降低胚胎丢失率。     

卵巢早衰患者外周血CD4~+CD25~+Treg细胞的变化及意义

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(即CD4+CD25+Treg细胞)在卵巢早衰发病机制中的作用。方法:流式细胞仪定量检测卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)患者、卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve,DOR)患者及健康对照组外周血CD4+T、CD8+T细胞及CD4+CD25+Treg细胞数量,应用3H-thymidine掺入法测定POF患者及对照组外周血CD4+CD25+Treg细胞对效应性T细胞的增殖抑制功能。结果:与对照组相比,POF患者及DOR患者CD4+CD25+Treg细胞比例降低(P<0.01)、POF患者CD4+T/CD8+T细胞比值增高(P<0.05),DOR患者CD4+T/CD8+T细胞比值无明显变化(P>0.05);POF患者免疫抑制功能无明显降低(P>0.05)。结论:CD4+CD25+Treg细胞比例降低与T细胞亚群失衡可能是POF的发病机制。     

靶向沉默Gata3对妊娠期哮喘小鼠树突状细胞表型及效应T细胞失衡表达的影响

目的:研究慢病毒介导siRNA靶向沉默Gata3基因表达对妊娠哮喘模型小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)抗原递呈及其免疫生物学特性的影响。方法:以脂质体DNA沉淀法将重组慢病毒干扰质粒与包装质粒共转染AD293细胞,包装生成慢病毒感染体外诱导DC,RT-PCR、Western blot分析其对siGata3基因的整合转录效果;流式细胞术观察细胞表型变化。通过尾静脉注射将pSH1/siGata3转移至小鼠体内,ELISA法测定其肺泡灌洗液(BALF)中的炎性因子含量;MTT法验证混合淋巴细胞反应(MLR)后T细胞增殖能力。结果:经重组、包装携有Gata3特异siRNA慢病毒感染DC成功,其siRNA靶点Gata3 mRNA及蛋白的转录表达分别下调87.30%和81.33%(P0.05);同时降低DCs膜表面CD86荧光强度(P0.05)。减少pSH1/siGata3组小鼠BALF中IL-5、IL-17分泌而提升IL-12水平(P0.05);MLR证实,共培养感染DC激活T细胞的能力明显不足(P0.05)。结论:siRNA干扰可有效抑制模型小鼠免疫微环境特定Gata3通路,阻遏T细胞及其亚群分化由此来诱导DC免疫耐受,为妊娠期哮喘防治奠定基础并提供新的思路和手段。     

Th17细胞在妇产科疾病中作用研究进展

<正>T淋巴细胞是人体内免疫系统的重要组成部分,CD4+T细胞作为效应T细胞的重要成员之一,过去将CD4+T细胞分为Th1和Th2两类细胞亚群[1]。Th1细胞主要介导细胞免疫,主要分泌白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子β(TNF-β)、干扰素γ(IFN-γ)等。其中IFN-γ占主导地位,具有诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成,激活抗肿瘤活性的作用。尤其是在细菌、病毒及原虫感染中起保护作用[2]。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-10和IL-13,介导体液免疫反应。其中IL-4和IL-5起主要作用,其     

STAT3蛋白调节与Th17细胞分化及其与妊娠相关疾病的关系研究进展

信号转导和转录激活因子3(STAT3)主要参与信号转导及转录调控,在辅助性T细胞17(Th17)的分化过程中起关键作用。研究发现STAT3及Th17细胞异常与妊娠相关疾病如复发性流产(RSA)、子痫前期(PE)、妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)、妊娠期糖尿病(GDM)等的发生相关。妊娠早期Th17可促进滋养细胞的增殖和侵袭,参与胎盘的形成,妊娠期Th17过多可能会影响免疫母胎间免疫耐受,引起过度免疫炎症反应,促使妊娠相关疾病的发生。STAT3表达减少或增多可能会影响Th17细胞的分化而影响正常妊娠。     

CD4＋T细胞在原因不明复发性流产中的研究进展

正常妊娠有赖于母体对胚胎半同种抗原的免疫耐受,一旦免疫耐受失衡,将导致免疫排斥、免疫攻击从而导致自然流产,原因不明复发性流产被认为与母胎免疫耐受失衡有关.CD4＋T在同种异体急性排斥反应中发挥重要作用,根据所分泌的细胞因子不同,CD4＋T 细胞分为Th1、Th2、调节性T细胞（Treg）及新近发现的Th17细胞.早期研究发现母体外周血、母胎界面CD4＋T细胞增高与复发性流产密切相关.随免疫耐受机制研究的不断深入,母胎免疫耐受的研究历经Th1/Th2平衡到Treg的免疫负调控作用,再到Th17/Treg平衡.综述CD4＋T细胞在原因不明复发性流产中的研究进展.